藥物分析六雜質(zhì)

1、第三章藥物的雜質(zhì)檢查15-7月-221藥物分析六雜質(zhì)第三章 藥物的雜質(zhì)檢查第一節(jié) 概述（雜質(zhì)和雜質(zhì)的限量檢查）第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法第三節(jié) 特殊雜質(zhì)檢查方法藥物分析六雜質(zhì)3、甚至對(duì)人體健康有害的物質(zhì)。1、藥物中存在的無治療作用2、影響藥物的療效和穩(wěn)定性雜質(zhì)藥物分析六雜質(zhì)影響藥物質(zhì)量反應(yīng)藥物生產(chǎn)過程中存在的問題雜質(zhì)雜質(zhì)檢查鑒別真?zhèn)渭兌人幬锓治隽s質(zhì)雜質(zhì)檢查的目的：保證用藥的安全有效；為生產(chǎn)、流通過程的質(zhì)量保證和企業(yè)管理提供依據(jù)。藥物研究設(shè)計(jì)、開發(fā)實(shí)施工廠 企管藥品原料藥典檢驗(yàn)藥品劑型藥典檢驗(yàn)藥品使用安全、有效藥物分析六雜質(zhì)第一節(jié). 概述 雜質(zhì)和雜質(zhì)的限量檢查一、藥物純度的概念與要求二、藥物中

2、雜質(zhì)的來源與種類三、雜質(zhì)的限量6藥物分析六雜質(zhì)一、藥物純度的概念與要求概念雜質(zhì)來源雜質(zhì)危害檢查雜質(zhì)要求與純度控制藥物雜質(zhì)（或純度）與新藥研究純度控制藥物分析六雜質(zhì)1、純度（Purity）：藥物純凈的程度。 它是判定藥品質(zhì)量優(yōu)劣的一個(gè)重要指標(biāo)。對(duì)藥物純度的要求是隨著生產(chǎn)工藝的改進(jìn)、變化以及分離分析技術(shù)的發(fā)展而不斷提高、完善的。 一、藥物的純度要求8藥物分析六雜質(zhì)2、雜質(zhì)來源 生產(chǎn) 貯藏過程中引入 過程中引入使用試劑、原料 光、熱分解中間體、副產(chǎn)物例: (1)aspirin中salicylic acid (2)生產(chǎn)中的 HCl, H2SO4 胃刺激變色 氯化物 硫酸鹽 無毒,但使藥物含量降低 腸溶

3、片藥物分析六雜質(zhì)3、雜質(zhì)危害沒有治療作用影響藥物的療效、穩(wěn)定性對(duì)人體健康有害檢查雜質(zhì)、控制純度必要性 確保用藥安全、有效，保證藥品質(zhì)量藥物分析六雜質(zhì)對(duì)于規(guī)定中的各種雜質(zhì)檢查項(xiàng)目，系指該藥品在按既定工藝進(jìn)行生產(chǎn)和正常貯藏過程中可能含有或產(chǎn)生并需要控制的雜質(zhì)（如殘留溶劑、有關(guān)物質(zhì)等）；改變生產(chǎn)工藝時(shí)需另考慮增、修訂有關(guān)項(xiàng)目。中國藥典凡例藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的雜質(zhì)不包括變更生產(chǎn)工藝或變更原輔料而產(chǎn)生的新的雜質(zhì)，也不包括參入或污染的外來物質(zhì)。4、雜質(zhì)檢查要求與純度控制11藥物分析六雜質(zhì)藥物性狀理化常數(shù)含量測(cè)定等主要指標(biāo)雜質(zhì)雜質(zhì)檢查項(xiàng)目名稱檢查方法雜質(zhì)允許限量其它指標(biāo)純度評(píng)價(jià)收載在“檢查”項(xiàng)下“氯化物”“砷鹽

4、”“有關(guān)物質(zhì)”綜合整體評(píng)價(jià)藥物純度12藥物分析六雜質(zhì) 藥物純度、穩(wěn)定性 新藥質(zhì)量研究的重要組成部分可能引入雜質(zhì)？ 影響藥物變質(zhì)的因素？分離，結(jié)構(gòu)？ 變質(zhì)的過程？毒性？ 分解的產(chǎn)物？控制的方法？ 選擇適合的貯藏條件5、藥物雜質(zhì)（或純度）與新藥研究分析技術(shù)的發(fā)展13藥物分析六雜質(zhì)雜質(zhì)制劑安全性有效性藥理學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)等質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中檢查項(xiàng)藥物分析藥劑學(xué)雜質(zhì)檢查和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系不能用試劑代替藥品14藥物分析六雜質(zhì)藥物的純度與化學(xué)試劑的純度 藥物的純度考慮雜質(zhì)的生理作用，藥品只有兩個(gè)等級(jí)：合格或不合格。 化學(xué)試劑有很多等級(jí)，如基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級(jí)純（GR）、分析純（AR）、化學(xué)純（CP）、色譜純

5、、光譜純。藥物分析六雜質(zhì)二、藥物中雜質(zhì)的來源和種類雜質(zhì)的主要來源 (一)生產(chǎn)過程中引入 原料藥生產(chǎn)（合成：未反應(yīng)完的原料、反應(yīng)的中間體、副產(chǎn)物、殘留溶劑；提?。核幬锝Y(jié)構(gòu)、性質(zhì)相近的物質(zhì)、殘留溶劑） 制劑生產(chǎn)*注意：生產(chǎn)設(shè)備也可能引入雜質(zhì)例:1. 殘留溶媒 2.生產(chǎn)中所用金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具所帶來的雜質(zhì)金屬雜質(zhì) 3. 鹽酸普魯卡因注射劑水解、高溫滅菌對(duì)氨基苯甲酸;二乙氨基乙醇(二)貯藏過程藥物分析六雜質(zhì)二、藥物中雜質(zhì)的來源和分類雜質(zhì)的主要來源 (一)生產(chǎn)過程中引入易發(fā)生水解的結(jié)構(gòu)：環(huán)酰胺、苷類、酯、內(nèi)酯、酰胺易發(fā)生氧化的結(jié)構(gòu)：醛基、長鏈共軛雙鍵、酚羥基、 巰基、亞硝基(二)

6、貯藏過程(外界條件，微生物)溫度 濕度日光 空氣水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)變、聚合、潮解、發(fā)霉有關(guān)物質(zhì)藥物分析六雜質(zhì)1）按雜質(zhì)來源：一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)。 一般雜質(zhì)：自然界分布廣泛、在多種藥物的生產(chǎn)和儲(chǔ)藏過程中容易引入的雜質(zhì)。 特殊雜質(zhì)：指在特定藥物的生產(chǎn)和貯藏 過程中容易引入的雜質(zhì)。2）按雜質(zhì)理化性質(zhì)：無機(jī)雜質(zhì)，有機(jī)雜質(zhì)和殘留溶劑。3）按雜質(zhì)毒性：信號(hào)雜質(zhì)和毒性雜質(zhì)。 （三）雜質(zhì)的種類18藥物分析六雜質(zhì)雜質(zhì)分類 一般雜質(zhì)：自然界分布較廣泛，容易引入酸、堿、水分、來源 氯化物、硫酸鹽、砷鹽、重金屬檢查方法中國藥典附錄 特殊雜質(zhì)：個(gè)別藥物的生產(chǎn)和貯藏過程中引入檢查方法收藏在該藥 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中

7、無機(jī)雜質(zhì)：氯化物、硫酸鹽、硫化物、氰化物、重金屬性質(zhì) 殘留溶劑 有機(jī)雜質(zhì)：有機(jī)藥物中引入原料、中間體、副產(chǎn)物、分解產(chǎn)物 異構(gòu)體 信號(hào)雜質(zhì)：一般無害，含量多少藥物純度水平，氯化物、硫酸鹽毒性 毒性雜質(zhì)：重金屬、砷鹽、氰化物應(yīng)嚴(yán)格控制，保證用藥安全藥物分析六雜質(zhì)說明：1.藥典未規(guī)定的雜質(zhì)：一般不需要檢查。2.遇特殊情況：需要進(jìn)一步追蹤、檢查。如：改變了原料、生產(chǎn)方法。3.新藥研究：要對(duì)純度、穩(wěn)定性進(jìn)行考察。藥物分析六雜質(zhì)藥典中藥物雜質(zhì)檢查項(xiàng)目的前提：GMP按既定工藝生產(chǎn)按正常條件貯藏藥典中藥物雜質(zhì)檢查項(xiàng)目未列入的雜質(zhì)含量極少臨床限量允許較寬從生產(chǎn)實(shí)踐到檢驗(yàn)方法，認(rèn)識(shí)不夠時(shí)代發(fā)展藥物分析六雜質(zhì)三、雜

8、質(zhì)的限量*1雜質(zhì)限量的概念 在不影響藥物療效和不發(fā)生毒性的前提下，藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量，叫做雜質(zhì)限量。通常用百分之幾（）或百萬分之幾（ppm）來表示。 藥物中雜質(zhì)的檢查，一般也不要求測(cè)定其含量，而只檢查雜質(zhì)的量是否超出限量雜質(zhì)限量檢查（Limit Test)22藥物分析六雜質(zhì)雜質(zhì)量 雜質(zhì)限量 雜質(zhì)量藥品合格藥品不合格藥物分析六雜質(zhì)2.雜質(zhì)限量制定砷：不超過百萬分之一重金屬：不超過百萬分之五十依據(jù)：雜質(zhì)自身的性質(zhì)生產(chǎn)能達(dá)到的水平參照各國藥典慣例3.雜質(zhì)限量的檢查1）與雜質(zhì)對(duì)照品溶液進(jìn)行對(duì)比2）以檢測(cè)條件下正反應(yīng)的靈敏度控制15-7月-2224藥物分析六雜質(zhì)3.雜質(zhì)限量的檢查1）與雜質(zhì)對(duì)照品

9、溶液進(jìn)行對(duì)比一定量被檢雜質(zhì)的對(duì)照品溶液一定量供試品溶液相同條件：平行原則試劑相同、反應(yīng)溫度相同、放置時(shí)間等相同顏色渾濁色斑比色比濁比較色斑特點(diǎn)：不需知道雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量15-7月-2225藥物分析六雜質(zhì)2）以檢測(cè)條件下正反應(yīng)的靈敏度控制 在供試品溶液中加入試劑，在一定條件下反應(yīng)，觀察有無正反應(yīng)出現(xiàn)，以不出現(xiàn)正反應(yīng)為合格，即以該檢測(cè)條件下反應(yīng)的靈敏度來控制雜質(zhì)限量。例：純化水中檢查氯化物，是在50ml水中加入硝酸與硝酸銀試液，不得發(fā)生渾濁。由于50ml水中含有0.2mg的CL-時(shí)，所顯渾濁已比較明顯，所以此檢查限制了純化水中氯化物的含量小于0.2mg/50ml=0.004mg/ml，4ug/ml。

10、藥物分析六雜質(zhì) 4雜質(zhì)限量的計(jì)算15-7月-2227藥物分析六雜質(zhì)示例：例1.茶苯海明中的氯化物的檢查取本品0.30g置200ml量瓶中，加水50ml時(shí)、氨試液3ml和10%硝酸溶液6ml時(shí)，置水浴上加熱5min，加硝酸銀試液25ml，搖勻，再置水浴上加熱15min，并時(shí)時(shí)振搖，放冷，加水稀釋至刻度，搖勻， 放置15min，濾過，取續(xù)濾液25ml置納氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水稀釋成50ml，搖勻，在暗處放置5min，與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液（10gCL/ml）1.5ml制成的對(duì)照液比較，求氯化物的限量。28藥物分析六雜質(zhì)例1.茶苯海明中的氯化物的檢查已知：S = 0.3g25/200；C =

11、10g/ml；V = 1.5ml求： L = ？ 解： *注意:單位要統(tǒng)一29藥物分析六雜質(zhì)例2谷氨酸鈉中重金屬的檢查取本品1.0g，加水23ml溶解后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，依法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（10gPb/ml）所顯顏色相比較，不得更深重金屬限量為百萬分之十，求取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液多少毫升？15-7月-2230藥物分析六雜質(zhì)例2谷氨酸鈉中重金屬的檢查已知：S=1.0g；C=10g/ml；L= 1010-6求： V = ？解： 31藥物分析六雜質(zhì)第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法氯化物檢查法硫酸鹽檢查法鐵鹽檢查法重金屬檢查法砷鹽檢查法溶液顏色檢查法一般雜質(zhì)廣泛存在于藥物中，中國藥典把檢查方法

12、收載于附錄中易炭化物檢查法溶液澄清度檢查法熾灼殘?jiān)鼨z查法干燥失重測(cè)定法水分測(cè)定法殘留溶劑測(cè)定法15-7月-2232藥物分析六雜質(zhì)一般雜質(zhì)檢查規(guī)則 藥品檢驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：1. 遵循平行操作原則（1）儀器的配對(duì)性 如納氏比色管應(yīng)配對(duì)，刻度線高低相差不超過2mm，砷鹽檢查時(shí)導(dǎo)氣管長度及孔的大小要一致（2）對(duì)照品與供試品的同步操作藥物分析六雜質(zhì) 2. 正確的取樣及供試品的稱量范圍 1g不超過2%，1g不超過1% 3. 正確的比色、比濁方法 4. 檢查結(jié)果不符合規(guī)定或在限度邊緣時(shí)應(yīng)對(duì)供試管和對(duì)照管各復(fù)查二份 藥物分析六雜質(zhì) 原理中國藥典檢查 方法實(shí)驗(yàn)條件注意事項(xiàng)Cl-（樣品）+AgNO3 HNO3 Ag

13、Cl（白色渾濁液）與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液（一定量），相同條件下生成的氯化銀渾濁液比較，判斷供試品中的氯化物是否超過了限量見講義標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液10g Cl-/ml 5ml8ml50 g 80 g Cl-/50ml 此范圍氯化物所顯濁度明顯HNO3供試品溶液不澄清過濾帶顏色：內(nèi)消色法；化學(xué)方法排除有機(jī)氯破壞 Cl-一、氯化物(Chloride)的檢查法藥物分析六雜質(zhì)一、氯化物的檢查法1原理* 氯化物在硝酸酸性溶液中與硝酸銀試液作用，產(chǎn)生氯化銀白色渾濁液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液相同條件下生成的氯化銀渾濁液比較，判斷供試品中的氯化物是否超過了限量15-7月-2236藥物分析六雜質(zhì)2.方法：Ch.P藥典附錄

14、除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml（溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，應(yīng)濾過；置50ml納氏比色管中，加水使成約40m1，搖勻，即得供試溶液。另取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液，置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10m1，加水使成40m1，搖勻，即得對(duì)照浴液。藥物分析六雜質(zhì)于供試溶液與對(duì)照溶液中，分別加入硝酸銀試液1.0m1，用水稀釋使成50m1，搖勻，在暗處放置5分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較，即得藥物分析六雜質(zhì)3條件控制* ： (1)標(biāo)準(zhǔn)液：NaCl標(biāo)準(zhǔn)液（每1ml相當(dāng)于10g的CL）(2)所加試劑試液的作用

15、和目的：稀硝酸酸性溶液50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜氯化物檢查避免弱酸銀鹽（碳酸銀，磷酸銀），及氧化銀沉淀形成而干擾加速氯化銀沉淀的生成并形成較好的乳濁15-7月-2239藥物分析六雜質(zhì)(3)操作：觀察前避光（暗處放置5 min）避免光線使單質(zhì)銀析出(4)觀察方法：氯化銀沉淀為白色，黑色背景，從比色管上向下 (5)供試液和對(duì)照液稀釋后，再加硝酸銀溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀(6)取樣原則：便于觀察或測(cè)量結(jié)果(50g80g) /50ml CL- ，即標(biāo)準(zhǔn)液5 8ml，渾濁梯度明顯。）根據(jù)這個(gè)量選擇供試品的量。 氯化物檢查藥物分析六雜質(zhì)4供試品處理*目的：排除干擾方法：（1）供試品液

16、混濁：過濾，用含硝酸的水洗濾紙，以保證氯化物的完全轉(zhuǎn)移。（2）供試品有色：氯化物檢查根據(jù)藥物的化學(xué)性質(zhì)，設(shè)計(jì)適當(dāng)?shù)呐懦蓴_的方法。兩份供試品溶液：1.加過量硝酸銀洗滌沉淀無氯化物的有色溶液加入標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉對(duì)照品。2.按規(guī)定方法檢查。41藥物分析六雜質(zhì)4供試品處理*目的：排除干擾方法：（3）有機(jī)藥物中氯化物的檢查溶于水的有機(jī)藥物 不溶于水的有機(jī)藥物氯化物檢查（4）有機(jī)氯雜質(zhì)：先破壞，再檢查 （注意與有機(jī)藥物中的氯化物區(qū)別）直接檢查加水振搖氯化物溶解濾除不溶物加熱溶解供試品冷沉淀過濾取濾液藥物在稀乙醇或丙酮 中溶解檢查15-7月-2242藥物分析六雜質(zhì)二、硫酸鹽檢查法 原理 中國藥典檢查方法實(shí)驗(yàn)條件

17、注意事項(xiàng)SO42- + BaCl2 HCl BaSO4（白色渾濁） 標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液見講義標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液 1ml 0.1mg SO42-, 50ml中含0.1mg0.5mg SO42-,標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液 1ml5ml, 此范圍內(nèi)濁度梯度明顯HCl酸性同氯化物檢查法藥物分析六雜質(zhì)1.原理*硫酸鹽在鹽酸酸性溶液中與氯化鋇試液作用，產(chǎn)生硫酸鋇白色渾濁液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液相同條件下生成的渾濁比較，判斷供試品中的硫酸鹽是否超過了限量2.方法：講義或Ch.P硫酸鹽15-7月-2244藥物分析六雜質(zhì)3.條件控制： 標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液（每1ml相當(dāng)于0.1mg的SO42-），每50ml溶液中含0.1

18、mg 0.5mg 的SO42-）渾濁明顯，相當(dāng)于1.0ml 5.0ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。 酸度（pH1）、稀鹽酸防止碳酸鋇或磷酸鋇沉淀的產(chǎn)生硫酸鹽加入氯化鋇試液后，應(yīng)立即充分搖勻防止局部過濃，影響產(chǎn)生渾濁的程度45藥物分析六雜質(zhì)4供試品處理目的：排除干擾方法：與氯化物類似供試品如果需要過濾，用加入鹽酸的酸性水洗滌濾紙上的硫酸鹽藥物分析六雜質(zhì)三、鐵鹽檢查法 原理 中國藥典檢查法實(shí)驗(yàn)條件Fe3+6SCN- H+ Fe(SCN)63- 紅色FeNH4(SO4)212H2O 標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液（硫酸鐵銨） 10g/ml見講義50ml含5 g90 g A C 線性50ml含10g50 gFe3+ 標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液15ml

19、易于辨別HCl酸性藥物分析六雜質(zhì)鐵鹽檢查法1原理（一）硫氰酸鹽法*鐵鹽在鹽酸酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色可溶性硫氰酸鐵配位離子，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液同法處理后所呈顏色比較，判斷供試品鐵鹽是否超限15-7月-2248藥物分析六雜質(zhì) 2.方法：講義或Ch.P，藥典附錄 除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml，移置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg，用水稀釋使成35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻；如顯色，立即與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液一定量制成的對(duì)照溶液（取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液，置50ml納氏比色管中，加水使成25ml，加稀鹽酸

20、4ml與過硫酸銨50mg，用水稀釋使成35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻）比較，即得。 藥物分析六雜質(zhì)3.條件控制： 標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液：硫酸鐵銨FeNH4(SO4)212H2O 標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液（每1ml相當(dāng)于10ug的Fe3+ ），每50ml溶液中含5ug 90ug 的Fe3+ 時(shí)，溶液的吸收度與濃度呈良好線形關(guān)系。 目視比色，以50ml溶液中含10ug 50ug 的Fe3+ 渾濁明顯，易于區(qū)別。15-7月-2250藥物分析六雜質(zhì)3.條件控制： 標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液：硫酸鐵銨FeNH4(SO4)212H2O供試品反應(yīng)加入試液作用：增加生成配位離子穩(wěn)定性 +硫酸，防止鐵鹽水解鹽酸

21、防止Fe3+水解50ml中加入稀鹽酸4ml過硫酸銨（氧化劑）氧化 Fe2+成 Fe3+防止由于光線使硫氰酸鐵還原或分解過量硫氰酸銨提高反應(yīng)靈敏度 消除氯化物等的干擾51藥物分析六雜質(zhì)4供試品處理方法：（1）色調(diào)不一致或顏色較淺 加正丁醇或異戊醇提取分別取醇層比色。硫氰酸鐵配位離子在正丁醇等中的溶解度大增加酸度；增加硫氰酸銨的量；用正丁醇提取后比色（2）其它能與Fe3+或SCN-反應(yīng)的酸根陰離子，CL-、枸櫞酸根（3）某些有機(jī)藥物實(shí)驗(yàn)條件下不溶解熾灼殘?jiān)婪z查。15-7月-2252藥物分析六雜質(zhì)（二）巰基醋酸法*方法靈敏度高，試劑較貴試劑巰基醋酸還原 Fe3+ Fe2+，在氨堿性溶液中進(jìn)一步與

22、 Fe2+ 作用生成紅色配位離子，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液經(jīng)同法處理后產(chǎn)生的顏色進(jìn)行比較，以限制鐵的量。15-7月-2253藥物分析六雜質(zhì)四、重金屬(Heavy metals)檢查法 原理 實(shí)驗(yàn)條件重金屬指在實(shí)驗(yàn)條件下能與S2-(硫代乙酰胺或硫化鈉)作用顯色的金屬雜質(zhì)，如Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Sn、Sb、Bi等，其中Pb生產(chǎn)中遇到機(jī)會(huì)多，易在人體內(nèi)蓄積中毒。檢查時(shí)以鉛Pb作為代表。標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液：硝酸鉛注意：配制與貯存用的玻璃容器均不得含鉛 顯色劑： H2S試液（1990版藥典前） 硫代乙酰胺試液（1990版藥典后） 硫化鈉試液（JP）藥物分析六雜質(zhì)重金屬檢查法第一法硫代乙酰胺法 適用于實(shí)驗(yàn)條件

23、下，供試液澄清、無色，對(duì)檢查無干擾或經(jīng)處理后對(duì)檢查無干擾的藥物。CH3CSNH2 + H2O CH3CONH2 + H2S 適宜目視比色范圍 H2S + Pb2+ pH3.5(醋酸鹽緩沖液) PbS + 2H+ 10g20g Pb/27ml 黃色棕黑色硫化物均勻混懸液 標(biāo)準(zhǔn)鉛10 g Pb/1ml第二法用于在水中難溶或能與重金屬離子形成配位化合物而影響檢查的有機(jī)藥物將供試品熾灼破壞后檢查或取熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)M(jìn)行檢查第三法適于磺胺類、巴比妥類等難溶于稀酸，但溶于堿水溶液的藥物。取規(guī)定量的供試品，加NaOH試液5ml，水20ml，溶解后，加硫化鈉試液5滴，再與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同樣處理比色。

24、第四法微孔濾膜法適用于含 2 5 g 重金屬雜質(zhì)檢查。 限量低時(shí)，硫化物顏色太淺，需富集。藥物分析六雜質(zhì)第一法、硫代乙酰胺法 2.原理和方法 對(duì)照法1.適用范圍在實(shí)驗(yàn)條件下，供試液澄清、無色，對(duì)檢查無干擾或經(jīng)處理后對(duì)檢查無干擾的藥物。即溶于水、稀酸和乙醇的藥物。重金屬檢查 56藥物分析六雜質(zhì)方法：講義或Ch.P，藥典附錄 除另有規(guī)定外，取25ml納氏比色管兩支，甲管中加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖液(pH3.5) 2ml后，加水或各藥品項(xiàng)下規(guī)定的溶劑稀釋使成25m1，乙管加入按各藥品項(xiàng)下規(guī)定方法制成的供試液25m1；再在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2min，同置白紙上，自

25、上向下透視，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深。藥物分析六雜質(zhì)（1）標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉛溶液（每1ml相當(dāng)于10ug的Pb2+） 用硝酸鉛配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液（加硝酸防止Pb2+水解），臨用前加水稀釋而成。 適宜比色范圍為27ml溶液中含1020g的Pb2+，相當(dāng)于加入標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液12ml。 3. 條件控制藥物分析六雜質(zhì) （2） pH值為33.5硫化鉛沉淀完全 本法用2ml pH3.5的醋酸鹽緩沖液控制溶液的弱酸性。 供試品如果用強(qiáng)酸溶解、或用過強(qiáng)酸處理過氨水酚酞中性（無色） 3. 條件控制藥物分析六雜質(zhì)重金屬4.供試品處理供試品有色：外消色法消除（在對(duì)照管中加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液。）內(nèi)消色法。

26、(2) 供試品有微量Fe3+ Fe3+會(huì)氧化硫化氫生成單質(zhì)硫，干擾比色，加抗壞血酸（Vc）或鹽酸羥胺（0.51.0g）使Fe3+ 還原成Fe2+離子，消除干擾再檢查。60藥物分析六雜質(zhì)(3)供試品為鐵鹽 在相對(duì)密度1.1031.105的鹽酸中使大部分 Fe3+生成 再加氨試液，使溶液成堿性，用氰化鉀掩蔽殘留的微量鐵鹽后，加硫化鈉試液檢查鉛鹽(4)供試品本身也能生成不溶性硫化物 根據(jù)具體情況特殊處理。若藥物本身能生成不溶性硫化物時(shí)，可加入掩蔽劑消除干擾。如ZnSO4中重金屬的檢查，要在堿性下加KCN掩蔽Zn2+后，再依第三法檢查重金屬藥物分析六雜質(zhì)第二法、熾灼后的硫代乙酰胺法 2.原理 1.適用

27、范圍在水、乙醇中難溶，或能與重金屬離子形成配位化合物的有機(jī)藥物。將供試品破壞后（如熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)酉跛峒訜崽幚?，使有機(jī)物分解、破壞完全后，再按第一法進(jìn)行檢查重金屬15-7月-2262藥物分析六雜質(zhì)操作方法重金屬藥物分析六雜質(zhì)3.注意事項(xiàng)重金屬1）熾灼溫度：5006002）加入試劑的干擾：硝酸、鹽酸3）特殊藥物對(duì)容器的腐蝕含鈉及氟的有機(jī)藥物應(yīng)使用鉑坩堝、石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬）15-7月-2264藥物分析六雜質(zhì)第三法、硫化鈉法 2.原理 1.適用范圍適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。 在堿性介質(zhì)中，以硫化鈉為顯色劑

28、，使Pb2+生成PbS微粒的混懸液，與一定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理后所呈顏色比較進(jìn)行檢查重金屬65藥物分析六雜質(zhì)第三法、硫化鈉法 3.注意事項(xiàng)硫化鈉對(duì)玻璃有一定的腐蝕性；溶液放置過久會(huì)產(chǎn)生絮狀物，試液應(yīng)臨用新制。重金屬15-7月-2266藥物分析六雜質(zhì)第四法、微孔濾膜法 使重金屬生成的硫化物富集于微孔濾膜上，比較供試品和一定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理后所產(chǎn)生的色斑深淺，確定重金屬是否超限。1.適用范圍適用于2 5 g重金屬雜質(zhì)檢查，提高靈敏度。2.原理 重金屬第一法：10-20ug15-7月-2267藥物分析六雜質(zhì)3.注意事項(xiàng)供試溶液有顏色或渾濁，應(yīng)用濾膜進(jìn)行預(yù)濾 ；濾膜污染，換濾膜 A：濾器上

29、蓋部分B：連接頭；C：墊圈D：孔徑3.0m的濾膜E：尼龍墊網(wǎng)(孔徑不限)F：濾器下部 重金屬15-7月-2268藥物分析六雜質(zhì)*五、砷鹽(Arsenic)檢查法 砷鹽生產(chǎn)過程使用無機(jī)試劑引入標(biāo)準(zhǔn)砷溶液： 三氧化二砷方法：中國藥典檢查法第一法：古蔡法（Gutzeit法）第二法：二乙基二硫代氨基甲酸銀法（AgDDC法） （silver diethyldithio-carbamate）所加試劑的作用： 碘化鉀、氯化亞錫、醋酸鉛棉的作用儀器裝置15-7月-2269藥物分析六雜質(zhì)(一)古蔡法1. 原理： Zn + H+ H2 + Zn2+ 新生態(tài)氫 AsO33- AsH3 砷鹽 HgBr2 (溴化汞試紙

30、) As3+ As(HgBr)3 (黃色) AsH(HgBr)2 (棕色) As2Hg3 (棕黑色)砷斑與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較藥物分析六雜質(zhì)古蔡法 （Gutzeit）：醋酸鉛棉花： 吸收HsS砷斑HgBr2As(HgBr)3 + AsH(HgBr)2 +As2Hg3橙黃色砷斑黃色棕色棕黑色加 KI 和 SnCl2目的： 還原 As5+； 抑制SbH3生成； 形成鋅錫齊， 使氫氣的生成連續(xù)均勻。Zn粒、HCl2、裝置A.砷化氫發(fā)生瓶 B.中空磨口塞 C.導(dǎo)氣管 D.具孔有機(jī)玻璃旋塞 E.具孔有機(jī)玻璃旋塞蓋71藥物分析六雜質(zhì)3、注意事項(xiàng)(1)標(biāo)準(zhǔn)砷溶液:三氧化二砷配制儲(chǔ)備液標(biāo)準(zhǔn)砷溶液臨用前新配：1gAs/

31、1ml 中國藥典規(guī)定: 標(biāo)準(zhǔn)砷斑用2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液(2 gAs) 清晰砷斑。過深或過淺均會(huì)影響比色的正確 藥物含砷限量不同按規(guī)定限量改變供試品取用量(2)氫氣的發(fā)生速度砷化氫逸出速度砷斑色澤、清晰鋅粒的大小和用量溶液的酸度反應(yīng)溫度藥物分析六雜質(zhì)注意事項(xiàng)(3)酸性氯化亞錫SnCl2及碘化鉀KI的作用是還原As5+為As3+，加快反應(yīng)速度 As5+ As3+ AsO43- + 2I- + 2H+ AsO33- + I2 + H2O AsO43- + Sn2+ + 2H+ AsO33- + Sn4+ + H2O I2 + Sn2+ 2I- + Sn4+ 4I- + Zn2+ ZnI4 2- 穩(wěn)定配位

32、離子 利于AsH3不斷生成 Zn + SnCl2 鋅粒表面形成鋅錫齊去極化作用 氫氣均 勻連續(xù)發(fā)生藥物分析六雜質(zhì)(4)導(dǎo)氣管裝醋酸鉛棉花60mg（裝管高度約6080mm）醋酸鉛棉花的作用是消除鋅粒及供試品中少量硫化物的干擾。(5)溴化汞試紙 + AsH3反應(yīng)靈敏， 但所形成的砷斑不穩(wěn)定。溴化汞試紙 保持干燥、避光保存在棕色磨口瓶中形成砷斑后，立即比較 。藥物分析六雜質(zhì)4、供試品處理(1)供試品若為硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽時(shí) 加HNO3， 使氧化成硫酸鹽，以除去干擾再檢。如硫代硫酸鈉中砷鹽的檢查。 (2)供試品若為鐵鹽，需先加酸性氯化亞錫試液，將Fe3+還原為Fe2+。鐵鹽 SnCl2 Fe

33、2+如枸櫞酸鐵銨中砷鹽的檢查。砷鹽藥物分析六雜質(zhì)(3)干擾砷檢查的有機(jī)藥物，先進(jìn)行有機(jī)破壞能溶于水, 不干擾檢查的藥物, 直接依法檢查. 環(huán)狀結(jié)構(gòu)有機(jī)藥物 As 共價(jià)鍵結(jié)合結(jié)果偏低或難以檢出有機(jī)破壞(堿破壞法; 酸破壞法)堿破壞法：石灰法、無水碳酸鈉堿融法 酸破壞法：如葡萄糖中砷鹽的檢查 砷鹽15-7月-2276藥物分析六雜質(zhì)(4)含銻藥物，可改用白田道夫法 Betterdorff法含銻藥物如酒石酸銻鉀、葡萄糖酸銻鈉，用古蔡法檢砷時(shí)，銻鹽也可被還原為銻化氫，與溴化汞試紙灰色銻斑，干擾砷斑的檢查。 SbH3 + HgBr2 SbH2(HgBr) + HBr原理： SnCl2 在鹽酸中能將砷鹽還原

34、成棕褐色的膠態(tài) 砷，與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液按同法處理后進(jìn)行 比較，即可判斷供試品中含砷限量。 2As3+ + 3SnCl2 + 6HCl 2As+3SnCl4 +6H+ (注意！不加 Zn 粒和 KI )15-7月-2277藥物分析六雜質(zhì)(二)二乙基二硫代氨基甲酸銀法(AgDDC法) 檢查、含量測(cè)定1.原理紅色膠態(tài)銀藥物分析六雜質(zhì)是利用砷化氫與Ag-DDC吡啶溶液作用，AsH3使Ag-DDC中的銀還原為紅色膠態(tài)銀。試劑的作用同古蔡法。用(1)目視比色法(2)以Ag-DDC溶液為空白，于510nm的波長處，測(cè)定吸收度，再與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液用同法處理后得到的有色溶液進(jìn)行比較,供試溶液的吸收度不得大于標(biāo)

35、準(zhǔn)砷溶液的吸收度。藥物分析六雜質(zhì)2.裝置藥物分析六雜質(zhì)Ag-DDC法 ：二乙基二硫代氨基甲酸銀法AsH3Ag-DDC吡啶Ag（紅色膠態(tài)）ABC醋酸鉛棉花Zn、HCl、KI、SnCl2同古蔡氏法Ag-DDC吡啶溶液25-40水浴反應(yīng)45min檢查(1)比色(2)510nm測(cè)吸收度15-7月-2281藥物分析六雜質(zhì)3.注意事項(xiàng)(1)線性關(guān)系 1 g 10 g As /40ml線性關(guān)系良好，顏色2小時(shí)穩(wěn)定, 重現(xiàn)性好, 可作為限量檢查和砷鹽含量測(cè)定。(2)有機(jī)堿吸收用有機(jī)堿吸收反應(yīng)產(chǎn)生的HDDC( 二乙基二硫代氨基甲酸)有利于反應(yīng)的進(jìn)行。USP（24）用吡啶，ChP（2000）用三乙胺。 用吡啶檢測(cè)

36、靈敏度: 0.5g As /30ml用三乙胺檢測(cè)靈敏度略低于吡啶。藥物分析六雜質(zhì)六、溶液顏色檢查法目的：控制藥物中有色雜質(zhì)含量方法：中國藥典（2005年版）第一法：目視比色法:與標(biāo)準(zhǔn)比色液進(jìn)行比較的方法第二法：分光光度法:規(guī)定波長處吸收度值第三法：色差計(jì)法15-7月-2283藥物分析六雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)比色液的配制 第一法：目視比色法觀察方法與標(biāo)準(zhǔn)比色液比較的方法，全波長范圍定性觀察 藥物分析六雜質(zhì)黃綠色黃色橙黃色橙紅色棕紅色比色用重鉻酸鉀液比色用硫酸銅液比色用氯化鈷液水 五個(gè)色調(diào)：每個(gè)色調(diào)10個(gè)色號(hào)110淺深（62.4mg/ml, 藍(lán)色）（0.8000mg/ml, 黃色）（59.5mg/ml, 紅色）

37、85藥物分析六雜質(zhì)色差值標(biāo)準(zhǔn)液供試液水第二法：使用分光光度法檢查有色雜質(zhì)如果溶解度不好，先過濾，再在規(guī)定波長測(cè)定，吸收度不得超過規(guī)定值。第三法：色差計(jì)法:本法是通過色差計(jì)直接測(cè)定溶液的透視三刺激值，對(duì)其顏色進(jìn)行定量表述和分析的方法。 15-7月-2286藥物分析六雜質(zhì)七、易炭化物檢查法目的:檢查藥物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有機(jī)雜質(zhì)。方法:與規(guī)定的對(duì)照液進(jìn)行比色供試品一定量加入到5ml硫酸中振搖溶解靜置15分鐘與一定量標(biāo)準(zhǔn)比色液比較不得更深比色：同置白色背景前，平視觀察比較。 藥物分析六雜質(zhì) 如為固體，應(yīng)先研成細(xì)粉。 如不溶，可加熱。加熱溶解后，放冷 至室溫，再移置比色管中。 注意事項(xiàng)

38、：對(duì)照液溶液顏色檢查項(xiàng)的對(duì)照液比色用硫酸銅、重鉻酸鉀、氯化鈷按規(guī)定方法配制的對(duì)照液KMnO4液藥物分析六雜質(zhì)八、溶液澄清度檢查法目的:檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)用作注射劑的原料藥，一般應(yīng)作此項(xiàng)檢查。 加水 15ml 濁度標(biāo)準(zhǔn)液 濁度標(biāo)準(zhǔn)原液 濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液 稀釋 至1000ml水配制后5分鐘內(nèi)使用 550nm不同級(jí)號(hào) A：0.120.15 0.5 1 2 3 4與水配制藥物分析六雜質(zhì)檢查方法室溫 供試品溶液 等量 分別置于配對(duì)的比濁用玻璃管中 濁度標(biāo)準(zhǔn)液 暗室內(nèi)垂直同置于傘棚燈下 照度1000 lx 水平方向觀察、比較 檢查 藥物分析六雜質(zhì)濁度標(biāo)準(zhǔn)液硫酸肼 烏洛托品 水*甲醛腙濁度標(biāo)準(zhǔn)液：貯備

39、液、原液、比濁用液新沸過冷水15-7月-2291藥物分析六雜質(zhì) 硫酸高溫?zé)胱?揮發(fā)物質(zhì)逸出有機(jī)藥物 硫酸鹽熾灼殘?jiān)?硫酸灰分九、熾灼殘?jiān)鼨z查法目的:控制有機(jī)藥物和揮發(fā)性無機(jī)藥物中存在的非揮發(fā)性無機(jī)雜質(zhì)。熾灼殘?jiān)?有機(jī)藥物經(jīng)炭化或揮發(fā)性無機(jī)藥物加熱分解后,高溫?zé)胱?所產(chǎn)生的非揮發(fā)性無機(jī)雜質(zhì)的硫酸鹽。方法:稱重量法方法:藥物分析六雜質(zhì)檢查方法：規(guī)定量供試品置已熾灼至恒重的坩堝中精密稱定 電爐 緩緩熾灼至炭化 放冷 至室溫 加硫酸 0.5ml濕潤低溫加熱至硫酸蒸氣除盡后將坩堝置高溫電爐中700800熾灼至恒重計(jì)算計(jì)算方法:稱重量法藥物分析六雜質(zhì)注意事項(xiàng)：熾灼殘?jiān)蘖? 0.1%0.2% , 一般使熾

40、灼殘?jiān)?12mg（稱量誤差決定），取樣量大，1g（0.1%） 用藥劑量小或價(jià)格昂貴的藥品一般不作此項(xiàng)檢查.熾灼殘?jiān)? 緩緩加熱進(jìn)高溫馬弗爐前要揮盡硫酸 如果重金屬檢查 , 熾灼溫度500600 ， 避免重金屬雜質(zhì)揮發(fā)藥物分析六雜質(zhì)注意事項(xiàng)：坩堝應(yīng)先700800熾灼至恒重?zé)胱浦梁阒兀?供試品連續(xù)兩次熾灼（第二次稱重至少要熾灼30min）后的重量差異在0.3mg以下。含氟藥品鉑坩鍋瓷坩堝編號(hào)用藍(lán)墨水與FeCl3溶液混合涂寫恒重15-7月-2295藥物分析六雜質(zhì)十、干燥失重 測(cè)定法目的：檢查藥物中的水分或其 它揮發(fā)性物質(zhì)（乙醇）指藥物在規(guī)定條件下經(jīng)干燥后所減失的重量，根據(jù)所減失的重量和取樣量計(jì)算供

41、試品干燥失重的百分率。量：恒重第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1h后進(jìn)行。 藥物分析六雜質(zhì)常壓恒溫干燥法干燥劑干燥法減壓干燥法熱分析法熱重分析法（TGA）差示熱分析法（DTA）差示掃描量熱法（DSC）15-7月-2297藥物分析六雜質(zhì)“恒重”：藥典術(shù)語，指供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后的重量差異在0.3mg以下的重量。干燥溫度：105（一般）， 枸櫞酸鈉， 180 干燥至恒重。 硫代硫酸鈉，含結(jié)晶水，防熔化，4050 ，漸次升溫105 恒重器皿：扁形稱量瓶，樣品厚度5mm， 疏松物質(zhì)，不超過10mm； 大顆粒結(jié)晶，研細(xì)，2mm。置干燥器中放冷至室溫稱量干燥失重（一）常壓恒溫干燥法適用藥

42、物：受熱較穩(wěn)定的藥物。藥典：40多種藥物分析六雜質(zhì)（三）干燥劑干燥法適用藥物：適用于受熱易分解或揮發(fā)的藥物如氯化銨；苯佐卡因；硝酸異山梨酯；馬來酸麥角新堿。干燥劑：硅膠、硫酸、五氧化二磷吸水效力：P2O5 硅膠硫酸 吸水效果好、使用方便、價(jià)廉 變色硅膠1g吸水20mg變色 105 干燥吸水容量：硫酸 P2O5 (貴) 再次使用藥物分析六雜質(zhì)（二）減壓干燥法真空干燥器適用藥物：適于熔點(diǎn)低、受熱不穩(wěn)定、水分難趕除的藥物 減壓干燥劑干燥 恒溫減壓干燥例:布洛芬：m.p 74.5 77.5 規(guī)定:P2O5干燥器中減壓干燥至恒重 腎上腺素： P2O5干燥器中減壓干燥 18 小時(shí) 地高辛：105 減壓干燥

43、 1 小時(shí)恒溫減壓干燥 箱減壓壓力：2.67 Kpa(20mmHg)以下一般情況下藥物分析六雜質(zhì)熱分析法是在程序控制溫度下，精確記錄待測(cè)物質(zhì)理化性質(zhì)與溫度的關(guān)系，研究其受熱過程所發(fā)生的晶型轉(zhuǎn)變、熔融、升華、吸附等物理變化和脫水、熱分解、氧化、還原等化學(xué)變化，用以對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行物理常數(shù)、熔點(diǎn)和沸點(diǎn)的確定以及作為鑒別和純度檢查的方法。 干燥失重（四）熱分析法15-7月-22101藥物分析六雜質(zhì) 類型（根據(jù)測(cè)定物理量的不同 ）：熱重分析法（Thermogravimetric Analysis，TGA）差示熱分析法（Differential Thermal Analysis，DTA）差示掃描量熱法（Di

44、fferential Scanning Calorimetry，DSC）15-7月-22102藥物分析六雜質(zhì)1、熱重分析法 在程序控制溫度下，測(cè)量物質(zhì)的質(zhì)量與溫度關(guān)系的方法。熱重分析儀：由安裝在程序升溫爐中的微量分析天平組成，天平不受溫度的影響，經(jīng)過長時(shí)間加熱仍有良好的穩(wěn)定性。樣品用量：120mg容器：瓷坩堝、鉑坩堝 天平盤 升溫 氮?dú)饬鳎ɑ蚱渌栊詺饬鳎ё邠]發(fā)性物質(zhì)藥物分析六雜質(zhì)ABCDWT或t起始溫度終止溫度平臺(tái)熱重曲線：記錄質(zhì)量變化對(duì)溫度（或時(shí)間）的關(guān)系曲線 104藥物分析六雜質(zhì)熱重分析特點(diǎn)能準(zhǔn)確地測(cè)量物質(zhì)的質(zhì)量變化及變化的溫度樣品用量少(120mg)測(cè)定速度快（比通常干燥失重法）適用

45、：貴重藥品；在空氣中易氧化的藥物 干燥失重藥物分析六雜質(zhì)例：USP（24），用TGA法測(cè)定：硫酸長春堿的干燥失重供試品約10mg精密稱定氮?dú)饬鳎魉?0ml/min），5 /min 恒速升溫200 范圍內(nèi)記錄TG曲線減失重量不得過15.0%藥物分析六雜質(zhì)2、差示熱分析法（DTA）概念:差熱分析法是在程序控制溫度下，測(cè)量待測(cè)物質(zhì)（供試品）和參比物之間的溫度差與溫度(或時(shí)間)關(guān)系的熱分析技術(shù)。差熱分析曲線：記錄樣品與參比物的溫度差(T)變化對(duì)溫度（或時(shí)間）的關(guān)系曲線 參比物：應(yīng)具有惰性，與待測(cè)物有相似的熱容15-7月-22107藥物分析六雜質(zhì)應(yīng)用原理：待測(cè)物的相變(包括熔融、升華和晶型轉(zhuǎn)變等)和化

46、學(xué)反應(yīng)(包括脫水、分解和氧化還原等)可產(chǎn)生特征吸熱和特征放熱峰。 復(fù)雜的化合物常具有比較復(fù)雜的差熱分析曲線，各種吸熱和放熱峰的個(gè)數(shù)、形狀和位置與相應(yīng)的溫度可用來定性地鑒別待測(cè)物質(zhì)或其多晶型；與其對(duì)照品或標(biāo)準(zhǔn)品差熱分析曲線之間的差異，亦可檢查待測(cè)物質(zhì)的純度。15-7月-22108藥物分析六雜質(zhì)0+ABBCDDEFGTT or tDTA曲線峰寬T 負(fù)值倒峰 吸熱反應(yīng)T 正值正峰 放熱反應(yīng)DTA適用：測(cè)藥物熔點(diǎn) 鑒定、估測(cè)藥物純度 根據(jù)吸熱或放熱峰的數(shù)目、形狀和位置藥物分析六雜質(zhì)3、差示掃描量熱法（DSC）應(yīng)用：鑒別藥物：DSC曲線上峰位置、 形狀、數(shù)目 檢查雜質(zhì)：熔點(diǎn)下降 準(zhǔn)確測(cè)藥物熔點(diǎn)藥物分析六

47、雜質(zhì)DSC法是在程序控制溫度下，測(cè)量維持樣品與參比物質(zhì)的溫度相同,系統(tǒng)所需輸給待測(cè)物和參比物的能量差隨溫度(或時(shí)間)變化差示掃描量熱法 DSC法基本類型樣品與參比物的熱流量差（功率差(dQ/dt)）縱坐標(biāo)功率補(bǔ)停型熱流型樣品與參比物的溫度差(T)成正比溫度T或時(shí)間t橫坐標(biāo)DSC曲線15-7月-22111藥物分析六雜質(zhì)3）DSC法曲線15-7月-22112藥物分析六雜質(zhì)藥物分析六雜質(zhì)貴重藥物的干燥失重測(cè)定空氣中不穩(wěn)定藥物的測(cè)定區(qū)分結(jié)晶水和吸附水測(cè)定結(jié)晶水含量1)TGA法藥物的熔點(diǎn)測(cè)定晶型鑒別純度測(cè)定雜質(zhì)限量2)DTA和DSC法熱分析法的應(yīng)用15-7月-22114藥物分析六雜質(zhì)十一、水分測(cè)定法卡爾

48、費(fèi)休法，甲苯法費(fèi)休氏法原理根據(jù)碘和二氧化硫在無水吡啶和無水甲醇溶液中能與水起定量反應(yīng)的原理測(cè)定水分。所用儀器應(yīng)該干燥，并能避免空氣中水分的侵入；測(cè)定要在干燥的地方進(jìn)行。藥物分析六雜質(zhì)費(fèi)休氏試液的配制：稱取碘（置硫酸干燥器內(nèi)48小時(shí)以上）110g，置干燥的具塞錐形瓶中，加無水吡啶160ml，注意冷卻，振搖至碘全部溶解，加無水甲醇300ml，稱定重量，將錐形瓶置冰浴中冷卻，在避免空氣中水分侵入的條件下，通入干燥的二氧化硫至重量增加72g，再加無水甲醇使成1000ml，密塞，搖勻，于暗處放置24小時(shí)后進(jìn)行標(biāo)定。藥物分析六雜質(zhì)無水吡啶和無水甲醇利于使可逆反應(yīng)向正反應(yīng)進(jìn)行。水與費(fèi)休氏試液作用的摩爾比為：

49、水碘二氧化硫甲醇吡啶=11113藥物分析六雜質(zhì)供試品用費(fèi)休氏試液滴定，再滴定空白溶液A：供試品消耗的費(fèi)休氏試液的容積 (ml)B：空白消耗的費(fèi)休氏試液的容積 (ml)F：每1ml費(fèi)休氏試液相當(dāng)于水的重量(mg)W：供試品的重量指示終點(diǎn)方法：1、碘終點(diǎn)前顯淡黃色，終點(diǎn)時(shí)呈紅棕色；2、永停法藥物分析六雜質(zhì)十二、有機(jī)溶劑殘留量測(cè)定法檢查藥物在生產(chǎn)過程中引入的有害有機(jī)溶劑 苯、氯仿、1,4二氧六環(huán)、二氯甲烷、吡啶、甲苯、環(huán)氧乙烷如生產(chǎn)過程中涉及其他需要檢查的有害有機(jī)溶劑，則應(yīng)在各品種項(xiàng)下另作規(guī)定。2000版藥物分析六雜質(zhì)Ch.P2005：溶劑殘留量限度要求中，按有機(jī)溶劑毒性程度分為一類二類三類四類有機(jī)

50、溶劑殘留量限度要求毒性較大、致癌、對(duì)環(huán)境有害對(duì)人有一定毒性對(duì)人的健康危險(xiǎn)性較小無毒理學(xué)資料盡量避免使用限量使用質(zhì)控要求限制使用推薦使用藥物分析六雜質(zhì)有機(jī)溶液柱溫()內(nèi)標(biāo)測(cè)定方法限量,%二氧六環(huán)170吡啶一法0.038吡啶170二氧六環(huán)一法0.02苯170甲苯一或二法0.0002甲苯170苯一或二法0.089氯仿1401,2-二氯乙烷一或二法0.006二氯甲烷140一或二法0.06環(huán)氧乙烷80二法0.001表3-2 殘留有機(jī)溶劑測(cè)定的方法和限量（2000）藥物分析六雜質(zhì)中國藥典規(guī)定，在殘留溶劑測(cè)定前應(yīng)作色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。(1)用待測(cè)物的色譜峰計(jì)算的填充柱理論塔板數(shù)應(yīng)大于1000，n 1000。

51、毛細(xì)柱，n 5000。(2)以內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，內(nèi)標(biāo)物與待測(cè)物的兩個(gè)色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5。 R 1.5（內(nèi)標(biāo)與待測(cè)物）(3)以內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣5次，所得待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的RSD不大于5。 n = 5 RSD 5% (內(nèi)標(biāo)法) (4)若以外標(biāo)法測(cè)定，所得待測(cè)物峰面積的RSD不大于10%。 n = 5 RSD 10% (外標(biāo)法)122藥物分析六雜質(zhì)中國藥典 GC法 （填充柱）固定相：直徑為0.250.18mm的GDX （二乙烯苯乙基乙烯苯型高分子 多孔小球）載氣：氮?dú)鈾z測(cè)器：FID柱溫：80170 （毛細(xì)管柱）方法，頂空進(jìn)樣藥物分析六雜質(zhì)第三節(jié) 特殊雜質(zhì)的檢查方法概念：特殊

52、雜質(zhì)是指在該藥的生產(chǎn)和貯藏過程中可能引入的特有雜質(zhì)。原理: 利用藥物和雜質(zhì)在物理和化學(xué)性質(zhì) 上的差異方法: 方法專屬性要強(qiáng)藥物分析六雜質(zhì)利用藥物和雜質(zhì)在物理 性質(zhì) 上的差異外觀形狀分配或吸附光的吸收 利用藥物和雜質(zhì)在化學(xué) 性質(zhì) 上的差異化學(xué)反應(yīng)的差異藥物不發(fā)生反應(yīng)，雜質(zhì)反應(yīng)藥物分析六雜質(zhì)一、色譜分析法薄層色譜法 TLC氣相色譜法 GC高效液相色譜法 HPLC藥物分析六雜質(zhì)吸附或分配性質(zhì)的差異 （色譜法） 中間體、副產(chǎn)物、分解產(chǎn)物 與藥物結(jié)構(gòu)近似 色譜分離 檢查 薄層色譜法；高效液相色譜法； 氣相色譜法。藥物分析六雜質(zhì)(一)薄層色譜法 TLC靈敏、簡便、快速、不需要特殊設(shè)備雜質(zhì)對(duì)照品比較法較理想

53、, 需雜質(zhì)對(duì)照品供試品、雜質(zhì)對(duì)照品點(diǎn)在同一薄層板上雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與對(duì)照品斑點(diǎn)比較，不得更深可認(rèn)為未超過規(guī)定的含雜質(zhì)最高限量。(2)供試品溶液自身稀釋對(duì)照法(高低濃度對(duì)照法)雜質(zhì)結(jié)構(gòu)不能確定，無雜質(zhì)對(duì)照：將供試品溶液按限量要求稀釋至一定濃度作為對(duì)照溶液供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)不得深于對(duì)照溶液所顯主斑點(diǎn)顏色（注：供試品與所檢雜質(zhì)所顯顏色應(yīng)相同）藥物分析六雜質(zhì)(3)雜質(zhì)對(duì)照品法與供試品溶液自身稀釋對(duì)照法并用藥物中存在多個(gè)雜質(zhì)其中有些雜質(zhì)有對(duì)照品雜質(zhì)未知或沒有對(duì)照品雜質(zhì)對(duì)照品法供試品溶液自身稀釋對(duì)照法藥物分析六雜質(zhì)(4)對(duì)照藥物法選供試品相同的藥物作為對(duì)照品（適用于：無適合雜質(zhì)對(duì)照或供試品中雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與主成分斑點(diǎn)的顏色有異）此對(duì)照藥物所含待檢雜質(zhì)應(yīng)符合于要求的限量水平，且穩(wěn)定性好。 試驗(yàn)條件下雜質(zhì)的檢測(cè)限來控制其限量少數(shù)藥物采用在試驗(yàn)條件下不出現(xiàn)雜質(zhì)斑點(diǎn)為合格。 此法受條件影響較大，如薄層板厚度、顯色劑的量等。 一般在無其它合適的檢查方法時(shí)才使用。藥物分析六雜質(zhì)為了保證TLC系統(tǒng)符合要求，中國藥典2005，增加了TLC系