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1、尿紅細胞形態(tài)項目名稱尿紅細胞形態(tài)檢驗目的1臨床常規(guī)檢驗2泌尿系統(tǒng)疾病3其他疾病診斷和鑒別診斷、治療監(jiān)控及健康普查等臨床實驗室檢驗原理:1檢測原理:將尿液離心,倒掉上清尿液、用戊二醛固定一小時后涂成薄膜, 經(jīng)W-G染色后,于顯微鏡下,按尿紅細胞形態(tài)學特征逐個分數(shù),得出正常紅細 胞和異常紅細胞的百分比。2染色原理(瑞氏-吉姆薩復合法染色):使細胞著色既是有化學親和反應,又 有物理吸附作用。對染料的親和力也不一樣,因此,染色后各種細胞呈出現(xiàn)各自 的染色的特點。3瑞氏-吉姆薩復合法染色法學溯源:其原理與瑞氏染色染色原理相同,但提 高了塞秦染料的質量,加強了天青的作用,對細胞核著色效果較好,但對中性顆

2、粒著色瑞氏染色差。因此,瑞氏-吉姆薩復合染色法可取長補短,使血細胞的顆 粒及胞核均能獲得滿意的染色效果。性能參數(shù)4. 1 重復性:CV=2%2分析和計算參數(shù):報告單位百分比()3標本量:適量,染液量:緩沖液=1:1固定液量:尿液=1:14. 4細胞計數(shù):100 (個)5精密度范圍:原始樣品系統(tǒng):晨尿(中段尿)容器清潔的尿試管(有蓋)試劑及顯微鏡瑞氏-吉姆薩復合法染液吉姆薩7. 1 I液:取瑞氏染料1g,吉姆薩染料0.3G,置潔凈研缽中,加少量甲醇(分 析純),研磨片刻,析出上層染液。再加少量甲醇繼續(xù)研磨,再吸出上層 染液。如此連續(xù)幾次,共用甲醇500ML。收集于棕色玻璃瓶中,每天早. 晚各振搖

3、3MIN,共5天,以后存放一周即能使用。7. 1. 2使用方法:液體染料,直接使用7. 1. 3儲存:常溫保存7. 2 II液:PH6.4-6.8磷酸鹽緩沖液磷酸二氫鉀(無水)6.64G磷酸氫二鈉(無水)2.56G加少量蒸餾水溶解,用磷酸鹽調整PH,加水至1000ML。7. 2. 1使用方法:液體染料,直接使用7. 2. 3儲存:常溫保存 7. 3.戊二醛7. 4顯微鏡4. 1商標校準程序:顯微鏡的驗證,光路系統(tǒng)校正燈泡大約半年更換一次程序步驟:1標本采集與要求1. 1標本的采集:患者在清晨起床后,在未進早餐和其他運動之前排泄的尿液,但在采集的前 一天醫(yī)生應提供收集的容器和書面或口頭收集說明,

4、如外陰、生殖器清潔方法、 留中段尿等,并在試管上做好標識。留取后應及時送到檢驗科(最好30min內(nèi)完 成),需要運輸時應在避光條件下。1. 2不合格標本的處理對標本中混入異物的(如糖紙、煙灰)有污染的容器裝標本的、無標識等不 合格的標本,距采集時間超過2小時并沒有按要求儲存的標本,按程序文件樣 品核收、登記和保存程序處理1. 3標本的保存尿液標本采集后,一般應在2小時內(nèi)及時送檢,最好在30分鐘內(nèi)完成檢驗。 如不能及時檢驗者一般放在4攝氏度冰箱可保存6小時,在極特殊的情況下需加 適量的防腐劑(一般尿液篩查時盡量不使用防腐劑)。9. 2檢驗前準備9. 2. 1把接收到的標本按順序編寫序號。9. 2

5、. 2準備清潔、干燥、無塵、無油脂的離心管、載玻片,玻璃筆。9. 3病人標本的檢驗9. 3. 1離心及固定取清潔的離心管,倒入混合后的新鮮的尿液10ml,用12001300r/min轉速, 離心5min。待離心停止后,取出離心管,棄去上層清夜,留下0.2ML沉渣,輕搖離 心管,使沉渣有形成分充分混勻。向離心管中加與沉渣等量的戊二醛,進行沉渣固定。需靜止放在試管架上 1小時。9. 3. 2涂片的制備尿沉渣固定一小時后,取出離心管,棄去上層清液,留下0.2ML沉渣, 輕搖離心管。用塑料吸管取出沉渣12滴到載玻片的中心,然后用離心管的口端與沉渣 接觸,由里向外,輕輕涂片。的膜的薄厚與沉渣的有形成分的

6、多少和沉渣量的多 少有關,如沉渣的粘稠則取少量的沉渣涂片面積大些,這樣形成的涂片就比較??; 反之亦然。涂片應在室溫或37攝氏度溫箱中干燥。9. 3. 3涂片的染色制成厚薄適宜的涂片。用玻璃筆把膜圈上,然后將涂片平放在染色架上。加瑞吉染液數(shù)滴,以覆蓋整個血膜為宜,定血膜約1MIN。滴加約等量的緩沖液與染液混合,室溫下染色510MIN。用流水沖去染液,待干燥后鏡檢?!靖阶ⅰ课词傅哪虺猎げ荒苋旧?,否則染色時膜易脫落。染色時間與染色濃度、染色時溫度成反比;而與細胞數(shù)量成正比。沖洗時不能先倒掉染料,應用流水沖洗去,以防染料沉淀在血膜上。如血膜上有染料顆粒沉積,可加少許甲醇溶解,但需立即用水沖掉甲醇,

7、 以免脫色。染色過淡,可以復染。復染時先加緩沖液,創(chuàng)造良好的染色環(huán)境,而 后加染液,或加染液與緩沖液的混合液,不可先加染液。染色過深可用水沖洗或侵泡水中一定時間,也可用甲醇脫色。染色偏酸或偏堿時,均應更換緩沖液再重染。3. 4鏡下尿紅細胞分類先用低倍下瀏覽全片,了解染色好壞和細胞分布情況。選擇染色及細胞分布良好的區(qū)域,在油鏡下計數(shù)100個尿紅細胞,按其形 態(tài)特征進行分類計數(shù)。求出變形紅細胞和正常紅細胞占百分數(shù)絕對值?!靖阶ⅰ糠诸悤r應從膜的邊緣向另一邊緣一次上下呈城垛狀迂回移動,計數(shù)時不 能重復和遺漏。紅細胞數(shù)明顯減少的血片,應檢查多張涂片。紅細胞形態(tài)變化較大,遇有疑問應請問上級主管或主任進行核

8、實,以減 少錯誤。質量控制影響檢驗結果的因素比較多,如夜放置過久可變堿性、尿液中拄紅細胞可能 會破壞。尿酸堿度、滲透量變化對尿紅細胞成分都會有影響。如下表高滲尿低滲尿酸性尿堿性尿紅 細 胞皺縮,體積變 小星形或桑 葚形膨脹,體積變大 不定形或無色可存在一定時間體積變小溶解破裂, 粒形成褐色顆1標本采集正確流去尿標本對尿紅細胞檢查極其重要,一般宜用新鮮、早 晨中段尿液。要避免污染,如女性應避免月經(jīng)血、陰道分泌物混入,必要時應采 用導尿術采集標本。尿液標本最好在收集后2小時內(nèi)完成檢查,盡量不加如防腐 劑,不能及時送檢者應妥善的保存和處理標本,必要時應選擇正確的防腐劑防腐, 以避免相應的成分別破壞。

9、2使用標準的器材應用一次性清潔干燥容器,標本容器必須有清楚的標記 號(病人姓名、標本留取時間、標本編號等);使用標準的尿離心管,統(tǒng)一離心 條件等。3采用可靠的尿紅細胞質控物尿紅細胞質控物含有一定量保存完好的紅細 胞,用以室內(nèi)質量控制。4加強與臨床聯(lián)系 應將檢查結果及時反饋到臨床,如有疑問,應與臨床 醫(yī)師共同分析原因。干擾1尿液混入經(jīng)血、白帶、糞便。2尿液混入煙灰等異物。3容器不潔凈。實驗室解釋根據(jù)尿液中紅細胞的形態(tài)可將血尿分3種:即均一性紅細胞血尿(非腎小球源性 血尿)、非均一性紅細胞血尿(腎小球源性血尿)和混合性血尿。1均一性紅細胞血尿:紅細胞外形及大小多見正常,形態(tài)較一致,類似外周 血未染

10、色血片上的紅細胞形態(tài)。在少數(shù)情況下,也可見到丟失血紅蛋白的影細胞 或外形輕微改變的棘細胞。整個尿標本中紅細胞形態(tài)不超出2種。據(jù)報道,均一 性紅細胞與腎活檢的診斷符合率92.6%。1. 1非腎源性血尿:見于1.暫時性鏡下血尿,如正常人,特別是青少年在 劇烈運動、急性軍、冷水浴、久站或重體力勞動后。女性患者,還應注意是否有 月經(jīng)血污染尿液,應通過動態(tài)觀察加以區(qū)別。2.泌尿系統(tǒng)自身疾?。喝缑谀蛳到y(tǒng) 各部位的炎癥、腫瘤、結合、結石、創(chuàng)傷、腎移植排異反應、先天性畸形等均可 引起不同程度的血尿。3.其它疾?。阂娪诟鞣N原因引起的出血性疾病,如特發(fā)血 小板減少性紫瘢、血友病、再生障礙性貧血和白血病合并血小板減

11、少、DIC、高 血壓、動脈硬化、高熱;某些免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡等;泌尿系統(tǒng)附近器 官的疾病如前列腺炎、精囊炎、盆腔炎等。2非均一性紅細胞血尿:即變形紅細胞血尿,紅細胞大小不一致體積可相差 34倍,尿中可見2種形態(tài)以上的多形性變化的紅細胞,如大紅細胞、小紅細胞、 棘形紅細胞、皺縮紅細胞等。非均一性紅細胞血尿與活檢的診斷符合率可達到 96.7%。12. 2. 1腎源性血尿 多見急性或慢性腎小球炎、腎盂腎炎、紅斑狼瘡性腎炎、 腎病綜合征。腎源性血尿時,多伴尿蛋白增多明顯,而紅細胞增多不明顯,還常 伴有管型,如顆粒管型、紅細胞管型、腎小管上皮細胞等。3混合性血尿:指尿液中含有均一性和非均一性兩類紅細胞。依據(jù)哪一類紅 細胞超過50%,又可分為以非均一性紅細胞為主和以均一性紅細胞為主的兩組。安全性防護措施1在操作顯微鏡時應按照儀器作業(yè)指導書進行操作,防止受傷、觸電等2請帶上橡膠手套進行染色、沖片,在工作完成后,用消毒液清洗雙手,以免發(fā) 生感染3在檢驗時應小心謹慎,應始終戴上橡膠手套,以避免發(fā)生細菌感染,若樣本濺 入眼睛或者傷口,須用大量清水沖洗,并立即就診4在配制染液時:如果試劑不慎落入眼睛,立即用大量清水沖洗,并接受治療; 如果不慎吞入試劑,立即向醫(yī)生

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