重組白細(xì)胞介素2

1、重組人白細(xì)胞介素-2 Recombinant Human Interleukin-2主要內(nèi)容一、基本信息二、生產(chǎn)制備三、藥物信息四、注意事項五、發(fā)展前景一、基本信息為多肽類免疫增強(qiáng)劑，是一種淋巴因子。刺激B細(xì)胞增殖分化和分泌抗體。誘導(dǎo)干擾素和多種細(xì)胞因子的分泌用于腫瘤輔助治療和癌性胸、腹水的治療。也可各種自身免疫病的治療。對乙型肝炎、麻風(fēng)病、肺結(jié)核、白色念珠菌感染等具有一定的治療作用。二、生產(chǎn)制備生產(chǎn)制備的方式主要有兩種：1、傳統(tǒng)工藝制備2、基因工程制備其中以第二種方法為主傳統(tǒng)工藝流程雞瘟病毒，PHA,培養(yǎng)液啟動誘生 37人白細(xì)胞粉 誘生白細(xì)胞培養(yǎng)液滅活病毒，分離,HCl,NaOHpH = 2

2、2.5,pH = 7.27.4,離心上清液35%硫酸銨4 ，24h，離心上清液85%硫酸銨4 ，24h，離心沉淀10mmol/LPBS透析pH = 6.5，24h透析內(nèi)液親和層析上Sepharose柱pH = 6.5親和載體I洗滌0.4mol/LNaCl，PBSpH = 6.5親和載體吸收1.0mol/LNaCl,PBS透析pH = 6.5IL-2組分凝膠層析上Utrogel柱pH = 6.5凝膠載體0.2mol/Ltris-HCl含0.1%PEG2%正丁醇，0.2mol/L甘氨酸pH = 7.6IL-2基因工程制備流程IL-2 cDNA 文庫的構(gòu)建IL-2表達(dá)利用mRNA雜交篩選IL-2 c

3、DNA克隆與質(zhì)粒載體pLY-4連接，并轉(zhuǎn)入大腸桿菌純化的IL-2制備包涵體，并用凝膠過濾層析純化cDNA文庫的構(gòu)建IL-2mRNA逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄成單鏈cDNA末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶cDNA末端連接dCMP殘基，寡聚（dG）1218為引物DNA聚合酶I雙鏈cDNA蔗糖密度梯度離心cDNA片段G-C加尾法插入到pBR322質(zhì)粒的PstI位點(diǎn)重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌得到IL-2 cDNA文庫三、藥物信息 藥典中有以下三種藥物含有重組人白細(xì)胞素介素-2：注射用重組人白細(xì)胞介素-2重組人白細(xì)胞介素-2注射液注射用重組人白細(xì)胞介素-2（ ）注射用重組人白細(xì)胞介素-2高效表達(dá)人白細(xì)胞介素-2的大腸桿菌，經(jīng)過發(fā)酵、

4、分離和高度純化后獲得的重組人白細(xì)胞介素-2凍干制成，含有適宜穩(wěn)定劑，不含添加劑和抗生素。外觀為白色或者微黃色疏松體，加滅菌注射水后迅速溶解為澄明液體。重組人白細(xì)胞介素-2注射液高效表達(dá)人白細(xì)胞介素-2的大腸桿菌，經(jīng)過發(fā)酵、分離和高度純化后獲得的重組人白細(xì)胞介素-2制成，含有適宜穩(wěn)定劑，不含添加劑和抗生素。外觀為無色或者微黃色澄明液體。注射用重組人白細(xì)胞介素-2（ ）高效表達(dá)人白細(xì)胞介素-2 （ ）基因的大腸桿菌，經(jīng)過發(fā)酵、分離和高度純化后獲得的重組人白細(xì)胞介素-2 （ ）凍干制成，含有適宜穩(wěn)定劑，不含添加劑和抗生素。外觀為白色或者微黃色疏松體，加滅菌注射水后迅速溶解為澄明液體。人白細(xì)胞介素-2

5、 （ ）基因是人白細(xì)胞介素-2基因序列中原125位編碼半胱氨酸的序列突變?yōu)榫幋a絲氨酸的序列后的突變基因用法用量靜脈滴注：10萬一80萬國際單位；皮下注射：50萬100萬國際單位；胸腹腔注射：30萬l00萬國際單位；介入動脈灌注：40萬l00萬國際單位；腫瘤灶局部給藥：根據(jù)瘤體大小決定用藥劑量。一般劑量為一次20萬國際單位(IU)。注：藥物采用氯化鈉溶解。四、注意事項注意事項：各種不良反應(yīng)中最常見的是發(fā)熱、寒戰(zhàn)，而且與用藥劑量有關(guān)；個別患者可出現(xiàn)惡心、嘔吐、類感冒癥狀；皮下注射者局部可出現(xiàn)紅腫、硬結(jié)、疼痛；使用較大劑量時，可能會引起毛細(xì)血管滲漏綜合征，表現(xiàn)為低血壓、末梢水腫等。四、注意事項禁忌：

6、1、對本品成份有過敏史的病人。 2、高熱、嚴(yán)重心臟病、低血壓者 嚴(yán)重心腎功能不全者、肺功能異?；蜻M(jìn)行過器官移植者。 3、重組人白細(xì)胞介素-2既往用藥史中出現(xiàn)過與之相關(guān)的毒性反應(yīng)。五、發(fā)展前景目前研究是對其在用藥前進(jìn)行化學(xué)修飾，主要采用PEG修飾：具體有三聚氯氰活MPEG修飾MPEG 硝基苯基碳酸鹽修飾。修飾物和rhlu-2的投入比、反應(yīng)環(huán)境的PH、修飾反應(yīng)的時間、1%PEG4000的加入都會影響到修飾產(chǎn)物的活性。五、發(fā)展前景修飾后的產(chǎn)物經(jīng)過疏水層析和凝膠過濾即可被提純。目前已經(jīng)證明rhIL-2 經(jīng)不同的 PEG 化處理后，其循環(huán)半衰期均有不同程度的提高，其水溶性也得到極大提高，可不用 SDS 助溶在常溫下保持長期穩(wěn)定。參考文獻(xiàn)1、中國藥典2010版第三部；2、重組人白細(xì)胞介素-2 的化學(xué)修飾