雌激素對正常人精子受精能力的影響及其機制初探

1、雌激素對正凡人精子受精本領(lǐng)的影響及其機制初探何彥芳岳利民鄭潔何亞平張金虎【摘要】目的研究雌激素物質(zhì)17-雌二醇E2對正常生養(yǎng)男性體外受精本領(lǐng)的影響，并開端探究其大概的機制。要領(lǐng)精子懸液中別離參加差異濃度的E2及非透膜性交聯(lián)物雌二醇-牛血明凈卵白E2-BSA，獲能4h后行體外受精，不雅察卵子受精率FR和受精指數(shù)FI的變革；進(jìn)一步去除造就液中鈣離子a2+，再次不雅察無鈣情況下E2對人精子FR和FI的影響。效果必然濃度的E21l/L、10l/L可明顯進(jìn)步人精子的FR和FIP0.05，較低和較高濃度的E20.1l/L、100l/L那么對人精子FR和FI無明顯影響P0.05；別的，非透膜性大分子物質(zhì)E2

2、-BSA2g/L)也可顯著進(jìn)步人精子的FR和FIP0.05。去除獲能液中的a2+后，E2對人精子FR和FI無明顯影響P0.05。結(jié)論造就液中參加必然濃度的E2可進(jìn)步人精子的體外受精率，其作用機制大概是通過與精子膜上的雌激素受體或雌激素結(jié)合位點彼此作用后促進(jìn)胞外a2+內(nèi)流而實現(xiàn)的?！娟P(guān)鍵詞】17-雌二醇；雌二醇-牛血明凈卵白；人精子；受精;倉鼠卵穿透Abstrat：bjetiveTstudytheeffetandpssibleehanisf17-esrtrdial(E2)nthefertilizingabilityfhuansperatzainvitr.ethdsSperatzaereexpse

3、dtE2atdifferentnentratinsandtheebraneipereablenjugated17-estradil(E2-BSA)respetively.Afterinubatedinapaitatingediufr4hursandinvitrfertilizatinfr3hurs,fertilizatinrate(FR)andfertilizatinindex(FI)ereassessed.Furtherre,speratzaereexpsedtE2inaliu-freeapaitatingediutassesstheFRandFIagain.ResultsE2atnentr

4、atinf1l/Land10l/LsignifiantlyenhanedtheFRandFI(P0.05).Hever,E2atlerrhighernentratin(0.1l/Lr100l/L)hadnsignifianteffetntheFRandFI(P0.05).Besides,E2-BSA(2g/L)alsenhanedfertilizingabilityfhuansperatza(P0.05).E2hadnsignifianteffetntheFRandFIinaliu-freeapaitatingediu(P0.05).nlusinTheresultsindiatedthatE2

5、atsuitablenentratinuldaffetthefertilizingabilityfhuansperatzainvitr,hihayediatebybindingiththesiterestrgen-reeptrnhuansperatzaebranetausetheinfluxfextraellularaliu.Keyrds:estrgen;E2-BSA;huansperatza;fertilizatin;hastereggpenetratin精液和雌性生殖道內(nèi)存在富厚的雌激素，排卵前的卵泡液中雌激素的濃度尤為高約莫12.5ng/l4100ng/l1。人精子在穿越女性生殖道的歷程

6、中，雌激素大概會與精子彼此作用，從而影響精子的活動、獲能、受精等種種成效。有研究創(chuàng)造，人精子膜上存在雌激素的特異性結(jié)合位點或雌激素受體2，因此，雌激素大概通過與精子膜上的這種結(jié)合位點或雌激素受體彼此作用來影響精子成效。如今以為，雌激素可以增能人精子的頂體反響歷程，促進(jìn)精子的前向活動力，但是雌激素對人精子在體內(nèi)或體外受精本領(lǐng)的影響和機制如今還不明晰。17-雌二醇E2是活性比力高的雌激素物質(zhì)，本實行用E2以及E2與牛血明凈卵白交聯(lián)而成的非透膜性大分子E2-BSA別離作用于生養(yǎng)力正常男性的獲能精子，以開端探究雌激素對人精子在體外穿卵試驗的作用及其大概機制。1質(zhì)料與要領(lǐng)1.1質(zhì)料1.2要領(lǐng)另取10例精

7、子標(biāo)本的上游精子均分為含鈣組和無鈣組，別離用含鈣的B獲能液和無鈣的B獲能液重懸，調(diào)解精子密度至21010/L，之后兩組精子懸液又各分為兩小組，一小組為空缺比擬，另一小組參加終濃度為10l/L的E2，各小組精子均在孵箱中完全獲能4h后行體外受精。1.3統(tǒng)計學(xué)處置懲罰實行所得數(shù)據(jù)均以表現(xiàn)，接納SPSS10.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)舉行2查驗，以P0.05為差異有明顯性。2效果2.1E2和非透膜性大分子物質(zhì)E2-BSA對人精子SPA試驗的作用表1E2和E2-BSA對人精子穿卵率和受精指數(shù)的影響表1所示為差異濃度E2和大分子物質(zhì)E2-BSA作用后人精子SPA試驗的FR和FI的變革。統(tǒng)計效果表現(xiàn)：與空缺比擬組比

8、擬，1l/LE2和10l/LE2作用組精子SPA試驗的FR和FI均顯著進(jìn)步(P0.05)，兩作用組之間FR和FI無明顯差異(P0.05)；100l/LE2作用組的FR和FI無明顯變革(P0.05)；同時，2g/LE2-BSA相稱于游離E210l/L作用組的FR和FI也明顯進(jìn)步(P0.05)，而且其作用與E210l/L比擬無明顯差異(P0.05)。2.2無鈣液處置懲罰時E2對人精子SPA試驗的作用表2所示為含鈣組和無鈣組精子別離用10l/LE2處置懲罰后SPA試驗的FR和FI的變革。統(tǒng)計效果表現(xiàn)：在含鈣組，E2作用后精子SPA試驗的FR和FI均明顯進(jìn)步(P0.05)；在無鈣組，與空缺比擬比擬，E

9、2作用后精子SPA試驗的FR和FI均無明顯變革(P0.05)；同時，E2作用后，無鈣組的FR和FI明顯低于含鈣組(P0.05)，含鈣空缺比擬組的FR和FI明顯高于無鈣空缺比擬組(P0.05)。表2無鈣情況下E2對人精子FR和FI的影響3討論精子穿透去透明帶金色倉鼠卵試驗SPA是測定精子獲能、頂體反響和精卵彼此激活本領(lǐng)的一種經(jīng)典要領(lǐng)，是對精子終極獲能效果的不雅察，該要領(lǐng)能客不雅地反響精子的受精本領(lǐng)?，F(xiàn)已創(chuàng)造，雌激素可促進(jìn)精子獲能，進(jìn)步其前向活動力，而且加強精子頂體酶的活性，促進(jìn)頂體反響的產(chǎn)生4-5，精子獲能和末了產(chǎn)生頂體反響是精子獵取受精本領(lǐng)必備的條件。Adeya-sigua等報道，17-雌二醇

10、可以或許進(jìn)步小鼠頂精子頂體反響率和SPA試驗的卵細(xì)胞受精率6。在本實行中，將1l/L及10l/L的E2作用于生養(yǎng)力正常男性獲能精子4h后，創(chuàng)造精子SPA試驗的FR和FI均明顯進(jìn)步，這進(jìn)一步為上述雌激素對精子成效的促進(jìn)作用提供了證據(jù)。但是，0.1l/L和100l/LE2對人精子FR和FI無顯著影響，這表白，過高或過低濃度的雌激素對精子的活能和頂體反響歷程沒有誘導(dǎo)或具有按捺作用。1l/L、10l/L的E2靠近卵泡液中的雌激素濃度，這說明在靠近生理條件下的雌激素濃度對精子獲能和頂體反響誘導(dǎo)作用最大。別的我們還創(chuàng)造，在2gl/L的E2-BSA作用下，精子SPA試驗的FR和FI的也顯著進(jìn)步，而且其作用與

11、10l/L游離的E2相似。E2-BSA是由雌二醇與牛血明凈卵白交聯(lián)而成的一種大分子物質(zhì)，此中不含游離狀態(tài)的E27，這種大分子物質(zhì)是不克不及穿過精子細(xì)胞膜的。E2-BSA可使人精子受精本領(lǐng)加強這一效果表白，雌激素的作用位點應(yīng)該在精子膜上。就成熟的人精子而言，其染色質(zhì)高度凝結(jié)，卵白合成程度極低，而且缺少胞漿及核內(nèi)的雌激素受體8，因此，雌激素對精子成效的影響大概是通過快速的非基因組的作用方法來實現(xiàn)的。Baldi等人以為，人精子膜上存在有限的雌激素的受體或雌激素結(jié)合位點，這與本實行中不雅察到的精子SPA試驗的FR和FI并不隨雌激素濃度的增大而增大的效果是同等的。a2+是體細(xì)胞和生殖細(xì)胞實現(xiàn)其生物成效必

12、不成少的因素，精子的獲能和頂體反響以及受精的完成與精子胞內(nèi)游離a2+濃度的升高嚴(yán)密相干9。本實行中，我們進(jìn)一步去除造就液中的a2+之后，再用E2作用人精子，效果創(chuàng)造，精子SPA試驗的FR和FI無明顯變革。文獻(xiàn)資料表白，雌激素誘導(dǎo)獲能和頂體反響的作用是通過促進(jìn)胞外a2+內(nèi)流而實現(xiàn)的10。精子胞內(nèi)游離a2+濃度升高后可激活腺苷酸環(huán)化酶大概按捺磷酸二酯酶，進(jìn)一步引起精子內(nèi)AP程度升高，從而啟動精子的超激活活動11。超激活活動對付精子穿越輸卵管，末了穿過卵丘細(xì)胞及其胞外基質(zhì)和透明帶起著緊張的作用。結(jié)合以往的研究和本實行的效果，我們闡發(fā)，雌激素進(jìn)步正常男性精子穿卵試驗FR和F1的緣故原由大概是通過引起情

13、況中a2+內(nèi)流繼而引發(fā)精子的超激活活動而實現(xiàn)的。綜上所述，必然劑量的雌激素可以或許進(jìn)步人精子的體外受精本領(lǐng)，這種作用大概是通過雌激素與精子膜上的雌激素受體或結(jié)合位點彼此作用，繼而引起胞內(nèi)a2+內(nèi)流而實現(xiàn)的。同時，我們的研究效果也允許以為未到臨床上運用雌激素處置懲罰人精子以進(jìn)步體外受精率提供必然的實行根據(jù)?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1RdriguezH,Trres,ValdesX,etal.TheArsiReatininStallinSperatza:IndutiveEffetfthearePrevulatryFlliularFluidJ.Biell,2001,25(2):115-120.2BaldiE,Lu

14、ni,uratri,etal.ANvelFuntinalEstrgenReeptrnHuanSperebraneInterferesithPrgesterneEffetsJ.lellEndrinl,2000,161(1-2):31-35.3rldHealthrganizatin.hLabratryanualfrtheExainatinfHuanSeenandSper-ervialuusInteratins.4thed.abridgeUniversityPress,1999:33.4AquilaS,SisiD,Gentile,etal.TardsaPhysilgialRlefrythreP450

15、ArataseinEjaulatedHuanSperJ.HuReprd,2022,18(8):1650-1659.5SaberalGS,SharaK,BalasinrN,etal.EstrgenReeptr,aliubilizatinandRatSpertilityJ.lellBihe,2002,237(1-2):11-20.6Adeya-siguaSA,arkulakiS,PkV,etal.17beta-EstradilandEnvirnentalEstrgensSignifiantlyAffetaalianSperFuntinJ.HuReprd,2022,18(1):100-107.7Ta

16、guhiY,Kslski,BdennerDL.BindingfEstrgenReeptrithEstrgennjugatedtBvineSeruAlbuin(BSA)J.NulReept,2022,2(1):5-13.8Luni,BnarsiL,FrtiG,etal.EffetsfEstrgenipundsnHuanSperatza:EvidenefrInteratinithaNngeniReeptrfrEstrgennHuanSperebraneJ.lellEndrinl,2001,178(1-2):39-45.9BrEitbartH.SignalingPathaysinSperapaitatinandArseReatinJ.elllBil,2022,49(3):321-327.10Luni,FranavillaF