四體病毒學(xué)總論課件

1、異常增殖與干擾現(xiàn)象 病毒異常增殖：不能組裝成完整的病毒體 頓挫感染 abortive infection (宿主細(xì)胞的原因) 缺陷病毒 defective viruses (病毒本身的原因) 輔助病毒 helper viruses病毒的干擾現(xiàn)象 當(dāng)兩種病毒同時感染同一細(xì)胞時，可發(fā)生一種病毒的增殖抑制另一種病毒增殖的現(xiàn)象第四節(jié) 病毒的遺傳與變異遺傳特點1、遺傳方式簡單2、受宿主細(xì)胞影響3、易發(fā)生突變突變株 (mutant)：由基因突變產(chǎn)生的病毒表型性狀改變的毒株。 溫度敏感突變株 2835可以復(fù)制， 3740不能復(fù)制-脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗 突變株能穩(wěn)定地存在，可在相應(yīng)的宿主或細(xì)胞中傳代或存活。重

2、組 (recombination) 幾種具有親緣關(guān)系的病毒感染同一宿主細(xì)胞時發(fā)生基因的交換，產(chǎn)生具有兩個親代特征的子代病毒，并能增殖繁殖。整合 (integration)病毒感染宿主細(xì)胞的過程中，有時病毒基因組中DNA片段插入到宿主染色體DNA中重組過程。既可引起病毒基因的變異，也可引起宿主細(xì)胞染色體基因的變異，導(dǎo)致細(xì)胞轉(zhuǎn)化發(fā)生腫瘤等。表型混合 (phenotypic mixing)基因產(chǎn)物間相互作用；裝配過程發(fā)生錯誤形成；主要表現(xiàn)為耐藥性，抗原性等改變，基因并未改變，改變的生物學(xué)性狀不能遺傳。第五節(jié) 理化因素對病毒的影響病毒受理化因素作用后，失去感染性，稱為滅活（inactivation）。

3、滅活的病毒仍保留其抗原性、紅細(xì)胞吸附、血凝和細(xì)胞融合等特性。一、物理因素 1. 溫度 2. pH 3. 射線二、化學(xué)因素 1. 脂溶劑 2. 化學(xué)消毒劑第六節(jié) 病毒的分類一、病毒的分類原則核酸類型與結(jié)構(gòu)；病毒體的形狀和大??；病毒體的形態(tài)結(jié)構(gòu)；對脂溶劑的敏感性等。DNA病毒、RNA病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒三大類二、非尋常病毒（亞病毒）1. 衛(wèi)星病毒（satellites） 基因組為5002000 個核苷酸的單鏈RNA。2. 類病毒（viroids） 基因組為200400個單鏈環(huán)狀RNA，有二級結(jié)構(gòu)，不含蛋白質(zhì)。3. 朊病毒（prion） 也稱為蛋白侵染顆粒，其生物學(xué)地位待定。結(jié)構(gòu)僅由一種耐蛋白酶K的蛋白

4、分子組成。病毒的感染與免疫This Khmer woman died of hepatoma.Source: Patricia Walker, MDPrimary Hepatocellular Carcinoma (PHC) 病毒進(jìn)入機(jī)體，在細(xì)胞中增殖的過程稱為病毒感染。病毒感染的結(jié)果取決于病毒與宿主力量的對比，發(fā)病取決于病毒的毒力和機(jī)體抵抗力的強(qiáng)弱對比。兩者的平衡關(guān)系被打破，則導(dǎo)致疾病的發(fā)生。第一節(jié) 病毒的傳播方式水平傳播是病毒在人群中不同個體之間的傳播，如呼吸道、消化道、泌尿生殖道、輸血、注射、機(jī)械損傷和昆蟲叮咬等而感染機(jī)體。一、水平傳播主要感染途徑傳播方式與媒介病毒種類呼吸道空氣、飛沫流

5、感病毒、麻疹病毒等消化道污染水或食物脊髓灰質(zhì)炎病毒、輪狀病毒等輸血、注射或器官移植污染血或血制品、醫(yī)療器械等HIV、HBV、HCV等眼或泌尿生殖道接觸、游泳池或性接觸HIV、HPV破損皮膚昆蟲叮咬、狂犬、鼠類腦炎病毒、出血熱病毒等病毒水平傳播的途徑二、垂直傳播 存在母體的病原體通過胎盤或產(chǎn)道由親代傳播給子代的方式。除此之外，還可通過哺乳、密切接觸和感染生殖細(xì)胞。已知有十余種病毒可致垂直感染，其中以HBV、HIV為多見。 第二節(jié) 病毒的感染類型病毒侵入機(jī)體后，只在入侵部位感染，稱為局部感染或表面感染。不引起臨床癥狀的稱為隱性感染或亞臨床感染；出現(xiàn)臨床癥狀稱為顯性感染或感染性疾病。根據(jù)臨床癥狀的長

6、短，又可分為急性與慢性感染等?？赡芘c入侵機(jī)體的病毒數(shù)量少、毒力弱及機(jī)體抵抗力強(qiáng)有關(guān)，致使病毒在體內(nèi)不能大量增殖。多數(shù)人可獲得對該病毒的特異性主動免疫，病原體被清除，從而終止感染。隱性感染者 有可能排毒病毒攜帶者傳染源一、隱性感染二、顯性感染2. 持續(xù)性感染 （1）慢性感染 （2）潛伏性感染 （3）慢發(fā)病毒感染或遲發(fā)感染1. 急性病毒感染第三節(jié) 病毒感染的致病機(jī)理(一) 對宿主細(xì)胞的致病作用 殺細(xì)胞效應(yīng) 穩(wěn)定狀態(tài)感染 包涵體形成 細(xì)胞凋亡 基因整合與細(xì)胞轉(zhuǎn)化1) 殺細(xì)胞效應(yīng) (cytocidal effect)病毒在感染細(xì)胞內(nèi)增殖，引起細(xì)胞的裂解死亡正常細(xì)胞細(xì)胞病變作用(CPE) 2) 穩(wěn)定狀態(tài)

7、感染為特異性Ag或CTL細(xì)胞識別新抗原多核巨細(xì)胞多核巨細(xì)胞概念：某些受病毒感染的細(xì)胞內(nèi)，用普通光學(xué)顯微鏡可看到有與正常細(xì)胞結(jié)構(gòu)和著色不同的圓形或橢圓形的斑快。意義：病毒感染的診斷依據(jù)。3) 包涵體 (inclusion body)狂犬病毒包涵體（Negri body）4) 細(xì)胞凋亡 (apoptosis)誘導(dǎo)因子（如病毒等）細(xì)胞凋亡基因激活細(xì)胞膜鼓泡細(xì)胞核濃縮染色體DNA降解電泳時有階梯式條帶形成凋亡小體細(xì)胞核細(xì)胞核細(xì)胞核5) 基因整合與細(xì)胞轉(zhuǎn)化結(jié)果：細(xì)胞轉(zhuǎn)化或腫瘤形成與人類腫瘤相關(guān)的病毒病毒科與人類相關(guān)的腫瘤病毒嗜肝DNA病毒 肝細(xì)胞癌 HBV皰疹病毒 鼻咽癌 EBV Burkitt淋巴瘤

8、EBV Kaposi肉瘤 HHV-8乳多空病毒 乳頭狀瘤 HPV亞型 宮頸癌 HPV-16、18逆轉(zhuǎn)錄病毒 成人T細(xì)胞白血病 HTLV-1(二) 病毒感染的免疫病理作用3、病毒對免疫系統(tǒng)的損傷2、有些病毒感染后，呈穩(wěn)定狀態(tài)感染，使細(xì)胞失去某些功能或出現(xiàn)新抗原4、免疫復(fù)合物引起損傷1、抗體增強(qiáng)病毒感染作用第四節(jié) 抗病毒免疫一、非特異性免疫1、屏障作用2、吞噬細(xì)胞的作用3、干擾素獲得性非特異性免疫干擾素定 義：由病毒或其他干擾素誘生劑刺激人或動物 細(xì)胞所產(chǎn)生的一類具有抗病毒、抗腫瘤和 免疫調(diào)節(jié)作用的糖蛋白。種 類：種類產(chǎn)生細(xì)胞 抗病毒 抗腫瘤 免疫調(diào)節(jié) 人白細(xì)胞 強(qiáng) 弱 弱 人成纖維細(xì)胞 強(qiáng) 弱

9、弱 T細(xì)胞 弱 強(qiáng) 強(qiáng)廣譜抗病毒，但只能抑制病毒，且有種屬特異性干擾素的抗病毒作用機(jī)制：是通過受感染靶細(xì)胞上的干擾素受體，經(jīng)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制等一系列生化反應(yīng)，通過調(diào)控宿主細(xì)胞的基因，使之合成抗病毒蛋白實現(xiàn)對病毒的抑制作用。二、特異性免疫1. 體液免疫 包括中和抗體和非中和抗體，對機(jī)體具有保護(hù)作用的主要是中和抗體，中和抗體主要包括三類免疫球蛋白：IgM、IgG和IgA。病毒 中和抗體 失去感染性2. 細(xì)胞免疫 進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的病毒，主要依靠殺傷性T細(xì)胞（CTL）和輔助性T細(xì)胞（Th）釋放的細(xì)胞因子發(fā)揮抗病毒作用。細(xì)胞免疫主要在病毒感染的局部發(fā)揮作用，通過免疫細(xì)胞和靶細(xì)胞的接觸或在局部釋放細(xì)胞因子清除病毒

10、。第25章 檢查方法與防治原則第一節(jié) 病毒感染的檢查方法一、標(biāo)本采集與送檢標(biāo)本采集： 早期；不同病變?nèi)〔煌瑯?biāo)本標(biāo)本處理： 無菌操作；雜菌標(biāo)本+抗生素冷藏速送： 快速送檢；冷藏（-70）血清學(xué)標(biāo)本： 雙份血清，效價升高4倍有診斷價值光鏡、電鏡分離培養(yǎng)免疫熒光ELISA分子生物學(xué)技術(shù)Southern blotPCR病毒感染的檢測方法二、分離與鑒定動物接種雞胚接種組織培養(yǎng)器官培養(yǎng)移植培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)原代細(xì)胞培養(yǎng)二倍體細(xì)胞培養(yǎng)傳代細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)方法二、病毒分離培養(yǎng)的方法1. 動物接種：如鼠、兔、犬、牛和猴等。2. 雞胚接種：針對有些病毒，如流感病毒、痘病毒。3. 細(xì)胞培養(yǎng)：有三種類型的細(xì)胞。（1）細(xì)胞類型原

11、代細(xì)胞：從標(biāo)本中分離病毒。傳代細(xì)胞：可在體外連續(xù)傳代的細(xì)胞。二倍體細(xì)胞：體外連續(xù)傳代50100代后，仍保持其二倍染色體數(shù)目的細(xì)胞。（2）病毒增殖指標(biāo) 細(xì)胞病變效應(yīng)（cytopathic effect, CPE）：溶細(xì)胞型病毒感染細(xì)胞后，可出現(xiàn)細(xì)胞團(tuán)縮、裂解或細(xì)胞腫大、數(shù)個細(xì)胞融合成多核巨細(xì)胞或細(xì)胞聚集成葡萄串狀、脫落或死亡等。未接種病毒的細(xì)胞 CPE的細(xì)胞（Hela細(xì)胞，柯薩奇病毒感染） 血吸現(xiàn)象：感染細(xì)胞膜上帶有病毒血凝素與加入的紅細(xì)胞結(jié)合。 干擾現(xiàn)象：當(dāng)兩種病毒感染同一種細(xì)胞時，常發(fā)生一種病毒抑制另一種病毒復(fù)制增殖的現(xiàn)象。 （3）病毒定量方法 空斑形成單位（PFU）：測定病毒數(shù)量可用空斑形

12、成單位。一個空斑是標(biāo)本中一個病毒大量復(fù)制所致，有感染性的病毒經(jīng)適當(dāng)稀釋后接種于單層細(xì)胞，由于單個病毒的復(fù)制增殖使局部單層細(xì)胞脫落，此即空斑。 50組織細(xì)胞感染量（TCID50）三、病毒感染的血清學(xué)診斷 采用免疫標(biāo)記技術(shù)，即用熒光素、同位素、生物素和酶等標(biāo)記已知的特異性抗體，用于檢測病毒感染局部脫落細(xì)胞或分泌物細(xì)胞中的抗原，來早期診斷病原。 機(jī)體血清中出現(xiàn)抗某種病毒的抗體，除患過相應(yīng)的疾病外，亦可因隱性感染或疫苗接種而產(chǎn)生。因此，抗體效價必須明顯高于正常人群的水平或隨病程遞增才有診斷價值。四、檢測病毒核酸的方法1. 核酸雜交技術(shù)2. 多聚酶鏈反應(yīng)3. 基因芯片技術(shù)第二節(jié) 病毒感染的特異性預(yù)防 乙腦疫苗、狂犬疫苗流感滅活疫苗、HAV、HBV疫苗人工主動免疫滅活疫苗