第三節(jié)亞慢性和慢

1、第三節(jié) 亞慢性和慢性毒性試驗(yàn) 人類(lèi)接觸環(huán)境污染物時(shí)，通常接觸水平低于急性中毒劑量或濃度。為了得到更接近實(shí)際情況的毒作用資料，需要進(jìn)行亞慢性和慢性毒性試驗(yàn)。1亞慢性毒性試驗(yàn) 一，試驗(yàn)時(shí)期 在相當(dāng)于動(dòng)物生命周期的1/30-1/20的時(shí)間內(nèi)進(jìn)行。二，試驗(yàn)途徑 使動(dòng)物每日或反復(fù)多次接觸受試物的毒性試驗(yàn)。三，試驗(yàn)?zāi)康?為進(jìn)一步對(duì)受試物的主要毒作用、靶器官和最大無(wú)作用劑量或中毒閾劑量做出估計(jì)。四，試驗(yàn)應(yīng)用 通過(guò)亞慢性試驗(yàn)可以為慢性試驗(yàn)觀察指標(biāo)以及實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)提供參考。2亞慢性毒性試驗(yàn)程序（以哺乳動(dòng)物為例）1，試驗(yàn)動(dòng)物及分組 應(yīng)當(dāng)是急性毒性試驗(yàn)證明的對(duì)受試物敏感的動(dòng)物種屬和品系。試驗(yàn)至少設(shè)3個(gè)劑量組和1個(gè)對(duì)照組

2、。2，染毒劑量和試驗(yàn)期限 高劑量組能引起明顯的中毒反應(yīng)，但不引起很多動(dòng)物死亡； 低劑量組不引起任何中毒反應(yīng)；介于高低劑量組之間的為中間劑量組。 一般用LD50 （ LC50 ）的1/80-1/50作為亞慢性試驗(yàn)劑量。 試驗(yàn)期限隨目的和要求或動(dòng)物不同而異。33，染毒途徑 亞慢性毒性試驗(yàn)中接觸外來(lái)化合物的途徑，應(yīng)盡量模擬人類(lèi)在環(huán)境中實(shí)際接觸的方式或途徑，主要是經(jīng)胃腸道（經(jīng)口）、呼吸道及皮膚接觸。 染毒途徑還應(yīng)與預(yù)期進(jìn)行慢性毒作用試驗(yàn)的接觸途徑相一致。4，觀察指標(biāo) 一般綜合指標(biāo)：一般活動(dòng)、癌癥和死亡情況，稱(chēng)重，飼料或飲水量，計(jì)算生長(zhǎng)率等 血液及生化檢驗(yàn)：主要指血清和肝、腎功能的檢驗(yàn)。如血紅蛋白、紅細(xì)

3、胞數(shù)、白細(xì)胞數(shù)等 病理組織學(xué)檢查：如試驗(yàn)過(guò)程中解剖死亡或?yàn)l臨死亡動(dòng)物；試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，處死所有的動(dòng)物進(jìn)行尸檢等。 4 5，試驗(yàn)評(píng)價(jià) 由試驗(yàn)結(jié)果可對(duì)受試物的主要作用、靶器官和最大無(wú)作用水平及中毒閾劑量做出初步估計(jì)，并為進(jìn)一步開(kāi)展慢性毒性試驗(yàn)提供依據(jù)。 5慢性毒性試驗(yàn) 慢性毒性試驗(yàn)的定義： 慢性毒性試驗(yàn)是指以低劑量外來(lái)化合物，長(zhǎng)期與試驗(yàn)動(dòng)物接觸，觀察其對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物所產(chǎn)生的生物學(xué)效應(yīng)的試驗(yàn)。 慢性毒性試驗(yàn)的作用： 通過(guò)慢性毒性試驗(yàn)，可以確定最大無(wú)作用劑量，為制訂人體每日允許攝入量(Allowable Daily Intake ,ADI)和最高容許濃度（Maximam Allowable Concentra

4、tion,MAC)提供毒理學(xué)依據(jù)。 6慢性毒理試驗(yàn)程序（以哺乳動(dòng)物為例）1，試驗(yàn)動(dòng)物及分組 選用斷乳的動(dòng)物，年齡應(yīng)低于亞慢性試驗(yàn)動(dòng)物的年齡。設(shè)置3至4組劑量組和1組對(duì)照組。其他的要求同亞慢性試驗(yàn)。2，染毒劑量和試驗(yàn)期限 高劑量組能引起明顯的中毒反應(yīng)；低劑量組不引起任何中毒反應(yīng)；在高低劑量組之間再設(shè)1至2個(gè)劑量組，可根據(jù)亞慢性試驗(yàn)資料，取其最低中毒劑量的1/10、1/20、1/50（或LD50的1/100-1/20中取3至4個(gè)劑量）作為慢性試驗(yàn)劑量。 試驗(yàn)期限為1至12個(gè)月，如果包括致癌試驗(yàn)應(yīng)為18至24個(gè)月。 7 3，染毒途徑 與亞慢性毒性試驗(yàn)相同。 4，觀察指標(biāo) 基本與亞慢性試驗(yàn)形同。 5，

5、試驗(yàn)評(píng)價(jià) 對(duì)受試物在低劑量長(zhǎng)時(shí)間接觸機(jī)體時(shí)所引起的毒性作用有更深入的了解； 可依據(jù)敏感觀察指標(biāo)出現(xiàn)異常的最小閾劑量，找出該受試物慢性毒理作用的最大無(wú)作用劑量； 為受試物能否應(yīng)用或?yàn)橹贫ㄆ湓诃h(huán)境中衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，提供最重要的依據(jù)。 由于試驗(yàn)是在受試動(dòng)物生命期的絕大部分時(shí)間進(jìn)行，其間通過(guò)對(duì)動(dòng)物的一般觀察及其對(duì)各臟器的病理學(xué)檢查，對(duì)受試物的致癌性評(píng)定亦可提供一個(gè)參考價(jià)值的依據(jù)。8第四節(jié) 蓄積毒性試驗(yàn) 一 基本概念 低于中毒閾劑量的外來(lái)化合物，反復(fù)多次地與機(jī)體持續(xù)接觸，經(jīng)一定時(shí)間后使機(jī)體出現(xiàn)明顯的中毒表現(xiàn)，即為蓄積毒性作用。 這種蓄積毒性作用，是由于外來(lái)化合物進(jìn)入機(jī)體的速度大于有機(jī)體消除的速度，而使外來(lái)化合

6、物在體內(nèi)的量不斷積累，達(dá)到了使機(jī)體引起毒性作用的閾劑量所致。9二 環(huán)境污染物在體內(nèi)蓄積作用的過(guò)程 1， 物質(zhì)積累過(guò)程（劑量蓄積） 環(huán)境污染物不斷進(jìn)入機(jī)體內(nèi)，其吸收量大于排出量，使其在體內(nèi)的量逐漸積累增多，此種量的蓄積稱(chēng)為物質(zhì)積累。 2， 功能蓄積過(guò)程 (效應(yīng)蓄積) 不斷進(jìn)入機(jī)體內(nèi)的環(huán)境污染物，反復(fù)作用機(jī)體，引起機(jī)體一定結(jié)構(gòu)或功能的變化，并逐漸累積加重，最后導(dǎo)致出現(xiàn)損害作用，此種蓄積稱(chēng)為功能蓄積。 10三 蓄積毒性試驗(yàn)研究的意義 環(huán)境污染物在體內(nèi)的蓄積 作用，是引起亞慢性和慢性毒性作用的基礎(chǔ)。因而蓄積毒性作用常常是評(píng)估環(huán)境污染物毒性作用的指標(biāo)之一，也是制訂其在環(huán)境中的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的重要參考依據(jù)。11四 蓄積毒性試驗(yàn)的試驗(yàn)方法 1，蓄積系數(shù)法 所謂蓄積系數(shù)是分次給受試物后引起50%受試物出現(xiàn)某種毒效應(yīng)的總劑量(以 LD50（n)表示),與一次給受試物后引起的50%受試物出現(xiàn)同一毒效應(yīng)的劑量（以 LD50（1)表示）的比值，即 蓄積系數(shù)= LD50（n) / LD50（1) 比值愈小，表示蓄積作用愈強(qiáng)。 12 根據(jù)蓄積系數(shù)大小，可將環(huán)境污染物的蓄積作用強(qiáng)度分為以下幾級(jí)： 蓄積系數(shù)法（K）蓄積作用強(qiáng)度 5輕度蓄積13 2，20天蓄積試驗(yàn)法（略） 3，受試物生物半減期測(cè)定法 生物半減期是指一種外來(lái)化合物在體內(nèi)消除到原有濃度（或量）的一半所需要的時(shí)間。 因此，生物半減期越長(zhǎng)的物質(zhì)，表示越不容