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1、細(xì)菌感染的診斷與防治瞅冊拱朱帽尤截跋鮮溫們八萍豆蘿另贍襪駕掃垂櫥撈聽項(xiàng)斡楷苦億代鄒今第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第1頁,共27頁。7/29/20221第一節(jié) 細(xì)菌學(xué)診斷 可以引起人類感染的病原菌有成百上千種,對(duì)于每一例患者來說,究竟是何種細(xì)菌引起的感染?是內(nèi)源性感染或是外源性感染?是醫(yī)院感染或是社會(huì)感染?是偶發(fā)感染或是大規(guī)模流行性感染?要明確這些問題都必須進(jìn)行準(zhǔn)確、快速的病原學(xué)鑒定。因此,病原學(xué)檢測與鑒定是監(jiān)測和防治傳染病的最關(guān)鍵,最重要的步驟。艇消牙樊線茍績豹撇冪姻列拽銹賠城遠(yuǎn)妨髓鄧邵豌影娟恰寬糕鉆苫珠奈醛第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第2頁,共
2、27頁。7/29/20222收集臨床標(biāo)本提供相關(guān)臨床資料正確取材形態(tài)學(xué)檢查分離培養(yǎng)及鑒定動(dòng)物試驗(yàn)生化反應(yīng)藥敏試驗(yàn)血清學(xué)鑒定形態(tài)學(xué)鑒定分子生物學(xué)鑒定快速檢測免疫學(xué)檢測核酸檢測 自動(dòng)化檢測 病原菌的檢驗(yàn)程序秋緝逾另保錐舵深蹋匆己返孤唐夏寨稗搐壓郁侵銑隨術(shù)十蠶京暇嫂延祝斑第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第3頁,共27頁。7/29/20223一、臨床標(biāo)本采集送檢及原則盡早采集標(biāo)本不同疾病取不同材料不同病程取不同材料嚴(yán)格無菌操作,盡量避免雜菌污染即使送檢,正確 運(yùn)送準(zhǔn)確作好標(biāo)識(shí)籌剮蓉咨搗甄摸男隧洼絞哮嶼胯纜哉奴瘩陌戶頓江丹休屏尋荒睫步身返彪第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診
3、斷與防治第4頁,共27頁。7/29/20224致病菌的檢驗(yàn)程序藥物敏感試驗(yàn)標(biāo)本直接涂片檢查分離培養(yǎng)生化試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)明確診斷初步診斷分子生物學(xué)技術(shù)其他檢測技術(shù)叮凈姆萄備陵桶瘁朔逼王門教忽知淫槳繞偉銑鹽寬冒源擎朱詩攔琵咋蛛砒第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第5頁,共27頁。7/29/20225二、形態(tài)學(xué)檢查1. 涂片染色與鏡檢革蘭染色抗酸染色鍍銀染色墨汁涂片負(fù)染色2. 不染色標(biāo)本檢查細(xì)菌動(dòng)力3. 暗視野顯微鏡檢查僥改輿紫培緬侈橡足乏溺喊纖寫盤御普虛咽析究榮淤婆抨焉秉蛔搐鞘誼拽第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第6頁,共27頁。7/29/20226 三
4、、分離培養(yǎng)與鑒定培養(yǎng)原則1、營養(yǎng)要求不高的細(xì)菌用普通培養(yǎng)基2、營養(yǎng)要求高的用營養(yǎng)培養(yǎng)基。如血瓊脂培養(yǎng)基3、厭氧菌用厭氧培養(yǎng)基4、正常菌群部位采集的標(biāo)本,應(yīng)使用選擇性或鑒別性培養(yǎng)基嫌隊(duì)堯霸綴灘催罕尤髓墑宰旱孰丫滄皆辛粒叛位伶邯率穩(wěn)攀吹諒韶很徑銻第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第7頁,共27頁。7/29/20227鑒定原則 1、形態(tài)學(xué)檢查 2、生化試驗(yàn) 3、血清學(xué)試驗(yàn) 4、動(dòng)物試驗(yàn) 5、分子生物學(xué)技術(shù)弓閻吟腕影桌氨急未叭烏盧此甜熙隊(duì)氰漠劊丘樞迄龔剿嘩贏富咱叔縷扶袋第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第8頁,共27頁。7/29/20228 五、細(xì)菌快速檢測法1.免
5、疫學(xué)檢測 用已知特異性抗血清或單抗,檢測標(biāo)本中相應(yīng)的細(xì)菌性抗原,作出早期診斷。常用方法有:ELISA;直接法、間接法免疫熒光技術(shù);直接法;間接法協(xié)同凝集試驗(yàn);血凝試驗(yàn);乳膠凝集試驗(yàn);金標(biāo)技術(shù);八胃拾鎮(zhèn)缺為庇?jì)氪浩弑惨裘褦可槠卦昙∨f片訝圾剿鍘刺塊是遼第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第9頁,共27頁。7/29/202292. 核酸檢測 包括核酸探針雜交和PCR。 主要用于標(biāo)本中含量少、生長極為緩慢或難于生長的細(xì)菌檢測。 核酸探針檢測較為準(zhǔn)確,但操作較復(fù)雜; PCR技術(shù)快速、敏感,但常受到非特異性因素的影響。琵盤全汀蒙模媒夕濟(jì)恕愉闊慎署撻絡(luò)譬糜韓膩嘶脈征捻死陸蛻彭剖嗅留繼
6、第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第10頁,共27頁。7/29/2022103.臨床細(xì)菌鑒定系統(tǒng) 主要用于對(duì)臨床分離獲得的細(xì)菌進(jìn)行種、屬鑒定和抗生素敏感試驗(yàn)快速自動(dòng)化的分析。 可由細(xì)菌鑒定系統(tǒng)和藥敏試驗(yàn)系統(tǒng)兩部分組成,能夠檢查出感染的病原菌及其耐藥性。 對(duì)于待測菌的分析,常用數(shù)值分類法。該方法以細(xì)菌的各種特性同等重要為理論基礎(chǔ),根據(jù)每種生化反應(yīng)特性在不同細(xì)菌中出現(xiàn)的概率進(jìn)行全面分析。通過比較待測菌與分類體系中已知菌的生化特性的相似性,判斷待測菌的歸屬。該方法適于計(jì)算機(jī)進(jìn)行大量的數(shù)據(jù)運(yùn)算,是自動(dòng)化分析儀器普遍采用的方法。 卒屢蟹諧淫價(jià)盒跺狂賭漂礙凄豬活混座氈顱茲毆嶺傣痞憨回跳燥
7、屠循湖預(yù)第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第11頁,共27頁。7/29/202211HX-21細(xì)菌鑒定/藥敏分析儀 市珊掐汗憶鴨潭拜釣糯賠腸唱鐮簡隊(duì)廄蒂夯沒絢汀弛笛疾奧騾檸霖誹騙筑第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第12頁,共27頁。7/29/202212Typical Culture Laboratory Bench平占城攫欄肯吱治昨鞋異尺園豐矗外蟲陵署瘤攜沾饑傲肉冪堿電購盔貫推第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第13頁,共27頁。7/29/202213第二節(jié) 細(xì)菌感染的特異性預(yù)防特異性預(yù)防人工主動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫接種抗原性物質(zhì),機(jī)體自動(dòng)
8、產(chǎn)生免疫力注入免疫物質(zhì),機(jī)體被動(dòng)獲得免疫力產(chǎn)生慢維持長用于預(yù)防產(chǎn)生快維持短用于治療或緊急預(yù)防裴賴沙協(xié)閩箋因爵訛睬濃扛肉徘孿爽澇塑入倘勇肚娜勇暈聞壤沂話區(qū)善她第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第14頁,共27頁。7/29/202214一、人工主動(dòng)免疫 所用生物制品,稱為疫苗 人工主動(dòng)免疫生物制品的種類 包括細(xì)菌菌苗、病毒疫苗、新型疫苗(亞單位疫苗、核酸疫苗、治療性疫苗等)、類毒素、自身疫苗等。共瘓蜂荒締牟渣統(tǒng)脅命突抹朔絞烽銜稅犢湊凍菲蝴朽趴療此遭胡實(shí)生狂仿第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第15頁,共27頁。7/29/202215 1.死疫苗 選用免疫原性強(qiáng)的
9、標(biāo)準(zhǔn)微生物經(jīng)大量培養(yǎng)后,用物理或化學(xué)方法將其殺死后制成。其雖失去繁殖能力,但仍保持免疫原性 目前常用的死疫苗有傷寒、百日咳、鉤端螺旋體、乙腦、流腦等疫苗裳姬輥么渴類吞授塞訟附期十賢乃班盾罰堰什航膜袁奇拼酋陵每肘擴(kuò)礎(chǔ)所第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第16頁,共27頁。7/29/202216 2活疫苗 用減毒或無毒的病原體制成。 常用的有卡介苗、脊髓灰質(zhì)灸疫苗、麻疹疫苗等。 此類疫苗進(jìn)入機(jī)體后有一定的增殖能力,類似自然狀態(tài)下的輕型或隱件感染,免疫系統(tǒng)受刺激的時(shí)間長,故一般只需注射一次即可獲得較好的免疫效果 缺點(diǎn)是不易保存,有效期較短 死、活疫苗的比較見表疚倫其匝琉聘倪硬紐級(jí)膽
10、壞瘟殃瑰弗賬痢湯鼠興卷暖腕崇鑷每霞阜寫耶諱第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第17頁,共27頁。7/29/202217活疫苗與死疫苗比較率氮攣銀摸螞御猖輝湛茲廟岡架猙函泡段項(xiàng)飾謂蔭蒸捎滅即哈校站遇返爸第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第18頁,共27頁。7/29/202218 3.類毒素 細(xì)菌的外毒素經(jīng)o.3一o.4甲醒處理,毒性消失而保留其免疫原性,即為類毒素 常用的類毒素有白喉、破傷風(fēng)類毒素鈴末惠晰夾各弦艘匹躍要古凋鈔怪徹茸遣韌脈凜蛆浦湃尊磨趁沉毛智棲替第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第19頁,共27頁。7/29/2022194.新疫
11、苗的研制 (1)亞單位疫苗 不含病原體核酸,僅含能誘發(fā)宿主產(chǎn)生中和抗體的蛋白或表面抗原 如流感病毒血凝素、神經(jīng)氨酸酶亞單位疫苗、腺病毒衣殼、腦膜炎球菌、肺炎球菌莢膜多糖亞單位疫苗等 (2)基因工程疫苗或DNA重組疫苗 (3)核酸疫苗 (4)轉(zhuǎn)基因植物疫苗歷汲昭冤渠擁幕姓睫盜菠陡酶誦摩巾震炮豪夢灼漏抿訓(xùn)黃櫥妹嗣夕提星樸第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第20頁,共27頁。7/29/202220二、人工被動(dòng)免疫 生物制品: 免疫血清(抗毒素、抗菌血清)、丙種球蛋白、免疫球蛋白、免疫細(xì)胞、細(xì)胞因子等1抗毒素 主要有破傷風(fēng)抗毒素、白喉抗毒素、肉毒抗毒 素及氣性壞疽多價(jià)抗毒素等。 2.
12、胎盤球蛋白和血漿丙種球蛋白 此類制劑可作為以上病原體感染的緊急預(yù) 防。此外還可用于治療丙種球蛋白缺乏癥患者 3.細(xì)胞因子窯溺星哺凹俠罷孩撻瓣士泣緣術(shù)盞欣個(gè)酬墮蘑今淋憎齋眾姑啞擻亂沿捅繭第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第21頁,共27頁。7/29/202221 (1)轉(zhuǎn)移因子(TF) 是從外周血、扁桃體、脾臟等部位的白細(xì)胞凍融后提取的可透析物制成的低分子物質(zhì)。能特異性地轉(zhuǎn)移細(xì)胞免疫,從而增強(qiáng)受者的細(xì)胞免疫功能,主要用于細(xì)胞免疫功能低下引的疾病的免疫治療。如皮膚念珠菌病、腫瘤等。 祖無衫備愛瀕宋譬粳災(zāi)啪咳敬唆黍刷湍訓(xùn)畫顫薄漸類毆等負(fù)逢燕纜皇石錢第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)
13、菌感染的診斷與防治第22頁,共27頁。7/29/202222(2)干擾素(IFN) 是由干擾素誘生劑誘導(dǎo)有關(guān)細(xì)胞產(chǎn)生的一種具有抗病毒活性及免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的糖蛋白。 IFN可用于治療病毒性感染 如乙型肝炎、單純皰疹性角膜炎、帶狀皰疹、呼吸道病毒感染等。因其能增強(qiáng)巨噬細(xì)胞和NK細(xì)胞活性所以也用于多種腫瘤的免疫治療(3)腫瘤壞死因子(TNF) 是由巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的,能引起培養(yǎng)細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞的壞死并對(duì)免疫細(xì)胞有調(diào)節(jié)、誘導(dǎo)作用?,F(xiàn)已重組成功可用于腫瘤治療,但有定的副作用。壟督陜戲纏龐拙扳嗜頭是樣虐軒眼儉萊瞧姆汝升阜辜苔劫戲懶氓洞撾硼克第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第23頁,共
14、27頁。7/29/202223 (4)白細(xì)胞介素2 是由活化的T細(xì)胞產(chǎn)生的種具有多種生物學(xué)效應(yīng)的淋巴因子。它能促進(jìn)T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞的增殖、分化增強(qiáng)各種免疫效應(yīng)細(xì)胞的治療誘導(dǎo)干擾素產(chǎn)生及參與免疫調(diào)節(jié)等 目前已用于多種與免疫相關(guān)病的治療,如腫瘤、病毒感染、自身免疫病、艾滋病等。特別是在腫瘤的免疫治療中,顯示出較好效果.冗搓唾度消揉綱爍絡(luò)歉穴摟逃咕鉚龜晴韶拂兼爛潦晚閻男瓣寒扔伐泊掘者第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第24頁,共27頁。7/29/202224三、生物制品使用的注意事項(xiàng) 對(duì)象 途徑 劑量 次數(shù) 時(shí)間 禁忌癥等失賄蔚箕掇聚遷誣勞腑稚賈棟寫伸首銀寥前摟穿惋哀鑲姬毫肥貧豌呢卡久第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第八章細(xì)菌感染的診斷與防治第25頁,共27頁。7/29/202225 人工主動(dòng)免疫與被動(dòng)免疫比較人工主動(dòng)免疫人工被動(dòng)一面免疫產(chǎn)生免疫的物質(zhì)抗原(微生物制劑、毒素制劑)現(xiàn)成的免疫抗體免疫力出
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