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1、精品文檔艾滋病實(shí)驗(yàn)室生物安全HIV的生物危害?第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。人類免疫缺陷病毒(HIV )屬第二類病原微生物,是高致病性病原微生物。HIV相關(guān)檢測(cè)的生物安全級(jí)別?HIV抗體檢測(cè)(包括篩查和確證實(shí)驗(yàn))、抗原檢測(cè)和相關(guān)的免疫學(xué)檢測(cè)應(yīng)在符合n級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室(BSL-2 )要求的艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。? HIV分離培養(yǎng)、濃縮、中和試驗(yàn)、細(xì)胞培養(yǎng)及研究工作及其它需要應(yīng)用活病毒的研究工作,應(yīng)在出級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室( BSL-3 )中進(jìn)行。? HIV核酸提取和檢測(cè)均應(yīng)在符合H級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室( BSL-2 )要求的艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。? HIV病毒株應(yīng)保存在符合出級(jí)生
2、物安全實(shí)驗(yàn)室( BSL-3 )要求的艾滋病實(shí)驗(yàn)室;HIV陽(yáng)性樣品,包括全血、血清、血槳和其他組織(液)、核酸提取物應(yīng)保存在符合BSL-2要求的艾滋病實(shí)驗(yàn)室。生物安全保證措施?建立安全制度實(shí)驗(yàn)室的安全工作制度或安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序(S-SOP)。意外事故處理預(yù)案,主要是生物安全意外事故。內(nèi)容包括應(yīng)急處理、登記和報(bào)告、 調(diào)查和處理。信息安全及保密制度:與HIV/AIDS檢測(cè)相關(guān)的所有資料均應(yīng)嚴(yán)格保密,包括送檢單、檢測(cè)記錄、樣品登記、報(bào)告單及工作人員年度檢測(cè)結(jié)果等,不得對(duì)無(wú)關(guān)人員透露檢測(cè)結(jié)果。?培訓(xùn)和管理實(shí)驗(yàn)室應(yīng)進(jìn)行全員安全培訓(xùn)并強(qiáng)化普遍性防護(hù)原則”安全意識(shí),所有的血液、未固定的組織和組織液樣品,均應(yīng)視
3、為有潛在的傳染性,都應(yīng)以安全的方式進(jìn)行操作。所有管 理和檢測(cè)人員都應(yīng)接受省級(jí)以上艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室主持的安全培訓(xùn),包括上崗前培訓(xùn)和復(fù) 訓(xùn),并接受管理人員的監(jiān)督。必須對(duì)新上崗人員進(jìn)行安全教育和培訓(xùn),使他們清楚實(shí)驗(yàn)室工作的潛在危險(xiǎn),通過(guò) 考核等方式確認(rèn)他們具備安全操作的能力后方可單獨(dú)工作。必須對(duì)新調(diào)入人員、外來(lái)合作、進(jìn)修和學(xué)習(xí)的人員進(jìn)行生物安全培訓(xùn),經(jīng)實(shí)驗(yàn)室主任批準(zhǔn)后,方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。生物安全培訓(xùn)和監(jiān)督應(yīng)有客觀詳實(shí)的記錄。實(shí)驗(yàn)室主任應(yīng)詳細(xì)了解所有工作人員的教育和培訓(xùn)背景、特長(zhǎng)、性格特點(diǎn)等。要根據(jù)人員特點(diǎn)、工作種類、所涉及的生物材料合理安排工作區(qū)域,要定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境進(jìn)行安全檢查。個(gè)人保健和防護(hù)精品文
4、檔遇有手部皮膚有開(kāi)放性傷口及其他不適于工作的情況,應(yīng)暫停工作。皮膚的微小傷口、擦傷等,應(yīng)用防水敷料嚴(yán)密覆蓋。應(yīng)為每一名在艾滋病實(shí)驗(yàn)室工作的人員提供充足的防護(hù)服、一次性乳膠手套、口罩、帽子和覆蓋足背的工作鞋。 應(yīng)將清潔的防護(hù)服和其他個(gè)人防護(hù)用品置于實(shí)驗(yàn)室清潔區(qū)內(nèi)的專 用處存放。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置應(yīng)急沖洗眼睛裝置。工作人員上崗前必須進(jìn)行 HIV抗體和乙型肝炎病毒、 丙型肝炎病毒等肝炎病毒標(biāo)志 物檢測(cè),應(yīng)接種乙肝疫苗。應(yīng)每年對(duì)工作人員采血檢測(cè)HIV抗體,血清應(yīng)長(zhǎng)期保留。進(jìn)實(shí)驗(yàn)室工作前要摘除首飾,修剪長(zhǎng)的帶刺的指甲,以免刺破手套。嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)食、飲水、吸煙和化妝。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)穿合適防護(hù)服 (白大衣、隔離
5、衣或一次性工作服)、戴手套和口罩、 穿實(shí)驗(yàn)室專用的工作鞋。如接觸物的傳染性大、應(yīng)戴雙層手套;含有 HIV的液體(樣品或 病毒培養(yǎng)液)有可能?chē)姙R時(shí),應(yīng)戴防護(hù)眼鏡、穿防水(如塑料)圍裙。工作完畢,先脫去手 套,再脫去防護(hù)服,用肥皂和流動(dòng)水洗手。穿過(guò)的污染的防護(hù)服應(yīng)及時(shí)放入污物袋中,消毒后方可洗滌或廢棄。操作過(guò)程中,如發(fā)現(xiàn)防護(hù)服被污染應(yīng)立即更換,如手套破損,應(yīng)立即丟棄、洗 手并換上新手套。不能用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等。不要將 手套清洗或消毒后再次使用,因?yàn)槭褂帽砻婊钚詣┣逑纯墒故痔讓?duì)水的通透性增加,消毒劑可以引起手套的破損。禁止使用口腔吸液管,必須使用移液器來(lái)操作實(shí)驗(yàn)的所
6、有液體。?安全操作試劑及樣品的管理應(yīng)嚴(yán)格按要求妥善保存血清及其它體液樣品,應(yīng)按有關(guān)規(guī)定設(shè)立專門(mén)儲(chǔ)存陽(yáng)性 血清、質(zhì)控品的血清庫(kù)和/或毒種庫(kù),應(yīng)上鎖并指定專人管理。對(duì)存放試劑和有毒有害物質(zhì) 的區(qū)域應(yīng)進(jìn)行監(jiān)控,冷藏柜、冰箱、培養(yǎng)箱和存放生物試劑、化學(xué)危險(xiǎn)品、放射性物質(zhì)的容 器,置于工作人員視線之外的地點(diǎn)時(shí)應(yīng)上鎖。實(shí)驗(yàn)室的清潔和消毒工作完畢應(yīng)對(duì)工作臺(tái)面消毒,推薦用0.10.2%的次氯酸溶液消毒;用消毒液清洗后要干燥20min以上;操作過(guò)程中如有樣品、檢測(cè)試劑外濺,應(yīng)及時(shí)消毒。如有大量高濃度的傳染性液體 濺出,在清潔之前應(yīng)先用 1%的次氯酸鈉溶液浸泡,然后戴上手套擦凈。樣品的采集和處理抽取靜脈血液(或以
7、其它方式收集血液樣品)時(shí)要注意安全,應(yīng)使用一次性注射 器,戴手套,謹(jǐn)慎操作,防止血液污染雙手。應(yīng)小心防止被針頭和其它利器刺傷。如用濾紙 采樣,應(yīng)按常規(guī)將手指或耳垂局部消毒。刺破皮膚后,迅速把濾紙沾上,切勿讓血液滴落在其它物體表面造成污染。采血后待血樣干燥后再包裝送檢。離心樣品時(shí)要使用密閉的罐和密封頭,防止離心時(shí)液體溢出或在超 /高速離心時(shí)形成氣溶膠。樣品的帶入、帶出和操作不得將非實(shí)驗(yàn)室物品帶入實(shí)驗(yàn)室。包裝有測(cè)試樣品的包裹應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室的安全柜內(nèi)打開(kāi),不能在收發(fā)地點(diǎn)或倉(cāng)庫(kù)等地點(diǎn) 打開(kāi),同時(shí),打開(kāi)包裹的人員應(yīng)接受過(guò)處理感染源方面的訓(xùn)練并穿戴合適的防護(hù)服;實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有處理感染源的設(shè)備并準(zhǔn)備好可消毒的容器
8、。精品文檔打開(kāi)樣品容器時(shí)要小心,防止內(nèi)容物潑濺。要核對(duì)樣品與送檢單,檢查樣品管有無(wú)破損和溢漏。如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的樣品移出,對(duì)樣品管和盛器進(jìn)行消毒,同時(shí)要按照程序報(bào)告有關(guān)負(fù)責(zé)人。要檢查樣品的狀況, 記錄有無(wú)嚴(yán)重溶血、 微生物污染、血脂過(guò)多以及黃疸等情況。 如污染過(guò)重或者認(rèn)為不能接受,則應(yīng)將樣品用安全方式廢棄,同時(shí)將情況通知送樣人。常規(guī)處理血液、體液樣品可在工作臺(tái)上進(jìn)行,如樣品有可能濺出,則應(yīng)戴手套、 口罩和防護(hù)眼鏡,在生物安全柜中操作。將樣品轉(zhuǎn)送到其他實(shí)驗(yàn)室時(shí),應(yīng)防止對(duì)工作人員、患者或環(huán)境造成污染。護(hù)送樣 品的人應(yīng)清楚接收地點(diǎn)和接收人,實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或其指定的人員應(yīng)及時(shí)確認(rèn)樣品已送達(dá)指定
9、的實(shí)驗(yàn)室,被轉(zhuǎn)入安全位置并得到妥善處理。被污染或可能污染的材料在帶出實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)進(jìn)行消毒。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。用于國(guó)際空運(yùn)的樣品要按照國(guó)際空運(yùn)協(xié)會(huì)(IATA)的規(guī)則進(jìn)行包裝和標(biāo)記,并提交相應(yīng)的資料。?使用利器注意事項(xiàng)應(yīng)盡量避免在實(shí)驗(yàn)室使用針頭、刀片、玻璃器皿等利器,以防刺傷。如果必須使用,在處理或清洗時(shí)應(yīng)采取措施防止刺傷或劃傷,并應(yīng)對(duì)用過(guò)的物品進(jìn)行消毒。應(yīng)使用安全針具采血,如蝶形真空針,自毀性針具等,以降低直接接觸血液 和刺傷的危險(xiǎn)性。應(yīng)將用過(guò)的銳器直接放入耐穿、防滲漏的利器盒,用過(guò)的針頭應(yīng)直接放入堅(jiān)固的容器內(nèi),消毒后廢棄禁止將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。禁止用手直接接觸使用過(guò)的針頭、刀
10、片等利器。污染物處理艾滋病實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的所有廢棄物,包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它物品,均應(yīng)視為感染性廢棄物, 應(yīng)置于專用的密封防漏容器中,安全運(yùn)至消毒室,經(jīng)高壓消毒后再進(jìn)行處理或廢棄。?艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法物理消毒方法高壓蒸汽消毒,121 C,保持1520min;干燥空氣烘箱消毒(干烤消毒)140C,保持23h。化學(xué)消毒方法含氯消毒劑(次氯酸鈉,含有效氯 20005000mg/L)75%乙醇2%戊二醛艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室物品常用的消毒方法廢棄物缸:5000mg/L次氯酸鈉。生物安全柜工作臺(tái)面和儀器表面:75%乙醇。溢出物:5000mg/L次氯酸鈉。污染的臺(tái)面和器具:2000mg/L次氯
11、酸鈉,也可以用過(guò)氧化氫或過(guò)氧乙酸。器械可用2%戊二醛消毒。生物安全柜生物安全柜精品文檔處理危險(xiǎn)性微生物時(shí)所用的箱型空氣凈化安全裝置。?I類生物安全柜至少裝置一個(gè)高效空氣過(guò)濾器對(duì)排氣進(jìn)行凈化,工作時(shí)柜正面玻璃推拉窗打開(kāi)一半,上部為觀察窗,下部為操作窗口。外部空氣由操作窗吸進(jìn), 而不可能由操作窗口逸出。工作狀態(tài)時(shí)保證工作人員不受侵害,但不保證實(shí)驗(yàn)對(duì)象不受污染。?n類生物安全柜至少裝置一個(gè)高效空氣過(guò)濾器對(duì)排氣進(jìn)行凈化,工作空間為經(jīng)高效過(guò)濾器凈化的無(wú)渦流的單向流空氣。工作時(shí)柜正面玻璃推拉窗打開(kāi)一半,上部為觀察窗,下部為操作窗口。外部空氣由操作窗吸進(jìn),而不可能由操作窗口逸出。工作狀態(tài)下遵守操作規(guī)程時(shí)既保
12、證工作人 員不受侵害,又保證實(shí)驗(yàn)對(duì)象不受污染。元LASS II級(jí)生物安全柜CLASS II級(jí)生物安全柜根據(jù)結(jié)構(gòu)以及氣流分配不同主要是外排氣流不同分為: A型:(30%排在室內(nèi))B型:B1 (70%接管道外排)B2 (100%接管道外排)B3 ( 30%接管道外排)CLASS II A 生物安全柜生物安全柜的使用位置操作人員意外事故處理發(fā)生意外事故時(shí),應(yīng)針對(duì)事故的類型立即進(jìn)行緊急處理,主要包括:皮膚針刺傷或切割傷,應(yīng)立即用肥皂和大量流水沖洗,盡可能擠出損傷處的血液, 用70%乙醇或其它消毒劑消毒傷口。皮膚污染:用水和肥皂沖洗污染部位,并用適當(dāng)?shù)南緞┙?,?70%乙醇或其 它皮膚消毒劑。粘膜污
13、染:用大量流水或生理鹽水沖洗污染部位。衣物污染:盡快脫掉污染的衣物,進(jìn)行消毒處理。污染物潑濺:小范圍污染物潑濺,應(yīng)立即進(jìn)行消毒處理和清洗。發(fā)生大范圍污染物潑濺事故時(shí),應(yīng)立即通知實(shí)驗(yàn)室主管領(lǐng)導(dǎo)和安全負(fù)責(zé)人到達(dá)事故現(xiàn)場(chǎng),查清情況,確定消毒的程序。發(fā)生空氣污染時(shí),可采用低溫蒸汽甲醛氣體對(duì)空氣進(jìn)行消毒,但甲醛有致癌作用, 不宜用于生物安全柜和實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)空氣消毒。如果發(fā)生重大潑濺事故,應(yīng)采取以下措施進(jìn)行:從污染處疏散人員,但要防止污染擴(kuò)散;控制污染擴(kuò)散,鎖門(mén)并禁止人員進(jìn)入;通知實(shí)驗(yàn)室主管領(lǐng)導(dǎo)、安全負(fù)責(zé)人等,查清情況,確定消毒處理的程序;必要時(shí)可進(jìn)行生物安全柜和 /或?qū)嶒?yàn)室的低溫蒸汽甲醛氣體消毒,使用這
14、種方法生 物安全柜和/或?qū)嶒?yàn)室必須密閉,人員必須離開(kāi)。具體操作可按說(shuō)明書(shū)執(zhí)行。溢漏處可用經(jīng)消毒劑浸泡的吸水物質(zhì)覆蓋;消毒劑作用10-15分鐘后,移走吸水性物質(zhì),用消毒劑沖洗,用水清洗。精品文檔意外及事故的登記、報(bào)告和檢測(cè)對(duì)重大意外和事故必須進(jìn)行登記,對(duì)職業(yè)暴露事故應(yīng)填寫(xiě)艾滋病職業(yè)暴露人員個(gè)案登記表”。對(duì)重大意外和事故必須進(jìn)行報(bào)告和檢測(cè)步驟1:確定暴露級(jí)別步驟2:確定HIV傳染源頭嚴(yán)重程度哪些情況暴露不會(huì)導(dǎo)致 HIV感染由于職業(yè)暴露而導(dǎo)致的HIV感染的概率是很小的,并不是每一次職業(yè)暴露都會(huì)導(dǎo)致HIV感染的發(fā)生,許多情況下可以不必過(guò)度緊張擔(dān)心,如:(1)經(jīng)證實(shí)接觸的可疑血液或體液為HIV陰性;(2
15、)完整無(wú)損皮膚或無(wú)新鮮流血的陳舊性傷口等接觸HIV陽(yáng)性血液、感染性體液;(3)完整無(wú)破損皮膚或無(wú)新鮮流血的陳舊性傷口等接觸HIV陽(yáng)性血液、感染性體液且及時(shí)沖洗消毒后;(4)完整粘膜或皮膚粘膜結(jié)合部短時(shí)接觸少量、低滴度(如HIV血漿濃度低于1500拷貝/毫升)HIV陽(yáng)性血液或感染性體液; 感染風(fēng)險(xiǎn)?應(yīng)將職業(yè)暴露補(bǔ)救防護(hù)藥品放在醫(yī)務(wù)人員24小時(shí)都能拿取的地方。?呆證有足夠的醫(yī)療防護(hù)用品貯存,并能隨時(shí)取用。?要求醫(yī)護(hù)人員在發(fā)生職業(yè)暴露的第一時(shí)間按照處置流程進(jìn)行防護(hù),并及時(shí)報(bào)告感染辦進(jìn)行職業(yè)暴露備案登記存檔管理。?規(guī)范建立健康檔案,定期免疫接種。2m強(qiáng)過(guò)程控制中相關(guān)細(xì)節(jié)的管理成善洗手條件:配備感應(yīng)或腳
16、踏式洗手裝置,以洗手液替代肥皂。曲手標(biāo)準(zhǔn)化:將洗手的步驟、時(shí)間以圖示方式張貼于洗手處。心療廢物嚴(yán)格按分類處理,明顯標(biāo)識(shí),雙層包裝,防滲漏,防遺撒。-銳器置入銳器盒內(nèi)。?fej定減輕職業(yè)壓力的策略?新職員安全操作培訓(xùn)?建立暴露后預(yù)防和普遍性應(yīng)急預(yù)防方案案例提示精品文檔1、在處理一次性醫(yī)療用品時(shí),要將針頭、刀片等銳器與其它物品分開(kāi)存放和處理,銳 器等要裝在耐刺的朔料桶中,以免發(fā)生被混在污物中的銳器扎傷等事故。2、暴露級(jí)別為2級(jí),暴露源級(jí)別為重度類型;3、在發(fā)生職業(yè)暴露后馬上進(jìn)行局部緊急處理是對(duì)的;4、發(fā)生職業(yè)暴露后,最好在 4小時(shí)內(nèi)服藥,即使超過(guò)了 24小時(shí)仍然要服藥。 案例提示1、在臨床工作中,
17、尤其在為艾滋病人的醫(yī)療操作中,一要注意戴口罩,二要戴防護(hù) 眼鏡。2、這屬于粘膜的暴露,不要用眼藥水滴眼,否則容易損傷粘膜,增加感染的機(jī)會(huì)。3、在暴露源不明時(shí),先采取必要的預(yù)防措施,待暴露源明確后,要根據(jù)暴露級(jí)別和 暴露源類型重新調(diào)整用藥方案。精品文檔艾滋病的流行與實(shí)驗(yàn)室診斷一、艾滋病簡(jiǎn)介二、艾滋病流行現(xiàn)狀(全球、全國(guó)、全省)三、艾滋病實(shí)驗(yàn)室診斷四、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制五、生物安全與職業(yè)暴露預(yù)防一、艾滋病簡(jiǎn)介人類免疫缺陷病毒(HIV)?獲得性免疫缺陷綜合癥(AIDS)的病原體?慢病毒屬的逆轉(zhuǎn)錄病毒?感染和破壞CD4+ T淋巴細(xì)胞,導(dǎo)致免疫系統(tǒng)的損害?HIV-1 亞型:A-J (M) , O 和 N?H
18、IV-2 亞型:A-FHIV的傳播史徒自猿猴免疫缺陷病毒(SIV) - 1700 B.C.縱 SIV 分離出 HIV-1 - 1930 S?AIDS可能開(kāi)始於非州 -1950 s?苜次報(bào)導(dǎo)於中非-1981?散播到中美,美國(guó),歐州HIV的構(gòu)造?Gp120殼糖蛋白?Gp41殼糖蛋白小17基質(zhì)蛋白用24內(nèi)膜蛋白械轉(zhuǎn)錄酶?白酶力旨質(zhì)膜層病毒DNA嵌入細(xì)胞核的 DNA接合精品文檔體液可能感染?由脊髓液?骨膜液?匈膜液姬膜液?a包液祚膜液施體液中HIV含量?專染源:艾滋病人與艾滋病毒攜帶者久感人群所有人高危人群:1、多性伴人群,如嫖娼賣(mài)淫、同性戀2、經(jīng)常使用或接觸血液者,如血友病人、受血者3、注射吸毒者4
19、、性病病人5、艾滋病毒感染者的配偶、子女6、艾滋病人的密切接觸者,如醫(yī)務(wù)人員二、艾滋病流行現(xiàn)狀(全球、全國(guó)、全?。﹫?bào)告HIV的傳播途徑構(gòu)成流行特點(diǎn)? 專播方式復(fù)雜隱蔽-90年代初期,僅在援外人員中發(fā)現(xiàn)艾滋病感染者F0年代中期,出現(xiàn)了經(jīng)采供血感染和注射毒品感染的病例-90年代后期,又發(fā)現(xiàn)了經(jīng)性接觸傳播的病例-艾滋病傳播的三種途徑在我省都已出現(xiàn)HIV/AIDS:報(bào)告人數(shù)僅為冰山一角今天艾滋 病在中國(guó)流行的形勢(shì)三、艾滋病實(shí)驗(yàn)室診斷診斷的重要性?及時(shí)發(fā)現(xiàn)和治療,延長(zhǎng)生命 ?進(jìn)行防治教育,改變高危行為、預(yù)防進(jìn)一步傳播和職業(yè)暴露精品文檔?被低母嬰傳播的危險(xiǎn)性餐期治療,保障和穩(wěn)定免疫系統(tǒng)的應(yīng)答功能檢測(cè)加毒-
20、檢定抗體,抗原-病毒核酸 (DNA/RNA)?免疫系統(tǒng) -CD4計(jì)數(shù)檢測(cè)?HIV的血清學(xué)檢測(cè)急性期-病毒量與抗體非急性期-抗體?HIV感染者的監(jiān)測(cè)病毒量與CD4計(jì)數(shù)的追蹤檢測(cè)窗口期?感染后,血液 HIV檢測(cè)結(jié)果陰性期間a0%感染者在暴露3個(gè)月后,檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性?10%在暴露后3至6個(gè)月間,檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性HIV抗體的檢測(cè):檢測(cè) 的可靠性陰性:輸血者 1/251,000(0.0004%)?吉果假陰性的原因-窗口期:期限中數(shù),1個(gè)月;很少6個(gè)月-HIV-1 分類亞型 (Subtype O)-不正常的機(jī)體反應(yīng)? 吉果錯(cuò)誤的最主要原因:電腦和工作人員的錯(cuò)誤策料外的結(jié)果應(yīng)重復(fù)檢測(cè)急性期/早期感染_HIV抗體的
21、適當(dāng)檢測(cè)時(shí)間-基線(Baseline)暴露后6周暴露12周暴露后26周精品文檔暴露六個(gè)月后,病毒抗體檢測(cè)結(jié)果大致已轉(zhuǎn) 陽(yáng)性艾滋病EIA方法發(fā)展病毒量才僉測(cè)血液中病毒量(計(jì)數(shù)/亳升)? PCR (多聚酶鏈鎖反應(yīng))或bDNA讖歸影響開(kāi)始藥物治療的時(shí)間與藥物的選擇(若病毒量100,000/毫升,能預(yù)測(cè)病癥的發(fā)展?容許三倍的誤差存在:例如30,000可算是介乎10,000與90,000間的任何可能數(shù)值?同時(shí)發(fā)生的疾病和新近的疫苗注射可使檢測(cè)結(jié)果反常?臺(tái)療的目標(biāo):病毒量低于測(cè)量的限度-測(cè)不到尸 5窿升核酸檢測(cè)對(duì)血液安全的影響冤大利93家血液中心開(kāi)展核酸檢測(cè)2001年至2006年6年來(lái)對(duì)血液安全的影響結(jié)果
22、。資料來(lái)源:Transfusion. 2008 Oct;48(10):2205-13各種診斷檢測(cè)法的檢定HIVCD4計(jì)數(shù)彈位:計(jì)數(shù)/毫升或淋巴細(xì)胞中CD4的百分比?E常af數(shù):600-1200領(lǐng)型的下降:50-100/年-CD4是評(píng)估病人的至關(guān)重要的基礎(chǔ)-是確定HIV感染發(fā)展、抗病毒治療、預(yù)防機(jī)會(huì)性感染的依據(jù)鐺CD4200 ,大多數(shù)感染開(kāi)始麗時(shí)患有其他疾病和新近的疫苗注射可使檢測(cè)結(jié)果反常?期追蹤檢測(cè)是關(guān)鍵AIDS的正式診斷?DD4 200 或?AIDS的臨床表現(xiàn)從 HIV 到 AIDS訃能治愈?藥物可局部治療免疫缺陷并發(fā)疾病7藥物可抑制病毒,延長(zhǎng)壽命?乍病毒量(Viral Load)和免疫系統(tǒng)
23、(CD4計(jì)數(shù))的追蹤檢驗(yàn)精品文檔四、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制室內(nèi)質(zhì)量控制?式劑盒內(nèi)部對(duì)照:陽(yáng)性、陰性對(duì)照?室內(nèi)質(zhì)控品:外部質(zhì)控品。以此數(shù)據(jù)繪制質(zhì)控圖-Levey-Jennings質(zhì)控圖是最常用的質(zhì)控圖,該圖使用累計(jì)和技術(shù)或趨勢(shì)分析技術(shù)的圖形提供系統(tǒng)偏移和漂移的狀況。-即刻法”質(zhì)控方法是在對(duì)同一批外部質(zhì)控血清連續(xù)測(cè)定3次后,即可對(duì)第 3次檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行質(zhì)控。Levey-Jennings質(zhì)控圖繪制?在常規(guī)條件下,對(duì)同一批血清連續(xù)測(cè)定 20次(天)或以上,獲得一組S/CO值,求均數(shù)()和標(biāo)準(zhǔn)差(s),超出2s或3s的數(shù)據(jù)不應(yīng)刪除。?各均值()和標(biāo)準(zhǔn)差(s)分別在質(zhì)控框架圖中標(biāo)示出來(lái)。以S/CO值作縱座標(biāo)(Y軸)
24、,每一批次試驗(yàn)作橫座標(biāo)(x軸),繪制質(zhì)控圖。?從第21次起,將每次質(zhì)控血清的檢測(cè)結(jié)果依次點(diǎn)入該質(zhì)控框架圖中,檢驗(yàn)進(jìn)入質(zhì)控狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量考評(píng)?質(zhì)量控制是對(duì)從樣品接收到發(fā)出報(bào)告整個(gè)過(guò)程每個(gè)環(huán)節(jié)的管理過(guò)程,包括:人員能力;實(shí)驗(yàn)室分區(qū)和環(huán)境;儀器設(shè)備;-檢測(cè)過(guò)程(試劑、操作過(guò)程,外部質(zhì)控品使用)??荚u(píng)方式?發(fā)放外部質(zhì)控樣品?現(xiàn)場(chǎng)檢查?反饋與通報(bào)五、生物安全與職業(yè)暴露預(yù)防 生物安全保證措施?建立安全制度?培訓(xùn)和管理?個(gè)人保健和防護(hù)?安全操作精品文檔?使用利器注意事項(xiàng)? 虧染物處理7t外事故處理職業(yè)暴露后處理原則?及時(shí)原則2艮告原則?呆密原則依口情同意原則職業(yè)暴露后預(yù)防?局部急救? 寸暴露級(jí)別的評(píng)估?寸
25、暴露源的評(píng)估?預(yù)防性用藥2艮告與保密精品文檔HIV抗體的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)本章規(guī)定了 HIV抗體的檢測(cè)方法、程序、結(jié)果報(bào)告、檢測(cè)策略及質(zhì)量控制。適用于各級(jí)各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)、疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)、檢驗(yàn)檢疫機(jī)構(gòu)、采供血機(jī)構(gòu)及衛(wèi)生保健機(jī)構(gòu)??勺鳛閷?duì)HIV感染者診斷和監(jiān)測(cè)的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。HIV抗體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室要求應(yīng)符合全國(guó)艾滋病檢測(cè)工作管理辦法(2006年版)中對(duì)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室人員、建筑設(shè)施和設(shè)備等條件的要求。應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求(GB 19489-2004 )對(duì)II級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室(BSL-2 )的各項(xiàng)要求。實(shí)驗(yàn)室安全按本規(guī)范第八章規(guī)定執(zhí)行。實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量保證按本規(guī)范第九章規(guī)定執(zhí)行。HIV抗體檢測(cè)的目的HIV抗體檢測(cè)
26、可用于診斷、血液篩查、監(jiān)測(cè)等。以診斷為目的的檢測(cè)是為了確定個(gè)體HIV感染狀況,包括臨床檢測(cè)、自愿咨詢檢測(cè)、根據(jù)特殊需要進(jìn)行的體檢等。以血液篩查為目的的檢測(cè)是為了防止輸血傳播HIV,包括獻(xiàn)血員篩查和原料血漿篩查。以監(jiān)測(cè)為目的的檢測(cè)是為了解不同人群HIV感染率及其變化趨勢(shì),包括各類高危人群、 重點(diǎn)人群和一般人群。研究HIV抗體檢測(cè)的要點(diǎn)根據(jù)目的選擇檢測(cè)方法及檢測(cè)策略。嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室 SOP。篩查試驗(yàn)陽(yáng)性,須作確證試驗(yàn)。篩查試驗(yàn)陰性,不應(yīng)做確證試驗(yàn)。篩查及確證試驗(yàn)陽(yáng)性均應(yīng)做好咨詢工作。達(dá)到保證措施的必要條件貫徹有關(guān)HIV檢測(cè)的法規(guī)有效的檢測(cè)方法和檢測(cè)試劑常規(guī)質(zhì)量控制和質(zhì)量保證全國(guó)艾滋病檢測(cè)工作管理1
27、990. 全國(guó)HIV檢測(cè)管理規(guī)范(試行)1997.9.全國(guó)艾滋病檢測(cè)工作規(guī)范全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范(試行)-規(guī)范”辦法”?2004.8全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范2009.9全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范(修訂版)2006.6全國(guó)艾滋病檢測(cè)工作管理辦法-辦法”艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)信息上報(bào)精品文檔各級(jí)艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室所在機(jī)構(gòu)每月應(yīng)填寫(xiě)HIV抗體檢測(cè)數(shù)及陽(yáng)性人數(shù)統(tǒng)計(jì)報(bào)表(唯表6),并于每月10日前完成網(wǎng)絡(luò)直報(bào)。未開(kāi)展網(wǎng)絡(luò)直報(bào)的單位,由縣級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu) 收集信息后統(tǒng)一上報(bào)。HIV感染的實(shí)驗(yàn)診斷檢測(cè)方法HIV培養(yǎng),核酸測(cè)定,P24抗原檢測(cè),血清抗體測(cè)定金標(biāo)準(zhǔn)血清HIV抗體測(cè)定,HIV感染后平均25天檢出,待12
28、周時(shí)幾乎全檢出 HIV抗體檢測(cè)兩個(gè)階段(篩查和確證)三個(gè)程序(篩查復(fù)檢確證)五種標(biāo)本(血清,血漿,濾紙干血斑,唾液,尿液, )HIV感染后的血清學(xué)動(dòng)態(tài)血清學(xué)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的血清學(xué)檢測(cè)指用 EIA進(jìn)行篩查,然后用免疫印跡實(shí)驗(yàn)( WB)進(jìn)行確證。EIA篩查實(shí)驗(yàn)需要重復(fù),復(fù)測(cè)陽(yáng)性是做WB檢測(cè)的指征。如果抗原抗體聯(lián)合試劑檢測(cè)呈陽(yáng)性反應(yīng),而抗體試劑檢測(cè)為陰性反應(yīng),則應(yīng)進(jìn)行隨訪,必要時(shí)考慮進(jìn)行HIV-1 p24抗原或核酸檢測(cè)。HIV抗體篩查-篩查(-) 出具“HIV抗體陰性”報(bào)告篩查(+) 出具“HIV抗體待復(fù)檢”,不能出陽(yáng)性報(bào)告-復(fù)查填寫(xiě)“HIV抗體復(fù)檢檢測(cè)單,兩人簽字(檢驗(yàn)人員、審核人員)重新采集受檢者的血
29、樣原樣和新樣連同送樣單送確證實(shí)驗(yàn)室做好檢測(cè)前后咨詢初篩試驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告對(duì)HIV抗體篩查試驗(yàn),呈陰性反應(yīng)者可出具 HIV抗體陰性”報(bào)告(可用附表1);對(duì)初篩試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)者不能出陽(yáng)性報(bào)告,可出具“HIV抗體待復(fù)檢”報(bào)告(附表1)。初篩試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)樣品的轉(zhuǎn)送如需送上級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確,需要填寫(xiě)HIV抗體復(fù)檢檢測(cè)單(附表2),經(jīng)1名檢驗(yàn)人員和1名具有中級(jí)以上技術(shù)職稱的人員審核簽字。送當(dāng)?shù)匕滩『Y查中心實(shí)驗(yàn)室,再轉(zhuǎn)送艾滋病 確證實(shí)驗(yàn)室。檢測(cè)的方法一、檢測(cè)HIV抗體篩查方法.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA/EIA ).化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn).快速檢測(cè)(RT)及其它檢測(cè)試驗(yàn)精品文檔明膠顆粒凝集試驗(yàn)(PA)免疫滲
30、濾試驗(yàn)免疫層析試驗(yàn)二、確證試驗(yàn)方法免疫印跡試驗(yàn)(Western Blot)條帶免疫試驗(yàn)放射免疫沉淀試驗(yàn)(RIPA)免疫熒光試驗(yàn)(IFA)等。酶標(biāo)免疫技術(shù)(EIA)人員培訓(xùn) ELISA 原理;臨床意義;熟悉檢測(cè)技巧,熟悉檢測(cè)試劑性能(包括試劑盒組成,包被片段及其組成);熟悉檢測(cè)儀器的原理及性能;掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識(shí)。需經(jīng)有關(guān)部門(mén)組織的專門(mén)培訓(xùn)班,考試合格后持證上崗。方 法間接法Ag+Ab f Ag-Ab*Ag-Ab+IgG競(jìng)爭(zhēng)法 *Ag+Ab/Ab夾心法Ag+Ab f Ag-Ab*Ag-Ab+AgELISA檢測(cè)試劑根據(jù)其設(shè)計(jì)原理、抗原制備難易和歷史發(fā)展可粗分為四代。第一代產(chǎn)品是使用
31、HIV全病毒裂解物為抗原,應(yīng)用間接法原理檢測(cè)HIV抗體;第二代產(chǎn)品是使用在細(xì)菌或真菌中表達(dá)的人工重組或化學(xué)合成多肽HIV抗原,應(yīng)用間接法原理檢測(cè)HIV抗體。第三代試劑使用合成多肽HIV抗原(少數(shù)用重組抗原),應(yīng)用雙抗原(或雙抗體)夾心法原理檢測(cè)HIV抗體(或抗原)。第四代試劑是已超出只查抗體的傳統(tǒng)酶聯(lián)方法,可同時(shí)測(cè)出抗體和抗原。每一代HIV EIA 試劑實(shí)驗(yàn)原理HIV 窗口期”第一代 HIV Ab:6 - 8星期酶聯(lián)免疫試劑操作步驟試劑盒選擇必須使用經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)、批批檢合格、在有效期內(nèi)的試劑,試劑應(yīng) 從靈敏度,特異性,精密度,穩(wěn)定性,簡(jiǎn)便性,安全性及經(jīng)濟(jì)性作出全面的評(píng)價(jià)。敏
32、感性:是該方法能夠檢測(cè)出最弱陽(yáng)性標(biāo)本的能力, 真陽(yáng)性數(shù)敏感度x 100%真陽(yáng),f數(shù)+假陰性數(shù)精品文檔特異性:是該方法能夠檢測(cè)出真陰性標(biāo)本的能力。真陰性數(shù)X 100%特異度=真陰f數(shù)+假陽(yáng)性數(shù)精密度:ELISA試劑一般指其批內(nèi) CV,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時(shí)考察線性范圍 試劑盒選擇穩(wěn)定性:試劑在規(guī)定條件下能儲(chǔ)存的時(shí)間, 一般采用破壞性試驗(yàn)即將試劑存放于 37 c保存, 定期測(cè)定其靈敏度,特異性和精密度等指標(biāo), 直到其質(zhì)量指標(biāo)開(kāi)始下降為止, 通常認(rèn)為37 C 每穩(wěn)定一天相當(dāng)于 4-10C保存一個(gè)半月。簡(jiǎn)便性:指在不影響試劑的前三項(xiàng)指標(biāo)的前題下,實(shí)驗(yàn)和測(cè)定步驟越少越好,在定性試驗(yàn) 中結(jié)果判斷
33、簡(jiǎn)單明了,定量試驗(yàn)結(jié)果計(jì)算也應(yīng)簡(jiǎn)單。安全性:指試劑對(duì)操作者和環(huán)境安全無(wú)害無(wú)傳染性。經(jīng)濟(jì)性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過(guò)大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本而市場(chǎng)價(jià)格比較合 理。通過(guò)詢問(wèn)試劑包被物的組成,如原料來(lái)源(基因工程或合成多肽),片段的組合(按比例混合或化學(xué)合成),片段的長(zhǎng)短等判斷試劑的優(yōu)劣;試劑評(píng)價(jià)需要有權(quán)威的血清考核盤(pán)(Panel)進(jìn)行檢測(cè),由于 Panel 一般實(shí)驗(yàn)室不易取得,每進(jìn)行一次試劑評(píng)價(jià)也很麻煩??梢酝ㄟ^(guò)間接的信息對(duì)試劑進(jìn)行選擇。根據(jù)權(quán)威部門(mén)發(fā)布的試劑評(píng)價(jià)結(jié)果,了解市場(chǎng)上試劑的質(zhì)量?jī)?yōu)劣。 如參考中國(guó)CDC AIDS參比實(shí)驗(yàn)室組織的全 國(guó)HIV抗體診斷試劑臨床質(zhì)量評(píng)估結(jié)果對(duì)試劑進(jìn)行選擇。
34、儀器質(zhì)控為使儀器保持最佳工作狀態(tài)應(yīng)建立維護(hù)和校正儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP),所要控制的儀器包括移液器(加樣槍),水浴箱(溫箱),洗板機(jī)和酶標(biāo)儀。移液器:ELISA加樣量?。?-100 u D,其準(zhǔn)確性直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,利用稱重法檢查:吸取刻度指示量的水,萬(wàn)分之一天平稱重后計(jì)算吸量是否準(zhǔn)確,一般應(yīng)在土10%以內(nèi);水浴箱 經(jīng)常檢查水浴箱溫度計(jì)所示的溫度和水中(或溫箱內(nèi))實(shí)測(cè)溫度是否一致,允許 有土 1C的誤差;洗板機(jī) 每個(gè)廠家設(shè)置洗板后的殘留液有各自的規(guī)定一般不超過(guò)2ul ,人工扣板時(shí),墊紙不濕,定期檢查管孔是否堵塞;酶標(biāo)儀 經(jīng)常維護(hù)其光學(xué)部分,防止濾光片霉變,定期檢測(cè)校正,使其保持良好的工作性
35、 能。EIA結(jié)果判斷OD值各孔OD值是通過(guò)某一波長(zhǎng)的一束光自上而下照射,并檢測(cè)被液體吸收的光的量。Cut-off值(臨界值)是將檢測(cè)的陽(yáng)性和(或)陰性對(duì)照的OD值代入廠商提供的計(jì)算公式計(jì)算出來(lái)的判斷陽(yáng)性和陰性結(jié)果的界值。不同廠商、不同方法的試劑臨界值計(jì)算公式不同。EIA結(jié)果判斷有反應(yīng):樣本的 OD值 CUTOFF值無(wú)反應(yīng):樣本的 OD值v CUTOFF值精品文檔不確定(灰色區(qū)):CUTOFF值上下10% 灰區(qū)概念把定量分析的正常值范圍引入定性分析建立灰區(qū)概念,即將CO值上下的一段區(qū)域定為陽(yáng)性可疑,需重復(fù)實(shí)驗(yàn)或換試劑重測(cè)以確定其陰陽(yáng)性,如仍落在灰區(qū)范圍內(nèi)則報(bào)告 +(陽(yáng)性)。灰區(qū)概念對(duì)血站系統(tǒng)的獻(xiàn)
36、血員篩查尤為重要?;覅^(qū)的設(shè)置有二種:C.OX ( 1 CV), CV為該試劑的批內(nèi) CV (一般在15-20%間);C.O2s, s為實(shí)驗(yàn)室做室內(nèi)質(zhì)控 ROC的s。 EIA影響因素反應(yīng)時(shí)間溫度酶結(jié)合物的穩(wěn)定性影響ELISA試驗(yàn)效果常見(jiàn)問(wèn)題原因分析及解決辦法影響ELISA試驗(yàn)效果常見(jiàn)問(wèn)題原因分析及解決辦法 影響ELISA試驗(yàn)效果常見(jiàn)問(wèn)題原因分析及解決辦法 EIA試驗(yàn)的優(yōu)缺點(diǎn) 化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn)這類試劑采用發(fā)光或熒光底物,既可檢測(cè)抗體,也可聯(lián)合檢測(cè)抗原抗體。HIV抗原或抗體包被于固相載體,加入待檢本品和酶或熒光標(biāo)記的HIV抗原或抗體,加發(fā)光或熒光底物,用發(fā)光或熒光儀測(cè)定結(jié)果。有效試驗(yàn)的陰性和陽(yáng)
37、性對(duì)照必須符合試劑盒規(guī)定。 快速檢測(cè)(RT)及其它檢測(cè)試驗(yàn)明膠顆粒凝集試驗(yàn) (PA):是HIV血清抗體檢測(cè)的一種簡(jiǎn)便方法。將HIV抗原致敏明膠顆粒作為載體,與待檢樣品作用。當(dāng)待檢樣品含有 HIV抗體時(shí),明膠顆粒與抗體發(fā)生凝集反 應(yīng),根據(jù)凝集情況判讀結(jié)果。PA試劑有兩種:同時(shí)檢測(cè)HIV-1和HIV-2抗體以及分別檢測(cè)HIV-1和HIV-2抗體。有效試驗(yàn)必須有陰性和陽(yáng)性質(zhì)控。 凝集試驗(yàn)與ELISA的原理比較 凝集試驗(yàn)與ELISA操作步驟的比較 小 結(jié)操作簡(jiǎn)便,不需任何輔助設(shè)備可以單人份操作SFD HIV 1/2PA 可同時(shí)檢測(cè) HIV-1型(包括 O群)和HIV -2型抗體。由于使用了重組抗原及明
38、膠顆粒凝集技術(shù),試劑的敏感性和特異性均較高。對(duì)HIV血清轉(zhuǎn)化盤(pán)的研究顯示:敏感性與酶免法相當(dāng)特異性高于99.8%免疫滲濾試驗(yàn):斑點(diǎn)ELISA和斑點(diǎn)免疫膠體金(或膠體硒)快速試驗(yàn):均以硝酸纖維膜為載體,HIV抗原點(diǎn)狀固定在膜上,加待檢樣品。陽(yáng)性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色斑點(diǎn)。 反應(yīng)時(shí)間在10分鐘以內(nèi)。有效試驗(yàn)的質(zhì)控點(diǎn)必須顯色。免疫層析試驗(yàn):以硝酸纖維膜為載體,HIV抗原線狀固定在膜上, 待檢樣品(血液或唾液) 沿著固相載體遷移,陽(yáng)性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色條帶。有效試驗(yàn)的質(zhì)控帶必須顯色。此法操作簡(jiǎn)便,不需特殊儀器,出結(jié)果快,特別適合在未產(chǎn)前檢查的分娩孕婦、高危行為 的求診者、輸血前的急診者
39、、邊遠(yuǎn)地區(qū)供血者、VCT、急診室、解剖室、殯儀館以及意外暴露時(shí)追蹤傳染源等情況下使用。對(duì)于實(shí)驗(yàn)條件差,技術(shù)人員水平較低的發(fā)展中國(guó)家也較適用。精品文檔但其敏感性、特異性均較 ELISA法低,且檢測(cè)結(jié)果結(jié)果用肉眼判讀,易受主觀因素的影響, 不同的檢驗(yàn)人員觀察同一個(gè)結(jié)果可能會(huì)得出不同的結(jié)論,弱陽(yáng)性結(jié)果常常較難判別。 對(duì)篩查結(jié)果的解釋篩查檢測(cè)的目的是檢出所有的陽(yáng)性者,因此對(duì)篩查試劑的質(zhì)量要求是敏感性必須好,在注 重強(qiáng)調(diào)敏感性的情況下,特異性不可避免地受到影響。出現(xiàn)假陰性或假陽(yáng)性結(jié)果,同時(shí)還有可能出現(xiàn)的技術(shù)誤差等等。因此分析篩查結(jié)果時(shí),必須全面考慮。解釋結(jié)果要十分謹(jǐn)慎,這也是為什么篩查實(shí)驗(yàn)的陽(yáng)性結(jié)果不能
40、最終確定為HIV抗體陽(yáng)性,必須做確證實(shí)驗(yàn)才能下結(jié)論。 假陽(yáng)性結(jié)果一些含有針對(duì) HLA抗原的抗體患自身免疫性疾?。ㄈ缦到y(tǒng)性紅斑狼、風(fēng)濕病等 寄生蟲(chóng)(如瘧疾等) 其他病毒(如病毒性肝炎等) 近期疫苗接種(如流感疫苗接種等) 高丙種球蛋白癥技術(shù)誤差實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)技術(shù)誤差是難免的,特別是在一次做大批量檢測(cè)時(shí)。 血清標(biāo)本或試劑稀釋或配備不正確 加樣器污染或不正確 加錯(cuò)標(biāo)本臨近孔交叉污染 洗滌程序錯(cuò)誤 吸光檢測(cè)不正確 假陰性結(jié)果窗口期”感染者嚴(yán)重的HIV相關(guān)免疫紊亂者血清轉(zhuǎn)換期:一些病人在病程的晚期發(fā)生血清學(xué)轉(zhuǎn)換,可能由于免疫系統(tǒng)的崩潰所致; 也可能于HAART治療導(dǎo)致免疫重建的病人igG抗體缺乏者 抗原量過(guò)
41、量 對(duì)確證結(jié)果的解釋W(xué)B的檢測(cè)結(jié)果是在轉(zhuǎn)印條膜特異性HIV抗原的位置上出現(xiàn)深淺不同的條帶,按照不同的的帶型,最終結(jié)果可以判斷為HIV抗體陽(yáng)性、HIV抗體陰性、HIV抗體不確定。HIV抗體陽(yáng)性:說(shuō)明是真正感染了HIV ,為HIV感染者或AIDS。HIV抗體陰性:未感染 HIV 窗口期”感染者 對(duì)確證結(jié)果的解釋HIV抗體不確定:是一個(gè)比較令人困惑的問(wèn)題。不僅篩查陽(yáng)性的標(biāo)本可以出現(xiàn)不確定的 結(jié)果,篩查陰性的標(biāo)本做 WB檢測(cè)時(shí)也有大約15%出現(xiàn)一個(gè)或幾個(gè)抗原的不確定結(jié)果。早期感染:有過(guò) HIV感染危險(xiǎn)行為的個(gè)體。處在血清轉(zhuǎn)換的過(guò)程,出現(xiàn) P24最多見(jiàn),2-3 個(gè)月以后可以顯示確切的陽(yáng)性反應(yīng)。在WB條帶
42、中,P24、P31和P55比單獨(dú)P17預(yù)示早期感染的價(jià)值高得多。 對(duì)確證結(jié)果的解釋AIDS病人:在病程的晚期,可能喪失對(duì)P24抗原和其他抗原的反應(yīng)性而表現(xiàn)為持續(xù)的不確定結(jié)果。精品文檔非特異性反應(yīng):共同抗體的交叉反應(yīng),多見(jiàn)于膠原-血管疾病,自身免疫性疾病、惡性腫瘤、 高球蛋白血癥及其他病原微生物感染等。對(duì)不確定結(jié)果如何處理不論是哪種可能都應(yīng)進(jìn)行隨訪,結(jié)合流行病學(xué)資料,可以在4周后隨訪檢測(cè),如帶型沒(méi)有進(jìn)展或呈陰性反應(yīng), 則報(bào)告陰性;如隨訪期間出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng),則報(bào)告陽(yáng)性;如隨訪期間帶型有進(jìn)展,但不滿足陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn),應(yīng)繼續(xù)隨訪到8周。如帶型沒(méi)有進(jìn)展或呈陰性反應(yīng)則報(bào)告陰性; 滿足HIV抗體陽(yáng)性診斷標(biāo)準(zhǔn)則報(bào)告陽(yáng)
43、性,不滿足陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)可視情況決定是否繼續(xù)隨訪。對(duì)不確定結(jié)果如何處理隨訪期間可根據(jù)需要,檢測(cè)病毒核酸或 P24抗原作為輔助診斷。如果出現(xiàn) HIV-2型的特異 性指示條帶,根據(jù)實(shí)際情況需用 HIV-2型免疫印跡試劑再做 HIV-2的抗體確證試驗(yàn)或 HIV-2 核酸檢測(cè),以進(jìn)一步明確 HIV-2感染狀態(tài),疑難樣品送國(guó)家艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步分析。檢測(cè)與咨詢?nèi)珖?guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范(2009年修訂版)全國(guó)艾滋病檢測(cè)工作管理辦法共八章三十五條本辦法由衛(wèi)生部負(fù)責(zé)解釋,自發(fā)布之日起施行二。六年六月十二日本管理辦法適用于全國(guó)所有開(kāi)展艾滋病檢測(cè)工作的機(jī)構(gòu)第一章 總則目的:為加強(qiáng)對(duì)全國(guó)艾滋病檢測(cè)工作的監(jiān)督管理,規(guī)
44、范艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置和驗(yàn)收,確保艾滋病檢測(cè)工作質(zhì)量依據(jù):中華人民共和國(guó)傳染病防治法、艾滋病防治條例和國(guó)家相關(guān)法律、法規(guī)的規(guī)定,衛(wèi)生部對(duì)1997年頒布的全國(guó)艾滋病檢測(cè)工作規(guī)范進(jìn)行了補(bǔ)充修改,制訂了全國(guó)艾滋病檢測(cè)工作管理辦法衛(wèi)生部主管全國(guó)艾滋病檢測(cè)及其監(jiān)督管理工作,縣級(jí)以上地方衛(wèi)生行政部門(mén)主管轄區(qū)內(nèi)的艾滋病檢測(cè)及其監(jiān)督管理工作。中國(guó)疾病預(yù)防控制中心及各省、自治區(qū)、直轄市疾病預(yù)防控制中心承擔(dān)艾滋病檢測(cè)的日常管理工作。各級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、采供血機(jī)構(gòu)、計(jì)劃生育技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)等承擔(dān)職責(zé)范圍內(nèi)的艾滋病檢測(cè)工作, 并接受中國(guó)疾病預(yù)防控制中心及省、自治區(qū)、直轄市疾病預(yù)防控制中心的業(yè)務(wù)指導(dǎo)。第二章艾
45、滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置省級(jí)以上衛(wèi)生行政部門(mén)根據(jù)醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)布局和艾滋病流行情況,統(tǒng)籌規(guī)劃確定承擔(dān)艾滋病檢測(cè)工作的實(shí)驗(yàn)室。國(guó)家對(duì)艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室實(shí)行分類管理,按照實(shí)驗(yàn)室的職能、開(kāi)展檢測(cè)工作的性質(zhì)及范圍共分三類實(shí)驗(yàn)室,分別是艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室、艾滋病檢測(cè)確證實(shí)驗(yàn)室、艾滋病檢測(cè)篩查實(shí)驗(yàn) 室。艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室設(shè)在中國(guó)疾病預(yù)防控制中心。精品文檔其職能包括:1、承擔(dān)全國(guó)艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)建設(shè)的業(yè)務(wù)技術(shù)指導(dǎo)和評(píng)價(jià)工作。2、建立全國(guó)艾滋病檢測(cè)質(zhì)量保證及質(zhì)量控制體系,組織國(guó)家級(jí)實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證和艾滋病診 斷試劑臨床質(zhì)量評(píng)估。3、承擔(dān)艾滋病檢測(cè)疑難樣品的分析和確證,對(duì)有爭(zhēng)議的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行仲裁,出具最終
46、檢測(cè) 報(bào)告。4、開(kāi)展應(yīng)用性研究,承擔(dān)與艾滋病防治相關(guān)的病原學(xué)鑒定、現(xiàn)場(chǎng)綜合防治、調(diào)研、監(jiān)測(cè)、 臨床治療等工作中的相關(guān)檢測(cè)任務(wù)。5、建立國(guó)家艾滋病病毒毒種庫(kù)、樣品庫(kù)、質(zhì)控品庫(kù)、基因庫(kù)和細(xì)胞庫(kù)。6、為艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展省級(jí)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理、省級(jí)艾滋病診斷試劑臨床質(zhì)量評(píng)估和自愿咨詢檢測(cè)等工作提供技術(shù)支持和指導(dǎo)。7、組織全國(guó)艾滋病檢測(cè)相關(guān)業(yè)務(wù)培訓(xùn),組織制定和修改與艾滋病檢測(cè)工作有關(guān)的技術(shù)規(guī)范和指南。艾滋病檢測(cè)確證實(shí)驗(yàn)室包括艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室和艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室。艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室設(shè)在省級(jí)疾病預(yù)防控制中心。艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室可設(shè)在疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、血液中心、計(jì)劃生育技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)等。艾滋病確
47、證中心實(shí)驗(yàn)室職能負(fù)責(zé)職責(zé)范圍內(nèi)艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)建設(shè)的業(yè)務(wù)技術(shù)指導(dǎo)和評(píng)價(jià),組織艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn) 室人員技術(shù)培訓(xùn)。建立艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制體系,組織省級(jí)實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證和艾滋病診斷試劑的臨床 質(zhì)量評(píng)估。承擔(dān)省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)指定區(qū)域內(nèi)的艾滋病病毒抗體確證、抗體篩查和其他艾滋病檢測(cè)工 作。開(kāi)展應(yīng)用性研究,承擔(dān)與艾滋病防治相關(guān)的病原學(xué)鑒定、現(xiàn)場(chǎng)綜合防治、調(diào)研、監(jiān)測(cè)、臨 床治療等工作中相關(guān)的檢測(cè)任務(wù)。建立職責(zé)范圍內(nèi)的艾滋病檢測(cè)樣品庫(kù)和質(zhì)控品庫(kù)。收集、整理和分析艾滋病檢測(cè)數(shù)據(jù)及相關(guān)資料,建立艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室基本資料庫(kù)和艾滋 病檢測(cè)資料數(shù)據(jù)庫(kù)。定期向省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)和中國(guó)疾病預(yù)防控制中心報(bào)告艾滋病檢測(cè)數(shù)據(jù)
48、 及相關(guān)資料,并配合其做好個(gè)案調(diào)查、登記等隨訪工作。負(fù)責(zé)對(duì)開(kāi)展自愿咨詢檢測(cè)工作的艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)支持和指導(dǎo)。艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室職能承擔(dān)當(dāng)?shù)匦l(wèi)生行政部門(mén)指定的艾滋病病毒抗體確證、抗體篩查和其他艾滋病檢測(cè)工作。及時(shí)向艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室報(bào)告經(jīng)確證的陽(yáng)性結(jié)果,并配合其做好個(gè)案調(diào)查、登記等隨 訪工作。承擔(dān)當(dāng)?shù)匦l(wèi)生行政部門(mén)指定的艾滋病檢測(cè)篩查實(shí)驗(yàn)室的業(yè)務(wù)技術(shù)指導(dǎo)、培訓(xùn)和評(píng)價(jià)任務(wù)。定期匯總艾滋病檢測(cè)資料,并上報(bào)艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室和同級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)。協(xié)助艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展自愿咨詢檢測(cè)工作,給予技術(shù)支持和指導(dǎo)。艾滋病檢測(cè)篩查實(shí)驗(yàn)室包括艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室、艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室和艾滋病檢測(cè)點(diǎn)。艾滋病篩查中心
49、實(shí)驗(yàn)室設(shè)在市(地)級(jí)疾病預(yù)防控制中心;艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室和艾滋病檢測(cè)點(diǎn)可設(shè)在疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、采供血機(jī)構(gòu)、計(jì)精品文檔劃生育技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)等。艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室職能(1)開(kāi)展艾滋病病毒抗體的篩查試驗(yàn),根據(jù)需要可開(kāi)展其他艾滋病檢測(cè)工作。(2)負(fù)責(zé)將艾滋病病毒抗體篩查呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品送當(dāng)?shù)匕滩『Y查中心實(shí)驗(yàn)室或艾滋 病檢測(cè)確證實(shí)驗(yàn)室。(3)定期匯總艾滋病檢測(cè)資料,并上報(bào)當(dāng)?shù)匕滩『Y查中心實(shí)驗(yàn)室或艾滋病檢測(cè)確證實(shí) 驗(yàn)室。(4)對(duì)自愿咨詢檢測(cè)工作提供技術(shù)支持。 艾滋病檢測(cè)點(diǎn)職能(1)開(kāi)展艾滋病病毒抗體的篩查試驗(yàn)。(2)負(fù)責(zé)將艾滋病病毒抗體篩查呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品送當(dāng)?shù)匕滩『Y查實(shí)驗(yàn)室或艾滋病篩 查中心實(shí)
50、驗(yàn)室。(3)定期匯總艾滋病檢測(cè)資料,并上報(bào)當(dāng)?shù)匕滩『Y查實(shí)驗(yàn)室或艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室。(4)開(kāi)展艾滋病自愿咨詢檢測(cè)工作。第三章艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的驗(yàn)收開(kāi)展艾滋病檢測(cè)工作的實(shí)驗(yàn)室要經(jīng)過(guò)技術(shù)和條件驗(yàn)收,未經(jīng)驗(yàn)收或驗(yàn)收不合格的實(shí)驗(yàn)室不得開(kāi)展艾滋病檢測(cè)工作。設(shè)立艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的機(jī)構(gòu)或單位應(yīng)向省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)提交申請(qǐng)書(shū)。省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)組織專家組按照艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室基本標(biāo)準(zhǔn)”(見(jiàn)附件),對(duì)艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室人員業(yè)務(wù)能力、設(shè)施、條件等進(jìn)行驗(yàn)收。艾滋病檢測(cè)確證實(shí)驗(yàn)室的驗(yàn)收省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)組織專家組對(duì)申請(qǐng)材料進(jìn)行審查,對(duì)符合規(guī)定、材料齊全的申請(qǐng)者, 組織有國(guó)家級(jí)專家參加的省級(jí)艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收專家組進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)驗(yàn)
51、收。省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)對(duì)通過(guò)驗(yàn)收者發(fā)出合格通知,同時(shí)抄送省級(jí)疾病預(yù)防控制中心,未通過(guò)驗(yàn)收者整改后可重新提出申請(qǐng)。艾滋病檢測(cè)篩查實(shí)驗(yàn)室的驗(yàn)收省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)組織專家組對(duì)申請(qǐng)材料進(jìn)行審查,對(duì)符合規(guī)定、材料齊全的申請(qǐng)者,由省級(jí)(或市地級(jí))艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收專家組進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)驗(yàn)收。省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)對(duì)通過(guò)驗(yàn)收者發(fā)出合格通知, 同時(shí)抄送省級(jí)疾病預(yù)防控制中心,未通過(guò)驗(yàn)收者整改后可重新提出申請(qǐng)。省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)在組織對(duì)采供血機(jī)構(gòu)執(zhí)業(yè)驗(yàn)收時(shí), 應(yīng)選派艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收專家組 專家參加對(duì)采供血機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室的驗(yàn)收。采供血機(jī)構(gòu)取得執(zhí)業(yè)許可后, 抄送省級(jí)疾病預(yù)防控制中心備案。遷移艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室或變更艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的類別
52、,按本辦法上述規(guī)定重新申請(qǐng)驗(yàn) 收。省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)應(yīng)將艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收情況對(duì)外公布,并接受相關(guān)部門(mén)的監(jiān)督檢查。第四章艾滋病檢測(cè)工作要求艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)在規(guī)定的職能范圍內(nèi)開(kāi)展檢測(cè)工作,遵守國(guó)家法律、法規(guī)和有關(guān)規(guī)范。檢測(cè)技術(shù)及程序應(yīng)符合全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范的要求。艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員需要經(jīng)過(guò)相關(guān)的業(yè)務(wù)培訓(xùn),經(jīng)考核合格者由相關(guān)機(jī)構(gòu)發(fā)給培訓(xùn)證書(shū),持證上崗。非衛(wèi)生專業(yè)技術(shù)人員不得從事艾滋病檢測(cè)工作。必須由同級(jí)或上級(jí)計(jì)量認(rèn)證部門(mén)艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中使用國(guó)家規(guī)定需要強(qiáng)檢的儀器設(shè)備,精品文檔定期檢定,非國(guó)家強(qiáng)檢的儀器設(shè)備應(yīng)定期要求廠家或供應(yīng)部門(mén)維護(hù)和校準(zhǔn)。艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中使用的檢測(cè)試劑必須是經(jīng)國(guó)家
53、食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)、且符合相關(guān)要求的試劑。艾滋病檢測(cè)篩查實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)艾滋病病毒抗體篩查呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品必須及時(shí)送艾滋病檢 測(cè)確證實(shí)驗(yàn)室,不得擅自處理。艾滋病檢測(cè)確證實(shí)驗(yàn)室收到送檢樣品后應(yīng)盡快進(jìn)行確證試驗(yàn),最遲不得超過(guò)十個(gè)工作日, 一次性檢測(cè)大量樣品等特殊情況除外。艾滋病檢測(cè)確證實(shí)驗(yàn)室出具的艾滋病病毒抗體確證報(bào)告應(yīng)以保密方式發(fā)送。艾滋病病毒抗 體確證試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)當(dāng)告知本人;本人為無(wú)行為能力人或者限制行為能力人的,應(yīng)當(dāng)告知其監(jiān)護(hù)人。艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有專人負(fù)責(zé)妥善保存檢測(cè)記錄和各種檔案,不得擅自修改和銷(xiāo)毀。記錄保存期不少于十年,國(guó)家法律、法規(guī)另有規(guī)定的,依照有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。艾滋病檢測(cè)工作應(yīng)遵守自愿和
54、知情同意原則,國(guó)家法律、法規(guī)另有規(guī)定的除外。艾滋病自愿咨詢檢測(cè)需按艾滋病免費(fèi)自愿咨詢檢測(cè)管理辦法(試行)執(zhí)行。艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室工作人員不得泄露艾滋病病人或感染者的姓名、住址、檢測(cè)結(jié)果等有關(guān)情況。第五章艾滋病檢測(cè)工作中的生物安全艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按照國(guó)家有關(guān)法律、法規(guī)的相關(guān)規(guī)定,對(duì)污染場(chǎng)所、物品以及醫(yī)療廢棄物進(jìn)行消毒和無(wú)害化處置,遵循標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)原則”,防止實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外污染。艾滋病檢測(cè)工作中涉及到艾滋病病毒毒種(株)和檢測(cè)樣品的采集、保藏、攜帶、運(yùn)輸,必須符合衛(wèi)生部的有關(guān)規(guī)定。艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室必須執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求 (GB 19489-2004 )的要求及衛(wèi)生部的有關(guān)規(guī)定。艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室人員
55、發(fā)生職業(yè)暴露后,應(yīng)按照醫(yī)務(wù)人員艾滋病病毒職業(yè)暴露防護(hù)工 作指導(dǎo)原則(試行)及其它相關(guān)規(guī)定及時(shí)處理。第六章實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)對(duì)全國(guó)艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)質(zhì)量進(jìn)行檢查。艾滋病確證中心實(shí) 驗(yàn)室負(fù)責(zé)對(duì)職責(zé)范圍內(nèi)的艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)質(zhì)量進(jìn)行檢查。艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立健全實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證和質(zhì)量控制體系,并有專人負(fù)責(zé)質(zhì)量體系的 正常運(yùn)轉(zhuǎn)。艾滋病檢測(cè)篩查實(shí)驗(yàn)室必須參加省級(jí)以上實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證;艾滋病檢測(cè)確證實(shí)驗(yàn)室必須參 加中國(guó)疾病預(yù)防控制中心組織的實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證。艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證結(jié)果由組織者定期公開(kāi)發(fā)布。第七章監(jiān)督管理各級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)對(duì)艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的監(jiān)督管理工作。實(shí)驗(yàn)室未經(jīng)驗(yàn)收或驗(yàn)收不合格擅自開(kāi)展艾滋病檢測(cè)工作的,由本級(jí)或上級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)責(zé)令限期改正,并通報(bào)批評(píng)。艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
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