實(shí)驗(yàn)室常用染料性能介紹及常用藥品試劑和培養(yǎng)基的配制

1、實(shí)驗(yàn)室常用染料性能介紹及常用藥品試劑和培養(yǎng)基的配制一、生物標(biāo)本常用染料性能簡介（一）天然染料1、蘇木精 蘇木精是從南美的蘇木（熱帶豆科植物）干枝中用乙醚浸制出來的一種色素，是最常用的染料之一。蘇木精不能直接染色，必須暴露在通氣的地方，使他變成氧化蘇木精（又叫蘇木素）后才能使用，這叫做“成熟”。蘇木精的“成熟”過程需時(shí)較長，配置后時(shí)間愈久，染色力愈強(qiáng)。被染材料必須經(jīng)金屬鹽作媒劑作用后才有著色力。所以在配制蘇木精染劑時(shí)都要用媒染劑。常用的媒染劑有硫酸鋁按、鉀明礬和鐵明礬等。蘇木精是淡黃色到銹紫色的結(jié)晶體，易溶于酒精，微溶于水和甘油，是染細(xì)胞核的優(yōu)良材料，他能把細(xì)胞中不同的結(jié)構(gòu)分化出各種不同的顏色。

2、分化時(shí)組織所染的顏色因處理的情況而異，用酸性溶液（如鹽酸酒精）分化后呈紅色，水洗后仍恢復(fù)青藍(lán)色，用堿性溶液（如氨水）分化后呈藍(lán)色，水洗后呈藍(lán)黑色。2、洋紅 洋紅又叫胭脂紅或卡紅。一種熱帶產(chǎn)的雌性胭脂蟲干燥后，磨成粉末，提取出蟲紅，再用明礬處理，除去其中雜質(zhì)，就制成洋紅。單純的洋紅不能染色，要經(jīng)酸性或堿性溶液溶解后才能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸，堿性溶液有氨水、硼砂等。洋紅使細(xì)胞核的優(yōu)良染料，染色的標(biāo)本不易褪色。用作切片或組織塊染都適宜，尤其適宜于小型材料的整體染色。用洋紅配成的溶液染色后能保持幾年。洋紅溶液出現(xiàn)渾濁時(shí)要過濾后再用。（二）人工染料人工染料，即苯胺染料或煤焦油染料，種類很

3、多，應(yīng)用極廣。它的缺點(diǎn)是經(jīng)日光照射容易褪色，苯胺藍(lán)、亮綠、甲基綠等更易褪色。在制片中注意掌握酸堿度，并避免日光直射，也能經(jīng)幾年不褪色。1、酸性品紅 酸性品紅是酸性染料，呈紅色粉末狀，能容于水，略溶于酒精（0.3%）。他是良好的細(xì)胞制染色劑，在動(dòng)物制片上應(yīng)用很廣，在植物制片上用來染皮層、髓部等薄壁細(xì)胞和纖維素壁。他跟甲基綠同染，能顯示線粒體。組織切片在染色前先浸在帶酸性的水中，可增強(qiáng)它的染色力。酸性品紅容易跟堿起作用，所以染色過度，易在自來水中褪色。2、剛果紅 剛果紅是酸性染料，呈棗紅色粉末狀，能溶于水喝酒精，遇酸呈藍(lán)色。他能作染料，也用作指示劑。他在植物制片中常作為蘇木精或其他細(xì)胞染料的襯墊劑

4、。他用來染細(xì)胞質(zhì)時(shí)，能把膠制或纖維素染成紅色。在動(dòng)物組織制片中用來染神經(jīng)軸、彈性纖維、胚胎材料等。剛果紅可以跟蘇木靜作二重染色，也可用作類淀粉染色，由于他能溶于水和酒精，所以洗滌和脫水處理要迅速。3、甲基藍(lán) 甲基藍(lán)是弱酸性染料，能溶于水和酒精。甲基藍(lán)在動(dòng)植物的制片技術(shù)方面應(yīng)用極廣。他跟伊紅合用能染神經(jīng)細(xì)胞，也是細(xì)菌制片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生動(dòng)物的活體染色劑。甲基藍(lán)極易氧化，因此用他染色后不能長久保存。4、固綠 固綠是酸性染料，能溶于水（溶解度為4%）和酒精（溶解度為9%）。固綠是一種染含有漿質(zhì)的纖維素細(xì)胞組織的染色劑，在染細(xì)胞和植物組織上應(yīng)用極廣。他和蘇木精、番紅并列為植物組織學(xué)上

5、三中最常用的染料。5、蘇丹 蘇丹是弱酸性染料，呈紅色粉末狀，易溶于脂肪和酒精（溶解度為0.15%）。蘇丹是脂肪染色劑。 6、伊紅 這類染料種類很多。常用的伊紅Y，是酸性染料，呈紅色帶藍(lán)的小結(jié)晶或棕色粉末狀，溶于水（15攝氏度是溶解度達(dá)44%）和酒精（溶于無水酒精的溶解度為2%）。伊紅在動(dòng)物制片中廣泛應(yīng)用，是很好的細(xì)胞質(zhì)染料，常用作蘇木精的襯染劑。 7、堿性品（復(fù)）紅 堿性品紅是堿性染料，呈暗紅色粉末或結(jié)晶狀，能溶于水（溶解度1%）和酒精（溶解度8%）。堿性品紅在生物學(xué)制片中用途很廣，可用來染色膠原纖維、彈性纖維、嗜復(fù)紅性顆粒和中樞神經(jīng)組織的核質(zhì)。在生物學(xué)制片中用來染維管束植物的木質(zhì)化壁，又作為

6、原球藻、輪藻的整體染色。在細(xì)菌學(xué)制片中，長用來鑒別結(jié)核桿菌。在 爾根氏反應(yīng)中用作組織化學(xué)試劑，已核查脫氧核糖核酸。 8、結(jié)晶紫 結(jié)晶紫是堿性染料，能溶于水（溶解度9%）和酒精（溶解度8.75%）。結(jié)晶紫在細(xì)胞學(xué)、組織學(xué)和細(xì)菌學(xué)等方面應(yīng)用極廣，是一種優(yōu)良的染色劑。他是細(xì)胞核染色常用的，用來顯示染色體的中心體，并可染淀粉、纖維蛋白、神經(jīng)膠質(zhì)等。凡是用番紅和蘇木精或其他染料染細(xì)胞核不能成功時(shí)，用它能得到良好的結(jié)果。用番紅和結(jié)晶紫作染色體的二重染色，染色體染成紅色，紡錘絲染成紫色，所以也是一種顯示細(xì)胞分裂的優(yōu)良染色劑。用結(jié)晶紫染纖毛，效果也很好。用結(jié)晶紫染色的切片，缺點(diǎn)是不易長久保存。 9、龍膽紫 龍

7、膽紫是混合的堿性染料，主要是結(jié)晶紫和甲基紫的混合物。在必要是，龍膽紫能跟結(jié)晶紫互相替用。醫(yī)藥上用的紫藥水，主要成分是甲基紫，需要時(shí)能代替龍膽紫和結(jié)晶紫。 10、中性紅 中性紅是弱堿性染料，呈紅色粉末狀，能溶于水（溶解度4%）和酒精（溶解度1.8%）。它的堿性溶液中呈現(xiàn)黃色，在強(qiáng)堿性溶液中呈藍(lán)色，而在弱酸性溶液中呈紅色，所以能用作指示劑。中性紅無毒，常做活體染色的染料，用來染原生動(dòng)物和顯示動(dòng)植物組織中活細(xì)胞的內(nèi)含物等。陳久的中性紅水溶液，用作顯示尼爾體的常用染料。 11、番紅 番紅是堿性染料，能溶于水和酒精。番紅是細(xì)胞學(xué)和動(dòng)植物組織學(xué)生常用的染料，能染細(xì)胞核、染色體和植物蛋白質(zhì)，示維管束植物木質(zhì)

8、化、木栓化和角質(zhì)化的組織，還能染孢子囊。 12、亞甲藍(lán)或美藍(lán) 亞甲藍(lán)或美藍(lán)是堿性染料，呈藍(lán)色粉末狀，能溶于水（溶解度9.5%）和酒精（溶解度6%）。亞甲藍(lán)是動(dòng)物學(xué)和細(xì)胞學(xué)染色上十分重要的細(xì)胞核染料，其優(yōu)點(diǎn)是染色不會(huì)過深。 13、甲基綠 甲基綠是堿性染料。它是綠色粉末狀，能溶于水（溶解度8%）和酒精（溶解度3%）。甲基綠是最有價(jià)值的細(xì)胞和染色劑，細(xì)胞學(xué)上常用來染染色質(zhì)，跟酸性品紅一起可作植物木質(zhì)部的染色。 二、常用藥品試劑和培養(yǎng)基的配制(一)反應(yīng)劑1、檢查葡萄糖試劑配方一本尼迪克(Benedict)溶液(1) 在400毫升蒸餾水中溶解85克檸檬酸鈉和50克無水碳酸鈉。(2) 在50毫升加熱的蒸餾

9、水中溶解8.5克硫酸銅。把硫酸銅溶液緩緩倒入檸檬酸鈉-碳酸鈉溶液中，邊加邊攪拌，如果產(chǎn)生沉淀，要過濾。本尼迪克溶液配制后能長期使用（存放時(shí)間較久而產(chǎn)生沉淀是，取上層清液使用，不必重新配制）。 本尼迪克溶液用來測(cè)試食物、血液和尿中的葡萄糖，可測(cè)出0.15 0.20%的葡萄糖。這種溶液跟未知物同加熱時(shí)，如果未知物中有葡萄糖，會(huì)形成紅色的氧化亞銅沉淀物。 配方二 裴林（Fehling）溶液 （1）把34.5克硫酸銅溶于500毫升蒸餾水中。 （2）把125克氫氧化鉀（鈉）和173克酒石酸鉀鈉溶解在500毫升蒸餾水中。 上述兩種溶液應(yīng)分別保存。在檢測(cè)葡萄糖時(shí)，使他們等量的混合，加入待測(cè)物的試管內(nèi)，加熱到

10、沸騰。如果有葡萄糖，會(huì)形成紅色的氧化亞銅沉淀物。 2、檢查淀粉的試劑 魯哥氏（Lugols）溶液（碘液） 取6克碘化鉀溶于20毫升蒸餾水中，攪拌到溶解后，加入4克碘，等碘充分溶解，在加入80毫升蒸餾水，貯存在棕色試劑瓶內(nèi)。 碘液用來測(cè)試食物樣品或葉片中的淀粉，也用作染色劑，例如可染色鞭毛、纖毛和細(xì)胞核等。 3、檢查蛋白質(zhì)的試劑 配方一 米倫（Millon）試劑 在60毫升濃硝酸（比重1.42）中溶解40克汞（水浴加溫可助溶），溶解后加入兩倍體積的蒸餾水稀釋，靜置澄清后，取它上層的清液備用。這種試劑可長期保存。 在待測(cè)物中加入少量米倫試劑，加熱，如果有蛋白質(zhì)，會(huì)出現(xiàn)紅色。這種試劑不能用來測(cè)定尿中

11、的蛋白質(zhì)。 配方二 雙縮尿試劑 分別配制10%氫氧化鈉溶液和1%硫酸銅溶液。 在3毫升待測(cè)物中加入1毫升10%氫氧化鈉溶液和1滴1%硫酸銅溶液。如果有蛋白質(zhì)，會(huì)出現(xiàn)紫色反應(yīng)。 4、檢查脂肪的試劑 蘇丹（）酒精飽和溶液 取0.2克蘇丹（或蘇丹），放入純酒精中，加熱，使它充分溶解，成為飽和酒精溶液，過濾后密閉在試劑瓶內(nèi)保存?zhèn)溆谩?5、酸堿指示劑 配方一 酚酞試劑和試紙 酚酞試劑 取1克酚酞，溶解在100毫升60%的酒精溶液里，裝在試劑瓶內(nèi)密閉保存。 酚態(tài)試紙 取1克酚酞，溶解在100毫升95%酒精溶液里，加入00毫升蒸餾水。把綠紙條放入酚酞溶液中浸濕后，取出，放在無氨氣影響處晾干。 酚泰試劑（試紙

12、） pH值變色范圍8.210，在酸性和中性溶液中都無色，再堿性溶液中呈深紅色。 配方二 紅藍(lán)石蕊試紙 取市售石蕊1克，放在80毫升10%酒精溶液中攪拌，使它溶解，然后過濾。把濾液分成兩份。1份滴入稀磷酸或稀硫酸，到出現(xiàn)紅色為止。另1份滴入稀氫氧化鈉溶液，到出現(xiàn)藍(lán)色為止。在上述制備的溶液中分別浸濕濾紙條，隨后取出濾紙條，放在蔽光處、無酸堿性氣體影響的地方晾干，即的紅、藍(lán)兩種石蕊試紙。 紅石蕊試紙?jiān)趬A性溶液中變藍(lán)，藍(lán)石蕊試紙?jiān)谒嵝匀芤褐凶兗t。 6、檢查二氧化碳的試劑 檢查二氧化碳的試劑，可用溴代麝香草酚藍(lán)溶液和石灰水。 配方一 溴代麝香草酚藍(lán)溶液 取0.1克溴代麝香草酚藍(lán)，溶解在100毫升蒸餾水里

13、，滴入少量0.1%氫氧化鉀溶液，使它成為弱堿性溶液而呈藍(lán)色。 溴代麝香草酚藍(lán)溶液pH值變色范圍是6.0（黃）7.6（藍(lán)）。待測(cè)物中如果有二氧化碳，會(huì)形成碳酸而使溶液變成黃色。 配方二 石灰水 在蒸餾水中加入生石灰（氧化鈣），變加邊攪拌，直到加入的生石灰不再溶解，呈飽和狀態(tài)時(shí)為止。在石灰水澄清后，傾出上層清液，用濾紙過濾，放在密閉瓶內(nèi)保存。 如果測(cè)定的物質(zhì)中有二氧化碳，會(huì)生成碳酸鈣，使石灰水變渾濁。 7、檢查細(xì)胞生活力的試劑 檢查細(xì)胞有無生活力，可用中性紅甲基藍(lán)試劑。配制的方法是先分別配制1%中性紅溶液和1%甲基藍(lán)溶液，這兩種溶液各取1份混合，用來鑒定細(xì)胞的死活。該試劑使活細(xì)胞的液泡染上紅色，而

14、使死細(xì)胞全部染成藍(lán)色。（二）分離液 1、肌細(xì)胞分離液 配方一 馬克凱郎（Maccallum）液 取1份濃硝酸、2份甘油、3份水，混合后就得到馬克凱郎液。 把新鮮的肌肉組織小塊（橫紋肌、心肌和平滑肌）投入這種溶液里浸漬，分離時(shí)間需13日。這種溶液尤其適于分離橫紋肌核心肌細(xì)胞。 配方二 氫氧化鉀溶液 取35克氫氧化鉀，放在100毫升蒸餾水中，加熱，使它完全溶解后，在室溫下冷卻。 把新鮮的肌肉組織塊投入氫氧化鉀溶液中，浸泡1530分鐘后，肌細(xì)胞便可分離。 2、上皮細(xì)胞分離液 配方一 福爾馬林氯化鉀溶液 稱取58.44克氯化鈉，用蒸餾水溶解，再稀釋到1000毫升，加入2毫升福爾馬林。 這種溶液是很好的

15、上皮細(xì)胞分離液，分離很迅速，而且能保護(hù)纖細(xì)的上皮細(xì)胞纖毛。小腸和氣管的上皮組織小塊，放在此溶液里2小時(shí)即可分離，口腔和皮膚上皮組織小塊的細(xì)胞分離一般需3日左右。 配方二 水和氯醛溶液 稱取5克水和氯醛，用蒸餾水溶解，再稀釋到100毫升，就得到5%水合氯醛溶液。 從洗凈的動(dòng)物胃、腸和口腔內(nèi)壁上取下上皮組織一小塊，投入以上溶液中，浸泡2448小時(shí)。 3、神經(jīng)細(xì)胞分離液 配方一 可以用上皮細(xì)胞分離液配方一福爾馬林氯化鈉溶液來分離神經(jīng)細(xì)胞（見2）。 配方二 硼酸生理鹽水溶液 在生理鹽水溶液內(nèi)加入一些硼酸，攪拌到不再溶解時(shí)為止，使成為飽和溶液。 把脊椎灰質(zhì)和腦皮質(zhì)部位的神經(jīng)組織一小塊投入這種溶液中分離。

16、 4、植物莖細(xì)胞分離液 杰弗里氏（Jeffreys）液 取等量的10%鉻酸溶液和10%硝酸溶液混合，成鉻酸硝酸溶液。 這種溶液用來分離木本植物莖部的導(dǎo)管、管胞、篩管、伴胞和韌皮纖維等。把材料切成小塊放在水里，加熱煮沸，冷卻后再加熱煮沸。這樣重復(fù)幾次，到材料全部沉于水底后，投入分離液內(nèi)，分離時(shí)間是2448小時(shí)。 5、植物根尖細(xì)胞分離液 配方一 鹽酸酒精溶液 在1份95%酒精中慢慢的加入1份濃鹽酸，即成鹽酸酒精溶液，裝瓶密閉保存。 把植物根尖部位截下一小段，投入以上溶液中分離。 配方二 4%鹽酸溶液 配制4%鹽酸溶液。 截下植物根尖部位，投入盛有4%鹽酸溶液的小燒杯內(nèi)，在60攝氏度溫水中隔水溫?zé)?

17、2分鐘，使根尖軟而不酥，這時(shí)分離效果最好。 6、植物纖維分離液 取10克氫氧化鈉（或氫氧化鉀），溶解在90毫升水里，制成10%氫氧化鈉（或氫氧化鉀）溶液，放在瓶里密閉保存。 把植物莖縱切成細(xì)條，剪成小段后，投入分離液內(nèi)。 7、植物細(xì)胞質(zhì)壁分離液 配方一 30%蔗糖溶液 取30克蔗糖，溶解在70毫升蒸餾水里，裝瓶備用。 配方二 5%氯化鈉溶液 取5克食鹽，溶解在95毫升蒸餾水里，裝瓶備用。 配方三 5%硝酸鉀溶液 取5克硝酸鉀，溶解在95毫升蒸餾水里，裝瓶備用。 （三）生理鹽水 配方一 各種動(dòng)物需用的生理鹽水 哺乳類 需用生理鹽水濃度是0.9%。稱取0.9克氯化鈉，溶解在少量蒸餾水中，稀釋到10

18、0毫升。 鳥類 需用的生理鹽水濃度是0.75%。稱取0.75克氯化鈉，溶解后用蒸餾水稀釋到100毫升。 兩棲類 需用的生理鹽水濃度是0.65%。稱取0.65克氯化鈉，溶解后用蒸餾水稀釋到100毫升。 配方二 任氏（Ringers）生理鹽水 氯化鈉 6.5克 碳酸氫鈉 0.2克 氯化鉀 0.14克 磷酸二氫鈉 0.01克 氯化鈣 0.12克 先把氯化鈉、氯化鉀、碳酸氫鈉、磷酸二氫鈉分別溶解在少量蒸餾水中，混合后用蒸餾水稀釋到980毫升。然后取氯化鈣溶解在20毫升蒸餾水中，把氯化鈣溶液逐滴加入到上述溶液內(nèi)，邊滴、邊攪拌，以免產(chǎn)生不溶解的磷酸鈣沉淀。 此溶液用于變溫動(dòng)物，尤其常用于兩棲類。 配方三

19、樂氏（Lockes）生理鹽水 氯化鈉 9.0克 碳酸氫鈉 0.10.3克 氯化鉀 0.42克 氯化鈣 0.24克 把氯化鈉、氯化鉀、碳酸氫鈉分別用少量蒸餾水溶解，混合后加蒸餾水到980毫升。把氯化鈣溶解在20毫升蒸餾水里，逐滴加入上述溶液中。 以上溶液用于恒溫動(dòng)物，尤其常用于哺乳類。 （四）培養(yǎng)液 1、人造海水 配方一 氯化鈉24.72克 氯化鉀 0.67克 氯化鈣 1.36克 氯化鎂 4.66克 硫酸鎂 6.29克 碳酸氫鈉 0.18克 蒸餾水 加到1升 把上述各種鹽溶解在少量蒸餾水中，再加入碳酸氫鈉，最后用蒸餾水稀釋到1000毫升。 配方二 氯化鈉 45.0克 硫酸鎂 0.1克 氯化鎂 5

20、.0克 氯化鐵（1%溶液） 1滴 先把硫酸鎂、磷酸一氫鉀、氯化鐵用少量蒸餾水溶解，加蒸餾水到980毫升。隨后取硝酸鈣溶解在20毫升蒸餾水里，把此溶液逐滴加到上述溶液內(nèi)，裝瓶保存。 配方二 克諾普氏（Knops）溶液 硝酸鉀 1克 硫酸鎂 1克 磷酸二氫鉀 1克 硝酸鈣 3克 先把硝酸鉀、硫酸鎂、磷酸二氫鉀用少量蒸餾水溶解，加蒸餾水到980毫升。隨后取硝酸鈣，用20毫升蒸餾水溶解，加入到上述溶液內(nèi)。溶液灰形成白色沉淀，在使用是必須搖動(dòng)。 在以上溶液中加入蔗糖溶液（14%），能刺激某些藻類形成游動(dòng)孢子。該液用于培養(yǎng)綠藻。 3、植物無土培養(yǎng)液 配方 霍格倫德（Hoagland）和斯納德（Snyder

21、）液 硝酸鈣 0.821克 硝酸鉀 0.506克 磷酸二氫鉀 0.136克 硫酸鎂 0.120克 酒石酸鐵 0.005克 把上述鹽類溶解在少量蒸餾水里，然后稀釋到1000毫升。 （五）培養(yǎng)基 1、細(xì)菌培養(yǎng)基 配方一 牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基 牛肉膏 0.3克 蛋白胨 1.0克 氯化鈉 0.5克 瓊脂 1.5克 水 1000毫升 在燒杯內(nèi)加水100毫升，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉，用蠟筆在燒杯外作上記號(hào)后，放在火上加熱。待燒杯內(nèi)各組分溶解后，加入瓊脂，不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補(bǔ)足失水，用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調(diào)整pH值到7.27.6,分裝在各個(gè)試管里，加棉花塞，用高壓蒸汽滅菌30分鐘。

22、配方二 馬鈴薯培養(yǎng)基 取新鮮牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀細(xì)細(xì)剁成肉末后，加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號(hào)，煮沸，轉(zhuǎn)用文火燉2小時(shí)。過濾，濾出的肉末干燥處理，濾液pH值調(diào)到7.5左右。每支試管內(nèi)加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心，滅菌，備用。 配方四 根瘤菌培養(yǎng)基 葡萄糖 10克 磷酸氫二鉀 0.5克 碳酸鈣 3克 硫酸鎂（ ） 0.2克 酵母粉 0.4克 瓊脂 20克 水 1000毫升 1%結(jié)晶紫溶液 1毫升 先把瓊脂加水煮沸溶解，然后分別加入其他組分，攪拌使溶解后，分裝，滅菌，備用。 2、放線菌培養(yǎng)基 配方一 淀粉瓊脂培養(yǎng)基（高氏培養(yǎng)基） 可溶性淀粉 2克 硝酸鉀

23、 0.1克 磷酸氫二鉀 0.05克 氯化鈉 0.05克 硫酸鎂 0.05克 硫酸亞鐵 0.001克 瓊脂 2克 水 1000毫升 先把淀粉放在燒杯里，用5毫升水調(diào)成糊狀后，倒入95毫升水，攪勻后加入其他藥品，使它溶解。在燒杯外做好記號(hào)，加熱到煮沸時(shí)加入瓊脂，不停攪拌，待瓊脂完全溶解后，補(bǔ)足失水。調(diào)整pH值到7.27.4，分裝后滅菌，備用。 配方二 面粉瓊脂培養(yǎng)基 面粉 60克 瓊脂 20克 水 1000毫升 把面粉用水調(diào)成糊狀，加水到500毫升，放在文火上煮30分鐘。另取500毫升水，放入瓊脂，加熱煮沸到溶解后，把兩液調(diào)勻，補(bǔ)充水分，調(diào)整pH值到7.4，分裝，滅菌，備用。 3、真菌培養(yǎng)基 配方

24、一 薩市（Sabourauds）培養(yǎng)基 蛋白胨 10克 瓊脂 20克 麥芽糖 40克 水 1000毫升 先把蛋白胨、瓊脂加水后，加熱，不斷攪拌，待瓊脂溶解后，加入40克麥芽糖（或葡萄糖），攪拌，使它溶解，然后分裝，滅菌，備用。 本培養(yǎng)菌是培養(yǎng)許多種類真菌所常用的。 配方二 馬鈴薯糖瓊脂培養(yǎng)基 把馬鈴薯洗凈去皮，取200克切成小塊，加水1000毫升，煮沸半小時(shí)后，補(bǔ)足水分。在濾液中加入10克瓊脂，煮沸溶解后加糖20克（用于培養(yǎng)霉菌的加入蔗糖，用于培養(yǎng)酵母菌的加入葡萄糖），補(bǔ)足水分，分裝，滅菌，備用。 把這培養(yǎng)基的pH值調(diào)到7.27.4，配方中的糖，如用葡萄糖還可用來培養(yǎng)放線菌和芽孢桿菌。 配方三

25、 黃豆芽汁培養(yǎng)基 黃豆芽 100克 瓊脂 15克 葡萄糖 20克 水 1000毫升 洗凈黃豆芽，加水煮沸30分鐘。用紗布過濾，濾液中加入瓊脂，加熱溶解后放入糖，攪拌使它溶解，補(bǔ)足水分到1000毫升，分裝，滅菌，備用。 把這培養(yǎng)基的pH值調(diào)到7.27.4，可用來培養(yǎng)細(xì)菌和放線菌。 配方四 豌豆瓊脂培養(yǎng)基 豌豆 80粒 瓊脂 5克 水 200毫升 取80粒干豌豆加水，煮沸1小時(shí)，用紗布過濾后，在濾液中加入瓊脂，煮沸到溶解，分裝，滅菌，備用。 4、食用菌菌種培養(yǎng)基 配方一 馬鈴薯蔗糖-瓊脂培養(yǎng)基 20%馬鈴薯煮汁 1000毫升 蔗糖 20克 瓊脂 18克 把馬鈴薯洗凈去皮后，切成小塊。稱取馬鈴薯小塊

26、200克，加水1000毫升，煮沸20分鐘后，過濾。在濾汁中補(bǔ)足水分到1000毫升，即成20%馬鈴薯煮汁。在馬鈴薯煮汁中加入瓊脂和蔗糖，煮沸，使它溶解后，補(bǔ)足水分，分裝，滅菌，備用。使用該培養(yǎng)基對(duì)pH值要求不嚴(yán)格，可以不測(cè)定。 配方二 綜合馬鈴薯培養(yǎng)基 20%馬鈴薯煮汁 1000毫升 磷酸二氫鉀 3克 硫酸鎂 1.5克 葡萄糖 20克 維生素 10毫克 瓊脂 18克 先配制20%馬鈴薯煮汁，方法同上。在煮汁中加入上述各種組分，加熱溶解后補(bǔ)足水分，調(diào)整pH值到6。分裝，滅菌，備用。 該培養(yǎng)基用于培養(yǎng)和保存靈芝、平菇、香菇等食用菌菌種。 （六）染色劑 1、細(xì)菌染色劑 配方一 齊氏（Ziehl）石炭酸

27、品紅染液 甲液 取石炭酸5克，溶解在95毫升蒸餾水中。 乙液 取0.3克堿性品紅，放入研缽中研磨，逐漸加入10毫升95%酒精，繼續(xù)淹沒，使它溶解。 將甲液和乙液混合后，搖勻，過濾，裝瓶，備用。 配方二 羅氏（Loefflers）美藍(lán)染液 甲液 取5克美藍(lán)，溶于100毫升95%酒精中，制成美藍(lán)酒精飽和液。 乙液 取氫氧化鉀0.01克（或1%氫氧化鉀溶液1毫升），溶液也可用于放線菌染色，0.1%濃度可用于酵母菌染色。 配方三 革蘭氏（Grams）染液 用此液染色因先用甲液染色，再加乙液固定，用丙液處理，最后用丁液復(fù)染。四種液體的配方如下： 甲液（結(jié)晶紫液） （1）結(jié)晶紫 2克 95%酒精 20毫升

28、 （2）草酸銨 0.8克 蒸餾水 80毫升 使用錢江（1）、（2）液相混，靜置48小時(shí)后使用。 乙液(碘液) 碘 1克 碘化鉀 2克 蒸餾水 300毫升 將碘化鉀溶于少量蒸餾水中，然后加入碘，待碘全部溶解后，加水稀釋至300毫升。 丙液 95%酒精溶液 丁液（番紅花紅液） 2.5%番紅花紅酒精溶液 10毫升 蒸餾水 100毫升 2、細(xì)菌特殊染色劑 配方一 芽孢染液 用此配方染色是用甲液染色后，用乙液復(fù)染。 甲液 取5克孔雀綠，加入少量蒸餾水，使它溶解后，用蒸餾水稀釋到100毫升，即成孔雀綠染液。 乙液 取番紅花紅0.5克，加入少量蒸餾水，使它溶解后，用蒸餾水稀釋到100毫升，集成番紅花紅復(fù)染液

29、。 配方二 莢膜染液 此配方先用甲液染色，后用乙液復(fù)染。 甲液 取結(jié)晶紫0.1克，溶于少量蒸餾水后，加水稀釋到100毫升，再加入0.25毫升冰醋酸一結(jié)晶紫染液。 乙液 取硫酸銅（ ）31.3克，溶于少量蒸餾水后，加水稀釋到100毫升，即成20%硫酸銅脫色劑。 配方三 鞭毛染液 甲液 飽和明礬溶液 2毫升 5%石炭酸溶液 5毫升 20%丹寧酸溶液 2毫升 乙液 堿性品紅 11克 95%酒精 100毫升 使用前取甲液9毫升和乙液1毫升相混，過濾即可。 3、植物細(xì)胞壁染色劑 配方一 纖維素細(xì)胞壁染液（） 取固綠0.1克，溶于100毫升95%酒精中，即成0.1%固綠酒精溶液。 該液能染色纖維素細(xì)胞壁，

30、還用于動(dòng)植物中作漿質(zhì)染色劑。 配方二 纖維素細(xì)胞壁染液（） 氯化鋅 20克 碘化鉀 6.5克 碘 1.5克 蒸餾水加至100毫升 先把氯化鋅溶于少量蒸餾水中，再加入6.5克碘化鉀，在碘完全溶解后，用蒸餾水稀釋到100毫升，即成碘氯化鋅溶液。 該染液能把細(xì)胞壁染成紫色，胞質(zhì)染成淡黃色，胞核染成棕色。 配方一 纖維素細(xì)胞壁染液（） 甲液 取1克碘和1.5克碘化鉀，溶于100毫升蒸餾水中，即成1%碘液。 乙液 取7份硫酸和3份蒸餾水相混，即成66.5%硫酸溶液。 染色時(shí)，在材料上滴加甲液，再加一滴乙液，纖維素細(xì)胞壁就染成黃色。 配方四 木質(zhì)化細(xì)胞壁染液（） 硫酸化苯胺（或鹽酸話本安） 1份 蒸餾水

31、70份 95%酒精 30份 硫酸 30份 將上述各組分相混，將細(xì)胞材料放入混合液里染色，可是木質(zhì)化細(xì)胞壁呈鮮黃或姜黃色。 配方五 木質(zhì)化細(xì)胞壁染液（） 取間苯三酚45克，溶于100毫升95%酒精中，即成間苯三酚酒精液。 先在材料上滴上1滴濃鹽酸，然后滴上間苯三酚酒精液1滴，木質(zhì)化的細(xì)胞壁就染上櫻紅或紫紅色。 配方六 木質(zhì)化細(xì)胞壁染液（） 取1克番紅，溶于99毫升蒸餾水中，即成1%番紅溶液。4、細(xì)胞質(zhì)染色劑 配方一 伊紅染液 伊紅染液一般配用水溶液和酒精溶液兩種。 （1）取1克伊紅，溶于99毫升蒸餾水中，即成1%伊紅水溶液（市售紅墨水內(nèi)含伊紅成分，可以用紅墨水稀釋液來代替本溶液）。 （2）取1克

32、伊紅，溶于99毫升70%酒精中，即成1%伊紅酒精溶液。 配方二 甲基藍(lán)染液 取1克甲基藍(lán)，溶于29毫升70%酒精中，加入70毫升蒸餾水，即成1%甲基藍(lán)染液。 配方三 亮綠染液 取0.5克亮綠，溶解在100毫升蒸餾水中，即成0.5%亮綠溶液。 5、細(xì)胞核染色劑 配方一 甲基綠染液 取1克甲基綠，溶于99毫升蒸餾水中，加入1毫升冰醋酸。本染液能染細(xì)胞核，還用來染木質(zhì)化細(xì)胞壁。 配方二 龍膽紫染液 取1克龍膽紫，溶于少量2%醋酸溶液中，加2%醋酸溶液，直到溶液不呈深紫色止。 配方三 美藍(lán)（亞甲基藍(lán)）染液 取0.5克美藍(lán)，溶于30毫升95%酒精中，加100毫升0.01%氫氧化鉀溶液，保存在棕色瓶內(nèi) 。

33、 此溶液能染細(xì)胞核，還用來染細(xì)菌、血和神經(jīng)組織等。 配方四 硼砂洋紅染液 取4克硼砂，溶于96毫升蒸餾水中。再加入2克洋紅，加熱溶解后煮沸30分鐘，靜置3日，用100毫升70%酒精沖淡，放置24小時(shí)后過濾。 此染液能染細(xì)胞核，還用來染糊粉粒和一般動(dòng)物、植物的整體染色，如水螅、血吸蟲等整體標(biāo)本。 配方五 德氏（Delafields）蘇木精染液 甲液 取1蘇木精，溶于6毫升無水酒精中，即成蘇木精酒精溶液。 乙液 取10克銨礬溶于90毫升蒸餾水中，即成10%銨礬水溶液。 取甲液逐滴加入到乙液中，用紙遮蓋，放在陽光明亮處，使它充分氧化。34天后將溶液過濾，在濾液中加入25毫升甘油和25毫升甲醇，保存在

34、密閉玻璃瓶內(nèi)。靜置12個(gè)月，待該液顏色變深時(shí)過濾，可長久保存。 本染液是染色體的優(yōu)良染色劑，除能染細(xì)胞核外，還用來染纖維素、細(xì)胞壁和動(dòng)植物組織。 配方六 席夫（Schiffs）試劑 稱取0.5克堿性品紅，加到100毫升煮沸的蒸餾水中，再微微加熱5分鐘，不斷攪拌，使它溶解。在溶液冷卻到50攝氏度時(shí)過濾，濾液中加入10毫升1N鹽酸。再冷卻到25攝氏度時(shí)加入0.5克偏重亞硫酸鈉（ ）或無水亞硫酸氫鈉（ ）。把溶液裝入棕色試劑瓶內(nèi)，搖蕩后，塞緊瓶塞，放在黑暗中24小時(shí)。在溶液顏色退到淡黃色時(shí)，加入0.5克活性炭，用力搖蕩1分鐘，過濾后把濾液貯在棕色試劑瓶內(nèi)，塞緊瓶塞，濾液應(yīng)該是無色的。在使用時(shí)勿讓溶液

35、長時(shí)間暴露在空氣中和見光（瓶外用黑紙或暗盒遮光）。如溶液變成紅色，即失去染色能力。 堿性品紅是較強(qiáng)的核染色劑，在孚爾根氏（Feulgens）反應(yīng)中作為組織化學(xué)試劑，以檢查DNA。 6、染色體染色劑 配方一 醋酸洋紅染液 取45毫升冰醋酸，加蒸餾水55毫升，煮沸后徐徐加入洋紅1克，攪拌均勻后加入1顆鐵銹釘，煮沸10分鐘，冷卻后過濾，貯存在棕色瓶內(nèi)。 配方二 醋酸地衣紅染液 取45毫升醋酸，跟55毫升蒸餾水相混，加熱，徐徐加入地衣紅粉末12克，攪拌溶解后，緩緩煮沸2小時(shí)。冷卻后過濾，貯存在棕色瓶里。 配方三 龍膽紫染液 取1克龍膽紫，用少量蒸餾水溶解后，加蒸餾水，稀釋到100毫升，保存在棕色瓶內(nèi)。

36、 配方四 甲苯胺藍(lán)染液 取0.5克甲苯胺藍(lán)，溶解在100毫升蒸餾水中，即成0.5%甲苯胺藍(lán)水溶液。 7、線粒體染色劑 配方一 詹鈉斯綠B(Janus green 酒精飽和溶液 取125毫升詹鈉斯綠B，加入到62.5毫升無水酒精中，攪拌，即成煙魯綠B酒精飽和染液。 （1）取詹鈉斯綠酒精飽和染液按1：30000比例加蒸餾水稀釋，用來染原生動(dòng)物線粒體。 (2)取詹鈉斯綠酒精飽和液，按1：10000比例加蒸餾水稀釋，用來染新鮮蛙血線粒體。 配方二 詹鈉斯綠B中性紅染液 先配制詹鈉斯綠B和中性紅酒精飽和液。詹鈉斯綠酒精飽和液見配方一。中性紅酒精飽和液配制方法：取125毫升中性紅，加入到50毫升無水酒精中

37、，攪拌。 在10毫升生理鹽水（兩棲類生理鹽水濃度為0.65%；哺乳類生理鹽水濃度為0.9%）中，加入詹鈉斯綠B酒精飽和液0.71毫升，中性紅酒精飽和液2毫升，混合。 詹鈉斯綠B稀釋液是活體染液。 8、脂肪染色劑 蘇丹染液 取0.1克蘇丹，溶于20毫升95%酒精中，即成0.5%蘇丹染液。 這染液能染脂肪，還能染木栓、角質(zhì)層。 9、血液染色劑 配方一 瑞氏（Wrights）染液 取瑞氏染料粉末0.1克和甲醇60毫升。把染料放在研缽內(nèi)，加少量甲醇研磨，使染料溶解，然后把溶解的染料倒入干凈的棕色玻璃瓶。并用完甲醇為止。配制好的染液在室溫中保存，即可使用。新鮮配制的染液偏堿性，放置后呈酸性，染液貯存愈久

38、染色愈好。這染液的適宜pH值是6.46.8。因此，染色時(shí)加入緩沖液，可維持一定的酸堿度，使染色效果更好。 這種染液除能染血液，還能染瘧原蟲。 瑞氏染料可以自制。在100毫升0.5%碳酸氫鈉水溶液里加入1克美藍(lán)，溶解后放在鍋內(nèi)，蒸上1小時(shí)，取出冷卻后過濾。在濾液里加入0.1%伊紅水溶液500毫升，隨加、隨攪拌，使混合液呈紫色。靜置一夜后，用濾紙過濾。濾紙上的沉淀物，在室內(nèi)風(fēng)干或放在干燥箱內(nèi)，充分干燥后研磨成粉末，即成瑞氏染料。 配方二 甲基紫染液 取甲基紫0.5克，加到100毫升生理鹽水中，溶解后加入冰醋酸0.02毫升。 10、吸蟲染色劑 梅耶氏（Mayers ）明礬洋紅染液 取銨明礬（硫酸鋁銨

39、）5克，溶于95毫升蒸餾水中，再加入0.5克洋紅酸，加熱溶解，冷卻后過濾。在濾液中加入少量防腐劑，如麝香草酚、樟腦粉、水楊酸鈉、苯酚（石炭酸）等，以防生霉。 這種染液適合于染小型動(dòng)物材料，如吸蟲等寄生蟲的整體，也能染高等植物的表皮和蕨類植物的原葉體。 11、活體染色劑 配方一 中性紅染液 先配成1%中性紅水溶液（1克中性紅溶于100毫升蒸餾水中）。取這種溶液1毫升，用0.6%生理鹽水（或蒸餾水）稀釋到50毫升，即成0.02%中性紅水溶液，貯存在棕色瓶里，放在黑暗處。 本染液用來顯示原生動(dòng)物的食物泡以及動(dòng)植物組織中活細(xì)胞的內(nèi)含物等。 配方二 尼羅藍(lán)（Nile Blue）染液 取0.1克尼羅藍(lán)，溶

40、解于10001500毫升蒸餾水中，即成尼羅藍(lán)染液。 這種染液能把原生動(dòng)物大核染成綠色，食物泡染成藍(lán)色。 配方三 亞甲藍(lán)染液 取0.1克亞甲藍(lán)，溶解于1000毫升蒸餾水中，即成亞甲藍(lán)染液。 這種染液用于原生動(dòng)物的活體染色。 12、透明骨骼標(biāo)本染色劑 配方一 茜素紅染液（） 取冰醋酸5毫升、甘油5毫升、1%水合氯醛60毫升混合。在這種混合液中方入少量茜素紅，制成茜素紅飽和溶液。 配方二 茜素紅溶液（） 取1克茜素紅，溶于100毫升95%酒精中，攪拌，然后跟900毫升1%氫氧化鉀溶液相混，即成深紫色的茜素紅染液。 （七）固定液和保存液 用固定液固定動(dòng)植物整體或它的一部分組織和氣管等，能保存組織內(nèi)細(xì)胞

41、的形態(tài)、結(jié)構(gòu)及其組成，盡量使它近于生活狀態(tài)。固定液一般有防腐和保存的作用，分為單純固定液和混合固定液。單純固定液中最重要的有乙醇、福爾馬林、醋酸、苦味酸、鉻酸、重鉻酸鉀、升汞等，前兩種固定液是中學(xué)生物實(shí)驗(yàn)室常用的。單純固定液的優(yōu)點(diǎn)是簡便，缺點(diǎn)是有一定的局限性，不易達(dá)到理想的固定要求?；旌瞎潭ㄒ河袔追N不同的藥液按一定的比例混合而成，使各自的優(yōu)缺點(diǎn)相互補(bǔ)充，成為較完美的固定液。這種固定液的制備雖比較麻煩，但是效果比較好。常用的混合固定液是醋酸酒精混合液、福爾馬林醋酸酒精液、包因氏固定液等。 常用的保存液大致跟固定液相同，主要是福爾馬林、酒精、甘油以及由這些藥物按比例配制成的各種混合液。有時(shí)按特殊保

42、存的需要，再保存液中增加某些藥品（如原生標(biāo)本的保存液）。 1、福爾馬林 福爾馬林在固定組織標(biāo)本時(shí)殺菌能力強(qiáng)，所以防腐性強(qiáng)，滲透力大，固定得快。永福爾馬林固定精細(xì)的解剖標(biāo)本時(shí)，要跟甘油、酒精、石炭酸等混合使用。固定液常用的濃度是510%（根據(jù)材料的大小、性質(zhì)和數(shù)量而定）。 保存液常用的濃度是510%。用福爾馬林作保存液，效果好且價(jià)格低廉。 在配制福爾馬林溶液（固定液或保存液）時(shí)，應(yīng)將3740%的甲醛作為整個(gè)溶質(zhì)來配。例如配制5%福爾馬林是取市售3740%甲醛溶液5毫升跟95毫升蒸餾水混合。實(shí)際上甲醛含量只有1.92%，這樣的配法已成為一般實(shí)驗(yàn)室常用的慣例。 注意事項(xiàng)： （1）福爾馬林業(yè)在長期貯存

43、中會(huì)產(chǎn)生蟻酸，可適量的加入碳酸鈣（ ）或碳酸鎂（ ）等堿性物質(zhì)進(jìn)行中和。（2）福爾馬林業(yè)作為保存液會(huì)慢慢揮發(fā)而致使?jié)舛冉档停⑶腋栺R林液再保存中往往形成多聚甲醛，使浸液變濁，影響觀察。所以，根據(jù)一定保存期的情況，可適當(dāng)增加福爾馬林液的濃度或更換新液，以防標(biāo)本變壞。其中如有白色沉淀物，加熱后可使它溶解。 （3）市售的福爾馬林液常帶有酸性，能腐蝕石灰質(zhì)，因此，最好不用福爾馬林液浸制有石灰質(zhì)外殼的動(dòng)物。2、酒精（乙醇） 酒精也是常用的固定液，它有強(qiáng)烈的殺菌作用，對(duì)組織材料的滲透力較大，固定的快。但是，它的脫水作用較強(qiáng)，在高濃度的酒精中容易使材料顯著硬化和收縮。一般用于固定浸制標(biāo)本材料，分一級(jí)或二級(jí)

44、固定，即70%或50%與70%的酒精。有些小型材料或精細(xì)的解剖材料，最好用二級(jí)或三級(jí)固定，即用50%、70%或50%、60%、70%的酒精，最后再進(jìn)行保存。從經(jīng)濟(jì)效果來考慮，一般酒精應(yīng)跟福爾馬林液等固定液混合使用。 市售的工業(yè)用酒精濃度是95%左右，因此用時(shí)要重新配制。保存液的濃度通常是70%。 注意事項(xiàng)： （1）在固定材料時(shí)要注意固定的效果，小型材料一般放在固定液中固定。大型材料必須先往體內(nèi)注射一部分固定液，再放入固定液中，防止材料內(nèi)部腐懷變質(zhì)。用福爾馬林液固定也是如此。 （2）高濃度的酒精有脫水、脫脂作用。含有多量脂肪或擬脂標(biāo)本（如腦、脊髓）等都不宜用較高濃度的酒精作保存液。 （3）為了防

45、止酒精使標(biāo)本硬化，保存一些精細(xì)的材料或解剖標(biāo)本時(shí)，因加入少量甘油，因?yàn)楦视途哂袧欆浗M織的作用。 （4）忌跟鉻酸、鋨酸和中鉻酸鉀等氧化劑配合。 3、醋酸 醋酸即乙酸，純醋酸在低于16.7攝氏度時(shí)會(huì)凝成冰狀固體，所以叫冰醋酸。醋酸能很快穿透組織，因?yàn)樗荒艹恋砑?xì)胞質(zhì)中的蛋白質(zhì)，組織不會(huì)硬化。一般常跟酒精、福爾馬林、鉻酸等容易引起組織變硬和收縮的液體混合，以起到相互抵消的作用。 醋酸固定液的常用濃度是0.3%5%。 4、苦味酸 苦味酸是一種黃色結(jié)晶，能溶于水（溶解度是0.91.2%）、酒精（溶解度是4.9%）和苯（溶解度是10%）?？辔端嵋材艹恋硪磺械鞍踪|(zhì)，穿透較慢，固定后，組織收縮明顯，但不使組織

46、硬化。 苦味酸固定液可以在100毫升蒸餾水中加入苦味酸約1.5克，制成飽和水溶液。固體苦味酸易爆，長制成飽和水溶液保存。 5、升汞 升汞又叫氯化汞，是白色粉末，以針狀結(jié)晶為最純。通常固定時(shí)用飽和水溶液，有時(shí)也用70%酒精作溶劑，不單獨(dú)用作固定劑。升汞的穿透力較弱，通常用于小型材料，對(duì)蛋白質(zhì)有強(qiáng)烈的沉淀作用，硬化程度中等。 固定液用飽和溶液，濃度約為7%。 6、卡爾氏（Carls）液 配方 95%酒精 170毫升 蒸餾水 280毫升 福爾馬林 60毫升 冰醋酸 20毫升 冰醋酸要在臨用前加入。 這時(shí)極好的昆蟲保存液，常用來殺死和保存小型、身體柔軟的種類入螨、蜈蚣、馬陸等。在這溶液里加入少量甘油，

47、能防止蟲體變脆。 7、卡諾氏（Carnoys）液 配方 純酒精 6份 冰醋酸 1份 氯仿 3份 這種固定液能固定細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核，尤其適宜于固定染色體，所以多用于細(xì)胞學(xué)的質(zhì)片，還用來固定腺體、淋巴組織以及原生動(dòng)物的胞殼等。這種固定液穿透得快，因此一般小塊組織固定2040分鐘，大型材料不超過34小時(shí)。固定后用95%或純酒精洗滌，換液兩次，移到石蠟中或用80%酒精保存。 8、吉爾桑氏（Gilson）液 配方 60%酒精 50毫升 冰醋酸 2毫升 80%硝酸 7.5毫升 升汞 10克 蒸餾水 440毫升 這是常用的固定液，適用于肉質(zhì)菌類，特別是柔軟膠質(zhì)狀的材料如木耳等，也廣泛用于無脊椎動(dòng)物和一般組織和

48、蛙胚的固定。固定時(shí)間1820小時(shí)，然后用50%酒精沖洗材料，除去升汞。如果用水沖洗，會(huì)使材料膨脹。混合液保存24小時(shí)后失效。 9、福爾馬林-醋酸-酒精溶液（FAA）液 配方 50%酒精 85毫升 福爾馬林 10毫升 冰醋酸 5毫升 這種固定液適用于固定一般植物莖、葉組織，昆蟲和甲殼類動(dòng)物。液組織在這溶液里固定12小時(shí)，木質(zhì)化組織要固定1周，材料也可在此液中長期保存。固定后的材料放在50%酒精中沖洗12次。 10、克來寧堡氏（Kleinenbergs）液 配方 在20%硫酸水溶液內(nèi)加入苦味酸，直到飽和。 這種固定液適用于雞胚的固定，也用于許多小型海洋生物的固定。 11、包因氏（Bouins）液

49、配方 苦味酸飽和水溶液 75毫升 冰醋酸 5毫升 福爾馬林 25毫升 這是常用的良好固定劑，滲透迅速，固定均勻，組織收縮少，染色后能顯示一般的微細(xì)結(jié)構(gòu)。一般動(dòng)物組織、無脊椎動(dòng)物的卵和幼蟲以及一般組織學(xué)、胚胎學(xué)的材料，如植物組織的根尖和胚囊都可用它來固定。一般組織固定2448小時(shí)，小塊組織固定416小時(shí)，動(dòng)物材料能在這種固定液中長期保存。固定后，動(dòng)物材料用70%酒精沖洗凈苦味酸，到無黃色為止（用酒精沖洗時(shí)，加幾滴氨水，可加快除去黃色）；植物材料用20%酒精沖洗幾次。 12、紹丁氏（Schaudinns）液 配方 甲液 升汞飽和水溶液 66毫升 95%酒精 33毫升 乙液 冰醋酸 1毫升 甲、乙液

50、要在臨用前混合。 這種固定液適用于固定有鞭毛的原生動(dòng)物、植物的精子和游動(dòng)孢子等。材料如制作涂布裝片，可在40攝氏度下固定1020分鐘。 13、眼球固定液 配方 丙酮 40毫升 冰醋酸 1.5毫升 升汞 2克 甲醛 10毫升 蒸餾水 40毫升 這種固定液適用于眼球的固定，并可在固定液中長期保存。 14、納瓦興氏（Nawaschins）液 配方 甲液 鉻酸 1.5克 冰醋酸 10毫升 蒸餾水 90毫升 乙液 福爾馬林 40毫升 蒸餾水 60毫升 臨用前將等量甲、乙液混合。 高等植物有絲分裂材料適宜在這種固定液里固定或長期保存。 15、綠色標(biāo)本保存液 配方一 硫酸銅 5克 水 95毫升 這種保存液適

51、用于綠色植物和一切植物綠色部分的保存。植物放入硫酸銅液后，由綠變黃，再由黃變綠。這時(shí)取出材料，用清水漂洗干凈，浸在5%福爾馬林液內(nèi)長期保存。 配方二 硫酸銅 0.2克 95%酒精 50毫升 福爾馬林 10毫升 冰醋酸 5毫升 水 35毫升 先把硫酸銅溶于水中，然后加入配方中的其他組分。綠色標(biāo)本能長期的貯存在該液中。 配方三 醋酸銅 1530克 50%醋酸 100毫升 在50%醋酸中逐漸加入醋酸銅，直到飽和。適用時(shí)取原液1份，加水4份，即成稀釋的硫酸銅溶液。 這種保存液適用于表面有蠟質(zhì)、蛙質(zhì)、質(zhì)地較硬的綠色植物保色。加熱稀釋到醋酸銅溶液，放入植物，輕輕翻動(dòng)，到植物由綠轉(zhuǎn)黃再轉(zhuǎn)綠色時(shí)取出植物，用清

52、水漂洗后，浸入5%福爾馬林液內(nèi)保存。 16、紅色標(biāo)本保存液 配方一 甲液 硼酸 3克 福爾馬林 4毫升 水 400毫升 乙液 亞硫酸 2毫升 硼酸 10克 水 488毫升 把紅色的果實(shí)浸在甲液里13天，等果實(shí)由紅色轉(zhuǎn)深棕色時(shí)取出，移到乙液里保存，同時(shí)在果實(shí)內(nèi)注入少量乙液。 配方二 氯化鋅 2份 福爾馬林 1份 甘油 1份 水 40份 先把氯化鋅溶解在水里，然后加入配方中其他組分。溶液如果渾濁而有沉淀，應(yīng)過濾后使用。紅色果實(shí)能在此液中保存。 17、黃色標(biāo)本保存液 配方一 甲液 硫酸銅 5克 水 95毫升 乙液 6%亞硫酸 30毫升 甘油 30毫升 95%酒精 30毫升 水 900毫升 先把植物標(biāo)

53、本在甲液中浸12天，取出洗凈后，浸入乙液中保存，同時(shí)在果實(shí)內(nèi)注入少量乙液。 配方二 6%亞硫酸 568毫升 80%酒精 568毫升 水 450毫升 植物材料能在這種保存液中長期保存。 18、紫色標(biāo)本保存液 配方一 95%酒精 20毫升 福爾馬林 20毫升 水 60毫升 使用時(shí)，取1份原液加9份水稀釋，植物材料能在這溶液中保存。 配方二 食鹽飽和水溶液 30毫升 水 175毫升 福爾馬林 20毫升 甘油 少量 植物材料能在這溶液中保存。 19、白色標(biāo)本保存液 配方一 甲液 5%硫酸銅溶液 乙液 14%亞硫酸溶液 全白色植物材料能浸在乙液中保存。雜有綠色的白色植物材料先浸在5%硫酸銅溶液內(nèi)13天，

54、用清水漂洗后浸在乙液中保存。 配方二 氯化鋅 32克 95%酒精 125毫升 水 1000毫升 把氯化鋅溶于水中，再加入酒精。植物材料能在這溶液中保存。20、綠色幼蟲保存液 甲液 福爾馬林 4毫升 醋酸銅 1克 硝酸鉀 1克 水 100毫升 乙液 甘油 20毫升 醋酸鉀 10克 福爾馬林 1毫升 水 100毫升 先把昆蟲幼蟲放在80攝氏度熱水中燙死，曬干后放在甲液中固定1星期左右，最后放入稀釋一倍的乙液中保存。 配方二 甲液 95%酒精 90毫升 甘油 2.5毫升 福爾馬林 2.5毫升 冰醋酸 2.5毫升 氯化銅 3克 乙液 冰醋酸 5毫升 福爾馬林 4毫升 水 100毫升 將絕食12天的幼蟲

55、，用注射器從肛門向體內(nèi)注射甲液，12小時(shí)后轉(zhuǎn)入乙液內(nèi)保存，約20天更換1次乙液。 21、黃色幼蟲保存液 甲液 苦味酸飽和液 10毫升 冰醋酸 5毫升 福爾馬林 2.5毫升 乙液 與綠色幼蟲保存液配方二乙液相同 用注射器從幼蟲肛門內(nèi)注入甲液，12小時(shí)后轉(zhuǎn)入乙液內(nèi)保存。 22、紅色幼蟲保存液 硼砂 2克 50%酒精 100毫升 昆蟲幼蟲能在這溶液中保存。 23、動(dòng)物內(nèi)臟原色保存液 甲液 福爾馬林 200毫升 硝酸鉀 15克 醋酸鉀 30克 水 1000毫升 乙液 甘油 200毫升 醋酸鉀 100克 麝香草酚 2.5克 水 1000毫升 先把材料放在甲液內(nèi)固定，固定時(shí)間根據(jù)材料的大小而定，一般需15

56、天。當(dāng)材料失去自然色澤而呈暗褐色時(shí)，用手輕輕擠壓，直到?jīng)]有淡紅色血水流出時(shí)，取出材料，用清水沖洗，在浸在85%酒精中324小時(shí)（不能太久，否則易破壞色素），到血色恢復(fù)后，浸在乙液中保存。 （八）脫水劑 在顯微鏡制片中，生物實(shí)驗(yàn)室最常用的脫水劑是酒精。 1、酒精 市場(chǎng)出售的酒精有95%和100%（純酒精）兩種。高濃度的酒精（95%以上）對(duì)組織有強(qiáng)烈的收縮和脆化的缺點(diǎn)，因此材料在水洗后不能立即投入高濃度酒精中。脫水時(shí)為了避免材料萎縮、僵硬，應(yīng)在不同濃度的酒精里逐漸脫水。一般組織（除神經(jīng)組織、柔軟組織外）可從70%酒精開始經(jīng)80%、95%、100%酒精，使它逐步脫水。對(duì)一些柔軟組織如胚胎組織、低等無脊椎動(dòng)物組織，要從70%酒精以下的50%或30%或20%開始，否則組織收縮較大。以上各種濃度的就經(jīng)常用95%酒精加蒸餾水稀釋而成，而不用純酒精稀釋，因?yàn)樗膬r(jià)格太貴。 2、質(zhì)取水酒精 在酒精脫水劑中，無水酒精是最高一級(jí)的濃度脫水劑，中學(xué)生物實(shí)驗(yàn)室一般用一下方法由9