new,細(xì)胞凍存原則與流程的操作

1、冠科生物技術(shù)起草/修訂者：起草/修訂日期：部門：批 準(zhǔn)日 期：審 閱（QA）：審 閱日 期：實(shí)驗(yàn)機(jī)構(gòu):批 準(zhǔn)日 期：目的規(guī)范細(xì)胞凍存建庫(kù)的操作與流程職責(zé)協(xié)商編寫實(shí)驗(yàn)流程，部門員工遵守使用范圍適用于本公司各種細(xì)胞的凍存和復(fù)蘇內(nèi)容/流程1)凍存標(biāo)準(zhǔn)及原則新入庫(kù)細(xì)胞：每株細(xì)胞建庫(kù)凍存總支數(shù)為 2-40 支，P2-3，20-30 支。庫(kù)：P0-1，2-10 支；工作庫(kù)再擴(kuò)大凍存細(xì)胞：當(dāng)項(xiàng)目所需細(xì)胞工作庫(kù)庫(kù)存量小于等于 10 支時(shí)，需選擇質(zhì)控確定的批次重新回凍建庫(kù)，以確保庫(kù)存總支數(shù)。子細(xì)胞庫(kù)：根據(jù)特殊需要構(gòu)建子細(xì)胞庫(kù)用以特殊目的使用。【每管細(xì)胞具體凍存信息：細(xì)胞名稱，細(xì)胞凍存液：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO

2、+FBS（ 30%）】?jī)龃媾味x，細(xì)胞批次，凍存日期，凍存人。：GIBCO20%；太倉(cāng)：國(guó)產(chǎn)2)第一次凍存標(biāo)記為 P0，每?jī)龃嬉淮蜗嗬^標(biāo)記為 P1,2,3；實(shí)際傳代次數(shù)以備注的形式標(biāo)記。（貼壁細(xì)胞：每胰酶消化一次記為一代；懸浮細(xì)胞：每擴(kuò)大培養(yǎng)體積一次記為一代）。例：P0(3)代表第一次凍存?zhèn)鞔巍Ｙ|(zhì)控每批凍存細(xì)胞都要進(jìn)行如下檢測(cè)：細(xì)菌檢測(cè)，肉眼鏡下檢測(cè)即可凍存復(fù)蘇活率檢測(cè)，使用培養(yǎng)瓶復(fù)蘇后第二天觀察復(fù)蘇狀態(tài)（可選：臺(tái)盼蘭計(jì)數(shù)及計(jì)算活率，給出具體數(shù)值。）3)支原體檢測(cè)特殊檢測(cè)MycoAlert 試劑盒法 SOP （可選：DNA 染色法 SOP）種屬交叉污染檢測(cè)（COI）SOP ；種間交叉污染檢測(cè)（STR）SOP4)凍存細(xì)胞使用程序降溫盒放置-80 度冰箱過夜（-80 度繼續(xù)保存時(shí)間范圍 1-3 周），再放入液氮罐保存。液氮罐原則（表）。使用紙質(zhì)版凍存信息，并在 CBIS 系統(tǒng)中錄入（Cell-Deit Record EV）。參考文獻(xiàn)無(wú)附件6.16.2細(xì)胞凍存表細(xì)胞復(fù)蘇表： SOP-CB-005-F001： SOP-CB-005-F002版本更改