2022-2023學(xué)年新教材高中生物 第1章 發(fā)酵工程 第2節(jié) 微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用 二 微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)夯基提能作業(yè) 新人教版選擇性必修3

1、 第1章 第2節(jié) 二一、選擇題1土壤中的細(xì)菌能分解尿素，是因為它們能合成一種(B)A尿素酶B脲酶C蛋白酶D肽酶解析：土壤中的尿素分解菌體內(nèi)能夠產(chǎn)生一種脲酶，酶能夠使土壤中的尿素分解為氨和水，植物才能利用土壤中的營養(yǎng)物質(zhì)銨離子。2(2021吉林通化十四中高二期中)用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設(shè)置的對照是(B)A未接種的選擇培養(yǎng)基B接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D接種了的選擇培養(yǎng)基解析：選擇的目的是分離、篩選，對照實驗遵循的原則是單一變量，要做對照實驗就應(yīng)該是選擇作用與無選擇作用對照，而有無選擇作用取決于用來選擇的物質(zhì)，因此用接種了的普通培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基進(jìn)行對

2、照，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目。故選B。3以下操作用到接種環(huán)的是(A)A平板劃線操作B系列稀釋操作C涂布平板操作D倒平板操作解析：常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，對于液體培養(yǎng)基中的微生物計數(shù)常需要進(jìn)行系列梯度稀釋。常用的接種工具主要有接種環(huán)、接種針、接種鉤等。平板劃線法需要接種環(huán)，A正確；系列稀釋操作是用滴管和試管進(jìn)行的，B錯誤；涂布平板法是用涂布器操作的，C錯誤；倒平板只需要培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿，D錯誤。4若在固體培養(yǎng)基上用稀釋涂布法培養(yǎng)細(xì)菌，看到的結(jié)果不可能是(D)解析：A、B、C選項的固體培養(yǎng)基上所形成的是一個個的單個菌落，是用稀釋涂布法培

3、養(yǎng)細(xì)菌得到的結(jié)果，D選項的固體培養(yǎng)基上所形成的不是單菌落，是平板劃線分離得到的結(jié)果。5某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為234，那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.1 mL)(B)A2.34108個B2.34109個C234個D23.4個解析：根據(jù)題意可以知道，每毫升樣品中的菌落數(shù)平板上菌落數(shù)的平均值體積稀釋倍數(shù)2340.11062.34109個，所以B選項是正確的。6用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目，其結(jié)果與實際值相比最可能是(B)A比實際值高B比實際值低C和實際值一致D比實際值可能高也可能低解析：用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目

4、時，當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，而樣品稀釋度無論多高都很難使其中的細(xì)菌都單個分布于培養(yǎng)基上，故計數(shù)結(jié)果比實際值低。7某種菌在30 的環(huán)境下，經(jīng)過6周后會產(chǎn)生2種不同的酶，幾乎可將PET塑料完全分解。下圖是分離、純化和保存菌株的過程，相關(guān)敘述正確的是(B)A塑料垃圾中含有大量微生物，是分離該菌株的首選樣品B篩選培養(yǎng)基中需要加入PET塑料粉末，通過菌落特征挑出分解PET塑料的菌落C通過涂布平板法可以獲得單菌落D斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物質(zhì)，可在常溫下長期保存菌株解析：塑料垃圾中含有大量微生物，但不一定含有分解PET塑料的菌株，A項錯誤；篩選培養(yǎng)基中需要加PET塑料粉末，

5、通過菌落特征挑出分解PET塑料的菌落，從而獲得分解PET塑料的菌株，B項正確；在涂布平板上長出的菌落，可以通過劃線或稀釋涂布平板法進(jìn)一步純化得到單個菌落，C項錯誤；斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物質(zhì)，可在低溫下臨時保存菌株，如果長期保存菌種應(yīng)選擇甘油管藏法，D項錯誤。8下圖是研究人員從紅棕壤中篩選高效分解尿素細(xì)菌的過程示意圖，有關(guān)敘述錯誤的是(C)A在配制步驟的培養(yǎng)基時，應(yīng)先調(diào)pH再進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B步驟純化分解尿素的細(xì)菌的原理是將聚集的細(xì)菌分散，可以獲得單細(xì)胞菌落C步驟采用涂布平板法接種，并需向牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入尿素D步驟挑取中不同種的菌落分別接種，比較細(xì)菌分解尿素的能力解析：配制培養(yǎng)基時，

6、應(yīng)先調(diào)pH再進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A項正確；步驟純化分解尿素的細(xì)菌的原理是將聚集的細(xì)菌通過稀釋涂布平板法分散，獲得單細(xì)胞菌落，B項正確；步驟篩選分解尿素的細(xì)菌，培養(yǎng)基中應(yīng)以尿素為唯一氮源，C項錯誤；步驟挑取中不同種的菌落分別接種，比較細(xì)菌分解尿素的能力，D項正確。9(2020山東卷)野生型大腸桿菌可以在基本培養(yǎng)基上生長，發(fā)生基因突變產(chǎn)生的氨基酸依賴型菌株需要在基本培養(yǎng)基上補(bǔ)充相應(yīng)氨基酸才能生長。將甲硫氨酸依賴型菌株M和蘇氨酸依賴型菌株N單獨接種在基本培養(yǎng)基上時，均不會產(chǎn)生菌落。某同學(xué)實驗過程中發(fā)現(xiàn)，將M、N菌株混合培養(yǎng)一段時間，充分稀釋后再涂布到基本培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后出現(xiàn)許多由單個細(xì)菌形成的菌落，將

7、這些菌落分別接種到基本培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后均有菌落出現(xiàn)。該同學(xué)對這些菌落出現(xiàn)原因的分析，不合理的是(B)A操作過程中出現(xiàn)雜菌污染BM、N菌株互為對方提供所缺失的氨基酸C混合培養(yǎng)過程中，菌株獲得了對方的遺傳物質(zhì)D混合培養(yǎng)過程中，菌株中已突變的基因再次發(fā)生突變解析：據(jù)題意可知，甲硫氨酸依賴型菌株M和蘇氨酸依賴型菌株N單獨培養(yǎng)時均不會在基本培養(yǎng)基上出現(xiàn)菌落，兩者混合培養(yǎng)一段時間后，再接種在基本培養(yǎng)基中卻出現(xiàn)菌落，除了操作過程中出現(xiàn)雜菌污染，雜菌在基本培養(yǎng)基上生長形成菌落的原因以外，還可能的原因是菌株獲得了對方的遺傳物質(zhì)，或菌株中已突變的基因再次發(fā)生突變，使突變菌株能產(chǎn)生所需的氨基酸，而變成了非依賴型菌株

8、，從而能在基本培養(yǎng)基上生長形成菌落，A、C、D項正確；M、N菌株混合培養(yǎng)一段時間，稀釋涂布到基本培養(yǎng)基上后，培養(yǎng)出現(xiàn)的菌落是由單個細(xì)菌形成的，菌落中不可能有M、N菌株同時存在而互為對方提供所缺失的氨基酸，故B項錯誤。10(不定項)下圖中甲是稀釋涂布平板法中的部分操作，乙是平板劃線法的操作結(jié)果。下列敘述中正確的是(ABD)A甲涂布前要將涂布器灼燒，冷卻后才能涂菌液B甲、乙操作中只有甲可以用于微生物的計數(shù)C乙中接種環(huán)需要灼燒5次D乙中連續(xù)劃線的起點是上一次劃線的末端解析：甲圖中采用了稀釋涂布平板法，涂布前要將涂布器灼燒，冷卻后才能取菌液，A項正確；乙圖平板劃線法無法計數(shù)，B項正確；圖乙為平板劃線法

9、，平板中劃了5個區(qū)域，因此操作過程中接種環(huán)需要灼燒6次，C項錯誤；乙圖中每次劃線的起點是上一次劃線的末端，D項正確。11(不定項)下列關(guān)于微生物培養(yǎng)過程的操作的敘述，正確的是(AB)A稀釋涂布平板法的工具使用前應(yīng)進(jìn)行灼燒滅菌B連續(xù)劃線法和交叉劃線法接種的微生物不適合計數(shù)C從土壤中分離尿素分解菌時應(yīng)向培養(yǎng)基中加入剛果紅指示劑D將菌種接種到試管的固體斜面上培養(yǎng)至出現(xiàn)菌落，再把試管放入4 的冰箱中保藏，這種方法保存的菌種純凈不易變異解析：稀釋涂布平板法的工具是涂布器，使用前應(yīng)灼燒滅菌，A項正確；連續(xù)劃線法和交叉劃線法接種的微生物不適合計數(shù)，適合計數(shù)的是稀釋涂布平板法，B項正確；從土壤中分離尿素分解菌

10、時應(yīng)向培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，C項錯誤；將菌種接種到試管的固體斜面上培養(yǎng)至出現(xiàn)菌落，再把試管放入4的冰箱中保藏，這種方法保存的菌種易變異，D項錯誤。12(不定項)篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，得到如下圖所示的兩個菌落，培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理，出現(xiàn)了以菌落為中心的透明圈。相關(guān)敘述正確的是(CD)A培養(yǎng)基中的淀粉也可為微生物提供氮源B兩個菌落中的微生物為同一種微生物C兩個菌落中的微生物均能將淀粉酶分泌至細(xì)胞外D透明圈直徑與菌落直徑的比值越大，說明該微生物分解淀粉的能力越大解析：淀粉只含有C、H、O三種元素，因此培養(yǎng)基中的淀粉不能為微生物提供氮源，A項錯誤；兩個菌落的周圍均

11、有透明圈，說明兩個菌落中的微生物都能分解淀粉，但不一定為同一種微生物，B項錯誤；兩個菌落的周圍均有透明圈，說明兩個菌落中的微生物均能產(chǎn)生淀粉酶并將淀粉酶分泌至細(xì)胞外，C項正確；透明圈是由培養(yǎng)基中的淀粉被微生物產(chǎn)生的淀粉酶分解后而產(chǎn)生的，因此透明圈直徑與菌落直徑的比值越大，說明該微生物分解淀粉的能力越大，D項正確。二、非選擇題13(2021重慶質(zhì)量調(diào)研抽測)果膠是一類廣泛存在于植物細(xì)胞壁，以聚半乳糖醛酸為主的雜多糖，大量存在于柑橘、檸檬、柚子等果皮中。果膠酶是應(yīng)用于果酒生產(chǎn)的重要酶制劑之一，它廣泛存在于細(xì)菌、酵母菌等多種微生物細(xì)胞中。研究者欲篩選出能大量產(chǎn)生果膠酶的細(xì)菌并對其進(jìn)行計數(shù)?；卮鹣铝袉?/p>

12、題。(1)配制培養(yǎng)基時，培養(yǎng)基通常應(yīng)該含有水、_碳源_、氮源和無機(jī)鹽等物質(zhì)。實驗室通常用_高壓蒸汽滅菌_法對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。(2)可從腐爛的柑橘、檸檬、柚子等果皮中進(jìn)行取樣，其原因是這些腐爛的果皮中含有_果膠分解菌_。(3)下表是某同學(xué)配制的果膠分解菌的培養(yǎng)基配方(將表中物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL)。從培養(yǎng)基的物理性質(zhì)看，該培養(yǎng)基屬于_液體_培養(yǎng)基。這個培養(yǎng)基對果膠分解菌_不具有_(填“具有”或“不具有”)選擇作用，原因是_培養(yǎng)基中含有葡萄糖，聚半乳糖醛酸(果膠)不是唯一碳源_。成分葡萄糖聚半乳糖醛酸NaNO3Na2HPO47H2OKClMgSO47H2O酵母膏水解酪素含量(g

13、)5511.20.50.50.50.5(4)對選擇培養(yǎng)的菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋，然后采用_涂布平板_法接種在培養(yǎng)基上進(jìn)行單菌落分離并計數(shù)，推測出菌液樣品中活菌數(shù)目。解析：(1)培養(yǎng)基通常含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽等物質(zhì)，對培養(yǎng)基一般采用高濕熱滅菌中的高壓蒸汽滅菌。(2)果皮中大量微生物繁殖說明微生物產(chǎn)生果膠酶分解果皮。(3)題干中用蒸餾水定容到1 000 mL表明該為液體培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中含有葡萄糖，聚半乳糖醛酸不是唯一碳源。(4)對培養(yǎng)液進(jìn)行一系列梯度稀釋，采用涂布平板法進(jìn)行分離和計數(shù)，可推測出菌液中活菌的數(shù)目。14(2021湖南衡陽一中高二下月考)微生物強(qiáng)化采油(MEOR)是利用某些微生物

14、能降解石油、增大石油的乳化度、降低石油黏度的原理，通過向油井中注入含微生物的水來提高采油率的新技術(shù)。以下是人們篩選、純化和擴(kuò)大培養(yǎng)該類微生物的實驗操作。請回答下列問題：(1)土壤是微生物的大本營，該類微生物應(yīng)取自_長期被石油污染(或含石油多)_的土壤。(2)為篩選和純化該類微生物，從功能上分，應(yīng)選用_選擇_培養(yǎng)基，此培養(yǎng)基中添加_石油_作為微生物生長的唯一碳源。培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是_高壓蒸汽滅菌_法。常用的接種方法是_平板劃線法_和_稀釋涂布平板法_。(3)接種后需密封培養(yǎng)，由此推測該類微生物的代謝類型是_異養(yǎng)厭氧型_，培養(yǎng)一段時間后在培養(yǎng)基上形成降油圈，此時選取_降油圈大的菌落_就可獲

15、得高效菌株。解析：(1)該類微生物能降解石油，則該類微生物只能存在于被石油污染或者浸泡的土壤中。所以該類微生物應(yīng)取自長期被石油污染(或含石油多)的土壤。(2)從功能上分，篩選和純化降解石油的微生物的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，此培養(yǎng)基中應(yīng)添加石油作為微生物生長的唯一碳源。培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是高壓蒸汽滅菌法。微生物的實驗室培養(yǎng)中，最常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。(3)該類微生物需密封培養(yǎng)，說明該類微生物的細(xì)胞呼吸不需要氧氣，其呼吸類型是無氧呼吸；該生物以石油為碳源，為異養(yǎng)生物，故其代謝類型為異養(yǎng)厭氧型。培養(yǎng)一段時間后在培養(yǎng)基上形成降油圈，降油圈越大，說明該類微生物分解石油的能力越強(qiáng)

16、，所以選取降油圈大的菌落就可獲得高效菌株。15(2020遼寧沈陽東北育才中學(xué)高三下模考)某校生物研究性學(xué)習(xí)小組的同學(xué)欲調(diào)查某冷飲店的冰塊中大腸桿菌的含量，具體實驗步驟如下：第一步：配制培養(yǎng)基(成分：蛋白胨、氯化鈉、乳糖、蒸餾水、X和Y)；第二步：制作無菌平板；第三步：設(shè)置空白對照組和實驗組，對照組接種，實驗組接種。第四步：將各組平板置于37 恒溫箱中培養(yǎng)一段時間后，統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù)。回答下列問題：(1)培養(yǎng)基中的乳糖可以為大腸桿菌提供_碳源_。為了方便大腸桿菌的鑒定，需要在培養(yǎng)基中添加成分X_伊紅美藍(lán)(或伊紅亞甲藍(lán)、深紫色)_，在該培養(yǎng)基表面，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)_黑色_(填顏色)。為了完成第二步，該培養(yǎng)基中的成分Y通常是_瓊脂_。(2)完善第三步，是_適量無菌水_，是_等量冰塊水_。(3)若該小組在空白對照組的平板上檢測到少許菌落，請分析可能的原因：_培養(yǎng)基滅菌不合格或倒平板(或接種)過程中被污染_。(4)將1 mL冰塊水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接種0.1 mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37，據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_3.8107_