婦康顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

1、婦康顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究【關(guān)鍵詞】婦康顆粒；,芍藥苷；,質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；,高效液相色譜；,薄層鑒別摘要：目的建立了婦康顆粒的質(zhì)量控制方法。方法采用薄層色譜法對(duì)處方中的生地黃、墨旱蓮、益母草和地骨皮進(jìn)展了定性鑒別；用HPL法測(cè)定芍藥苷的含量。結(jié)果在TL色譜中均能檢出生地黃、墨旱蓮、益母草和地骨皮；芍藥苷含量測(cè)定方法的線性范圍為00.5625gr=0.9997，n=7，芍藥苷的平均回收率為100.07%RSD=1.25%，n=6，含量限度芍藥苷不少于7gg1。結(jié)論所建立的方法能準(zhǔn)確地進(jìn)展定性、定量檢測(cè)，可作為婦康顆粒的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。關(guān)鍵詞：婦康顆粒；芍藥苷；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；高效液相色譜；薄層鑒別StudynQua

2、lityStandardfrFuKangGranulesAbstrat：bjetiveTestablishthequalitystandardfrFuKangGranules.ethdsRadixRehanniae,Eliptaprstrate,HerbaLenuriandrtexLyiiinthispresriptinereidentifiedbyTL,PaeniflrinasdeterinedbyHPL.ResultsRadixRehanniae,EliptaAlba,HerbaLenuriuldbeidentifiedbyTL.Deterinatinethdfpaeniflrinasli

3、nearattherangef0.005760.0576gr=0.9997，n=7,averagereveryas100.07%RSD=1.25%，n=6.ThententliitfPaeniflrinshuldntbelerthan7g/g.nlusinTheethdisaurateandreprduible,anditanbeusedfrthequalityntrlfFuKangGranules.Keyrds：FuKangGranules;Paeniflringualitystandard;HPL;TL婦康顆粒是新研制的中成藥制劑，具有滋腎清熱、固澀安沖的成效。在臨床上用于月經(jīng)先期、經(jīng)后淋

4、漓、經(jīng)期延長(zhǎng)等癥。方中主要組成有白芍、生地黃、墨旱蓮、益母草、地骨皮和椿皮等。本實(shí)驗(yàn)對(duì)生地、墨旱蓮、益母草和地骨皮進(jìn)展了薄層層析鑒別，采用HPL對(duì)白芍中的芍藥苷進(jìn)展了含量測(cè)定，建立了婦康顆粒完好的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。1儀器與材料AEL200型精細(xì)分析天平島津公司；UV1型三用紫外分析儀上海顧村電光儀器廠；薄層鋪板器重慶南岸新力實(shí)驗(yàn)儀器廠；微量進(jìn)樣器上海激光儀器設(shè)備廠；aters600E型高效液相色譜儀。益母草對(duì)照藥材批號(hào)：09129905、地骨皮對(duì)照藥材批號(hào)：10879901、墨旱蓮對(duì)照藥材批號(hào)：9589201、梓醇(批號(hào)：08089602)、芍藥苷批號(hào)：07369912，含量測(cè)定用、鹽酸水蘇堿批號(hào)：7

5、129903，含量測(cè)定用購于中國藥品生物制品檢定所。婦康顆粒及缺各味藥的陰性對(duì)照樣品均由江西江中制藥有限責(zé)任公司技術(shù)中心提供。甲醇為色譜級(jí)試劑，其他試劑均為分析純。2方法2.1薄層色譜鑒別2.1.1生地黃的鑒別取婦康顆粒20g，加硅藻土3g，研勻，加無水乙醇100l，置水浴上加熱回流1h，冷卻后，置冰水浴中30in，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0l使溶解，濾過，濾液加在已處理好的活性炭柱2040目，5g，內(nèi)徑1015，濕法裝柱上，用200l水洗脫，繼用5%乙醇200l洗脫，棄去上述洗脫液，再用20%乙醇150l洗脫，搜集洗脫液，置水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状?l使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。另取生

6、地黃藥材5g及缺生地黃的陰性對(duì)照樣品，同法制成生地黃藥材對(duì)照液及陰性對(duì)照溶液。再取梓醇對(duì)照品加甲醇制成每毫升含0.5g的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法1實(shí)驗(yàn)，汲取上述溶液各5l，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿甲醇水(1461)為展開劑，展開約10，取出,晾干，再以同一展開劑展開約7，取出，晾干，噴以茴香醛試液，在105加熱至斑點(diǎn)顯色明晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯一樣顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無此斑點(diǎn)。結(jié)果見圖1。2.1.2墨旱蓮的鑒別2取婦康顆粒15g，加硅藻土3g，研勻，置索氏提取器中，加甲醇適量，加熱回流提取至提取液無色，回收甲醇至干，殘?jiān)铀?0l使溶解，濾過，濾液

7、用乙醚提取2次，30l/次，水溶液備用，合并乙醚液，置水浴上蒸干，殘?jiān)訜o水乙醇2l使溶解，作為供試品溶液。另取墨旱蓮對(duì)照藥材2g，加水煎煮2次40，30l，15in/次，合并煎液，冷卻，濾過，濾液同法制成對(duì)照藥材溶液。再取缺墨旱蓮的陰性對(duì)照樣品，同法制成陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法1實(shí)驗(yàn)，汲取上述溶液各10l，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以正己烷醋酸乙酯(91)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365n)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯一樣顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無此斑點(diǎn)。結(jié)果見圖2。2.1.3益母草的鑒別1取婦康顆粒15g，加硅藻土5g，研勻，加乙醇80l，置水浴

8、上回流提取1h，冷卻后，置冰水浴中0.5h，濾過，濾液回收乙醇至干，殘?jiān)?.1l/LHl20l使溶解，濾過，濾液加在已處理好的強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂柱0017型(732)Na型,內(nèi)徑1015，柱長(zhǎng)12上，以水洗至流出液近無色，棄去水液，再以2l/L的氨水溶液150l洗脫，搜集洗脫液，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?l使溶解，作為供試品溶液。另取益母草藥材3g及缺益母草的陰性對(duì)照樣品，同法制成益母草藥材對(duì)照液及陰性對(duì)照溶液。再取鹽酸水蘇堿對(duì)照品，加甲醇制成每毫升含3g的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法1實(shí)驗(yàn)，汲取上述溶液各10l，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇鹽酸醋酸乙酯

9、(831)為展開劑，展開，取出,晾干，噴以稀碘化鉍鉀溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯一樣顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無此斑點(diǎn)。結(jié)果見圖3。2.1.4地骨皮的鑒別取2.1.2項(xiàng)下的乙醚提取后的水溶液，用醋酸乙酯提取3次，10l/次，合并醋酸乙酯提取液，水浴上蒸干，殘?jiān)訜o水乙醇1l使溶解，加中性氧化鋁2g，在水浴上拌勻、枯燥，裝入中性氧化鋁小柱100200目，2g，內(nèi)徑9，干法上柱上，用醋酸乙酯30l洗脫，棄去洗脫液，再用醋酸乙酯無水乙醇4150l洗脫，搜集洗脫液，水浴上蒸干，殘?jiān)訜o水乙醇2l使溶解，作為供試品溶液。另取地骨皮對(duì)照藥材5g，加水煎煮兩次40，30l，15in/次，合并

10、煎液，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状歼m量使溶解，濾過，回收甲醇至干，殘?jiān)铀?5l溶解，用乙醚提取2次，15l/次。棄去乙醚液，水溶液同法制成對(duì)照藥材溶液。再取缺地骨皮的陰性對(duì)照樣品，同法制成陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法1實(shí)驗(yàn)，汲取上述溶液各10l，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯醋酸乙酯甲酸(1031)為展開劑，展開，取出,晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在110加熱至斑點(diǎn)顯色明晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相對(duì)應(yīng)的位置上，顯一樣顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無此斑點(diǎn)。結(jié)果見圖4。2.2含量測(cè)定2.2.1色譜條件色譜柱：PinnaleDS柱5，4.6250，流動(dòng)相：甲醇水冰醋酸30700.1，柱溫：25，

11、流速：1.0l/in；檢測(cè)波長(zhǎng)：230n。在上述條件下，芍藥苷與其他組分到達(dá)基線別離。結(jié)果見圖5。2.2.2對(duì)照品溶液的制備精細(xì)稱取在五氧化二磷減壓枯燥器中枯燥36h的芍藥苷對(duì)照品適量，加50%乙醇制成每毫升含50g的溶液。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.2.3供試品溶液的制備取本品裝量差異項(xiàng)下內(nèi)容物，研細(xì)，混勻，稱取0.5g，精細(xì)稱定，置具塞錐形瓶中，精細(xì)參加50%乙醇100l，密塞，稱定重量，超聲處理30in，放冷，再稱定，用50%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，離心，取上清液，用微孔濾膜0.45濾過，即得。2.2.4線性關(guān)系考察精細(xì)稱取在五氧化二磷減壓枯燥器中枯燥36h的芍藥苷對(duì)照品11.25g，置

12、100l量瓶中，加50%乙醇適量使溶解，稀釋至刻度，搖勻，分別精細(xì)汲取0，1.00，2.00，4.00，6.00，8.00，10.00l，置10l量瓶中，加50%乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得各對(duì)照品溶液，分別精細(xì)汲取上述各對(duì)照品溶液5l，注入液相色譜儀測(cè)定峰面積。以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：Y=6929169.36X-46675.44，r=0.9997。結(jié)果說明，芍藥苷在00.5625g與峰面積具有良好的線性關(guān)系。2.2.5精細(xì)度實(shí)驗(yàn)精細(xì)汲取芍藥苷(50g/l)對(duì)照品溶液5l,重復(fù)進(jìn)樣5次,計(jì)算得芍藥苷峰面積的RSD為0.19%。2.2.6穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取同一供試品溶

13、液，分別于于配制后0，2，4，8，12h依法測(cè)定峰面積，結(jié)果說明，供試品溶液在12h內(nèi)根本穩(wěn)定，芍藥苷峰面積的RSD為0.37%。2.2.7重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)精細(xì)稱取同一批號(hào)婦康顆粒樣品5份，制備供試品溶液按上述方法測(cè)定峰面積，計(jì)算得芍藥苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7.74g/g，RSD為1.4%。2.2.8回收率實(shí)驗(yàn)采用加樣回收法。精細(xì)稱取含量的同一批號(hào)含芍藥苷7.74g/g0.5g，按高中低濃度法分別精細(xì)參加一定量的芍藥苷對(duì)照品溶液，按上述供試品溶液的制備方法及色譜條件進(jìn)展測(cè)定，結(jié)果芍藥苷的平均回收率為100.07%，RSD=1.25%。2.2.9樣品測(cè)定結(jié)果分別精細(xì)汲取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5l，注入液相色

14、譜儀。結(jié)果見表1。表1婦康顆粒中芍藥苷的測(cè)定結(jié)果略根據(jù)含量測(cè)定的結(jié)果確定婦康顆粒的含量限度為：本品的內(nèi)容物含芍藥苷23H2811不得少于7gg1。3討論3.1婦康顆粒中生地黃、墨旱蓮、益母草和地骨皮的定性鑒別，采用TL法，并分別與各自的陰性對(duì)照液進(jìn)展了對(duì)照實(shí)驗(yàn)，結(jié)果沒有干擾，斑點(diǎn)明顯，專屬性好，收到良好效果。3.2系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)：精細(xì)汲取對(duì)照品溶液、供試品溶液各5l，注入液相色譜儀測(cè)定，測(cè)得供試品中芍藥苷的色譜峰的保存時(shí)間與對(duì)照品中芍藥苷色譜峰的保存時(shí)間一致，平均保存時(shí)間為12.762in；最小理論塔片數(shù)2154；最小別離度2.24；重復(fù)性0.54；平均拖尾因子1.04，實(shí)驗(yàn)說明：本法所用的色譜條件與系統(tǒng)適用性參數(shù)均符合藥典規(guī)定。3.3超聲時(shí)間的選擇：取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物0.5g4份，按照2.2.3項(xiàng)下方法處理，分別超聲處理15，30，45，60in，測(cè)定。結(jié)果說明，超聲處理時(shí)間30in，芍藥苷含量最大，并趨于穩(wěn)定，應(yīng)選擇超聲提取時(shí)間為30