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1、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)課本習(xí)題答案課本習(xí)題答案還能有效避免操作者自身被微生物感染還能有效避免操作者自身被微生物感染P15 旁欄思考題答案旁欄思考題答案P16旁欄思考題答案旁欄思考題答案(1)、()、(2)需要滅菌;()需要滅菌;(3)需要消毒)需要消毒倒平板操作的討論題倒平板操作的討論題 1.1.培養(yǎng)基滅菌后要冷卻到培養(yǎng)基滅菌后要冷卻到5050O OC C時(shí)倒平板。用時(shí)倒平板。用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度?什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度? 用手觸摸錐形瓶,溫度下降到剛剛不燙手時(shí)用手觸摸錐形瓶,溫度下降到剛剛不燙手時(shí)即可開始倒平板。即可開始倒平板。 2.2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過

2、火焰?為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰? 通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。 3.3.平板冷凝后,為什么要將平板倒置?平板冷凝后,為什么要將平板倒置? 平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。 4.4.在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺

3、在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么?微生物嗎?為什么? 空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物?;献躺?,因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。1 1、為什么在操作的第一步以及每次劃線之、為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物

4、污染培養(yǎng)物可能存在的微生物污染培養(yǎng)物殺死上次殘留的菌種,保證使下一次劃線時(shí),殺死上次殘留的菌種,保證使下一次劃線時(shí),菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。減少,以便得到菌落。及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。環(huán)境和感染操作者。平板劃線操作平板劃線操作 的討論題的討論題 2.2.在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?進(jìn)行劃線? 以免接種環(huán)溫度太高

5、,殺死菌種。以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。 3.3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí),為什在作第二次以及其后的劃線操作時(shí),為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?么總是從上一次劃線的末端開始劃線? 劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細(xì)菌的要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。涂布平板操作討論涂布平板操作討論 涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰

6、附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一想,合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一想,第第2 2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作?步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作? 應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌無菌”。例如,酒。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等等。其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等等。 1.1.未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長(zhǎng)?如未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長(zhǎng)?如果有菌落生長(zhǎng),說明了什么?果有菌落生長(zhǎng),說明了什么? 未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1 12 d

7、2 d后無后無菌落生長(zhǎng),說明培養(yǎng)基的制備是成功的,否則需菌落生長(zhǎng),說明培養(yǎng)基的制備是成功的,否則需要重新制備。要重新制備。 2.2.在接種大腸桿菌的培養(yǎng)基上,能否觀察到在接種大腸桿菌的培養(yǎng)基上,能否觀察到獨(dú)立的菌落?它們的大小、形狀、顏色相似嗎?獨(dú)立的菌落?它們的大小、形狀、顏色相似嗎? 如果接種成功的話,在培養(yǎng)基的表面可觀察如果接種成功的話,在培養(yǎng)基的表面可觀察到大小、形狀、顏色相似的菌落。到大小、形狀、顏色相似的菌落。四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià) 3.3.培養(yǎng)培養(yǎng)12h12h和和24h24h后,觀察到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相同后,觀察到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相同嗎?如果不同,請(qǐng)分析產(chǎn)生差異的原因?嗎?如果

8、不同,請(qǐng)分析產(chǎn)生差異的原因? 培養(yǎng)培養(yǎng)12 h12 h與與24 h24 h后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)有明顯不同。隨著時(shí)間的延長(zhǎng)、菌落的不斷生長(zhǎng),有明顯不同。隨著時(shí)間的延長(zhǎng)、菌落的不斷生長(zhǎng),使菌落不斷增大。使菌落不斷增大。 4.4.如果在培養(yǎng)基上觀察到不同形態(tài)的菌落,如果在培養(yǎng)基上觀察到不同形態(tài)的菌落,請(qǐng)分析其可能的原因。請(qǐng)分析其可能的原因。 無菌操作未達(dá)到要求:可能是培養(yǎng)基滅菌不無菌操作未達(dá)到要求:可能是培養(yǎng)基滅菌不徹底;可能是接種時(shí)發(fā)生了污染;也可能是在培徹底;可能是接種時(shí)發(fā)生了污染;也可能是在培養(yǎng)的過程中受到了污染。養(yǎng)的過程中受到了污染。課后練習(xí)題課后練習(xí)題 答案答案 1、可以從微生物生長(zhǎng)需要哪些條件的角度、可以從微生物生長(zhǎng)需要哪些條件的角度來思考。例如,微生物的生長(zhǎng)需要水、空來思考。例如,微生物的生長(zhǎng)需要水、空氣、適宜溫度、食品保存可以通過保持干氣、適宜溫度、食品保存可以通過保持干燥、真空的條件,以及冷藏的方法來阻止燥、真空的條件,以及冷藏的方法來阻止微生物的生長(zhǎng)

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