雜環(huán)類(lèi)藥物分析-吡啶類(lèi)

藥物分析第九章雜環(huán)類(lèi)藥物的分析目錄CONTENTS吡啶類(lèi)苯并噻嗪類(lèi)苯并二氮雜卓類(lèi)…1324一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）化學(xué)結(jié)構(gòu)基本結(jié)構(gòu)→吡啶環(huán)

典型藥物尼可剎米

硝苯地平異煙肼酰肼基：強(qiáng)還原性；縮合反應(yīng)吡啶環(huán)：開(kāi)環(huán)反應(yīng)；N：弱堿性酰胺基：易水解硝基：遇光不穩(wěn)定（二）主要性質(zhì)1.吡啶環(huán)（1）弱堿性：本類(lèi)藥物吡啶環(huán)上的氮原子顯堿性，吡啶環(huán)的pKb值為8.8（水中）。（2）吡啶環(huán)的開(kāi)環(huán)反應(yīng)（戊烯二醛反應(yīng)

）本反應(yīng)適用于吡啶環(huán)的α、α?位無(wú)取代基的異煙肼和尼可剎米。當(dāng)溴化氰與芳伯胺作用于吡啶環(huán)，使環(huán)上氮原子由3價(jià)轉(zhuǎn)變成5價(jià)，吡啶環(huán)發(fā)生水解反應(yīng)生成戊烯二醛，再與芳伯胺縮合，生成有色的戊烯二醛衍生物。其顏色隨所用芳胺的不同有所差異，如與苯胺縮合顯黃至黃棕色；與聯(lián)苯胺則顯粉紅至紅色。（3）沉淀反應(yīng)：吡啶環(huán)為含氮雜環(huán)，可與沉淀試劑如重金屬鹽類(lèi)（如氯化汞、碘化鉍鉀等）發(fā)生沉淀反應(yīng)。2.二氫吡啶環(huán)（1）還原性：硝苯地平為二氫吡啶環(huán)，具有還原性。（2）解離性：在堿性條件下，硝苯地平的二氫吡啶環(huán)1,4-位氫均可發(fā)生解離，形成p-π共軛而呈色。3.取代基（1）酰肼基（異煙肼）：還原性，異煙肼與硝酸銀反應(yīng)，即生成可溶于稀硝酸的白色異煙酸銀沉淀，并生成氮?dú)夂徒饘巽y，在管壁上產(chǎn)生銀鏡。（2）酰胺基（尼可剎米）：水解性。4.吸收光譜特性結(jié)構(gòu)中均有共軛體系，在紫外光區(qū)有特征吸收；在紅外光區(qū)亦有特征吸收。二、鑒別（一）吡啶環(huán)的反應(yīng)1.沉淀反應(yīng)：本類(lèi)藥物具有吡啶環(huán)的結(jié)構(gòu)，可與重金屬鹽類(lèi)及苦味酸等試劑形成沉淀。例：異煙肼、尼可剎米可與氯化汞形成白色沉淀。例：尼可剎米可與硫酸銅及硫氰酸銨作用生成草綠色配位化合物沉淀二、鑒別（一）吡啶環(huán)的反應(yīng)2.開(kāi)環(huán)反應(yīng)（戊烯二醛反應(yīng)）：

當(dāng)溴化氰與芳伯胺作用于吡啶環(huán)，使環(huán)上氮原子由3價(jià)轉(zhuǎn)變成5價(jià)，吡啶環(huán)發(fā)生水解反應(yīng)生成戊烯二醛，再與芳伯胺縮合，生成有色的戊烯二醛衍生物。其顏色隨所用芳胺的不同有所差異，如與苯胺縮合顯黃至黃棕色；與聯(lián)苯胺則顯粉紅至紅色。例：取尼可剎米1滴，加水50mL，搖勻，分取2mL，加溴化氰試液2mL與2.5%苯胺溶液3mL，搖勻，溶液漸顯黃色。二、鑒別（一）吡啶環(huán)的反應(yīng)3.顏色反應(yīng)二氫吡啶在強(qiáng)堿溶液中，1,4位氫發(fā)生解離，形成p-π共軛而發(fā)生顏色變化。例：取硝苯地平約25mg，加丙酮1ml溶解，加20%氫氧化鈉溶液3～5滴，振搖，溶液顯橙紅色。二、鑒別（二）酰肼基的銀鏡反應(yīng)例：取異煙肼約10mg，置試管中，加水2ml溶解后，加氨制硝酸銀試液1ml，即發(fā)生氣泡與黑色渾濁，并形成銀鏡。二、鑒別（三）分解產(chǎn)物的反應(yīng)尼可剎米和煙酰胺的分子結(jié)構(gòu)中，吡啶環(huán)β位上的取代基均為酰胺基結(jié)構(gòu)，可遇堿水解，根據(jù)水解產(chǎn)物的性質(zhì)，對(duì)藥物進(jìn)行鑒別。例：尼可剎米與氫氧化鈉試液加熱，即發(fā)生二乙胺的臭氣，能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變藍(lán)色。例：煙酰胺的鑒別：在供試品水溶液中加氫氧化鈉試液后，緩緩煮沸，即發(fā)生氨臭。繼續(xù)加熱至氨臭除盡，放冷，加酚酞指示液1～2滴，用稀硫酸中和，再加硫酸銅試液，即緩緩析出煙酸銅的淡藍(lán)色沉淀；濾過(guò)，取沉淀熾灼，即發(fā)生吡啶的臭氣。二、鑒別（四）紫外可見(jiàn)分光光度法例：取硝苯地平適量，加三氯甲烷2ml使溶解，加無(wú)水乙醇制成每1ml約含15μg的溶液，照紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定，在237nm的波長(zhǎng)處有最大吸收，在320～355nm的波長(zhǎng)處有較大的寬幅吸收。二、鑒別（五）紅外分光光度法例：硝苯地平的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集469圖）一致。三、檢查1.異煙肼中游離肼的檢查

異煙肼是一種不甚穩(wěn)定的藥物，游離肼是由制備時(shí)原料引入，或在貯藏過(guò)程中降解而產(chǎn)生。肼又是一種誘變劑和致癌物質(zhì)，因此國(guó)內(nèi)外藥典規(guī)定了異煙肼及其制劑中游離肼的限量檢查。方法：TLC供試品溶液：100mg/ml對(duì)照溶液：0.08mg/ml固定相：硅膠G薄層板展開(kāi)劑：異丙醇-丙酮（3︰2）顯色劑：乙醇制對(duì)二甲氨基苯甲醛試液結(jié)果判斷：本法以試驗(yàn)條件下不出現(xiàn)游離肼斑點(diǎn)為合格。三、檢查2.硝苯地平中有關(guān)物質(zhì)的檢查二氫吡啶類(lèi)藥物遇光極不穩(wěn)定，在生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中分子內(nèi)部可能發(fā)生光化學(xué)歧化作用而發(fā)生降解。可降解為雜質(zhì)Ⅰ及雜質(zhì)Ⅱ。雜質(zhì)來(lái)源？雜質(zhì)Ⅰ雜質(zhì)Ⅱ如何檢查？HPLC法（避光操作）供試品溶液：1mg/ml。對(duì)照品貯備液：10μg/ml（雜質(zhì)Ⅰ、雜質(zhì)Ⅱ混合溶液）。對(duì)照溶液：含硝苯地平2μg/ml和雜質(zhì)Ⅰ、Ⅱ各1μg/ml的混合溶液。系統(tǒng)適用性溶液：含硝苯地平1mg/ml和雜質(zhì)Ⅰ、Ⅱ各10μg/ml的混合溶液。固定相：十八烷基硅烷鍵合硅膠。流動(dòng)相：甲醇-水（60∶40）。檢測(cè)波長(zhǎng)：235nm。雜質(zhì)Ⅰ、雜質(zhì)Ⅱ：按外標(biāo)法計(jì)算（0.1%）。其他單個(gè)雜質(zhì)：主成分自身對(duì)照法（0.2%）?？傠s質(zhì)：主成分自身對(duì)照法（0.5%）。四、含量測(cè)定1.非水滴定法：尼可剎米2.鈰量法：硝苯地平3.紫外可見(jiàn)分光光度法：尼可剎米注射液4.高效液相色譜法：硝苯地平制劑、異煙肼及其制劑硝苯地平的含量測(cè)定取本品約0.4g，精密稱(chēng)定，加無(wú)水乙醇50ml，微溫使溶解，加高氯酸溶液（取70%高氯酸8.5ml，加水至100ml）50ml、鄰二氮菲指示液3滴，立即用硫酸鈰滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，在水浴中加熱至50℃左右，繼續(xù)緩緩滴定至橙紅色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml硫酸鈰滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于17.32mg的C17H18N2O6。按干燥品計(jì)算，本品含C17H18N2O6應(yīng)為98.0%～102.0%。終點(diǎn)：微過(guò)量Ce4+將指示劑中的Fe2+氧化成Fe3，生成鄰二氮菲-鐵，橙紅色消失。鈰量法實(shí)例分析

按上述方法測(cè)定硝苯地平原料藥的含量：稱(chēng)取供試品2份，分別為0.3903g、0.4113g，用硫酸鈰滴定液（0.1018mol/L）滴定，消耗滴定液體積分別為22.02ml、23.17ml（空白校正后的消耗體積），計(jì)算硝苯地平原料藥的含量，并判斷是否符合規(guī)定。（干燥失重結(jié)果為0.3%）解：第1份供試品按干燥品計(jì)算的重量=0.3903g×（1－0.3%）=0.3891g

第2份供試品按干燥品計(jì)算的重量為0.4101g第2份供試品的含量為99.62%。2份的相對(duì)平均偏差為0.09%，不超過(guò)0.5%。2份的平均含量為99.7%。結(jié)論：符合規(guī)定。硝苯地平片的含量測(cè)定：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水（60∶40）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為235nm。理論板數(shù)按硝苯地平峰計(jì)算不低于2000，硝苯地平峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。HPLC測(cè)定法：避光操作。取本品20片，除去包衣，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量（約相當(dāng)于硝苯地平10mg），置50ml量瓶中，加甲醇適量，超聲使硝苯地平溶解，放冷，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5ml，置50ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取硝苯地平對(duì)照品，精密稱(chēng)定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1ml中約含20μg的溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。本品含硝苯地平（C17H18N2O6）應(yīng)為標(biāo)示量的90.0%～110.0%?！疽?guī)格】（1）5mg。（2）10mg。實(shí)例分析

按上述方法測(cè)定硝苯地平片（規(guī)格為10mg）的含量：20片的總重為2.4832g，稱(chēng)取2份供試品的量分別為0.1285g、0.1226g；2份供試品的平均峰面積分別為5520、5350；對(duì)照品濃度為20μg/ml，對(duì)照品平均峰面積為5320。計(jì)算硝苯地平片的含量。并判斷是否符合規(guī)定。第2份供試品相對(duì)標(biāo)示量的含量為101.84%。2份的相對(duì)平均偏差為0.7%，不超過(guò)3.0%。