紅墨水染色法快速測(cè)定小麥生活力

1、一、紅墨水染色法快速測(cè)定小麥、玉米種子生活力的具體方法如下：選取玉米種子100粒、小麥種子200粒，在30C35C溫水中浸泡6小時(shí)8 小時(shí)，使種子充分吸脹。取吸脹的種子100粒，用刀片沿胚部中線切為兩半，其 中一半用于測(cè)定。將準(zhǔn)備好的半粒種子置于杯中，加入稀釋20倍的紅墨水溶液， 以浸沒種子為好。染色1520分鐘后撈出，用清水沖洗種子，洗去顏色。觀察沖 洗后種子胚部著色情況，胚部不著色或略帶淺紅色者，即為有生命力的種子。若 胚部染成與胚乳相同的深紅色，則為無生命力的種子。依次計(jì)算活種子百分率， 即為發(fā)芽率。小麥種子發(fā)芽率快速測(cè)定法1、浸種將小麥種子用28C30C的溫水浸泡35小時(shí)，讓種子充分吸

2、收水分膨脹。2、切取選擇具有代表性的種子，用刀片沿麥粒的腹溝切成兩半，留取帶有胚部的一半作測(cè)定之用。3、染色先配制好5%的紅墨水溶液（即將1份紅墨水加入19份清水中，混合均勻即成），然后將切 取的麥種半片均勻攤在培養(yǎng)器皿或瓷盤中，將紅墨水倒入（用量以浸沒種子為宜）。4、沖洗染色510分鐘以后，將種子取出，用清水反復(fù)沖洗數(shù)次，直到?jīng)_洗后的水不再見到紅色為 止。5、觀察種子的胚不著色或僅帶有淺紅色的，即為具有生命力的種子。如果胚部呈紅色，與胚乳著色的 程度不同，即表明該小麥種子已經(jīng)喪失了生命活力，觀察時(shí)將其揀出。6、計(jì)算數(shù)出具有生命力的種子數(shù)目，除以供測(cè)試種子的總數(shù)，即可得出該小麥種子的發(fā)芽率。如

3、果供測(cè)試的種子正好是100粒，那么具有生命活力的種子就是該小麥種的發(fā)芽率。種子發(fā)芽率快速測(cè)定法紅墨水染色法寶興縣明禮鄉(xiāng)朱范剛舒正蓉科技下鄉(xiāng)應(yīng)深入農(nóng)戶種子發(fā)芽率是指在最適宜的條件下，在 規(guī)定的天數(shù)內(nèi)，發(fā)芽的種子占供試種子的百分?jǐn)?shù)，它是決定種子品質(zhì)和實(shí)用價(jià)值大小的主要 依據(jù)，與播種時(shí)的用種量直接相關(guān)。但是常規(guī)發(fā)芽（直接發(fā)芽）方法測(cè)定發(fā)芽率所需時(shí)間較 長(zhǎng)，特別是有時(shí)為了應(yīng)急需要，沒有足夠的時(shí)間來測(cè)定發(fā)芽率，遇到休眠種子也無法知道。這里介紹紅墨水染色法卻能在較短時(shí)間內(nèi)獲 得結(jié)果。其原理是：凡生活細(xì)胞的原生質(zhì)膜具有選擇性吸收物質(zhì)的能力，而死的種胚細(xì)胞原 生質(zhì)膜喪失這種能力，于是染料便能進(jìn)入死細(xì)胞而染色，

4、活種胚細(xì)胞則不被染色。操作方法： 將待測(cè)種子在3035C溫水中浸種68小時(shí)左右，以增強(qiáng)種胚的呼吸強(qiáng)度，使顯色迅速。 染色。取已吸脹的種子20粒，用刀片沿種子胚的中心線縱切為兩半，將一半置于培養(yǎng)皿中， 加入5%紅墨水（以淹沒種子為度），染色1015分鐘，染色后倒去紅墨水，用水沖洗多 次，至沖洗液無色為止即可檢查種子的死活。凡種胚不著色或著色很淺的為活種子；凡種胚 與胚乳著色程度相同的為死種子。可將另一半種子用沸水殺死后作對(duì)照觀察。計(jì)數(shù)種胚不著 色或著色淺的種子數(shù)，就可算出發(fā)芽率。（鄧云彬）二、生活力的四唑測(cè)定2.1意義四唑測(cè)定的意義是迅速了解某些用普通發(fā)芽方法其發(fā)芽緩慢種子的生活力。便于休眠種

5、子檢驗(yàn)、種子收購和管理工作中的初步檢查以及種子變質(zhì)原因的診斷。即測(cè)定種子潛在的發(fā) 芽能力。2.2原理氯化或漠化三苯基四唑，經(jīng)過氫化作用，在活細(xì)胞中產(chǎn)生紅色穩(wěn)定的不擴(kuò)散物質(zhì)，即三 苯基甲？（triphenylformazan）。種子活細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的還原過程，在脫氫酶催化之下，氫從各 種呼吸物質(zhì)中脫離出來，遇到浸入的無色紅四氮唑溶液，則紅四氮唑與氫離子相結(jié)合，產(chǎn)生 紅色物質(zhì)。由此可以區(qū)別種子紅色的有生命部分和無色的無生命部分。除完全染色的有生命 活力的種子及完全不染色的無生活力種子外，一些不同部分染上紅色，是存在不同大小的壞 死組織。種子生活力的有無，不是決定于顏色的深淺，而是決定于胚和胚乳的壞死組

6、織所在 部位和蔓延情況。2.3 一般說明2.3.1試劑準(zhǔn)備四唑溶液：采用2, 3, 5-三苯四唑氯化物（TTC），通常配成1%水溶液（pH6.5 7.0）保存。如果水的酸堿度不在中性范圍內(nèi)，則四唑鹽應(yīng)溶解在磷酸鹽緩沖液中。其緩沖 液的配制如下：溶液A在1000毫升水中溶解9.078克KH2PO4，溶液B在1000毫升水中溶解 11.876 克Na2PO4，取溶液A400毫升和溶液B600毫升混合在一起。將10克四唑鹽溶解于按上法 混合的1000毫升緩沖液中，即得到pH7.0的1.0%四唑溶液。須將配好的溶液貯存在黑暗處或棕色瓶里，以免照光而變質(zhì)。這種溶液可在室溫里保存 幾個(gè)月，但每次用過后即作

7、廢。乳酸苯酚溶液為辨清某些牧草種子如早熟禾、貓尾草、小糠草等的生活力，經(jīng)四唑處理后，用23 滴乳酸苯酚液浸泡，能使稃殼變?yōu)橥该?，易看清胚的染色部分。其配制方法?0份乳酸、 20份苯酚、40份甘油和20份水。應(yīng)注意不能接觸與吸入，因乳酸苯酚有毒。并保持通風(fēng)， 以降低其空氣中的濃度。2.3.2程序測(cè)定種子準(zhǔn)備。每次測(cè)定應(yīng)不少于200粒種子。一般種子在水中浸310小時(shí)，使 組織稍變?nèi)彳?。根?jù)不同種子特點(diǎn)進(jìn)行縱切或橫切以及刺破種皮的準(zhǔn)備。b .染色。準(zhǔn)備好的種子，放在小玻璃容器里染色。各類種子染色所需的時(shí)間要根據(jù)種 子的具體情況以及四唑溶液濃度和溫度而變化。鑒定。種子染色結(jié)束后立即進(jìn)行鑒定。小粒種子

8、須放在立體顯微鏡下檢查。紫花苜蓿、 三葉草可用乳酸苯酚液洗凈，不必剝?nèi)シN皮，放透射光下檢查。一般胚的構(gòu)造發(fā)育良好，未 受損傷，并染成正常紅色者應(yīng)作為有生活力的種子（見圖1、2）。2.4牧草種子四唑測(cè)定方法根據(jù)種子四唑測(cè)定的程序，按不同種類牧草將準(zhǔn)備方法、溶液濃度、染色時(shí)間列于表 6.4.A。2.5結(jié)果的計(jì)算和報(bào)告測(cè)定種子生活力的百分率根據(jù)4個(gè)重復(fù)計(jì)算。重復(fù)間最大容許差距與發(fā)芽試驗(yàn)的規(guī)定 相同，平均百分率計(jì)算到最接近的整數(shù)。四唑測(cè)定報(bào)告：有生活力種子.；空殼.， 帶有幼蟲的.，破裂或腐爛.。5、發(fā)芽試驗(yàn)5.1目的發(fā)芽試驗(yàn)的最終目的是獲得關(guān)于種子在草地建設(shè)中種的利用價(jià)值，并提供試驗(yàn)結(jié)果，以 比較不

9、同種子“批”的用價(jià)。利用實(shí)驗(yàn)室方法檢驗(yàn)，在能控制部分或全部外界條件的情況下，使各類種子樣品，大多 數(shù)可以獲得最整齊而迅速的發(fā)芽。這些控制條件應(yīng)逐步達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)化，使試驗(yàn)結(jié)果盡可能接近。5.2定義在鑒定實(shí)驗(yàn)室發(fā)芽試驗(yàn)所產(chǎn)生的幼苗其主要構(gòu)造的發(fā)育階段必須達(dá)到能夠查出某些不 正常的沒有實(shí)用價(jià)值的幼苗。在檢驗(yàn)證書上填報(bào)的發(fā)芽百分率是指規(guī)定條件下和時(shí)間內(nèi)，產(chǎn) 生了正常幼苗的種子比例。5.2.1正常幼苗在計(jì)算發(fā)芽百分率時(shí)，必須將正常幼苗與不正常幼苗分開。為了使鑒定正常幼苗具有一 致性，正常幼苗必須符合下列規(guī)定之一。一個(gè)發(fā)育良好的根系，包括一條初生根，其主根長(zhǎng)于種子。一個(gè)發(fā)育良好的下胚軸，其輸導(dǎo)組織未受損傷的。

10、一個(gè)完整的胚芽，具有一張發(fā)育良好的葉片，或一個(gè)具有正常胚芽的上胚軸。單子葉植物幼苗具有一片子葉，雙子葉植物具有兩片子葉。5.2.2不正常幼苗是指生長(zhǎng)在良好土壤及適宜的水分供應(yīng)、溫度和光線條件下，表現(xiàn)不能繼續(xù)發(fā)育為不正 常植株的幼苗。具有下列缺陷之一者：損傷的幼苗：幼苗沒有子葉；幼苗帶有皺縮、裂縫、破裂或損傷而影響上胚軸、下胚 軸與根的輸導(dǎo)組織。幼苗沒有初生根?；蔚挠酌纾河酌缂?xì)弱、發(fā)育不平衡；發(fā)育停滯的胚芽、下胚軸或上胚軸；腫脹的幼 芽及發(fā)育停滯的根；子葉出現(xiàn)后沒有進(jìn)一步發(fā)育的幼苗。*的幼苗.：幼苗的某種主要構(gòu)造染病或*嚴(yán)重，以至阻礙幼苗的正常發(fā)育。子葉從珠孔發(fā)育出來或胚根從珠孔以外的其他部分

11、發(fā)育的幼苗。5.2.3硬實(shí)豆科牧草種子，由于它們有一層不透水的種皮不能吸水，到規(guī)定的試驗(yàn)日期結(jié)束時(shí)，仍 是堅(jiān)硬的，這類種子列為硬實(shí)。硬實(shí)百分率應(yīng)與發(fā)芽百分率分開填報(bào)在檢驗(yàn)證書上。5.2.4新鮮的未發(fā)芽種子除硬實(shí)外，種子經(jīng)適當(dāng)?shù)钠瞥菝咛幚砗笕员３衷瓲?，而外表看來有生活力的，?yīng)列入 新鮮的未發(fā)芽種子，必須與發(fā)芽百分率分開填報(bào)。灌木植物在常規(guī)發(fā)芽試驗(yàn)?zāi)┢?，具有活?的新鮮未發(fā)芽種子，可用四唑測(cè)定其活動(dòng)力。5.3 一般原則所有發(fā)芽試驗(yàn)都要從凈種子分出來的種子進(jìn)行。凈種子應(yīng)充分混和，從中隨機(jī)數(shù)取400 粒種子，使成為100粒、50?；?5粒的重復(fù)。種子應(yīng)均勻的放在發(fā)芽床上，并有足夠的 距離，盡可能防止

12、種苗在計(jì)數(shù)和取出前相互接觸。在表5.A所規(guī)定的各個(gè)種的發(fā)芽床類型、 溫度及對(duì)光的要求，可在指定的方法中任選一種。5.4材料和條件5.4.1紙床紙上：種子放在一層或多層紙上發(fā)芽。紙放在（1）玻璃 培養(yǎng)皿里，（2）光照發(fā)芽器（Jacobson apparatus）內(nèi)，（3）直接放在發(fā)芽箱或發(fā)芽室內(nèi)的發(fā)芽盤上。第2）法的每一重復(fù)蓋有一 個(gè)鐘罩，它的頂上有一小孔以便通氣。用一條燈芯，其下端放在水中，以便將水吸收到紙上。 第（3）法的發(fā)芽箱或發(fā)芽室必須保持相對(duì)濕度為90%95%。經(jīng)過濕潤(rùn)的疏松紙或脫脂棉 可用來墊在紙底下，亦可直接作為發(fā)芽床。紙間：種子放在兩層紙中間發(fā)芽。紙層可（1）直接放在發(fā)芽箱或發(fā)芽

13、室內(nèi)的發(fā)芽盤上， 或（2）放在金屬、塑料玻璃盒內(nèi)。方法（1）的發(fā)芽箱或發(fā)芽室內(nèi)必須保持相對(duì)濕度達(dá)90% 95%。紙可以折好或卷好，平放或豎放。金屬的、玻璃的或塑料的框架可插入紙間以保持 通氣。經(jīng)濕潤(rùn)的疏松紙或脫脂棉可作紙的襯底或直接作為發(fā)芽床（規(guī)定用光照的，只能用紙 上法）。砂砂用于表5.A所規(guī)定的下列方法的發(fā)芽床：砂中：種子播在一層均勻的濕沙上，然后加蓋12厘米深松散的砂。砂上：種子壓入砂的表面。用砂做發(fā)芽床在必要時(shí)，必須預(yù)先洗滌消毒，以殺滅各種細(xì)菌、真菌、抱子、線蟲癭及 混入的其他種子。砂粒不應(yīng)過大過小。幾乎全部的砂粒應(yīng)通過篩孔直徑0.8毫米的篩子，而 留在篩孔直徑為0.5毫米的篩子上。p

14、H值應(yīng)在6.07.5范圍內(nèi)。土壤土壤或人造堆肥（相當(dāng)于營(yíng)養(yǎng)土）可用以代替砂中及砂上兩法中的砂，不過一般更難于 標(biāo)準(zhǔn)化，所以容易造成結(jié)果之間的更大差異。但對(duì)鑒定的幼苗發(fā)生懷疑時(shí)，以及某些樣品在 紙上或砂上發(fā)芽而所產(chǎn)生的幼苗表現(xiàn)生物中毒癥狀時(shí)，必須用這種發(fā)芽床加以證實(shí)。土壤中加水，應(yīng)該使土壤達(dá)一定粘度，使其在手掌中能捏擠成團(tuán)，而放在兩指間一壓時(shí)， 容易散開。5.4.4水分和通氣在全部發(fā)芽過程中，發(fā)芽床必須含有足夠水分，以滿足發(fā)芽需要，但水分不宜過多。發(fā) 芽床不應(yīng)濕到有一層水膜圍繞著種子。在建議用低水分時(shí)，濕的發(fā)芽床須壓上一種能吸水 的干物品，如干的擦臉紙或吸水紙，以除去過多的水。在種子四周的空氣相

15、對(duì)濕度，應(yīng)保持 在90%95%，以防止蒸發(fā)散失。水應(yīng)相當(dāng)?shù)夭缓釅A有機(jī)物質(zhì)或其他雜質(zhì)。有時(shí)需要應(yīng)用0.2%的硝酸鉀（KNO3）或 應(yīng)用0.2%的雙氧水處理24小時(shí)以打破休眠。如用蒸餾水，必須通氣增加氧的含量。5.4.5溫度表5.A中所規(guī)定的溫度，應(yīng)在和發(fā)芽床上種子相同的水平進(jìn)行測(cè)定，發(fā)芽箱或發(fā)芽室的 溫度必須盡可能均勻一致。在日光直射或在人造光源下試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)注意溫度不超過規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。 規(guī)定的溫度應(yīng)作為最高限度，儀器的溫度變幅，在24小時(shí)內(nèi)應(yīng)不超過1C。當(dāng)規(guī)定用變溫時(shí)，應(yīng)保持低溫16小時(shí)及高溫8小時(shí)。非休眠的種子，在3小時(shí)內(nèi)逐漸 變溫，一般就可以。但有的種子可能是休眠的，應(yīng)該在1小時(shí)以內(nèi)完成急劇變

16、溫，或?qū)⒃?驗(yàn)移到另一溫度較低的發(fā)芽箱中。如因特殊情況不能控制變溫時(shí)，則應(yīng)將試驗(yàn)保持在低溫條 件下。5.4.6 光表5.A所規(guī)定的光（L），可由自然或人工光源供給；但必須注意保證在整個(gè)試驗(yàn)面上 都有均勻的光照強(qiáng)度，而光源所放出的熱量不致影響規(guī)定的溫度。5.5程序5.5.1幼苗鑒定對(duì)幼苗要作出正確鑒定，只能當(dāng)幼苗已經(jīng)發(fā)育到能夠確定它們是否具有主要構(gòu)造階段。5.5.2試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間試驗(yàn)時(shí)間是按規(guī)定的最后計(jì)數(shù)時(shí)間（表5.A）而定，但試驗(yàn)前或試驗(yàn)進(jìn)行中為了打破休 眠需要的冷凍時(shí)間不包括在內(nèi)。在規(guī)定試驗(yàn)時(shí)間之末，有幾顆種子剛開始發(fā)芽，則試驗(yàn)時(shí)期 可再延長(zhǎng)7天。第一次計(jì)數(shù)的時(shí)間只要求大約接近，允許有13天的

17、偏差。但中間計(jì)數(shù)的次數(shù)應(yīng)降到 最低限度，以減少未充分發(fā)育的幼苗遭受損傷的危險(xiǎn)。當(dāng)一個(gè)樣品含有感染真菌或細(xì)菌的種子時(shí)，在試驗(yàn)規(guī)定時(shí)期內(nèi)，必須經(jīng)常間隔一定時(shí)間， 將幼苗取出并計(jì)數(shù)。明顯死亡和腐爛的種子，可能是健康幼苗染病的根源，應(yīng)在每次計(jì)數(shù)時(shí) 取出，并記錄其數(shù)目。5.5.3復(fù)粒種子無芒虎尾草（Chloris gayana）、鴨茅（Dactylis glomerata）、早熟禾屬（Poa）的復(fù)小 花，應(yīng)作為單粒種子進(jìn)行試驗(yàn)。要確定幼苗從那一顆復(fù)粒種子長(zhǎng)出來，可用兩種方法：在它 們分開前計(jì)數(shù)，并取出或試驗(yàn)時(shí)設(shè)法將復(fù)粒種子隔開。試驗(yàn)結(jié)果所表明的為至少長(zhǎng)出一個(gè)正 常幼苗的復(fù)粒種子的百分率。從100粒種子產(chǎn)

18、生的幼苗平均數(shù)，亦可由檢驗(yàn)站酌情進(jìn)行填 報(bào)。5.5.4發(fā)芽率的計(jì)算當(dāng)每個(gè)試驗(yàn)中的4次重復(fù)（每重復(fù)測(cè)100粒種子）結(jié)果都在最大容許誤差的范圍之內(nèi)， 其平均值即代表發(fā)芽百分率。為了求得最大容許差距，首先確定試驗(yàn)重復(fù)的平均發(fā)芽百分率， 如有必要，將發(fā)芽器中最靠近的50?；?5粒種子的重復(fù)合并成為100粒種子的重復(fù)。平 均百分率計(jì)算到最接近的整數(shù)。將其平均發(fā)芽百分率填報(bào)在證書上。當(dāng)試驗(yàn)結(jié)果具有下列情況，不可填報(bào)，而應(yīng)用同樣方法或另一方法進(jìn)行第二次試驗(yàn)。100粒種子發(fā)芽率各重復(fù)的差距超過表5.B的最大容許差距。試驗(yàn)條件不適當(dāng)，幼苗鑒定有差錯(cuò)或因休眠、生物中毒、真菌或細(xì)菌的傳布而使結(jié)果 不準(zhǔn)確。第二次試驗(yàn)

19、（也可以同時(shí)做）的結(jié)果如果和第一次試驗(yàn)符合的，則用二次試驗(yàn)的平均數(shù) 代表發(fā)芽率，填入檢驗(yàn)證書上。為了判斷二次試驗(yàn)是否符合，可計(jì)算兩次試驗(yàn)平均數(shù)，并在 表5.C第1欄或第2欄查出平均數(shù)。如兩次相差不超過3欄的容許差距，則試驗(yàn)是符合的。 超過容許差距，則至少再做一次試驗(yàn)。5.6結(jié)果報(bào)告當(dāng)發(fā)芽試驗(yàn)結(jié)果填報(bào)在檢驗(yàn)證書上時(shí)，除正常幼苗百分率、硬實(shí)百分率、不正常幼苗百分 率、死種子百分率等欄，都應(yīng)填寫，若沒有情況則將符號(hào)“一。填入該位置，不可空白。5.7休眠種子特殊處理5.7.1預(yù)先冷凍進(jìn)行發(fā)芽的各重復(fù)在移到規(guī)定的溫度以前，先放在濕潤(rùn)的發(fā)芽床上，開始時(shí)保持低溫。 開始7天保持35C或510C，因品種而異。

20、預(yù)先冷凍不包括在發(fā)芽試驗(yàn)的時(shí)期內(nèi)。5.7.2預(yù)先干燥進(jìn)行發(fā)芽的各重復(fù)在放入規(guī)定發(fā)芽條件以前，先在不超過40C的溫度和空氣暢通情況 下加熱7天。有時(shí)，可能需要延長(zhǎng)預(yù)先干燥的時(shí)間。干燥的時(shí)間及溫度應(yīng)在證書上填報(bào)。5.7.3硝酸鉀發(fā)芽床可用0.2%的硝酸鉀溶液濕潤(rùn)。將硝酸鉀2克溶解在1000毫升水內(nèi)配制。在試 驗(yàn)開始時(shí)，用溶液浸透發(fā)芽床，但以后用水濕潤(rùn)。應(yīng)用此法處理，須在檢驗(yàn)書上注明。5.7.4雙氧水用0.2%雙氧水處理24小時(shí)。一般種子放在小玻璃容器內(nèi)，加雙氧水液浸泡，要配加 合適的蓋子，處理以后的種子放在發(fā)芽床上。5.7.5低溫發(fā)芽發(fā)芽試驗(yàn)除表5.A4欄所規(guī)定外，可在較低的恒溫下或在高低溫交替的

21、條件下進(jìn)行。發(fā) 芽可能較慢，因此試驗(yàn)時(shí)期可以延長(zhǎng)。溫度及試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間均應(yīng)在證書上填報(bào)。5.7.6預(yù)先洗滌發(fā)芽試驗(yàn)以前，為除去種子中的某些抑制物質(zhì)，可將種子置于水中浸漬及洗滌除去該物 質(zhì)。處理持續(xù)時(shí)間及控制水溫均須在證書上填報(bào)。5.8發(fā)芽器具5.8.1光照發(fā)芽器一個(gè)鋅制的水槽，上面配制有圓孔或長(zhǎng)孔的玻璃或不銹鋼的金屬板，在孔上放置適宜的 發(fā)芽床（最好用濾紙），并用燈芯連接發(fā)芽床，通過小孔，伸入水槽，以保持發(fā)芽床濕潤(rùn)。 每個(gè)發(fā)芽床上蓋一個(gè)密縫的鐘形罩，罩的頂部有一孔，可以通氣，但不會(huì)有過份的蒸發(fā)。整 個(gè)發(fā)芽床放在直射或漫射光下。槽里的不用電力加熱，溫度用溫度調(diào)節(jié)器控制。5.8.2發(fā)芽箱通常由絕緣的

22、雙層壁的小室構(gòu)成，有電熱加溫和冷卻兩種設(shè)備，并且小室可由空氣或一 層絕緣物質(zhì)隔熱以防止箱內(nèi)溫度的變化。箱內(nèi)裝備著合適的可抽動(dòng)的淺盤，以便于放置各實(shí) 驗(yàn)室所選用的發(fā)芽盤。箱底的空氣或儲(chǔ)水器都可以加溫。這種發(fā)芽箱內(nèi)的溫度可以任意調(diào)節(jié)， 約在840C之間，箱內(nèi)空氣必須保持飽和濕度的90%95%，以避免發(fā)芽床變干燥。發(fā)芽箱有很多改制的型式，例如一種玻璃壁的日光照發(fā)芽器，是專門為對(duì)光敏感的種子 設(shè)計(jì)的。5.8.3發(fā)芽室其構(gòu)造原理與發(fā)芽箱相同，但容積擴(kuò)大，工作人員可以進(jìn)入內(nèi)部，并可將試驗(yàn)放到中心 走道的兩邊。通常需要風(fēng)扇，以防止溫度分成層次。同時(shí)還要有特別設(shè)備以保持較高的相對(duì) 濕度。5.8.4數(shù)粒設(shè)備數(shù)種

23、板：面積接近于放置種子的發(fā)芽床的大小。上層有一層固定的板，板上有50或 100個(gè)孔，孔的一般形狀和大小與所計(jì)數(shù)的種子相近似。板的下層襯有一塊薄板，無孔，作 為假底，可以來回抽動(dòng)。操作時(shí)，數(shù)種板放在發(fā)芽床上，把種子撒布在板上，并將板稍微傾 斜，除去多余的種子。然后進(jìn)行核對(duì)，當(dāng)所有孔裝滿了種子而每孔只有一粒種子時(shí)，抽去可 以移動(dòng)的板，種子就在適當(dāng)?shù)奈恢寐涞桨l(fā)芽床上。真空數(shù)粒器：包括三個(gè)部分真空系統(tǒng)，包括皮管；數(shù)種盤或數(shù)種頭；活門。若數(shù)大粒種子，則實(shí)驗(yàn)室需專設(shè)一個(gè)系統(tǒng)；其數(shù)種頭連接處能支持50到70厘米水銀 柱，每秒鐘抽出500到700升游離空氣；而對(duì)紫花苜蓿每秒鐘抽出225到450升的空氣， 即可

24、。真空數(shù)種器可以直接操作(即當(dāng)真空抽氣機(jī)開動(dòng)時(shí)，數(shù)種頭即產(chǎn)生真空)，有的是自動(dòng) 的(即在數(shù)種頭與抽氣機(jī)之間有一種箱，在箱內(nèi)的真空自動(dòng)控制抽氣機(jī)的運(yùn)轉(zhuǎn))。5.9紙床說明一般用吸水紙、濾紙或紙巾。應(yīng)是表面多細(xì)孔的結(jié)構(gòu)，無真菌和細(xì)菌的沾染。紙應(yīng)為白 色或用一種對(duì)發(fā)芽幼苗無毒的染料染色。紙的質(zhì)地應(yīng)使發(fā)芽幼苗的根生長(zhǎng)在紙上而不是伸入 紙中。發(fā)芽床在潮濕時(shí)的總厚度應(yīng)不少于約2毫米。2 .四唑染色目的 其目的是通過染色反應(yīng)，能將胚和活的營(yíng)養(yǎng)組織里的健壯、衰弱和死亡部分的差 異正確地顯現(xiàn)出來，以便進(jìn)行確切的鑒別，可靠地判斷種子生活力和活力。染色程序按要求，將經(jīng)過樣品準(zhǔn)備或不須準(zhǔn)備的規(guī)定數(shù)量種子分別放入四唑溶液

25、里染 色。小粒種子可用6cm培養(yǎng)皿，大、中粒種子可用9cm培養(yǎng)皿或更大的容器。特別細(xì)小的 種子可包在濾紙內(nèi)，分別放入容器里，然后加入適宜濃度的四唑溶液，以淹沒種子為度，移 置一定溫度的黑暗恒溫箱內(nèi)或弱光下進(jìn)行染色反應(yīng)。因?yàn)楣饩€可能使四唑鹽類還原而降低其 濃度，影響染色效果。染色的溫度和時(shí)間染色時(shí)間因種子種類、樣品準(zhǔn)備方法、本身生活力的強(qiáng)弱、四唑溶 液濃度、pH和溫度等因素的不同而有差異。其中特別是溫度影響為最大。染色時(shí)間可按需 要在2045C度范圍內(nèi)加以適當(dāng)選擇。在這種溫度范圍內(nèi)，溫度每增加5C，其染色時(shí)間可 減少一半。例如，要求在30C下適宜染色時(shí)間為6h的種子樣品，移到35C下則只需染色反

26、 應(yīng)3h，在40C下僅需1. 5h。另一方面，種子的健壯、衰弱和死亡不同等級(jí)的組織，其染 色的快慢也是不同的。一般來說，衰弱組織四唑溶液滲入較快，染色也較快；健壯組織酶的 活性強(qiáng)，染色明顯。為了使這些不同等級(jí)的組織均能達(dá)到良好的染色程度，以便于鑒別。有 時(shí)可根據(jù)樣品的實(shí)際情況，適當(dāng)調(diào)整染色時(shí)間，即縮短或延長(zhǎng)。如果已到規(guī)定染色時(shí)間，但樣品的染色仍不夠充分，這時(shí)可適當(dāng)延長(zhǎng)染色時(shí)間，以便證實(shí) 染色不夠充分是由于四唑溶液滲入緩慢所引起，還是由于種子本身的缺陷所引起的。但必須 注意，染色溫度過高或染色時(shí)間過長(zhǎng)，也會(huì)引起種子組織的變質(zhì)，而可能掩蓋住由于遭受凍 害、熱傷和本身衰弱而呈現(xiàn)不同顏色或異常的情況。

27、有些種子要求在各重復(fù)中加入微量的殺菌劑或抗生素，以避免在染色過程產(chǎn)生帶有黑色沉 淀物的多泡沫溶液。鑒定前處理 為了確保鑒定結(jié)果的正確性，還應(yīng)將已染色的種子樣品，加以適當(dāng)?shù)奶幚恚?再進(jìn)一步使胚的主要構(gòu)造和活的營(yíng)養(yǎng)組織明顯地暴露出來，以便觀察鑒定和計(jì)算，這里將目 前國(guó)際上采用和有效的處理方法介紹如下。不須處理，直接觀察適用于染色前已進(jìn)行樣品準(zhǔn)備的整個(gè)胚、摘出的胚中軸、縱切或 橫切的胚等樣品。因?yàn)檫@些種子胚的主要構(gòu)造已暴露在外面，所以不須附加處理，就可直接 觀察鑒定。輕壓出胚，觀察鑒定 適用于樣品準(zhǔn)備時(shí)僅切去種子的一部分，胚的大部分仍留在營(yíng)養(yǎng) 組織內(nèi)的樣品。在鑒定前須用解剖針在種子上稍加壓力，使胚向

28、切口滑出，以便觀察。扯開營(yíng)養(yǎng)組織，暴露出胚適用于染色前樣品準(zhǔn)備時(shí)僅撕去種皮或僅切去部分營(yíng)養(yǎng)組織 的樣品。如冷杉等種子。其方法是扯去遮蓋住胚的營(yíng)養(yǎng)組織或弄掉切口表面的營(yíng)養(yǎng)組織，使 胚的主要構(gòu)造完全暴露出來，以便鑒定。切去一層營(yíng)養(yǎng)組織，暴露出胚和活營(yíng)養(yǎng)組織 適用于樣品準(zhǔn)備時(shí)，僅切去或切開種子上 半粒或基部的種子樣品。因?yàn)檫@些種子的胚仍被營(yíng)養(yǎng)組織所包圍，所以需在適當(dāng)?shù)奈恢们腥?一層適宜厚度的營(yíng)養(yǎng)組織，才能看清胚和活營(yíng)養(yǎng)染色情況。沿胚中軸縱切，暴露出胚的構(gòu)造 這種方法適用于樣品未準(zhǔn)備的種子。如有些豆類種子。沿種子中線縱切，暴露出胚和活營(yíng)養(yǎng)組織這種方法適用于樣品準(zhǔn)備時(shí)，僅除去種子外 面構(gòu)造，或僅切去基部

29、的種子。如五加科等種子。剝?nèi)グ胪该鞯姆N皮或種子組織，暴露出胚 這種方法適用于四唑染色前樣品未加準(zhǔn)備或 僅切去基部的種子。如大豆、豌豆等種子。切去切面碎片或掰開子葉，暴露出胚這種處理主要適用于切得不好或有些豆科雙子葉 種子。如鑒定前發(fā)現(xiàn)胚中軸被若干切面碎片所遮蓋，以致難以正確鑒定，則需切去一層子葉， 或者為了可靠觀察子葉之間胚中軸的染色情況，則需掰開子葉。剝?nèi)シN皮和殘余營(yíng)養(yǎng)組織，暴露出胚這種處理適用于在樣品準(zhǔn)備時(shí)僅切去種子一部分 的樣品。如紅花種子在樣品準(zhǔn)備時(shí)，僅切去種子的上部，仍有種皮和殘余營(yíng)養(yǎng)組織包著胚， 因此，只有除去這些部分，才能暴露出胚的主要構(gòu)造。乳酸苯酚透明液的應(yīng)用在四唑染色反應(yīng)達(dá)到

30、適宜時(shí)間后，小粒種子用載玻片擋住培 養(yǎng)皿口的一邊，留下一條狹縫，讓其只能瀝出四唑溶液，注意不能溜出種子。萬一不小心， 跑出幾粒種子，則可用小吸管吸回種子。對(duì)更細(xì)小的種子(如小糠草)等，則可用管口比這種 種子小的吸管吸去四唑溶液，這樣就不會(huì)吸進(jìn)種子而僅吸去溶液。然后用厚型吸水紙片吸干 殘余的溶液，并把種子集中在培養(yǎng)皿中心凹陷處為一堆，再加入24滴乳酸苯酚透明液， 適當(dāng)搖晃，使其與種子良好接觸，馬上移人38恒溫箱保持3060min，經(jīng)清水漂洗或直 接觀察。這種有效的透明程序可使果種皮、稃殼或胚乳變?yōu)橥该鳎瑒t可清楚地鑒定胚的主要 構(gòu)造的染色情況。觀察鑒定 四唑測(cè)定樣品經(jīng)染色和樣品處理后，進(jìn)行正確的觀

31、察鑒定是十分重要的。測(cè) 定結(jié)果的可靠性取決于檢驗(yàn)人員對(duì)染色組織和部位的正確識(shí)別、工作經(jīng)驗(yàn)和判斷能力等綜合 運(yùn)用能力。為了避免判斷的錯(cuò)誤，檢驗(yàn)人員應(yīng)按鑒定標(biāo)準(zhǔn)，認(rèn)真觀察，以高度的責(zé)任感，確 保鑒定結(jié)果的正確性。目的 觀察鑒定主要著眼于以下三個(gè)目的：確切計(jì)算種子在適宜條件下(包括在殺菌劑處理有效的情況下)能產(chǎn)生正常幼苗的能力， 即種子生活力百分率。按種子樣品染色程度和組織特征，判斷其強(qiáng)壯程度，將種子分為強(qiáng)或弱23個(gè)等級(jí)， 以便統(tǒng)計(jì)種子活力。按局部解剖染色圖形，觀察染色部位，查明種子劣變和生活力喪失的原因，為種子生理、 種子加工、種子貯藏和種子處理提供指導(dǎo)情報(bào)。鑒定因素每個(gè)染色樣品的鑒定應(yīng)根據(jù)種子染

32、成的顏色、組織狀態(tài)，有無腫脹、破裂、 蟲傷、衰弱模糊，以及其他異常情況等鑒定因素作出正確的判斷。同時(shí)，還應(yīng)考慮其胚的主 要構(gòu)造機(jī)能與其他部分之間的關(guān)系，即與營(yíng)養(yǎng)組織的損傷面積指不染色的面積)、位置和程 度的關(guān)系。因?yàn)檫@些部分對(duì)胚發(fā)育成正常幼苗也是不可缺少的。同時(shí)，還要注意觀察種子的健壯水平。這種水平是以染成的顏色、膨脹程度和軟腐等狀態(tài) 顯現(xiàn)出來的。據(jù)此，可將種子分為健壯、活的衰弱組織、死的衰弱組織和死亡等4個(gè)等級(jí)水 平。胚的組織特征種子胚組織特征在種子種類之間、預(yù)濕溫度和時(shí)間等因素的不同而可能 有所變化。為了便于正確判別，這里將不同健壯水平的組織特征分述如下。健壯組織。一般情況，這種組織表現(xiàn)為

33、在暴露的表面顏色正常、均勻一致，無明顯的分 界、色澤鮮紅且有光澤，并且組織狀態(tài)正常。其濕潤(rùn)的染色組織通常具有高度的膨脹性和彈 性。當(dāng)用解剖針稍壓時(shí)，表面不會(huì)留下壓痕。當(dāng)用針挑出胚根或其他構(gòu)造時(shí)，表現(xiàn)出一定的 硬性，并在干燥失水后仍具有均勻一致的收縮特性，保持著正常的色澤。衰弱的活組織。這是指已有不同程度劣變的活組織。其劣變程度可從幾乎接近健壯到已 經(jīng)衰老而活著的不同衰弱程度。但其染色程度和組織特征是隨著劣變的加深和范圍大小而呈 現(xiàn)出一定的差異。其顏色的異常情況也隨著種子劣變程度的增加而加深。如玉米和小麥的胚 染色組織，其衰弱活組織切面的顏色要比正常組織略深，呈灰暗紅色，并隨著暴露時(shí)間的增 加而

34、變深。特別要注意，子葉、胚芽鞘和胚根的尖端的劣變癥狀要比其他部分出現(xiàn)得早。如子葉尖端 呈現(xiàn)膨脹紋條或斑點(diǎn)。胚芽鞘和胚根尖端染的顏色很淺或不染色，這就表明這些部分的組織 已經(jīng)劣變或損傷。當(dāng)讓這些部分氣干時(shí)，較為容易收縮，并且其顏色也變?yōu)樯罴t。衰弱的死組織。這是指已嚴(yán)重劣變而仍有染色的死組織。有時(shí)這種組織往往被健壯或衰 弱的活組織所包圍或埋藏著，只有切開時(shí)，才能觀察得到。這種組織顏色雜有斑點(diǎn)，或呈淡 紫色、淡棕色、暗紅色等不同的變化。當(dāng)切開胚軸時(shí)，其切面已呈現(xiàn)出異常的白色。若再刮 去表面的白色層，其下層則為暗紅色，并且組織已變?yōu)楹隣?，無膨脹力，切面呈軟腐狀態(tài)， 并帶有污點(diǎn)。當(dāng)讓其氣干時(shí)，則很快收縮

35、。不染色的死組織。通常死組織是染成很淺而無光澤的紅色或灰白色，并且組織軟腐、模 糊，與活組織有明顯的分界。但應(yīng)注意，當(dāng)延長(zhǎng)染色時(shí)間時(shí)，其顏色可能會(huì)變深，因此絕對(duì) 不能錯(cuò)誤地將其當(dāng)作活組織。不同組織的區(qū)分。正確區(qū)分健壯、衰弱活組織、衰弱死組織和死亡組織對(duì)取得可靠的測(cè) 定結(jié)果是十分重要的。這些組織的差異可從顏色、組織狀態(tài)和分界等特征加以區(qū)別。從染成 的顏色看，健壯組織是染成有光澤的鮮紅色，有光澤的淡紅色或有光澤的淡黃白色，衰弱的 活組織通常染成稍深的紅色，并隨著劣變程度的加深，其顏色也隨之變化。先在子葉和胚根 鞘出現(xiàn)不染色或異常的顏色。衰弱死組織則染成淡紫色、淡紅棕色、灰紅色，并往往帶有斑 點(diǎn)。其

36、顏色可從黑色到灰紅色等不同等級(jí)的變化。死組織則不染色，或略帶淡紅色、灰白色， 并且無光澤。從組織狀態(tài)看，健壯組織具有彈性和膨脹感。死組織則缺乏彈性和膨脹感，而且呈軟腐和 糊狀狀態(tài)。當(dāng)然也應(yīng)注意，有些禾本科大粒種子的活組織有時(shí)也表現(xiàn)軟腐和糊狀狀態(tài)。這可 能是由于切開技術(shù)不當(dāng)或暴露在空氣后引起的不良反應(yīng)，但只要葉表面有明顯的葉脈，仍應(yīng) 當(dāng)作活組織。再從染成顏色的分界線看，健壯組織與衰弱活組織之間沒有明顯的分界線，但它們與衰弱 死組織之間有明顯的分界線。當(dāng)切開組織時(shí)，就能看到其內(nèi)部的正確分界線。觀察鑒定從上述胚的組織特征分析，已掌握了區(qū)分健壯、衰弱和死組織的知識(shí)，但在 實(shí)際鑒定時(shí)還應(yīng)認(rèn)真考慮下列有關(guān)

37、方面。胚的主要構(gòu)造部位及主要細(xì)胞分裂區(qū)的染色狀況和組織狀態(tài)是否正常。正確區(qū)分正常與不正常胚組織的染色特征的差異。全面觀察正常、不正?；蛩婪N子的胚及活營(yíng)養(yǎng)組織的特征及其關(guān)系。判斷引起染色等級(jí)不同的原因。正確識(shí)別由于測(cè)定技術(shù)不當(dāng)而人為造成的損傷和異常染色情況。如果全部胚的主要構(gòu)造的染色和功能均在可接收的正常范圍內(nèi)，那么，即使胚的構(gòu)造和 組織狀態(tài)有些不正常情況，也不能認(rèn)為種子已喪失生活力。幾種種子的鑒定標(biāo)準(zhǔn)為了確切掌握四唑染色樣品的鑒定技術(shù)，這里介紹幾種種子鑒定 標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)例供參考。一般鑒定原則是，凡是胚的主要構(gòu)造及有關(guān)活營(yíng)養(yǎng)組織染成有光澤的鮮紅色，且組織狀態(tài) 正常的，為有生活力種子。凡是胚的主要構(gòu)造

38、局部不染色或染成異常的顏色和光澤，并且活 營(yíng)養(yǎng)組織不染色部分已超過1/2,或超過允許范圍，以及組織軟化的，為不正常種子。凡 是完全不染色或染成無光澤的淡紅色或灰白色，且組織已軟腐或異常、蟲蛀、損傷、腐爛的 為死種子。在鑒定時(shí)，可借助于放大器具，認(rèn)真觀察鑒別。大、中粒種子可直接用肉眼或57倍放 大鏡進(jìn)行觀察鑒定。對(duì)小粒種子最好利用10100倍體視顯微鏡進(jìn)行仔細(xì)觀察鑒定，在觀察 時(shí)，先打開底射燈光和側(cè)射燈光，開始用低倍(10 x)觀察，大致將正常染色種子，每10粒放 成一堆，而將異常染色及有懷疑的種子放在一起，然后再用30 x40 x物鏡進(jìn)行仔細(xì)觀察核 實(shí)，最后正確地區(qū)分和計(jì)算種子生活力或活力。(

39、七)結(jié)果表示與報(bào)告計(jì)算各個(gè)重復(fù)中有生活力的種子數(shù)，重復(fù)間最大容許差距不得超過 表6-22的規(guī)定，平均百分率計(jì)算到最近似的整數(shù)。在GB/t3543. 1的結(jié)果報(bào)告單“其他測(cè)定項(xiàng)目”欄中要填報(bào)“四唑測(cè)定有生活力的種子 %”。對(duì)豆類、棉籽和蕹菜等需增填試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的硬實(shí)百分率”，硬實(shí)百分率應(yīng)包括在所填報(bào)有生活力種子的百分率中。另外，種子生活力測(cè)定，還有甲烯藍(lán)（MB）法、漠麝香草酚蘭（BTB）法、紅墨水染色法和軟X射線造影法等。實(shí)驗(yàn)十一植物種子生活力快速測(cè)定文章來源：生命科學(xué)系發(fā)布者：123 發(fā)布時(shí)間：2009-5-15 13:31:52 閱讀：1396次一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆罩参锓N子生活力檢測(cè)的基本原理及快

40、速鑒定植物種子生活力的方法。二、實(shí)驗(yàn)原理種子活力是決定種子在發(fā)芽和出苗期間的活性強(qiáng)度和種子特性的綜合表現(xiàn)（指 田間條件下的出苗能力及與此有關(guān)的其他特征和指標(biāo)），種子生活力是指種子的 發(fā)芽潛在能力和種胚有的生命力（通常指一批種子中具有生命力種子數(shù)占種子總 數(shù)的百分率）。種子貯藏過程中必須維持種子是有活力的，因此定期進(jìn)行生活力 和活力的檢測(cè)是非常重要的。測(cè)定種子生活力方法常用發(fā)芽率測(cè)定法，該法是指 在最適宜的條件下，在規(guī)定天數(shù)內(nèi)發(fā)芽的種子占供試種子的百分?jǐn)?shù)。它是決定種 子品質(zhì)和實(shí)用價(jià)值大小的主要依據(jù)，與播種時(shí)的用種量直接有關(guān)。但是常規(guī)方法 （直接發(fā)芽）測(cè)定種子發(fā)芽率所需的時(shí)間較長(zhǎng)，對(duì)于處于深休眠狀

41、態(tài)的種子，幾 乎難于應(yīng)用。特別是有時(shí)為了應(yīng)急需要，沒有足夠的時(shí)間來測(cè)定種子發(fā)芽率，所 以有必要根據(jù)種子的生理特性建立起一套快速測(cè)定種子生活力的方法。目前，植 物種子生活力的快速測(cè)定法有多種，常用的有以下3種：氯化三苯基四氮唑法（TTC法）或漠麝香草酚藍(lán)法（BTB法）凡有生命活力的種子其胚在呼吸作用過程中都會(huì)發(fā)生氧化還原反應(yīng)，而無生 命活力的種子胚則無此反應(yīng)。當(dāng)TTC滲入種胚的活細(xì)胞內(nèi)，并作為氫受體被脫 氫輔酶（NADH或NADPH）上的氫還原時(shí)，便由無色的氯化三苯基四氮唑（TTC， 可溶于水）變?yōu)榧t色的三苯基甲腙（TTCH，不溶于水）。生活的種子充分吸脹后，呼吸強(qiáng)度迅速增加，吸收空氣中的氧，放

42、出二氧化 碳。二氧化碳溶于水成為碳酸，碳酸解離成H+和HCO3-，使種胚周圍酸度增 加，可用漠香草酚藍(lán)（BTB）來測(cè)定酸度變化。BTB的變色范圍為pH 6.07.6， 酸性呈黃色，堿性呈藍(lán)色，中間經(jīng)過綠色（變色點(diǎn)為pH 7.1），色澤差異顯著，易 于觀察。因此，可從種子的呼吸強(qiáng)弱來判斷種子的發(fā)芽率。紅墨水染色法或酸性靛藍(lán)染色法凡是生活的活細(xì)胞的原生質(zhì)膜都具有選擇吸收能力，它對(duì)某些染料不讓透過， 因此用這類染料（如紅墨水、酸性靛藍(lán)等）不能使種胚染色。而死種子的胚細(xì)胞原 生質(zhì)膜喪失了選擇吸收能力，于是染料進(jìn)入死細(xì)胞，將胚完全染色。因此，可根 據(jù)種胚或子葉對(duì)染料的著色情況判斷種子的發(fā)芽率。三、實(shí)驗(yàn)材

43、料小麥種子、大麥種子、秈稻種子、玉米種子、粳稻種子、蠶豆種子、大豆種子。四、設(shè)備與試劑恒溫箱，培養(yǎng)皿，燒杯，鑷子，刀片，紫外熒光燈，濾紙（無熒光），瓊脂， 沸水。0.5% TTC溶液：稱取TTC 0.5 g放燒杯中，加入少許95%乙醇使其 溶解，然后用蒸餾水稀釋至100 mL。配好的溶液需避光保存，若呈紅色時(shí)， 則不能再用。5%紅墨水：市售紅墨水5 mL加95 mL自來水。0.1%酸性靛 藍(lán)溶液：稱0.1 g酸性靛藍(lán)，加蒸餾水溶解，定容至100 mL。0.1% BTB水溶 液：稱取BTB 0.1 g溶于冷開水（配制指示劑的水應(yīng)為微堿性，使溶液呈藍(lán)色或 藍(lán)綠色，而蒸餾水為微酸性，故宜用煮沸的自來水或井水），用濾紙去殘?jiān)?濾液若呈黃色，可加數(shù)滴稀氨水，使之變?yōu)樗{(lán)色或藍(lán)綠色。此液可長(zhǎng)期貯于棕 色瓶中。五、實(shí)驗(yàn)步驟（一）氯化三苯基四氮唑法（TTC法）或漠麝香草酚藍(lán)法（BTB法）氯化三苯基四氮唑法（TTC法）將待測(cè)種子在3035C溫水中浸種（小 麥、大麥、秈稻種子68 h；玉米蠶豆種子5 h左右；粳稻種子2 h），以增加種 胚的呼吸速率，使顯色迅速；取吸脹種子200粒，用刀片沿種子胚的中心線縱 切為兩半，將其中一半置于30C恒溫箱中0.51 h，另一半在沸水中煮5 mi