《細(xì)胞工程》考試大綱教學(xué)提綱

1、Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。細(xì)胞工程考試大綱-細(xì)胞工程考試大綱第一章緒論一、名詞高技術(shù)、生物技術(shù)、細(xì)胞工程、生化工程.二、知識(shí)點(diǎn)現(xiàn)代生物技術(shù)是一項(xiàng)高技術(shù)；生物技術(shù)的基本內(nèi)容；細(xì)胞工程在整個(gè)生物工程中的地位；細(xì)胞工程主要的技術(shù)領(lǐng)域；細(xì)胞工程的主要應(yīng)用。第二章細(xì)胞工程理論基礎(chǔ)一、名詞細(xì)胞、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞分化、奢侈基因、管家基因.二、知識(shí)點(diǎn)細(xì)胞共性。第三章細(xì)胞工程基本技術(shù)一、名詞生物安全、p1級(jí)實(shí)驗(yàn)室、清潔液、干熱滅菌、濕熱滅菌、無(wú)菌操作技術(shù)、細(xì)胞貼壁率、細(xì)胞計(jì)數(shù)、MTT法、活體染色、成集落試驗(yàn)、污染。二、知識(shí)點(diǎn)細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn)室

2、主要的儀器設(shè)備；細(xì)胞培養(yǎng)室的基本要求；p1級(jí)實(shí)驗(yàn)室的基本要求；細(xì)胞培養(yǎng)室常見(jiàn)的消毒方法；玻璃器皿的清洗方法；判斷清潔液失效的方法及延長(zhǎng)其壽命的方法；無(wú)菌操作的技術(shù)要領(lǐng)與要求；培養(yǎng)細(xì)胞的觀察技術(shù)；培養(yǎng)細(xì)胞的主要污染與排除；細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)注意的問(wèn)題；細(xì)胞凍存與復(fù)蘇的技術(shù)要點(diǎn)及注意事項(xiàng)。第四章細(xì)胞培養(yǎng)與代謝調(diào)控一、名詞分批式培養(yǎng)、流加式培養(yǎng)、半連續(xù)式培養(yǎng)、連續(xù)式培養(yǎng)、灌流式培養(yǎng)。二、知識(shí)點(diǎn)分批式培養(yǎng)、連續(xù)式培養(yǎng)、灌流式培養(yǎng)的特點(diǎn)。第五章植物人工繁殖一、名詞植物細(xì)胞工程、植物組織培養(yǎng)、外植體、脫分化、再分化、愈傷組織、胚狀體、大量元素、微量元素、器官發(fā)生途徑、胚狀體發(fā)生途徑、植物快速無(wú)性繁殖、植物脫毒、胚

3、培養(yǎng)、胚乳培養(yǎng)、人工種子、體細(xì)胞胚。二、知識(shí)點(diǎn)植物細(xì)胞工程的主要內(nèi)容；植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)；植物細(xì)胞工程的技術(shù)手段；植物組織再分化的兩條途徑；植物組織培養(yǎng)的主要步驟與技術(shù)要點(diǎn)；影響植物細(xì)胞脫分化和再分化因素；愈傷組織有的特點(diǎn)及其在細(xì)胞工程中的重要性；愈傷組織再生植株的途徑；植物組織與動(dòng)物細(xì)胞的超低溫保存原理及方法的不同；植物細(xì)胞的幾種大規(guī)模培養(yǎng)系統(tǒng)的特點(diǎn)及其影響因素；生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素的生理作用及其在組織培養(yǎng)中的意義。成熟胚培養(yǎng)與幼胚培養(yǎng)在技術(shù)上的異同；植物胚乳培養(yǎng)的類型；植物胚胎培養(yǎng)的意義及影響因素；愈傷組織的形成的三個(gè)階段及主要特征；人工種子的組成、構(gòu)建與應(yīng)用；體細(xì)胞胚胎發(fā)生的同步控制；

4、植物脫毒的方法；植物快繁技術(shù)的主要步驟；微繁殖中芽的增殖方式；植物脫毒時(shí)外植體的預(yù)處理途徑。第六章動(dòng)物人工繁殖一、名詞胚胎工程p96體外受精p97胚胎移植p97胚胎分割p115胚胎融合p6嵌合體p6胚胎性別鑒定p121胚胎冷凍技術(shù)p6試管嬰兒p103超數(shù)排卵p6同步發(fā)情p6胚胎細(xì)胞克隆p8同種體細(xì)胞克隆p8異種體細(xì)胞克隆p8核移植技術(shù)p108二、知識(shí)點(diǎn)胚胎工程的主要技術(shù)領(lǐng)域p6體外受精的基本過(guò)程p7試管嬰兒的基本步驟p104胚胎工程的意義p7克隆研究的主要內(nèi)容p8克隆的理論與技術(shù)基礎(chǔ)理論基礎(chǔ)是細(xì)胞全能性技術(shù)基礎(chǔ)：核移植技術(shù)胚胎移植技術(shù)核移植的技術(shù)要點(diǎn)、應(yīng)用與發(fā)展前景p8“多莉”的制備步驟p9“

5、多莉”引發(fā)的思考你對(duì)克隆人的看法。第七章細(xì)胞重組與細(xì)胞融合一、名詞細(xì)胞重組p128胞質(zhì)體p128核質(zhì)體微細(xì)胞p128細(xì)胞融合p132HAT培養(yǎng)基p6單克隆抗體p239基因定位p6二、知識(shí)點(diǎn)細(xì)胞重組的方式與意義1）胞質(zhì)體與完整細(xì)胞的融合形成胞質(zhì)雜種；2）微細(xì)胞與完整細(xì)胞的融合形成微細(xì)胞異核體；3）胞質(zhì)體與核體（小細(xì)胞）融合形成重組細(xì)胞（核質(zhì)雜種）HAT選擇的原理p6細(xì)胞融合的主要應(yīng)用1)進(jìn)行基因定位，繪制人類基因圖2）誘導(dǎo)PC染色體3）體細(xì)胞雜種的致瘤性分析4)遺傳缺陷的基因互補(bǔ)5)分化功能表達(dá)調(diào)控的研究6)淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)與單克隆抗體7)植物細(xì)胞的原生質(zhì)體融合培育雜種植株8)核質(zhì)相互作用關(guān)系

6、9)基因治療10)疾病診斷PEG誘導(dǎo)細(xì)胞融合的基本原理PEG(polyethyleneglycol)是一種多聚化合物，分子式為H(OHCH2-CH2)nOH，平均分子量在20020000之間。誘導(dǎo)機(jī)制可能是由于帶有大量負(fù)電荷的PEG分子和原生質(zhì)體表面的負(fù)電荷間在鈣離子的作用下形成靜電鍵，促使原生質(zhì)體間的黏著而結(jié)合，導(dǎo)致電荷平衡失調(diào)并重新分配，使兩種原生質(zhì)體上的正負(fù)電荷連接起來(lái)，進(jìn)而形成具有共同質(zhì)膜的融合體。融合體的基本類型及其篩選1）同核體同源原生質(zhì)體的融合2）異核體非同源原生質(zhì)體的融合3）多核體含有雙親不同比例核物質(zhì)的融合體融合體的篩選方法1）遺傳互補(bǔ)篩選法2）抗性互補(bǔ)篩選法3）生長(zhǎng)特性篩選

7、法4）物理特性篩選法5）其他方法新品種培育名詞花藥培養(yǎng)p150植物原生質(zhì)體融合p13端體系統(tǒng):除了從細(xì)胞中去掉整條染色體外，還可以有計(jì)劃的去除某一染色體的某一側(cè)的臂。三體植物系統(tǒng):如果細(xì)胞中增加一條同種的染色體，則染色體數(shù)成為2n+1，稱為三體（trisome）。如果增加兩條同種染色體（非同源），結(jié)果有兩對(duì)染色體都變成三條，則稱雙三體。單體系統(tǒng)p13孤雌生殖p150染色體加倍p13染色體倍性改造工程:指有目的、有計(jì)劃的增加或減少一組或幾組同源或異源染色體，以創(chuàng)造我們所需的動(dòng)植物新品種的一項(xiàng)染色體工程技術(shù)。植物染色體的非整倍體改造:是按照人們預(yù)定的目標(biāo),通過(guò)有計(jì)劃的削減、添加和代換同種或異種的一

8、個(gè)或若干條染色體或其一部分，可以在一定程度上達(dá)到定向改變植物的遺傳性、選育新品種的目的。單體植物:從細(xì)胞中去掉一條染色體，則染色體數(shù)成為2n-1，這樣的植物叫做單體植物。缺體植物:去掉兩條染色體(同源)，2n-2二、知識(shí)點(diǎn)花藥培養(yǎng)中外植體的選擇（1）材料的遺傳變異首先，不同物種之間花藥培養(yǎng)的反應(yīng)存在跟大差異；此外，同一屬內(nèi)不同種或品種之間也存在誘導(dǎo)性的差異。母本材料的基因型是影響花藥培養(yǎng)的關(guān)鍵因素，不同基因型植株的花藥對(duì)培養(yǎng)的反應(yīng)不同?；ㄋ幣囵B(yǎng)的誘導(dǎo)率也與雜種優(yōu)勢(shì)有關(guān)，一般情況下雜種比純種容易誘導(dǎo)。（2）母本生理狀態(tài)的影響母本生理狀態(tài)直接影響花藥培養(yǎng)力母本的氮素營(yíng)養(yǎng)水平是另一個(gè)重要的影響因素（

9、3）花粉發(fā)育時(shí)期被子植物的花粉發(fā)育過(guò)程經(jīng)歷三個(gè)階段，即第一期四分體時(shí)期、第二期單核期（小孢子階段）、第三期雙核期和三核期（雄配子體階段）。單核期又分為單核早期、但和中期、單核晚期。對(duì)大多數(shù)植物來(lái)說(shuō)，單核中期和晚期是誘導(dǎo)花粉胚或花粉愈傷組織的最佳時(shí)期，尤其單核靠邊期是花粉誘導(dǎo)的關(guān)鍵時(shí)期。不同植物的花粉對(duì)離體培養(yǎng)有其特定的、最敏感的發(fā)育時(shí)期，然而，對(duì)大多數(shù)植物，單核期的花粉比較容易培養(yǎng)。具有無(wú)限數(shù)目花藥的植物，取材比較方便，具有有限數(shù)目花藥的植物，按順序找出小孢子發(fā)育時(shí)期不同的花藥。將鏡檢結(jié)果與花蕾發(fā)育狀態(tài)進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)花蕾狀態(tài)與花粉發(fā)育時(shí)期的對(duì)應(yīng)關(guān)系，為進(jìn)一步取樣培養(yǎng)奠定基礎(chǔ)。供體植物的遺傳背景

10、對(duì)單倍體的誘導(dǎo)影響甚大?；ㄋ幣囵B(yǎng)與花粉培養(yǎng)的不同點(diǎn)p12花藥培養(yǎng)中再生植株的形成途徑與再生植株倍性的關(guān)系p12花藥培養(yǎng)再生植株的途徑植物原生質(zhì)體制備的方法原生質(zhì)體再生植株的技術(shù)路線p13植物染色體的人工加倍方法p14植物遠(yuǎn)緣雜交遇到的主要困難第九章植物細(xì)胞代謝產(chǎn)物制備一、名詞看護(hù)培養(yǎng)p165：用一塊活躍生長(zhǎng)的愈傷組織來(lái)看護(hù)單個(gè)細(xì)胞，使其持續(xù)分裂和增殖。這塊愈傷組織被稱為看護(hù)組織。飼養(yǎng)層培養(yǎng)p165：與處理過(guò)的（如X射線處理）無(wú)分裂能力或分裂很慢的細(xì)胞來(lái)飼養(yǎng)所需培養(yǎng)的細(xì)胞，使其分裂和生長(zhǎng)。細(xì)胞固定化培養(yǎng)p168：是指將游離的細(xì)胞埋在支持物內(nèi)部或表面進(jìn)行培養(yǎng)的一門(mén)技術(shù)。冠癭組織p186：是由根癌農(nóng)

11、桿菌感染引起的植物腫瘤組織，它能在無(wú)外加植物激素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。轉(zhuǎn)基因植物p266：是指將外源基因轉(zhuǎn)入到植物的細(xì)胞或組織獲得了新的遺傳性狀的植物。Ti質(zhì)粒p14：是指在根瘤土壤桿菌細(xì)胞中存在的一種染色體外自主復(fù)制的環(huán)形雙鏈DNA。二、知識(shí)點(diǎn)植物細(xì)胞定向富集馴化方法p174：細(xì)胞株定向富集馴化是一種有效的篩選技術(shù)，主要包括:1激素自養(yǎng)型細(xì)胞株的篩選馴化：將愈傷組織或分離到的細(xì)胞接種在不含生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素的繼代培養(yǎng)基中進(jìn)行傳代培養(yǎng)，挑選生長(zhǎng)好的細(xì)胞進(jìn)行反復(fù)繼代培養(yǎng)馴化可以獲得激素自養(yǎng)型細(xì)胞。2、耐受高劑量有毒物質(zhì)的細(xì)胞株馴化：將愈傷組織或分離到的細(xì)胞接種在含高濃度的乙酸鹽、苯甲酸鈉等可能對(duì)細(xì)胞產(chǎn)

12、生含毒化合物的培養(yǎng)基中反復(fù)繼代培養(yǎng)馴化。不斷提高這些成分含量，可以獲得耐受高劑量有毒物質(zhì)的細(xì)胞株。第十章微藻培養(yǎng)及應(yīng)用一、名詞微藻p190：一般指是那些在顯微鏡下才能辨別形態(tài)的微小藻類。二、知識(shí)點(diǎn)微藻的特點(diǎn)及分類p190；1、特點(diǎn)：（1）利用太陽(yáng)能和二氧化碳通過(guò)光合作用生產(chǎn)有機(jī)物，生長(zhǎng)速度快，效率高，能耗低。（2）微藻提取有效成分不需要復(fù)雜的前處理。（3）種類多，許多微藻可以產(chǎn)生有生物活性的化合物。（4）可以利用貧瘠土地、鹽堿地等極端環(huán)境。（5）微藻培養(yǎng)簡(jiǎn)單，容易產(chǎn)業(yè)化。2、分類：微藻有原核微藻和真核微藻兩大類。根據(jù)微藻生長(zhǎng)環(huán)境可分為水生微藻、陸生微藻和氣生微藻三類生態(tài)類群。水生微藻又有淡水生

13、和海水生之分，根據(jù)分布又可分為浮游微藻和底棲微藻。微藻的應(yīng)用p190：微藻生物能源、藻類生物柴油、藻類生物制氫、生物活性物質(zhì)制備、水產(chǎn)餌料、微藻基因工程、其他應(yīng)用。第十一章動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一、名詞動(dòng)物細(xì)胞工程細(xì)胞培養(yǎng)組織培養(yǎng)器官培養(yǎng)原代培養(yǎng)p215繼代培養(yǎng)p217細(xì)胞系p220克隆接觸抑制p207密度抑制p207天然培養(yǎng)液合成培養(yǎng)液“一代”細(xì)胞p217組織塊培養(yǎng)法單層細(xì)胞培養(yǎng)法大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)p223二、知識(shí)點(diǎn)體外培養(yǎng)細(xì)胞的主要類型及其生長(zhǎng)特點(diǎn)p206細(xì)胞系的生長(zhǎng)過(guò)程的主要階段及其特征血清的主要用途及注意事項(xiàng)p208209細(xì)胞培養(yǎng)液配置的技術(shù)要點(diǎn)p211原代細(xì)胞培養(yǎng)的方法、主要步驟、技術(shù)要點(diǎn)以及

14、各自的適用范圍原代培養(yǎng)方法:組織塊培養(yǎng)法,組織消化培養(yǎng)貼壁細(xì)胞傳代的主要方法及技術(shù)要點(diǎn)酶消化法懸浮細(xì)胞傳代的主要方法及技術(shù)要點(diǎn)直接傳代、離心法傳代細(xì)胞模型的建立與應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)的作用意義生產(chǎn)實(shí)踐方面1）有害物質(zhì)的快速檢測(cè)（2）大面積皮膚燒傷的修復(fù)（3）遺傳病的產(chǎn)前診斷（4）建立各種醫(yī)學(xué)模型（5）大量生產(chǎn)生物活性物質(zhì)理論研究方面（1）細(xì)胞與細(xì)胞之間的相互作用（2）細(xì)胞內(nèi)部與細(xì)胞外界之間的作用（3）細(xì)胞內(nèi)胞質(zhì)的活動(dòng)4）胞質(zhì)與核質(zhì)之間的流動(dòng)第十二章轉(zhuǎn)基因生物反應(yīng)器一、名詞轉(zhuǎn)基因動(dòng)物p259基因治療p9基因打靶p9動(dòng)物生物反應(yīng)器p249二、知識(shí)點(diǎn)遺傳物質(zhì)導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法1物理法；包括電穿孔法、顯微注射

15、法和裸露DNA直接注射法。2化學(xué)法：DEAE-葡聚糖法、磷酸鈣DNA沉淀法和脂質(zhì)體載體包埋法。3生物學(xué)方法：指病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移。常用DNA病毒載體和反轉(zhuǎn)錄病毒載體。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的制備方法1）原核期胚胎顯微注射法2）反轉(zhuǎn)錄病毒感染法3）胚胎干細(xì)胞方法（ES細(xì)胞途徑）4）精子載體法5）人工酵母染色體（YAC）轉(zhuǎn)基因法6）受精前卵細(xì)胞顯微注射法7）其它方法:包括電脈沖法、染色體片段注入法、磷酸鈣共沉淀法、微彈轟擊法、基因剔除和基因嵌入法等動(dòng)物生物反應(yīng)器的類型與特點(diǎn)乳腺生物反應(yīng)器、血液生物反應(yīng)器、基因改良動(dòng)物第十三章干細(xì)胞與組織工程一、名詞干細(xì)胞p278胚胎干細(xì)胞p280成體干細(xì)胞p287ES細(xì)胞p7EC細(xì)胞p7EG細(xì)胞p7組織工程：利用細(xì)胞生物學(xué)和工程學(xué)原理，將人體某部分的組織細(xì)胞種植和吸附在一種生物材料的支架上進(jìn)行人工培養(yǎng)繁殖、擴(kuò)增，然后移植到人體內(nèi)所需要的部位，從而達(dá)到器官修復(fù)或再造的治療目的的一種技術(shù)。二、知識(shí)點(diǎn)干細(xì)胞的分類與特點(diǎn)按其分化潛能可分為三類：全能干細(xì)胞具有形成完整個(gè)體的分化潛能多能干細(xì)胞具有分化成一種器官的多種組織細(xì)胞的潛能，但卻失去了發(fā)育成完整個(gè)體的能力。專能干細(xì)胞只能向一種類型或密切相關(guān)的兩種類型的細(xì)胞分化。按干細(xì)胞來(lái)源分為兩類：胚胎干細(xì)胞從早期胚胎中分離出來(lái)的干細(xì)胞，具有全能性?？梢苑只扇魏谓M織類型的細(xì)胞。成體