第五章 血漿脂蛋白

1、第五章 血漿脂蛋白第五章 血漿脂蛋白動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis, AS）是危害人類健康的常見疾病之一，它以血管平滑肌細(xì)胞增生和血脂在粥樣斑塊沉積為特征動(dòng)脈粥樣硬化與血漿脂蛋白（lipoprotein, LP）代謝密切相關(guān)第一節(jié) 脂蛋白的分類和功能第二節(jié) 載脂蛋白第三節(jié) 脂蛋白代謝第一節(jié) 脂蛋白的分類和功能血漿中所含脂類統(tǒng)稱為血脂血脂包括非極性：甘油三脂（TG）、膽固醇脂（CE）極性：游離膽固醇（FC）、磷脂（PL）和脂肪酸（FA）按來(lái)源分可分成外源性（食物消化吸收）和內(nèi)源性（體內(nèi)合成）兩類一、脂蛋白的結(jié)構(gòu)和組成血脂不溶于水，在血漿中和載脂蛋白（apoprotein, Apo）

2、組成脂蛋白（lipoprotein, Lp）的形式轉(zhuǎn)運(yùn)成熟血漿脂蛋白呈球狀，其核心組分為甘油三脂和膽固醇脂，表面組分為載脂蛋白、游離膽固醇和磷脂游離膽固醇和磷脂的極性基團(tuán)暴露在顆粒表面，非極性碳鏈則指向核心。因此血漿脂蛋白顆粒能順利在血漿中運(yùn)輸ApoB100膽固醇脂磷脂游離膽固醇血 漿 脂 蛋 白 顆 粒 的 結(jié) 構(gòu)載脂蛋白表面具有特殊的兩性 螺旋結(jié)構(gòu)帶電、親水性氨基酸殘基組成螺旋極性面暴露在外，而不帶電疏水氨基酸殘基組成非極性面與內(nèi)部脂質(zhì)相互作用，起著穩(wěn)定血漿脂蛋白結(jié)構(gòu)的作用帶正電的堿性氨基酸殘基主要分布于極性面交界處，而帶負(fù)電酸性氨基酸集中在極性面中間，從而在溶液中呈特殊的立體兩性離子載脂

3、蛋白兩性 螺旋是血漿脂蛋白能結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)脂質(zhì)的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)兩 性 螺 旋載 脂 蛋 白 分 子 表 面 的 兩 性 螺 旋二、脂蛋白分類1. 正常血漿脂蛋白正常血漿脂蛋白分成四大類共 6 種。由于所含脂類及載脂蛋白的不同，其顆粒大小、密度、表面電荷、電泳遷移率及免疫原性均有不同用超速離心法分析，從上到下依次為乳糜微粒（CM）、極低密度脂蛋白（VLDL）、低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL）中密度脂蛋白（IDL）是 VLDL 代謝中間產(chǎn)物，其密度及組成均介于 VLDL 和 LDL 之間HDL 按其組成和密度不同又可劃分成 HDL2 和 HDL3CM 顆粒最大，密度最小。按 VLDL、LDL 和

4、 HDL 順序，顆粒逐步縮小，密度則增加CM 和 VLDL 富含甘油三脂，其中 CM 含 ApoB48, VLDL 含 ApoB100；LDL 富含膽固醇脂，其中 95% 以上的載脂蛋白是 ApoB100；HDL 富含磷脂和 ApoA各類脂蛋白204060801000密度 (g/ml)直徑 (nm)VLDL510IDLVLDL乳糜殘粒HDL3HDL2乳糜微粒LDL富含甘油三酯的脂蛋白(乳糜微粒，VLDL)CHYLOMICRONVLDLTRIGLYCERIDECHOLESTERYLESTERSPHOSPHOLIPIDSFREECHOLESTEROLPROTEINS9095%5065%24%814

5、%26%1216%1%47%12%610%801000nm3080nm乳 糜極低密度脂蛋白甘油三酯膽固醇酯磷脂游離膽固醇蛋白質(zhì)富含膽固醇的脂蛋白（LDL/HDL)LDLHDLTRIGLYCERIDECHOLESTERYLESTERSPHOSPHOLIPIDSFREECHOLESTEROLPROTEINS56%2226%3545%615%2225%7%1020%25%5%45%2025nm813nm低密度脂蛋白高密度脂蛋白甘油三酯膽固醇脂磷酯游離膽固醇蛋白質(zhì)2. 異常血漿脂蛋白在特殊情況下，血漿也可出現(xiàn)異常脂蛋白，如-VLDL、HDLc、HDL1 和 HDL3B 等-VLDL 是高膽固醇飲食引起

6、的一種異常脂蛋白。與正常VLDL 相比，其密度相似，但瓊脂糖電泳較慢HDLC 和 HDL1 是富含 ApoE 和 CE 的特大顆粒 HDL。由于缺乏血漿脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，導(dǎo)致 CE 在 HDL 中大量堆積而形成HDL1。高 CE 飲食可誘導(dǎo) HDLC 生成HDL3B 是高 TG 血癥時(shí)出現(xiàn)的小顆粒異常血漿 LP。在高 TG 時(shí)，HDL-CE 與 VLDL-TG 過(guò)度交換，而 HDL-TG 大量被肝性脂酶 ( HL ) 水解,使 HDL 的大量核心脂質(zhì)丟失3. 脂蛋白（a）脂蛋白 (a) Lp(a) 與 AS 密切相關(guān)，其結(jié)構(gòu)又與纖溶酶原極其相似，從而受到高度重視Lp(a) 的脂質(zhì)組分與 LDL 極

7、其相似，除了 ApoB100 外，還含有獨(dú)特的 Apo (a)。 Lp(a) 分子中 Apo(a) 與 Apo100 通過(guò)二硫鍵共價(jià)結(jié)合，用還原劑巰基乙醇可還原得到 LDL 和 Apo(a)。有關(guān)其代謝及濃度影響因素還甚少了解LDL 可以被 Cu2+ 或 Fe3+ 、巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞及血小板修飾，生成酰化 LDL 和氧化LDL (ox-LDL)。氧化修飾過(guò)程由氧自由基介導(dǎo)，使脂蛋白結(jié)構(gòu)、組成和生物學(xué)特性發(fā)生明顯變化修飾 LDL 可通過(guò)清道夫受體被巨噬細(xì)胞吞噬，促進(jìn)巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榕菽?xì)胞，因而具有強(qiáng)烈致 AS 作用。HDL 被氧化修飾后其抗 AS 能力顯著下降第二節(jié) 載脂蛋白至

8、今已從人血漿中分離出的載脂蛋白有 18 種之多，主要有 Apo A、B、C、E 四大類下表簡(jiǎn)單介紹了常見載脂蛋白的重要生物學(xué)特性一、分類Apo 分子量 血漿濃度 合成部位 血漿分布 主要功能 基因定位 其他A- 28,331 1.01.2 小腸、肝 HDL、CM 激活 LCAT, 11號(hào)染色體 識(shí)別 HDL 受體A- 8,7072 0.30.5 小腸、肝 HDL 、CM 抑制 LCAT, 1號(hào) 激活 HLA- 46,000 0.6 小腸 HDL、CM 激活 LCAT 11號(hào) 糖蛋白B100 549,000 0.71.0 肝 VLDL 、 IDL 、 識(shí)別LDL受體 2號(hào) 糖蛋白 LDL 磷蛋白

9、B48 264,000 小腸 CM 轉(zhuǎn)運(yùn)CM C- 6,550 0.040.06 肝 CM 、 VLDL 激活 LCAT, 19號(hào) HDL 抑制HLC- 8,837 0.030.05 肝 CM 、 VLDL 激活 LPL, 19號(hào) HDL 抑制HLC- 8,240 0.120.14 肝 CM 、 VLDL 抑制LPL,抑制Apo 11號(hào) 糖蛋白 HDL 與E受體結(jié)合D 32,500 0.1 ? d1.21部分 轉(zhuǎn)運(yùn)膽固醇 3號(hào) 糖蛋白E 34,145 0.0250.05 肝、 CM 、 VLDL 識(shí)別受體 19號(hào) 糖蛋白 巨噬細(xì)胞 HDLH 50,000 0.2 肝 VLDL 、LDL 激活

10、LPL, 17號(hào) 糖蛋白 抑制凝血J 75,000 0.1 肝及肝外 HDL 脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn) 8號(hào) 糖蛋白 組織 補(bǔ)體調(diào)節(jié)(a) 500,000 不定 肝 Lp(a) 抑制纖溶 6號(hào) 糖蛋白 二、載脂蛋白的結(jié)構(gòu)和基因ApoA 族ApoB 族ApoC 族ApoEApo(a)ApoHApoJ1. ApoA 族HDL 的主要載脂蛋白成熟的人 ApoA-I 分子量為 28.3 kDa, 其分子為單一的多肽鏈。經(jīng)聚焦雙向電泳發(fā)現(xiàn) Apo-AI 有 6 種分子量大致相等而等電點(diǎn)各異的異構(gòu)體，分別命名為 ApoAI1 至 Apo AI6， 其等電點(diǎn)依次為 、5.52 及 人類 Apo-AI 基因位于第 11 號(hào)染

11、色體長(zhǎng)臂末端區(qū)域內(nèi)(11q-13q ter)。人Apo-AI 基因由 3 個(gè)內(nèi)含子和 4 個(gè)外顯子組成?；蜷L(zhǎng) 1863bp, 含 3 個(gè)插入序列 ApoA-I ApoA-I 帶子模型ApoA-I 與 HDL 顆粒結(jié)合 ApoA-ApoA-是 HDL 的第二種主要載脂蛋白人 ApoA-由 77 個(gè)氨基酸組成。血漿 ApoA-以二聚體形式存在，兩個(gè)單體分子通過(guò) Cys6 以二硫鍵共價(jià)結(jié)合。有 5 種多態(tài)型，其 pI 分別為 、和，以 4.9 型最為常見人 Apo-AII mRNA 長(zhǎng) 473 個(gè)堿基, 它含有一個(gè) 58 堿基的 5不翻譯區(qū)。人類和鼠的 Apo AII 基因定位于 1 號(hào)染色體上(

12、1p21-qter)。含有 4 個(gè)外顯子和 3 個(gè)內(nèi)含子 ApoA-Apo-AIV 是一種酸性糖蛋白, 分子量 46kDa。ApoA- 的多態(tài)型為 ApoA-0 和 ApoA-1-7 共 8 種，以 A-1 和 A-2 為常見AIV 至少以 3 種方式存在:(1)與 ApoAI 和少量的 ApoE 一起組成 HDL; (2) 作為單一的載脂蛋白構(gòu)成 HDL; (3)與少量的膽固醇和磷脂結(jié)合, 以游離狀態(tài)存在于脂蛋白缺乏的血漿中 人 ApoAIV 基因與 ApoAI 及 ApoCIII 基因連鎖, 位于第 11 號(hào)染色體上。 ApoAIV 基因由 2603 個(gè)堿基組成, 包括 2 個(gè)內(nèi)含子和 3

13、 個(gè)外顯子2. ApoB 族ApoB 是一類在分子量、免疫性和代謝上具有多態(tài)性的蛋白質(zhì), 依其分子量及所占百分比可分為 B100、B48、B74、B26 及少量 B50。在正常情況下, 以 ApoB100 和 ApoB48 較為重要ApoB100 是其基因的全序列轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。成熟 B100 含糖 4-9%, 分子量約 550kDa, 是迄今所知最大的哺乳類蛋白分子。其氨基酸順序于 1986 年已闡明, 它由 4,536 個(gè)氨基酸殘基組成的單一多肽鏈。Apo B100 具有不在各脂蛋白顆粒間發(fā)生交換的特點(diǎn)。Apo B100 基因位于 2 號(hào)染色體的短臂上(2p23), 基因總長(zhǎng)度為 43kb, 由

14、 29 個(gè)外顯子和 28 個(gè)內(nèi)含子構(gòu)成ApoB48 是 CM 中的主要載脂蛋白，因其分子量是 B100 的 48% 而得名3. ApoC 族是載脂蛋白中分子量最小的一類按其 C 末端氨基酸不同分成 3 個(gè)亞類： ApoC-I ApoC- ApoC- ApoC-I分子最小、堿性最強(qiáng)的載脂蛋白。C-I 的 cDNA 含 430bp，由此推測(cè)其一級(jí)結(jié)構(gòu)為由 83 個(gè)氨基酸殘基組成的多肽（包括 N 端 信號(hào)肽）。經(jīng)水解切除信號(hào)肽后轉(zhuǎn)變成 57 肽的成熟 ApoC-I位于第 19 號(hào)染色體，由 4 個(gè)外顯子和 3 個(gè)內(nèi)含子組成，全長(zhǎng) 4,374 bp ApoC-人 Apo-CII 為含 79 個(gè)氨基酸殘

15、基的單鏈多肽, 分子量為 Apo CII 基因與 Apo-CI、ApoE 基因成簇排列, 位于 19 號(hào)染色體長(zhǎng)臂 q13 區(qū)。Apo CII 基因長(zhǎng) 3,320 bp, 含 4 個(gè)外顯子和 3 個(gè)內(nèi)含子 ApoC-Apo CIII 是一種水溶性低分子量蛋白質(zhì),由 79 個(gè)氨基酸殘基組成, 分子量為 8.7 kDa Apo CIII 基因位于第 11 號(hào)染色體長(zhǎng) q23 區(qū), 它與 Apo AI、Apo AIV 基因緊密連鎖, 共同組成一個(gè)基因家族。Apo CIII 基因長(zhǎng) 3,133 bp, 含有 3 個(gè)插入序列, 并有 4 個(gè)外顯子和 3 個(gè)內(nèi)含子4. ApoEApoE 是一個(gè)含有 299

16、 個(gè)氨基酸結(jié)合有磷脂的糖蛋白。單多肽鏈，含有 10-12% 的精氨酸?？梢栽诟鞣N組織中合成, 但以肝臟為主 ApoE 具有多態(tài)性。受一個(gè)基因位點(diǎn)上 3 個(gè)等位基因控制，ApoE 有 3 種異構(gòu)體（E2、E3 和 E4 ）和 6 種表型：3 種純合子（E2/2、E3/3、和 E4/4）和 3 種雜合子（E2/3、E2/4、和 E3/4）。E2/2 的受體結(jié)合活性為正常的 1% 以下Apo E 的二級(jí)結(jié)構(gòu)中含有較多的-螺旋 。ApoE 除具有與 LDL受體結(jié)合的能力外, 還可以與 ApoE 受體結(jié)合。ApoE 受體只能與 ApoE 結(jié)合, 它只存在于肝臟 ApoE 基因定位于 19 號(hào)染色體上。A

17、poE 基因由 3,597 個(gè)核苷酸組成, 含有 4 個(gè)外顯子和 3 個(gè)內(nèi)含子 5. Apo（a）Apo(a) 是 Lp(a) 中特有的載脂蛋白。Lp(a)是一獨(dú)立存在的脂蛋白系統(tǒng), 其脂質(zhì)成份和 LDL 極為相似,而其蛋白質(zhì)部分由 Apo B100 和富含神經(jīng)氨酸的 Apo(a)組成。 在完整 Lp(a)顆粒中二者以二硫鍵共價(jià)相連, 其比例因人而異, 可為二比一, 一比二或一比一。糖的含量較高, 約為 Apo B 的 6 倍 Apo(a) 的分子量為 503kDa, 含有 27 個(gè) Kingle 結(jié)構(gòu), 約4,529 個(gè)氨基酸 。Apo (a) 分子由三個(gè)結(jié)構(gòu)域組成: 疏水性信號(hào)肽、Krin

18、gle IV(可以 15-37 次重復(fù))和 kringle V Apo(a) 分子的多態(tài)性受一組位于第 6 號(hào)染色體上的等位基因( LPf、LPb、LPs1、LPs2、Lps3、LPs4、LPs0 )控制 6. ApoHMr 為 43,0005,000，由 326 個(gè)氨基酸組成，富含脯氨酸和半胱氨酸，含有 5 個(gè) N 連接的寡聚糖側(cè)鏈，含糖量高達(dá)19%，單鏈ApoH 在結(jié)構(gòu)上具有獨(dú)特性。其二級(jí)結(jié)構(gòu)主要是 折疊而 螺旋很少。在水溶液中不能自身締合人 ApoH 第 17 號(hào)染色體。 ApoH 多態(tài)性取決于 ApoH 的 4 個(gè)等位基因（ ApoH 1、 ApoH 2、 ApoH 3 和 ApoH

19、4）。以常染色體顯性遺傳模式編碼 3 種純合子（ ApoH 1/1、 ApoH 2/2 和 ApoH 3/3）和 4 種雜合子（ ApoH 1/2 、 ApoH 1/3、 ApoH 2/3 和 ApoH 4/2 ）7. ApoJApoJ 是一種與人血漿 HDL 和極高密度脂蛋白( VHDL ) 相結(jié)合的糖蛋白，是 Mr 為 70,000 的二聚體ApoJ 與大鼠硫酸化糖蛋白-2(SGP-2) 及牛糖蛋白的結(jié)構(gòu)有高度同源性，與人血清蛋白質(zhì) SP4040（人補(bǔ)體細(xì)胞溶解抑制物，CLI）為同一物質(zhì)ApoJ 由 、 兩條鏈通過(guò) 5 對(duì)二硫鍵連接而成。有 7 個(gè)糖基化位點(diǎn)，含糖量為 32%（ 鏈）和 2

20、6%（ 鏈）。 和 鏈中各含兩個(gè)富含堿性氨基酸可結(jié)合肝素的片段?；蚨ㄎ辉?第 8 號(hào)染色體三、載脂蛋白的功能1. 維持脂蛋白的結(jié)構(gòu)載脂蛋白作為一種結(jié)構(gòu)蛋白，在組建脂蛋白中起決定作用。載脂蛋白分子中特有的兩性螺旋結(jié)構(gòu)是與脂質(zhì)相互作用、穩(wěn)定脂蛋白結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ) 2. 調(diào)節(jié)酶活性脂蛋白酶（LPL）、肝性脂酶（HL）和卵磷脂：膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶（LCAT）是血漿脂蛋白代謝的三個(gè)關(guān)鍵酶，它們的活性受載脂蛋白的調(diào)節(jié)LPL 和 LCAT活性分別需要 ApoA-和 ApoA-的激活， ApoC- 則抑制 LPL 活性。體內(nèi) ApoC-/ApoC- 比值可調(diào)節(jié) LPL 活性，是控制 VLDL 和 CM 脂解的關(guān)鍵因

21、素。ApoC- 和 ApoC-I 也呈現(xiàn)一定的激活 LCAT 能力，而 A- 可抑制 LCATHL的活性雖不需要載脂蛋白，但 ApoA- 呈現(xiàn)一定的激活 HL 能力，而 ApoC-I、ApoC- 則可抑制 HL3. 作為配體識(shí)別和結(jié)合各自的脂蛋白受體ApoB100 是 LDL 受體的配體ApoE 是 LDL 受體和 LDL 受體相關(guān)蛋白（LRP）的配體ApoA-I 是 HDL 受體的配體ApoC- 抑制 ApoE 與受體的結(jié)合4. 作為一種 “程序劑” 調(diào)控脂蛋白代謝脂質(zhì)在血漿中轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝受載脂蛋白調(diào)控。脂質(zhì)和載脂蛋白結(jié)合組成脂蛋白，恰如給脂質(zhì)編上了程序。載脂蛋白猶如一種程序劑 ( progr

22、ammer )，通過(guò)調(diào)節(jié)酶活性和受體活性而調(diào)控脂蛋白代謝第三節(jié) 脂蛋白代謝一、脂蛋白代謝的關(guān)鍵酶二、脂蛋白受體三、脂蛋白代謝的過(guò)程一、脂蛋白代謝的關(guān)鍵酶Mr 為 50,000-70,000。 廣泛分布于肝外組織：主要有脂肪組織和心肌、乳腺；其次為腎上腺、肌肉和肺等。LPL在實(shí)質(zhì)細(xì)胞內(nèi)合成，定位于毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞表面行使其功能LPL 基因位于第 8 對(duì)染色體，含 30kb，有 10 個(gè)外顯子，9 個(gè)內(nèi)含子。由 cDNA 測(cè)得人 LPL 含 475 個(gè)氨基酸。哺乳動(dòng)物有 87%94% 的 cDNA 序列相同，說(shuō)明 LPL 基因在進(jìn)化上較為保守1. 脂蛋白脂酶（LPL）LPL 活性調(diào)節(jié) ApoC-激

23、活 LPL， ApoC- 抑制 LPL。 ApoC-/ ApoC- 比值是調(diào)節(jié) LPL 活性、控制 CM 和 VLDL 脂解速率的最重要因素 凝血酶對(duì) LPL 可產(chǎn)生最迅速持久的激活作用，胞外 Ca2+是凝血酶激活 LPL 所必需 胰島素刺激 LPL 合成、釋放并激活 LPLLPL 活性調(diào)節(jié)（續(xù)） TG 中脂肪酸種類也是調(diào)節(jié) LPL 活性的重要因素之一。作為 LPL 最適 TG 底物的脂肪酸順序是：?jiǎn)蝺r(jià)不飽和脂肪酸（18：1） 多價(jià)不飽和脂肪酸（18：2） 飽和脂肪酸（16：0） 基因突變可導(dǎo)致 LPL 缺陷和活性喪失。Gly142、Ala176、Gly188、Ile194、Leu207 和

24、Arg243 是維持 LPL 結(jié)構(gòu)完整和催化活性所必需的2. 肝性脂酶（HL）由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成，Mr 53,000，是由 476 氨酸組成的糖蛋白。定位于肝竇周間隙 (Disse space) 內(nèi)皮細(xì)胞表面和竇周間腔面的肝細(xì)胞微絨毛表面，在腎上腺及卵巢中也能檢測(cè)到肝源性 HL 存在。HL 基因位于第 15 染色體。HL 同時(shí)具有甘油三酯脂酶和磷脂酶活性HL 有兩個(gè)結(jié)構(gòu)域：N 端的催化區(qū)和 C 端結(jié)合細(xì)胞表面多糖的區(qū)域HL 和 LPL 的相同點(diǎn)和不同點(diǎn) 相 同 點(diǎn) 不 同 點(diǎn) 都具有水解 TG 活性, Ser 參與它們的活性中心 都帶正電，通過(guò)靜電作用與細(xì)胞表面帶負(fù)電的硫酸肝素蛋白聚糖（HSPG

25、）相結(jié)合都具有兩條 N 連接的糖鏈 HL LPL定位 肝臟 肝外細(xì)胞毛細(xì)血管壁 ApoC-激活 不依賴 依賴高鹽（1mol/L） 激活 抑制及魚精蛋白作用底物 CM 殘粒、 CM、VLDL IDL 和 HDL二者免疫原性不同此外，性激素是 HL 活性最重要的的生理調(diào)節(jié)因素 HL 在脂蛋白代謝中的功能促進(jìn)肝臟攝取 CM 和 VLDL 殘粒。HL 作為殘粒結(jié)合部位提高殘粒與肝細(xì)胞受體親和力，促進(jìn)殘粒的受體內(nèi)吞參與肝臟選擇性攝取 HDL-CE 過(guò)程，促進(jìn) HDL2 轉(zhuǎn)化成 HDL3參與 IDL 向 LDL 代謝轉(zhuǎn)化過(guò)程 3. 卵磷脂：膽固醇?；D(zhuǎn)移酶（LCAT）LCAT 在肝臟合成分泌而存在于血漿中

26、，Mr 6,000，由 416 個(gè)氨基酸組成。血漿濃度 48 mg/l，活性為每小時(shí) 70100 mol/ml可分為幾個(gè)功能區(qū) 活性中心，由 Ser 181 羥基和 2 個(gè)游離巰基（Cys31 和 Cys184）組成。 LCAT 在還原狀態(tài)下才具有最大活性，其活性至少需要一個(gè)游離巰基 糖基化部位，4 個(gè)（Asn20、84、272 和 384），含糖量 25% 二硫鍵區(qū)，由 Cys50、Cys74 和 Cys313、Cys356 分別形成 2 個(gè)二硫鍵。二硫鍵在維持 LCAT 活性中心結(jié)構(gòu)、使 Cys31 趨近 Ser 181 并參與活性中心中是必需的LCAT 催 化 的 反 應(yīng)LCAT 的活性

27、調(diào)節(jié)ApoC-是 LCAT 最重要的激活劑。 ApoA-、A-、C 和 E ，甚至能形成兩性螺旋的一些人工多肽也能激活 LCATHDL 脂質(zhì)尤其是表面脂質(zhì)組成對(duì) LCAT 活性有很大影響。LCAT 活性隨 PL/FC 比值升高而增大，TG/CE 比值升高則抑制 LCAT 活性LCAT 功能LCAT 是體內(nèi)膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)的一個(gè)關(guān)鍵部分。代謝動(dòng)力學(xué)研究表明，膽固醇循環(huán)清除速率的數(shù)量級(jí)與 LCAT 酯化反應(yīng)速率相同。這意味著 LCAT 可能是血漿膽固醇代謝的限速酶膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)（RCT）：指外周細(xì)胞多余膽固醇通過(guò)血漿轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟進(jìn)行代謝（合成膽汁酸等）的過(guò)程 4. 脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（LTP）人 LTP 定

28、位在 第 16 號(hào)染色體，全長(zhǎng) 25 kb，含 16 個(gè)外顯子和 15 個(gè)內(nèi)含子。LTP 是由 484 個(gè)氨基酸殘基組成的酸性糖蛋白，含 4 個(gè) N-連接的糖基化部位，Mr 74,000LTP-I 具有 CE 和 50% PL 轉(zhuǎn)運(yùn)活性，有較好的熱穩(wěn)定性（58穩(wěn)定1h）, 不能結(jié)合肝素LTP-具有 50% PL 轉(zhuǎn)運(yùn)活性，但無(wú) CE 轉(zhuǎn)運(yùn)活性，熱不穩(wěn)定, 能與肝素結(jié)合多種組織細(xì)胞，包括肝、小腸、腎上腺、脾、脂肪組織和巨噬細(xì)胞能合成分泌 LTPLTP 活性調(diào)節(jié) 血漿中存在的 LTP 抑制因子（LTIP） 血漿脂蛋白池大小及脂蛋白組成：如 HDL 中 TG/CE 比值升高，則 CE 轉(zhuǎn)運(yùn)到 HDL

29、 池減少，使 HDL 正常成熟受阻 LPL、HL 和 LCAT：LPL 和 HL 通過(guò)脂解改變 VLDL 和 HDL 組成而影響 LTP 活性；LCAT 與 LTP 在 HDL 表面相互作用，促進(jìn) LTP 轉(zhuǎn)運(yùn)活性 其他因素：如 LTP-能提高 LTP-的活性； ApoA-、 ApoE 和白蛋白抑制 LTP 活性二、脂蛋白受體幾乎所有細(xì)胞都能合成 LDL 受體，以肝臟中的絕對(duì)數(shù)量最多成熟 LDL 受體含 839 個(gè)氨基酸殘基，表觀 Mr 120,000160,000。含 18 個(gè) O-連接糖鏈和 2 個(gè) N-連接糖鏈LDL 受體分子從結(jié)構(gòu)上可分為 5 個(gè)區(qū)域1. LDL 受體LDL 受 體 分

30、 子 的5 個(gè) 區(qū) 域7 個(gè) 富 Cys區(qū)，每個(gè) 40 AA，帶負(fù)電35與 EGF前體同源18 個(gè) Ser/Thr保守，與 Clathrin 作用，便于小窩受體聚集LDL 受體配體結(jié)合域第一個(gè)富 Cys 區(qū)LDL 受體基因位于第 19 號(hào)染色體，全長(zhǎng) 45 kb，含 18 個(gè)外顯子和 17 個(gè)內(nèi)含子 ABC126714151617 18外顯子蛋白域信號(hào)序列配體結(jié)合域EGF 前體同源域O-連接糖鏈結(jié)構(gòu)域跨膜域胞質(zhì)域人 LDL 受體基因圖（內(nèi)含子未標(biāo)記）LDL 受體的功能 結(jié)合內(nèi)吞 LDL 或其他含 ApoB100 和 ApoE 的脂蛋白（殘粒），以提供細(xì)胞所需的膽固醇 調(diào)節(jié)血漿 LDL 濃度。細(xì)

31、胞內(nèi) LDL 受體基因表達(dá)受細(xì)胞內(nèi)膽固醇濃度的減量調(diào)節(jié)（down regulation） 調(diào)節(jié)血漿 LDL 生成 參與血漿脂蛋白殘粒的清除。50% 殘粒通過(guò)肝臟 LDL 受體被清除，另一半通過(guò)肝臟 LDL 受體相關(guān)蛋白被清除2. ApoE 受體和 LDL 受體相關(guān)蛋白（LRP）mahley首次提出肝細(xì)胞膜上存在著 ApoE 受體，其特征是與含 ApoE 的脂蛋白有高親和力并參與它們的代謝清除。但 ApoE 受體至今仍未分離純化并加以確證。近來(lái)的研究否定了ApoE 受體存在，而發(fā)現(xiàn)了 LDL 受體相關(guān)蛋白（LRP），并證明 LRP 可能就是以前認(rèn)為的 ApoE 受體LRP 是由 4,526 個(gè)氨

32、基酸殘基組成、Mr 約 600,000 的糖蛋白。其氨基酸組成與 LDL 受體極相似, 但數(shù)量比LDL 受體多得多LRP 與 LDL 受體不同之處 LDL 受體受細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平的減量調(diào)節(jié)，而 LRP 不受影響 LRP 受體與 ApoE 的結(jié)合不依賴 Ca2+ 存在，與 LDL 不同 E2/E3 表型與 LDL 受體結(jié)合僅為正常的 1% 2%，而與 LRP 結(jié)合為 40% 兩者無(wú)交叉免疫原性3. HDL 受體最近 Oram 從牛肺中分離純化到 HDL 受體，為一表觀 Mr 110,000 的糖蛋白ApoA-I 是 HDL 受體的配基。ApoA-I 分子中 Tyr 參與受體結(jié)合 HDL 受體受細(xì)

33、胞內(nèi)膽固醇水平的增量調(diào)節(jié) (up regulation) 肝臟和肝外組織 HDL 受體在功能上存在差異，前者介導(dǎo) HDL-CE 內(nèi)吞，而后者介導(dǎo)細(xì)胞膽固醇外流4. 清道夫受體（化學(xué)修飾脂蛋白受體、乙酰 LDL 受體）Goldstein 和 Brown 在研究巨噬細(xì)胞內(nèi)吞時(shí)發(fā)現(xiàn)乙酰LDL 高親和力受體存在。乙酰乙酰 LDL、馬來(lái)酰 LDL、琥珀酰 LDL、丙二醛 LDL 甚至細(xì)菌脂多糖也可以作為乙酰 LDL 受體的配體，因而改稱為清道夫受體或化學(xué)修飾脂蛋白受體LDL 與清道夫受體無(wú)競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合作用，且其結(jié)合不依賴 Ca2+ 存在，也不存在細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平的減量調(diào)節(jié)作用除巨噬細(xì)胞可表達(dá)該受體基因外，平

34、滑肌、肝和內(nèi)皮細(xì)胞等也存在清道夫受體。該受體分型和型，均由第 8 號(hào)染色體上同一基因編碼，因 mRNA 加工不同而引起。成熟型受體由 453 個(gè)氨基酸組成，型約 349 個(gè)氨基酸組成在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成受體單體分子中 Pro/Lys 的羥基化對(duì)維持三聚體螺旋結(jié)構(gòu)及三聚體從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)轉(zhuǎn)移到高爾基體進(jìn)行糖基加工是必需的。羥基化后兩個(gè)單體亞基借 Cys83 形成二硫鍵構(gòu)成二聚體，再與另一個(gè)亞基以非共價(jià)結(jié)合形成三聚體巨 噬 細(xì) 胞 型 清 道 夫 受 體 （富 Cys 區(qū)）（Y 為 Lys or Pro） （ 23個(gè)）清道夫受體是糖蛋白，在 螺旋卷曲樣域和間隔域之間有 7 個(gè) N-連接的糖鍵型清道夫受體沒(méi)有 SRCR 區(qū)域，而代之以 6 個(gè)氨基酸。此兩型受體都具備高親和力結(jié)合及介導(dǎo)內(nèi)吞修飾 LDL 的功能清道夫受體在體內(nèi)確切功能還不清楚。雖然這些?；疞DL 可以作為配體被該受體清除，但尚缺乏證據(jù)證實(shí)這些?；?LDL 在體內(nèi)存在。 近來(lái)研究表明，巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞可氧化修飾 LDL。氧化 LDL(ox-LDL) 具有強(qiáng)烈致 AS 作用除以上脂蛋白受體外，曾報(bào)道巨噬細(xì)胞有VLDL 受體、修飾 VLDL 受體和-VLDL 受體。由于這些受體的配體都是 ApoE 和 ApoB100，有著復(fù)雜的交叉結(jié)合現(xiàn)象，對(duì)于這些受體