實驗九噬菌體效價的測定(張理珉)

1、實實 驗驗 內(nèi)內(nèi) 容容 一一培養(yǎng)基和實驗物品的準備培養(yǎng)基和實驗物品的準備本次實驗準備工作（本次實驗準備工作（2 2人人/ /組）組）1 1、配制牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)液、配制牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)液； （已準備好）。（已準備好）。2 2、測定效價時稀釋用、測定效價時稀釋用9ml9ml牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)液牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)液 2 2支支/ /組，分裝于組，分裝于1818180mm180mm試管；試管；3 3、牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基（、牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基（2%2%的瓊脂）的瓊脂）底層用，底層用，150ml/150ml/組，裝于組，裝于250ml250ml三角瓶，三角瓶， （用于制備（用于制備9

2、 9個無菌平板，倒薄一點）個無菌平板，倒薄一點）4 4、上層用、上層用5ml5ml牛肉膏蛋白胨半固體培養(yǎng)基（牛肉膏蛋白胨半固體培養(yǎng)基（0.8 %0.8 %的瓊脂的瓊脂），融化后分裝于），融化后分裝于1515150mm150mm試管中加塞包扎滅菌，試管中加塞包扎滅菌，1010支支/ /組；組；（上周已準備好）。（上周已準備好）。5 5、1ml1ml無菌吸管無菌吸管 4 4支支/ /組。組。實實 驗驗 內(nèi)內(nèi) 容容 二二噬菌體知識介紹噬菌體知識介紹頭部頭部六角形基板六角形基板領(lǐng)環(huán)領(lǐng)環(huán)螺旋形尾鞘螺旋形尾鞘核心或管核心或管（中空）（中空）尾刺或刺突尾刺或刺突尾絲尾絲宿主細宿主細菌菌苔菌菌苔噬菌斑噬菌斑實

3、實 驗驗 內(nèi)內(nèi) 容容 三三噬菌體效價的測定噬菌體效價的測定四、實驗步驟四、實驗步驟用牛肉膏蛋白胨固用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基倒平板體培養(yǎng)基倒平板9皿（薄一點）皿（薄一點） 噬菌體稀釋液（噬菌體稀釋液（10-5、10-6、10-7）0.1mL敏感菌菌懸液敏感菌菌懸液0.9mL放入已有底層固體培養(yǎng)基的放入已有底層固體培養(yǎng)基的平板中平板中混勻放置混勻放置5分鐘分鐘將將5mL溶化的半固體培養(yǎng)基中倒入溶化的半固體培養(yǎng)基中倒入上述平板中（上述平板中（4550）混勻（動作？）混勻（動作？）37培養(yǎng)培養(yǎng)5小時或小時或室溫培養(yǎng)室溫培養(yǎng)12小時小時觀察結(jié)果計數(shù)觀察結(jié)果計數(shù)噬菌體稀釋液噬菌體稀釋液0.1ml大腸桿菌培

4、養(yǎng)液大腸桿菌培養(yǎng)液0.9ml4548溶化好牛肉膏溶化好牛肉膏蛋白胨半固體培養(yǎng)基蛋白胨半固體培養(yǎng)基4ml混勻吸附混勻吸附5min搓動混勻后倒于搓動混勻后倒于有底層的平板中有底層的平板中鋪平鋪平37 培養(yǎng)培養(yǎng)56小時，觀察計數(shù)小時，觀察計數(shù)思考題思考題下周實驗內(nèi)容下周實驗內(nèi)容微生物（細菌）的常見生理生化反應 要點：要點： 1、掌握進行微生物大分子水解試驗的原理和方法。、掌握進行微生物大分子水解試驗的原理和方法。 2、了解糖發(fā)酵的原理和在細菌鑒定中的重要作用。、了解糖發(fā)酵的原理和在細菌鑒定中的重要作用。 3、掌握通過糖發(fā)酵（葡萄糖、蔗糖、乳糖）鑒別不同微、掌握通過糖發(fā)酵（葡萄糖、蔗糖、乳糖）鑒別不同微生物的方法。生物的方法。 4、了解、了解IMViC（吲哚、甲基紅、伏（吲哚、甲基紅