熒光法測定維生素C

1、本科生畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）熒光法測定片劑中抗壞血酸的含量姓名：康玉勝指導(dǎo)教師：張娜院系：化學(xué)系一專 業(yè)：化學(xué)本科提交日期：2010-4-28目錄 TOC o 1-5 h z 摘要3英文摘要4引言51.實(shí)驗(yàn)部分51.1儀器51.2試劑61.3實(shí)驗(yàn)方法62熒光底物的選擇62.1鄰苯二胺62.2、水楊酸72.3、苯甲酸83.實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論93.1熒光光譜93.2酸度的影響10 HYPERLINK l bookmark39 o Current Document 3.3不同緩沖體系的影響11 HYPERLINK l bookmark42 o Current Document 3.4緩沖體系體積的影響123.

2、5 Fe3+用量的影響133.6加入順序的影響143.7時(shí)間的影響15 HYPERLINK l bookmark45 o Current Document 3.8溫度的影響16 HYPERLINK l bookmark48 o Current Document 3.9苯甲酸用量的影響173.10表面活性劑的影響17 HYPERLINK l bookmark63 o Current Document 3.11共存離子干擾試驗(yàn)193.12工作曲線的制備19樣品測定結(jié)果20結(jié)論20注釋20 HYPERLINK l bookmark66 o Current Document 參考文獻(xiàn)21致 謝21熒光

3、法測定片劑中抗壞血酸的含量III康玉勝指導(dǎo)老師；張娜（黃山學(xué)院化學(xué)化工系，黃山，安徽245041 ）摘 要：基于維生素C本身沒有熒光，苯甲酸與維生素C反應(yīng)生成熒光物質(zhì)的特性， 建立了一種測量維生素C含量的方法。在pH=6.0的NaOH-鄰苯二甲酸氫鉀的緩沖介質(zhì)中， 苯甲酸對(duì)維生素C促熒光明顯，可在激發(fā)波長310nm，發(fā)射波長410nm處測其產(chǎn)物的熒光 強(qiáng)度.Vc濃度在0-3. 5x10-堂/mL范圍內(nèi)其熒光強(qiáng)度呈良好線性關(guān)系，檢測限較低，相關(guān)系數(shù) 為0.988.利用本法進(jìn)行回收實(shí)驗(yàn)與樣品測定，結(jié)果令人滿意，適應(yīng)于片劑中維生素C的測定。關(guān)鍵詞：熒光光度法；維生素C；苯甲酸Fluorescence

4、 spectrometry in tablets ofAscorbic acidKang YushengInstructor; Zhang Na(Huangshan University Department of chemistry and chemical engineering,Huangshan, Anhui 245041)Abstract：Based on vitamin C itself has no fluorescence, benzoic acid and vitamin C reaction of fluorescence material characteristics,

5、 establishes a measure vitamin c content. At pH = 6.0 of NaOH potassium hydrogen phthalate buffer media, promoting hydroxybenzoic acid on vitamin C can be used in fluorescence obvious, excitation wavelength 310nm, measuring the emission wavelength 410nm at its products of fluorescence intensity .Vc

6、concentration in the 0-3. 5 x 10-fg/mL range its fluorescence intensity is good linear relationships, the detection limit is low, the correlation coefficient 0.988. Use this law to recycle and specimens, the results are atisfactory, they are suitable for the tablets in the determination of vitamin C

7、Key words: fluorescence spectroscopy; vitamin C; benzoic acid引言維生素C是可溶于水的無色結(jié)晶，是一種分子結(jié)構(gòu)最簡單的維生素。由于 其防治壞血病的功能，所以在醫(yī)藥上常把它叫做抗壞血酸。維生素C能保持巰 基酶的活性和谷胱甘肽的還原狀態(tài)，起解毒作用等。它廣泛存在于植物組織中， 新鮮的水果、蔬菜，特別是棗、辣椒、苦瓜、獼猴桃、柑橘等食品中含量尤為豐 富。準(zhǔn)確測定維生素C的含量，對(duì)飲食健康、醫(yī)療保健都具有十分重要的意義。 近年來文獻(xiàn)報(bào)道的測定方法1,主要有光度法2、3電化學(xué)法4、滴定法5、酶法6、 色譜法2、7等。Deutsch和Weeks曾

8、經(jīng)報(bào)道過一種檢測維生素C的熒光分析法(OPDA)，并 被指定為維生素C的經(jīng)典熒光分析法9。在該方法中，維生素C先被活性炭(Norit) 氧化為脫氫抗壞血酸(DHAA)，DHAA再與熒光底物鄰苯二胺(OPDA)結(jié)合生成熒 光產(chǎn)物，通過對(duì)該熒光產(chǎn)物的檢測實(shí)現(xiàn)對(duì)維生素C的定量分析8。鄰苯二胺本身 有很強(qiáng)的熒光，而且過量的活性炭會(huì)吸附一定量的維生素C，所以有人提出了一 種新的測定維生素C的熒光分析方法10、11?；诰S生素C被Cu2+氧化為DHAA， DHAA進(jìn)一步與苯甲酸及十六烷基三甲基漠化銨產(chǎn)生熒光協(xié)同增敏作用9，通過 對(duì)體系熒光強(qiáng)度的測定進(jìn)行維生素C的定量分析。該方法所涉及的體系穩(wěn)定性 好，但需

9、要進(jìn)行加熱，且反應(yīng)時(shí)間較長。本文的基本思路是，在以上實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ) 上，嘗試探索和尋找一種效果更好的氧化劑氧化抗壞血酸。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在不 外加氧化劑的條件下，苯甲酸與Vc在特定的酸度條件下可反應(yīng)生成一種較強(qiáng)的 熒光物質(zhì)，其熒光強(qiáng)度與Vc的濃度成正比，據(jù)此建立了新的熒光測定Vc的方 法。與經(jīng)典的Deutsch熒光方法相比，反應(yīng)底物熒光較弱，降低了背景干擾，與 孫振艷熒光方法相比，本反應(yīng)不需外加氧化劑，且反應(yīng)時(shí)間較短，反應(yīng)條件控制 較容易。其原理可以表示如下圖：1.實(shí)驗(yàn)部分1.1儀器熒光分光光度計(jì)(日立F-4500，天津天美科技有限公司)，分析天平(AL104, 北京賽多利斯天平有限公司）1.2試劑

10、鄰苯二胺（1,2-diaminobenzene,江陰市華亞化工有限公司）：4.0 x10-4g/mL 水楊酸（2-Hydroxybenzoic acid，宜興市輝煌試劑廠）：4. 0 x10-4g/mL 苯甲酸溶液（Benzoic acid，BA，國藥集團(tuán)試劑有限公司）：1. 0 x10-4g/mL 硫酸高鐵氨溶液（Ammonium iron，國藥集團(tuán)試劑有限公司）：2. 0 x10-3g/mL 維生素C（vitamin C，國藥集團(tuán)試劑有限公司）:準(zhǔn)確稱取0.0500克，配制到100ml 容量瓶，可制得5.0 x10-4g/mL的儲(chǔ)備液（避光密封2到8C）。維生素C工作液：1. 0 x10-

11、5g/mL，使用時(shí)用去離子水由儲(chǔ)備液逐級(jí)稀釋。氫氧化鈉（Sodium Hydrate，）： 0.2mol/L硼酸（Boric Acid，國藥集團(tuán)試劑有限公司）：0.2 mol/L磷酸二氫鉀（potassium dihydrogen phosphate;monopotassium phosphate，上海試劑 有限公司）：0.2mol/L磷酸二氫鈉（sodium dihydrgen phosphate，江蘇太倉化工廠）：0.2 mol/L氯化鉀（Potassium Chloride，中國上海試劑一廠）：0.2 mol/L鹽酸（hydrochloric acid，中國宿州化學(xué)試劑有限公司）：0.2

12、 mol/L鄰苯二甲酸氫鉀（potassium acid phthalate，汕頭市西隴化工廠有限公司）：0.2 mol/L無水乙醇（absolute alcohol;anhydrous ethanol上海展云化工有限公司） 硼砂（四硼酸鈉）（sodium tetraborate，中國云嶺化工廠）：0.2mol/L Vc藥片：湖北華中藥業(yè)有限公司規(guī)格（0.1g/粒） m=0.1249上海玉安藥業(yè)有限公司規(guī)格（0.莊/粒）m=0.1445南京白敬宇制藥有限公司規(guī)格（0.1g/粒）m=0.1486上海信誼黃河制藥有限公司規(guī)格（0.1g/粒）m=0.15401.3實(shí)驗(yàn)方法于10mL比色管中依次加入1

13、.00mLVc工作液，2.5 mL buffer，1.5mL苯甲酸， 去離子水稀釋定容至刻度，測定熒光光譜。同時(shí)在久ex /久em =310nm/410處， 測定熒光強(qiáng)度F。同時(shí)測定試劑空白（2.5 mL buffer，1.5mL苯甲酸）的熒光強(qiáng) 度 F0，F(xiàn)產(chǎn)-F0。2熒光底物的選擇2.1鄰苯二胺取Vc工作液（1ml）+硫酸高鐵銨溶液（2ml）+緩沖溶液（2ml）+鄰苯二胺 （2ml）測得熒光強(qiáng)度F，取硫酸高鐵銨溶液（2ml）+緩沖溶液（2ml）+鄰苯二表1 pH值對(duì)鄰苯二胺體系熒光的影響胺（2ml）測得熒光強(qiáng)度F0，測得熒光值如表1。pH1689.2F374.1150614771476F0

14、F- Fo= F167.53139615851565306.57110-108-89圖1 pH值對(duì)鄰苯二胺體系熒光的影響由圖1可看出鄰苯二胺本身具有較強(qiáng)的熒光強(qiáng)度，而且與Vc反應(yīng)生成產(chǎn)物 所促的熒光值很小。2.2水楊酸取Vc工作液（1ml）+硫酸高鐵銨溶液（2ml）+緩沖溶液（2ml）+水楊酸（2ml） 測得熒光值如表2。表2 pH值對(duì)水楊酸體系熒光的影響pH1689.2F32975821641978F0F- F= F1271.1577.32056248457.9180.7108-506F-pH 圖pH圖2 pH值對(duì)水楊酸體系熒光的影響由圖2可以看出，水楊酸也具有很強(qiáng)的熒光強(qiáng)度，與Vc反應(yīng)所增

15、熒光值很小。2.3苯甲酸取Vc工作液（1ml）+硫酸高鐵銨溶液（2ml）+緩沖溶液（2ml）+苯甲酸（2ml） 測得熒光值如下表。表3 pH值對(duì)苯甲酸體系熒光的影響pH1.267.68.4F7.3314874.8349.19F0F-吁 F16.27347.9824.8517.641.057100.0249.9831.55F-pH 圖160140-F120100F 80F(6040F12000246810pH圖3 pH值對(duì)苯甲酸體系熒光的影響根據(jù)圖3可以看出，苯甲酸體系熒光增強(qiáng)非常明顯，故本文選用苯甲酸作為 熒光底物進(jìn)行下一步研究。3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論3.1熒光光譜150S 1姬HOG1DOEBA

16、用量（1ml），buffer用量（2.5ml），Vc用量（1ml）不同組合的體系熒光光譜圖疊加 如下圖：1.Z_* H+biLffflr3-trQlfet丘.gT. fc+ijuffeiB.Tc從圖中我們可以看出，曲線4、5、6、7、8 （對(duì)應(yīng)苯甲酸+緩沖，緩沖， 去離子水，維生素C+緩沖，維生素C）均沒有熒光，曲線2、3（對(duì)應(yīng)維生素C+苯甲酸，苯甲酸）有熒光但熒光強(qiáng)度很弱，1號(hào)熒光強(qiáng)度非常強(qiáng)，我們可以知道 Vc+BA+buffer體系所促熒光最佳。1、1. bmlVob 2. OmlVo6、2. bmlVc7、3. OmlVc8. 3. 5mlVc由上圖可見，在苯甲酸體系中加入不同量的維生素

17、C，體系的熒光發(fā)生有規(guī) 律的增強(qiáng)。從而建立了熒光光度法測定維生素C的方法。3.2酸度的影響取硫酸高鐵銨（1ml）+苯甲酸（2ml）+Vc工作液（1ml）+緩沖溶液（2ml） 測得熒光強(qiáng)度為F，取硫酸高鐵銨（1ml）+苯甲酸（2ml）+緩沖溶液（2ml）測 得熒光強(qiáng)度為F0。酸度對(duì)體系的熒光強(qiáng)度有很大的影響，見下表與下圖。表4 pH值對(duì)體系熒光的影響pHF鼠1.27.336.2731.05727.9747.8660.1082.822.9224.83-1.913.633.6729.873.84.430.6232.31-1.695.279.2514.0265.23614847.98100.026.8

18、69.1435.5733.577.674.8324.8549.988.449.1917.6431.55由圖可以看出，在pH=1.28.4之間，體系的AF先增大而后降低，在pH=6.0 時(shí)，體系的AF值達(dá)到最大，故本文選擇pH=6.0的0.10mol L-1的緩沖體系進(jìn)行 進(jìn)一步的研究。3.3不同緩沖體系的影響取硫酸高鐵銨（1ml） +苯甲酸（2ml） +Vc工作液（1ml） +不同體系緩沖溶 液（2ml）定容測得熒光強(qiáng)度為F，取硫酸高鐵銨（1ml） +苯甲酸（2ml） +不同 體系緩沖溶液（2ml），定容測得熒光強(qiáng)度為F0。不同緩沖體系的熒光強(qiáng)度有較大的影響，見下表與下圖。表5不同緩沖體系對(duì)苯

19、甲酸體系熒光的影響緩沖體系FF0F1251.470.41812214.271.11143.093126.737.5689.144437.996.55341.355822.2152.9669.3F-不同緩沖體系緩沖體系圖5不同緩沖體系對(duì)苯甲酸體系熒光的影響1.磷酸二氫鉀NaOH 2.檸檬酸鈉NaOH 3.乙酸一乙酸鈉4.磷酸二氫鉀一硼砂5. NaOH一鄰苯二甲酸氫鉀由圖可以看出，當(dāng)緩沖體系為NaOH鄰苯二甲酸氫鉀時(shí)，體系的AF值達(dá) 到最大，故本文選擇pH=6.0的NaOH鄰苯二甲酸氫鉀緩沖體系進(jìn)行進(jìn)一步的 研究。3.4緩沖體系體積的影響取硫酸高鐵銨（1ml）+苯甲酸（2ml）+Vc工作液（1ml

20、）+緩沖溶液不同體 積定容測得熒光強(qiáng)度為F，取硫酸高鐵銨（1ml）+苯甲酸（2ml）+緩沖溶液不 同體積定容測得熒光強(qiáng)度為F0。緩沖體積對(duì)體系的熒光強(qiáng)度也有一定影響，見 下表與下圖。表6 pH值對(duì)苯甲酸體系熒光的影響V （緩沖溶液）FF0F07.76.3391.3610.514290.3851.621200.2130.569.71.5230.8142.8882255.2156.698.62.5255160.894.23257.4158.798.73.5258.7153.1105.64267.1171.495.75266.3168.597.8F-緩沖體積F-F0圖6 pH值對(duì)苯甲酸體系熒光的影響

21、由圖可以看出，當(dāng)緩沖溶液用量為2.5ml時(shí)，體系的AF值達(dá)到最大且保持 穩(wěn)定，故本文選擇pH=6.0的NaOH一鄰苯二甲酸氫鉀2.5ml緩沖溶液進(jìn)行進(jìn)一 步的研究。3.5 Fe3+用量的影響苯甲酸（2ml）+Vc工作液（1ml）+緩沖溶液（2ml）分別加入0.0、0.5、 1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mlFe3+溶液，定容測得熒光強(qiáng)度F，苯甲酸（2ml）+緩沖 溶液（2ml）分別加入 0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mlFe3+溶液，定容測得 熒光強(qiáng)度F0。表7氧化劑Fe3+用量對(duì)體系熒光強(qiáng)度的影響VFF0F02310528.61781.40.514685798

22、891658.4324.9333.51.5324.7141.2183.52134.782.9451.762.562.6444.3118.33318.622.67-4.07圖7氧化劑Fe3+用量對(duì)體系熒光強(qiáng)度的影響由圖可以看出，不添加鐵離子時(shí)，體系熒光增強(qiáng)數(shù)值游最大，所促熒光強(qiáng) 度更強(qiáng)一些，效果更佳。3.6加入順序的影響苯甲酸（BA）1.5ml，緩沖（bf）2.5ml，工作液 Vc（Vc）1.0ml試驗(yàn)了不同的加入順序?qū)w系的熒光強(qiáng)度的影響，結(jié)果見下表。表8不同加入順序?qū)w系熒光強(qiáng)度的影響順序XFF0F1.BA+VC+bf675.1240.14352.BA+bf+Vc713.9203.7510.

23、23.bf+BA+Vc594.5394200.54.bf+Vc+BA733188.2544.85.VC+BA+bf701.1185.5515.66.VC+bf+BA813.3179.2634.1圖8不同加入順序?qū)w系熒光強(qiáng)度的影響由圖8可以看出，試劑的加入順序?qū)υ擉w系的熒光強(qiáng)度有一定影響。本文選擇 按6的順序加入。即先加入Vc，然后是緩沖溶液，最后加入BA為最佳條件。3.7時(shí)間的影響取Vc工作液（1ml）+緩沖溶液（2.5ml）+苯甲酸（2ml）定容測得熒光強(qiáng) 度為F，取緩沖溶液（2ml）+苯甲酸（2ml）定容測得熒光強(qiáng)度為F0。表9反應(yīng)時(shí)間對(duì)體系熒光強(qiáng)度的影響t/minFF0F338393.

24、05289.955452.7105.3347.410579.6135.3444.315676.7154.6522.120748195.8552.225823.7212.761130852.7235617.735893251.3641.740911.3272.8638.545939.4292.7646.750954.2305.9648.355985312.2672.860999.4337.6661.8651028344.5683.5701034353.1680.9751055362.5692.5801058382.3675.7901078395.3682.7951073410.8662.2105

25、1121430.2690.8圖9反應(yīng)時(shí)間對(duì)體系熒光強(qiáng)度的影響由圖可以看出，反應(yīng)體系的熒光增強(qiáng)數(shù)值A(chǔ)F在35min達(dá)到最大，幾乎不受反 應(yīng)時(shí)間的影響，且至少在105分鐘內(nèi)AF基本保持不變，故本文要求在35分鐘以 后105分鐘內(nèi)完成測定。3.8溫度的影響取Vc工作液（1ml）+緩沖溶液（2.5ml）+苯甲酸（2ml）定容測得熒光強(qiáng) 度為F，取緩沖溶液（2ml）+苯甲酸（2ml）定容測得熒光強(qiáng)度為F0。分別放在25、30、35、40溫度下反應(yīng)三十分鐘測得熒光強(qiáng)度如下表表10反應(yīng)溫度對(duì)體系熒光強(qiáng)度的影響溫度253540501次F614.9488.81990998.21次F0303.5416.81320

26、992.5溫度253540502次F585.627773481657.62次F0306.324343412550.7由表中數(shù)據(jù)可以看出，在高溫條件下其熒光值，極其不穩(wěn)定，所以本文直接 在常溫條件下測定最佳。3.9苯甲酸用量的影響取Vc工作液（1ml） +緩沖溶液（2.5ml） +不同體積苯甲酸，定容，測得熒 光強(qiáng)度為F,取緩沖溶液（2ml）+不同體積苯甲酸，定容，測得熒光強(qiáng)度為F0苯甲酸的用量對(duì)體系的熒光AF程度有一定影響見下表下圖：表11苯甲酸用量對(duì)體系熒光強(qiáng)度的影響V （苯甲酸）FF0F0431.3436.6-5.30.5579.2178.8400.41613.5163.8449.71.5

27、722.6172.5550.12619.4158.6460.82.5594.1173.3420.83689.4168.8520.6F-V+ F-.-F0V圖10苯甲酸用量對(duì)體系熒光強(qiáng)度的影響由圖可以看出，當(dāng)苯甲酸（BA）溶液用量為1.5ml時(shí)，體系的AF值達(dá)到 穩(wěn)定，故本文選擇苯甲酸（BA）溶液加入量為1.5mL進(jìn)行進(jìn)一步的研究。3.10表面活性劑的影響取活性劑溶液(0.5ml)+Vc工作液(1ml) +緩沖溶液(2.5ml) +苯甲酸(1.5ml) 定容測得熒光強(qiáng)度為F，取活性劑溶液(0.5ml)+緩沖溶液(2ml)+苯甲酸(1.5ml) 定容測得熒光強(qiáng)度為F0。表12不同表面活性劑對(duì)體系熒

28、光強(qiáng)度的影響圖11不同表面活性劑對(duì)體系熒光強(qiáng)度的影響300310320330340nm活性劑FF0F3.0 x10-6 OP乳化劑濃度555.8215.3340.51.5x10-4聚山梨酯-80濃度440.3199241.3CTMAB570.5239331.5空白439.1189.7249.4圖12 OP乳化劑的發(fā)射光譜圖由圖可以看出，活性劑1與4相比較雖然AF較大，但是OP本身熒光值很 大高達(dá)1088，活性劑3雖然AF值比較大，但是其F0較大，活性劑2和4相比 無差別，所以我們選擇不添加任何表面活性劑。3.11共存離子干擾試驗(yàn)測定濃度為1. 0 x10-5g/mL的維生素C時(shí)較低濃度鈉離子、

29、鉀離子沒有干擾， 而鋁離子、鈣離子、鐵離子、鹵離子、漠離子、硫酸根離子在較低濃度對(duì)熒光強(qiáng) 度有猝滅強(qiáng)度。3.12工作曲線的制備準(zhǔn)確稱量Vc分析純0.0522g到100ml容量瓶配得儲(chǔ)備液，取2ml儲(chǔ)備液到 100ml容量瓶定容所得工作液濃度為1.044x10-5g/ml,取新配置的Vc工作液0.0ml、 0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml、3.5ml， 與 10ml 比色管中，再加緩 沖溶液（2.5ml）+苯甲酸（1.5ml）定容測得熒光強(qiáng)度為F，緩沖溶液（2ml）+ 苯甲酸（1.5ml）定容測得熒光強(qiáng)度為F0。V（H作液）FF0F0250.8250.800

30、.5412.8247.4165.41543.9240.5303.41.5718248.6469.42980.8246.9733.92.51268249.61018.431544252.41291.63.51880243.81636.2由上圖和表可見，加入維生素C后，體系的熒光強(qiáng)度有規(guī)律的明顯增強(qiáng)，線性關(guān)系良好。線性方程為：Y=464.14X109.96, R2=0.977（R=0.988）4.樣品測定結(jié)果研磨一片Vc藥片，在分析天平稱取0.0010g左右粉末配置到25ml容量瓶中， 下面是不同廠家藥片的測定結(jié)果：A.湖北華中藥業(yè)有限公司B.上海玉安藥業(yè)有限公司C.南京白敬宇制藥有限公司D.上海

31、信誼黃河制藥有限公司藥品稱量Vc 一粒藥片質(zhì)量理論藥片Vc含量Vc理論濃度g/mlA0.001080.06%3.2x10-5B0.001569.20%4.15x10-5C0.001867.29%4.85x10-5D0.001764.94%4.42x10-5分別取藥片溶液上清液（0.5ml）+緩沖溶液（2.5ml）+苯甲酸（1.5ml）比 色管中，測得熒光值結(jié)果如下表：ABF625.3701.6664819935998F0259.4259.4259.4259.4259.4259.4F1=F- f365.9442.2404.6559.6675.6738.6平均0404.2657.9CDF685.4

32、688672.8948982975F0259.4F1=F-f426259.4259.4259.4259.4259.4428.6413.4688.6722.6715.6平均0422.7708.9計(jì)算公式C一代 + l09.96)x 1.044 x 1。)-3I(g/ml)464.14 x 0.5藥品種類ABCD測量濃度g/ml :2.31x10-53.45x10-52.40 x10-53.68x10-5藥品規(guī)格濃度3.2x10-54.15x10-54.85x10-54.42x10-5測量濃度與規(guī)72.3%83.2%49.4%83.3%格濃度百分比5.結(jié)論以苯甲酸為促熒光強(qiáng)度試劑，采用分子熒光光度

33、法測定抗壞血酸，方法簡單， 空白對(duì)照干擾較少，其穩(wěn)定性、準(zhǔn)確度和精密度均令人滿意。注釋：論文中所用F1與4 F所代表的內(nèi)容相同，都是 F= FF0=F1參考文獻(xiàn)Levine M, Conry-Cantilena C, Wang Y, eta.l Vitam ine C pharma-cokinetics in healthy volunteers: evidence for a recommeded dietary al-lowanceJ.Anal Biochem, 1992, 204: 1-2.張麗萍，吳小春,吳友誼.國內(nèi)維生素C儀器定量分析進(jìn)展J.四川輕化工學(xué)院學(xué)報(bào)， 2002, 15(4): 33-35.趙興紅，郭新華.抗壞血酸的快速比色測定J.中國藥學(xué)雜志，1991,26(6): 357-358.彭文峰，Se