最新液相色譜儀操作規(guī)程

1、高效液相色譜系統(tǒng)操作規(guī)程目的規(guī)范高效液相色譜系統(tǒng)的使用和維護。范圍本規(guī)程適用于高效液相色譜系統(tǒng)的使用和維護。職責質檢室儀器分析員負責高效液相色譜系統(tǒng)的日常使用和維護。系統(tǒng)組成本系統(tǒng)由多溶劑輸送系統(tǒng)（有梯度控制器的高壓輸液泵）、Waters在線脫氣機、 自動進樣器、紫外檢測器、熒光檢測器、色譜工作站/電腦等組成。程序準備使用前應根據待檢樣品的檢驗方法準備所需的流動相（應足夠；流動相必 須用0.45 u m濾膜過濾）、樣品和標準溶液（也可在平衡系統(tǒng)時配制），更換合 適的色譜柱（柱進出口位置應與流動相流向一致）和定量環(huán)。通電前應檢查儀器設備之間的電源線、數據線和輸液管道是否連接正常。5.2.開機和泵

2、操作開機接通電源，依次液相色譜主機，待檢測器自檢結束顯示測量狀態(tài)時，打 開打印機、電腦顯示器、主機。打開工作站在線軟件，輸入用戶名和密碼，按OK注冊進入系統(tǒng)主界 面。更換溶劑，在工作站上，脫氣運行。5.3.平衡系統(tǒng)（分兩種情況進行）等度模式每次以0.1ml/min的增量加大流速至1ml/min，以超純水沖洗系統(tǒng)10min。檢查管路連接、柱接口及泵頭處是否漏液，如漏液應予以排除。觀察泵控制屏幕上的壓力值，壓力波動應在平均值的510%以內。如超 出此范圍，可初步判斷為柱前管路仍有氣泡。壓力波動平穩(wěn)后，換檢驗方法規(guī)定的流動相比例沖洗系統(tǒng)。在檢查基線 穩(wěn)定性前，讓最少56倍柱體積的流動相通過系統(tǒng)。觀察

3、基線和壓力變化。如果沖洗至基線漂移10-3Au/min，噪聲為10-4Au 數量級，且壓力平穩(wěn)時，可認為系統(tǒng)已達到平衡狀態(tài)，可以進樣。5.3.2.梯度模式按檢驗方法規(guī)定的條件沖洗平衡系統(tǒng)，并注意壓力波動變化和排氣泡。在進樣前運行12次空白梯度。進樣，運行自動進樣，直至完成。數據處理，運行離線工作站，記錄相關數據。清洗系統(tǒng)和關機數據采集完畢后，關閉檢測器，繼續(xù)以工作流動相沖洗10min后，換水沖 洗。C18柱先用超純水以1ml/min沖洗40min以上，再用甲醇或乙臘沖洗 20min。清洗完成后，先將流速降到0，再關閉主機，斷開電源。填寫使用記錄6簡單維護與故障排除一、泵的故障及排除方法1、泵壓

4、力變化較大或沒有流動相流出，又無壓力指示（1）原因是泵內有大量氣體?？纱蜷_排放閥，使泵在較大流量下運轉，將氣泡排盡；也可 以用一個50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體。（2）原因是高壓密封環(huán)變形，產生漏液。必須更換密封環(huán)；平時注意不要超出規(guī)定的最高 僅供學習與交流，如有侵權請聯(lián)系網站刪除謝謝3壓力。2、泵流量或壓力不穩(wěn)（1）原因是砂濾棒內有氣泡或被鹽的微晶?；蛞缟奈⑸锊糠侄氯??？尚断律盀V棒浸入10%硝酸內超聲除去微生物或鹽溶解，或浸入流動相內超聲除氣泡。再用蒸餾水立即清洗。（2）原因是系統(tǒng)內有氣泡?？杉哟罅髁颗懦鰵馀?。（3）原因是單向閥有異物?？尚断聠蜗蜷y，放入燒杯中，加10%稀硝酸，用超聲

5、波清洗20分鐘后，再用干凈蒸餾水清洗。3、泵壓力過高原因是管路被堵塞，需要卸下管道清除和清洗；壓力過低的原因是管路滴漏，可扳緊各接口 和更換損壞的管道。4、鍵開關按下，泵不運行，只有嗡嗡電流聲此故障原因是電機缺相，電機線圈被燒壞一組 或活塞被生銹卡住，應視情況給予排除。二、紫外檢測器的故障及排除方法1、系統(tǒng)內有氣泡（1）如果氣泡連續(xù)不斷地通過流動池，將使噪聲增大。必須對流動相進行充分除氣。檢查系統(tǒng)各條導管是否漏氣。如果導管損壞，必須更換并固緊各接口，加大系統(tǒng)流量驅除氣 泡。有條件的藥廠可配備一部脫氣機。（2）如果氣泡流在檢測器的流動池內，也可使噪音增大。用手指壓緊流動池出口，使池內增壓，再快速

6、放出流動相。反復操作數次，但注意不要使壓 力增加太大，以免流動池破裂或色譜柱沖壞。2、流動相被污染當流動池被污染時，可能產生噪音或基線漂移?？捎盟蚣状嫉热軇_洗檢測池（要注意溶 劑的互溶性)。如果污染嚴重，就需要依次使用1mol/L硝酸、水和新鮮溶劑沖洗，或取出 池體清洗，更換窗口。3、光源燈出現(xiàn)故障當氘燈使用到極限或者不能正常工作時，可能產生嚴重噪音，基線漂移，出現(xiàn)平頭峰或齒形 等異常峰，甚至基線不能回零。這時必須更換氘燈(一般氘燈壽命10002000小時)。4、倒峰倒峰的出現(xiàn)，可能是檢測器的極性接反。更正后即可將其轉復為正峰。如果流動相中含有紫外吸收的雜質時，無吸收的組分就會產生倒峰。對此，改為高純 度的溶劑為流動相。在死時間附近的尖銳峰，往往是由進樣時的壓力變化或者由于樣品溶劑與流動相不同 所引起的。三、本規(guī)程自2008年12月15日起發(fā)布實施。起草人：批準人：上腔靜脈肺靜脈主幼脈右心房右心室下腔靜脈身體上部 毛細血管肺部毛細血管肺動脈左心房左心室腹部毛細血管身體下部 毛細血管體循環(huán)和肺循環(huán)體循