微生物純培養(yǎng)與顯微技術(shù)

1、關(guān)于微生物的純培養(yǎng)與顯微技術(shù)第一張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 微生物的分離和純培養(yǎng)一、相關(guān)概念培養(yǎng)物（culture） ：在微生物學(xué)中，指在人為規(guī)定的條件下培養(yǎng)、繁殖得到的微生物群體 。純培養(yǎng)物（pure culture） ：只有一種微生物的培養(yǎng)物 。無(wú)菌技術(shù)（aseptic technique） ：指在分離、轉(zhuǎn)接及培養(yǎng)純培養(yǎng)物時(shí)防止其被其他微生物污染的技術(shù) 。第二張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、無(wú)菌條件1、微生物培養(yǎng)用的常用器具 試管、玻璃三角燒瓶、平皿2、滅菌方式 高壓蒸汽滅菌、高溫干熱滅菌、化學(xué)試劑、紫外射線、微波、過(guò)濾等3、接種操作1）、對(duì)操作環(huán)境滅菌

2、2）、對(duì)接種工具的滅菌3）、接種過(guò)程的無(wú)菌操作第三張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月高壓蒸汽滅菌鍋超凈工作臺(tái)第四張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三、固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)（一）相關(guān)概念1、菌落（colony） ：?jiǎn)蝹€(gè)微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見(jiàn)的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞生長(zhǎng)群體 。2、菌苔（lawn） ：當(dāng)固體培養(yǎng)基表面眾多菌落連成一片時(shí)，便成為菌苔 。第五張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)菌菌落形態(tài)第六張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第七張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第八張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于20

3、22年6月第九張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（二）微生物分離的手段1、稀釋倒平板法（pour plate method） 分離材料 無(wú)菌水倍比稀釋 取不同稀釋液少許 倒入45-50瓊脂培養(yǎng)基混合 倒入培養(yǎng)皿培養(yǎng)第十張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2、涂布平板法（spread plate method）一定稀釋度的樣品 滴加在平板表面 無(wú)菌玻璃涂棒涂布 菌液均勻分散整個(gè)平板表面 第十一張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3、 平板劃線法（streak plate method）第十二張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4、稀釋搖管法（dilution shake

4、 culture method）第十三張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月四 、液體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)1、原因 不是所有的微生物都能在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng) 。例如：許多原生動(dòng)物、藻類、大細(xì)胞細(xì)菌等。2、方法 稀釋法 （必須在同一個(gè)稀釋度的許多平行試管中，應(yīng)超過(guò)95%表現(xiàn)為不生長(zhǎng)）第十四張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月五、單細(xì)胞（孢子）分離 直接采取顯微分離法從混雜群體中直接分離單個(gè)細(xì)胞或單個(gè)個(gè)體進(jìn)行培養(yǎng)以獲得純培養(yǎng)。第十五張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月六、選擇培養(yǎng)分離（一）原因：1、單一培養(yǎng)不能滿足所有微生物生長(zhǎng)。2、微生物對(duì)培養(yǎng)條件的選擇。3、微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)的竟?fàn)?。（二?/p>

5、分離方法1、利用選擇平板進(jìn)行直接分離 依據(jù)：利用微生物自身特點(diǎn)選擇分離條件，如耐高溫、產(chǎn)特殊酶類等。第十六張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2、富集培養(yǎng) 本質(zhì)：使要分離的目的微生物的數(shù)量大大增加。 富集條件：根據(jù)所需分離的微生物的特點(diǎn)進(jìn)行選擇，如溫度、pH、紫外線、高壓、光照、氧氣、營(yíng)養(yǎng)等等許多方面。 第十七張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3、微生物的直接培養(yǎng) 方法：利用微生物自然生長(zhǎng)條件下加 入 選擇條件。 原理：自然條件下微生物的多樣性， 代謝的多樣性，微生物作用的協(xié) 調(diào)性（分工合作）。第十八張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月七 、二元培養(yǎng)物（一）概念 二元培養(yǎng)物

6、 ：培養(yǎng)物中只含有二種微生物，而且是有意識(shí)的保持二者之間的特定關(guān)系的培養(yǎng)物 。（二）應(yīng)用方面 嚴(yán)格寄生物的分離、特殊共生關(guān)系的微生物的分離。第十九張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月八 、微生物的保藏技術(shù)1、意義2、菌種保藏機(jī)構(gòu)（P19）3、保藏方法 1）傳代培養(yǎng)保藏 注意：a、應(yīng)根據(jù)微生物不同特性選擇培養(yǎng)基。b、傳代時(shí)間 2）冷凍保藏 注意：a、冰晶形成對(duì)細(xì)胞傷害。b、要快速升降溫 。c、加入保護(hù)劑第二十張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3）干燥保藏法 a、沙土管保存 適用于產(chǎn)孢子的微生物 ，如芽孢桿菌、放線菌等 。 b、冷凍真空保藏 將有保護(hù)劑樣品先凍結(jié)，然后真空作用下除去水

7、分，置真空或惰性氣體的密閉環(huán)境中低溫保存 。4）其它方法 紙片保藏、薄膜保藏、寄主保藏等 第二十一張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 顯微鏡下的微生物第二十二張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月一、細(xì)菌、放線菌和古生菌 原核微生物分為真細(xì)菌和古生菌，真細(xì)菌又分為細(xì)菌、放線菌。1、細(xì)菌的形態(tài)和排列 1）一般形態(tài) 球狀、桿狀與螺旋狀三種 第二十三張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二十四張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2)細(xì)菌的排列 許多細(xì)菌也常以成對(duì)、成鏈、成簇的形式生長(zhǎng) 。第二十五張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二十六張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作

8、于2022年6月3）其它形態(tài) 柄桿菌（prosthecate bacteria）細(xì)胞上有柄（stalk）、菌絲（hyphae）、附器（appendages）等細(xì)胞質(zhì)伸出物，細(xì)胞呈桿狀或梭狀，并有特征性的細(xì)柄 。第二十七張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月five cells are atached by their stalks.第二十八張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 An electron micrograph of a metal-shadowed preparation of Planctomyces maris.A single cell is about 1-1.5

9、 um long.Note the fibrillar nature of the stalk. Pili are also abundant.Note also the flagella(curly appendages) on each cell and the bud that is developing from the nonstalked pole of one cell.第二十九張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 Photomicrographs of cells of Hyphomicrobium. By phase contrast,showing typical f

10、ields.Notice the long hyphae and the occasional budding cell第三十張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 球衣菌（Sphaerotilus），能形成衣鞘（sheath），桿狀的細(xì)胞呈鏈狀排列在衣鞘內(nèi)而成為絲狀.第三十一張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞呈星形和方形的細(xì)菌 第三十二張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月支原體（Mycoplasma）由于只有細(xì)胞膜，沒(méi)有細(xì)胞壁，故細(xì)胞柔軟，形態(tài)多變，具有高度多形性。第三十三張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第三十四張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 Do

11、 not produce cell walls Have a gram negative-like membrane structure 第三十五張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4）繁殖方式： 無(wú)性繁殖：裂殖 第三十六張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月有性繁殖：細(xì)菌結(jié)合conjugation第三十七張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2、放線菌 1）菌絲形態(tài)： 營(yíng)養(yǎng)菌絲、氣生菌絲和孢子絲（鑒定指標(biāo)）第三十八張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月Chain of conidiosporesAgar surfaceSubstrate myceliumAerial hyp

12、hae第三十九張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月孢子絲不同形態(tài)第四十張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3、古生菌 古生菌與細(xì)菌具有類似的個(gè)體形態(tài)，但它們多生活于一些生存條件十分惡劣的極端環(huán)境中，例如高溫、高鹽、高酸等 。隱蔽熱網(wǎng)菌（Pyrodictium occultum）是迄今所發(fā)現(xiàn)的最耐熱的生物之一，它的最適生長(zhǎng)溫度為105 第四十一張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月從熱泉中分離出的火山熱原體（Thermoplasma volcanium）細(xì)胞電鏡照片熱原體（Thermoplasma）沒(méi)有細(xì)胞壁，其形態(tài)也象細(xì)菌中的支原體一樣呈多形性 。第四十二張，PPT共六十三頁(yè)，

13、創(chuàng)作于2022年6月4、 原核生物的細(xì)胞大小1）隨種類不同而變化2）影響細(xì)菌形態(tài)變化的因素 第四十三張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、真菌 1、特點(diǎn)： 種類繁多，形態(tài)各異、大小懸殊，細(xì)胞結(jié)構(gòu)多樣 。2、霉菌（mold） 霉菌菌體均由分枝或不分枝的菌絲（hypha）構(gòu)成。許多菌絲交織在一起，稱為菌絲體（mycelium）。 Filamentous fungi第四十四張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1）無(wú)隔膜菌絲 (nonseptate hypha) 整個(gè)菌絲為長(zhǎng)管狀單細(xì)胞，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有多個(gè)核。其生長(zhǎng)過(guò)程只表現(xiàn)為菌絲的延長(zhǎng)和細(xì)胞核的裂殖增多以及細(xì)胞質(zhì)的增加。如根霉、毛霉、犁頭

14、霉等。第四十五張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2）有隔膜菌絲 (septate hypha) 菌絲由橫隔膜分隔成成串多細(xì)胞，每個(gè)細(xì)胞內(nèi)含有一個(gè)或多個(gè)細(xì)胞核。第四十六張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3）相關(guān)概念營(yíng)養(yǎng)菌絲 ：在固體培養(yǎng)基上，部分菌絲伸 入培養(yǎng)基內(nèi)吸收養(yǎng)料 的菌絲。氣生菌絲 ：向空中生長(zhǎng) 的菌絲。繁殖菌絲 ：由氣生菌絲發(fā)育到一定階段， 分化而成 的。第四十七張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4）繁殖方式 無(wú)性生殖：菌絲斷裂、產(chǎn)生孢子 厚垣孢子第四十八張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月分節(jié)孢子 第四十九張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月分生孢

15、子第五十張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月有性生殖：準(zhǔn)性生殖第五十一張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第五十二張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3、酵母菌 1） 繁殖方式 無(wú)性生殖：芽殖或裂殖 第五十三張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月有性繁殖 ：產(chǎn)生子囊孢子新型隱球酵母（Cryptococcus neoformans）第五十四張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2）形態(tài) 單細(xì)胞呈卵圓形、圓形、圓柱形或檸檬形 第五十五張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月多細(xì)胞相連成為鏈狀 ：假絲酵母第五十六張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3）作用 a、有利面： 在釀造、食品、醫(yī)藥 、飼料 方面應(yīng)用。 b、不利面： 引起原料腐敗變質(zhì) ：蜂蜜酵母（Saccharomyces mellis）、魯氏酵母（Saccharomyces rouxii） 第五十七張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三、顯微藻類 1、特點(diǎn)： 有葉綠素，可進(jìn)行光合作用，放氧 2、 形態(tài) 1）單細(xì)胞 第五十八張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2）單個(gè)的、相似的 細(xì)胞互相粘連而成的簡(jiǎn)單聚集體 第五十九張，PPT共六十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3）由具特殊功能分化了的不同細(xì)胞所構(gòu)成很復(fù)雜的集體，其表面結(jié)