同種免疫性血小板減少癥診斷新方法ppt課件

1、同種免疫性血小板減少癥診斷新方法 Dr. Sentot Santoso PhD血小板輸注討論會(huì)中國(guó) 廣州2021.4.27-4.30同種免疫性血小板減少綜合癥胎兒/新生兒同種免疫性血小板減少 (FNAIT)血小板輸注無效輸注后紫癜被動(dòng)性血小板減少癥移植相關(guān)性血小板減少FAINT的發(fā)病機(jī)制人類血小板同種抗原新的人類血小板同種抗原中國(guó)人群的人類血小板同種抗原中國(guó)人群的人類血小板同種抗原表統(tǒng)計(jì)同種免疫性血小板減少癥的診斷學(xué)抗原測(cè)定 表型PIFT, MAIPA 基因分型PCR-RFLP, PCR-SSP, TaqMan 特異血清，血小板及稀有的HPA基因型抗體測(cè)定 結(jié)合測(cè)定PIFT, ELISA, F

2、lowcytometry 糖蛋白特異免疫測(cè)定法(MAIPA血小板抗原單克隆抗體固定法) 新一代血小板抗體實(shí)驗(yàn)？問題我們?nèi)绾胃牧纪N免疫性血小板減少癥的診斷呢？以穩(wěn)定的細(xì)胞系為來源的DNA產(chǎn)品和血小板同種抗原基因分型，來自于人類血小板同種抗原的表型的獻(xiàn)血者的淋巴細(xì)胞系抗體鑒定，轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)的人類血小板同種抗原以淋巴細(xì)胞系作為來源獲得規(guī)范DNA人類血小板同種抗原基因分型的淋巴細(xì)胞系ISTH/ISBT血小板基因型鑒定實(shí)驗(yàn)室特異等位片段細(xì)胞系表達(dá)人類血小板同種抗原被轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞表達(dá)鑒定低頻抗原HPA-8bw,-11bw,13bw引起的同種免疫反響問題血小板抗體測(cè)定能否可以進(jìn)一步改善？血

3、小板抗體測(cè)定的進(jìn)展血小板抗原單克隆抗體固定法測(cè)定的步驟抗原捕獲測(cè)定的優(yōu)點(diǎn)和缺陷新的血小板抗體測(cè)定？w/o theuseof mabw/o theuseof wholeplateletsw/o anywashingstep快速、敏感、特異、可靠新的血小板抗體測(cè)定？某些血小板同種異體抗體，用現(xiàn)有的技術(shù)是檢測(cè)不到的漏檢anti-HPA-1a 的胎兒與母親不相容的疑似抗體檢測(cè)的影響要素血小板抗原三維構(gòu)造密度表位血小板抗體濃度親和力異質(zhì)性其他要素比如說：配體血小板糖蛋白IIb/IIIa的構(gòu)象兩種類型HPA-1a 的同種異體抗體抗原密度異種表位：?jiǎn)慰寺】贵w抗體表達(dá)的穩(wěn)定性新的血小板抗體測(cè)定方法重組血小板抗

4、原在ELISA體系中的運(yùn)用在昆蟲細(xì)胞中可溶的重組人類血小板抗原產(chǎn)品可溶性重組HPA-1a and -1b用rGPIIIa抗體檢測(cè)anti-HPA-1a ELISA凝膠抗原特異測(cè)定(GASA)血小板抗體測(cè)定：MAIPA vs. GASA抗原-抗體的“鎖與鑰匙的概念新的血小板抗體測(cè)定方法 純化血小板抗原或者重組血小板抗原 在SPR外表激元共振，Surface Plasmon Resonance,SPR)中的運(yùn)用借助SPR技術(shù)的抗原-抗體相互作用的實(shí)時(shí)分析外表等離激元SPR實(shí)時(shí)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)交互作用在SPR中用Mabs 的HPA-1a and HPA-1b 抗原的反響SPR技術(shù)的原那么MabSZ21

5、: HPA-1a “Specific 單克隆抗體SZ-21 和抗PlA1 抗體的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合及這種結(jié)合潛在的臨床運(yùn)用 Xi X，Zhao Y，Jiang H，Wu Q，LI P， RUAN C 中國(guó) 江蘇血液研討所 、蘇州醫(yī)科大學(xué) Nouv Rev Fr Hematol.1992;34(3):239-42 Mab SZ21 (HPA-1a類似體) 與固定的HPA-1a and HPA-1b 抗原在SPR中的反響嚴(yán)重的NAIT 病例中低親和力的HPA-1a 同種異體抗體1嚴(yán)重的NAIT 病例中低親和力的HPA-1a 同種異體抗體2嚴(yán)重的NAIT 病例中低親和力的HPA-1a 同種異體抗體3人類血小

6、板抗體的分析 動(dòng)物模型？ 抗體介導(dǎo)的血小板去除和相關(guān) 抑制因子的測(cè)定以NOD/SCID 鼠作為模型進(jìn)展人類血小板抗體的研討在NOD/SCID 鼠體內(nèi)循環(huán)期間人類血小板存活的動(dòng)力學(xué)FNAIT的病理機(jī)制Mab SZ21 抑制體內(nèi)的HPA-1a 同種異體抗體介導(dǎo)的血小板去除？Mab SZ21 抑制體外的HPA-1a 同種異體抗體與人類血小板的結(jié)合Mab SZ21 抑制體內(nèi)的HPA-1a 同種異體抗體介導(dǎo)的血小板去除結(jié)論基于在分子生物學(xué)根底上的HPA的第四代基因分型技術(shù)的開展，此技術(shù)可以進(jìn)展快速的基因分型。參照DNA來源于永生化細(xì)胞系，可以用于基因分型的質(zhì)量控制但是，抗體的檢查依然個(gè)難題。新一代的血小板抗體檢測(cè)的運(yùn)用SPR技術(shù)勢(shì)在必行對(duì)于新一代的血小板抗體檢測(cè)技術(shù)，檢測(cè)自然抗原，表位的復(fù)雜性，抗體的異質(zhì)性等附加條件的要求是非常重要體內(nèi)實(shí)驗(yàn)可以研討致病的抗體和免疫介導(dǎo)的血小板減少癥的病理機(jī)制。動(dòng)物模型對(duì)于藥物檢測(cè)的研討必不可少新一代血小板抗體測(cè)定？致謝1、 Justus Liebig University 和臨床免疫輸注醫(yī)學(xué)研討所 Giessen, 德國(guó) Ines Socher ， Cornelia Andrei-Selmer ，Tamam Bakchoul，Ulrich Sachs，Hartmut Kroll 2、劍橋大學(xué)和國(guó)家安康效力血液移植英國(guó)PrachiStaff