生物安全實驗室的個體防護

1、生物安全實驗室的個體防護生物安全實驗室： 具有一系列特殊物理防護設施（屏障）、嚴格的管理制度和標準操作規(guī)程，能夠安全地進行生物學實驗的實驗室。Physical protection（P1-P4）Biological safety laboratory（BSL1-4）生物安全防護三原則 安全設備 個體防護裝備和措施 嚴格的管理制度和標準化的操作程序及規(guī)程確保實驗室工作人員不受實驗對象侵染，確保周圍環(huán)境不受其污染 不注意安全易導致的意外事故針刺傷（穿刺）碎玻璃刺傷（不穿鞋，刺傷手）載玻片割傷（顯微鏡下計數(shù)細胞）濺入口腔，濺入眼睛（分裝/凍存樣品）離心管破裂，滑倒跌傷，酒精燈損壞負壓泵接管損傷，過濾

2、分裝毒種過程美國CDC醫(yī)務工作者感染HIV數(shù)據(jù)統(tǒng)計污染源情況暴露途徑利器類型47 HIV+血液45 針刺或割傷41 中空針頭1 HIV+帶血體液5 黏膜暴露2 破玻璃1 HIV+其他體液1 針刺+黏膜1 解剖刀3 HIV+病毒液 （實驗室）1 不清 1 不清*截止到97年6月，52HCWs職業(yè)事故感染，另加114未證實感染的報告發(fā)生事故后可以造成嚴重危害安全事故 受傷者感染 發(fā)病 死亡受傷人員的生活及工作環(huán)境壓力 工作隊伍的穩(wěn)定性降低個體防護裝備（ Personal Protective Equipment，PPE）是通過設立屏障保護工作人員免受工作場所生物危險的傷害。PPE不能替代優(yōu)質工程，

3、或嚴格的行政管理，或熟練的工作技能, 但應與之相互結合，以確保工作人員的安全和健康。個體防護裝備項目包括： 管理人員、工作人員及生物安全部門的職責；危險性評估及個體防護裝備的選擇； 工作人員的培訓； 保存必要的培訓記錄。 管理人員的職責管理人員對工作場所實施PPE負有主要責任，包括： 為工作人員提供合適的PPE； 確保工作人員接受過PPE正確使用、護理及清潔方面的培訓； 保存PPE分配及培訓記錄； 監(jiān)督工作人員確保其遵循PPE項目、正確使用和保養(yǎng)PPE； 尋求生物安全委員會幫助，進行危險性評估； 出現(xiàn)新的危險，或實驗進程增加或更改時，要及時報告OHS； 確保缺損儀器設備及時更換。 工作人員的職

4、責PPE使用者有責任遵循PPE項目的要求，包括：根據(jù)要求穿戴PPE；參加所要求的培訓課程；按照要求護理、清潔及保養(yǎng)PPE；如有需要修理或替換的PPE，要及時報告管理人員。生物安全辦公室的職責（Office of Health and Safety， OHS ）OHS負責啟動、實施并管理PPE項目，包括： 指導工作場所危險性評估，確定是否必須使用PPE；根據(jù)管理人員和或OHS的要求，指導工作場所定期危險性評估；保存危險性評估記錄；PPE經(jīng)核準使用后，向管理人員提供關于其使用、保管及清潔方面的培訓和技術指導；向管理人員提供選擇和購買PPE的指導意見； 定期評估先前選擇的PPE的適用性；考察、更新并

5、評估PPE項目的全面效果。危險性評估及個體防護裝備的選擇OHS及管理人員負責：確定工作場所是否需要PPE；選擇每次工作所需要的合適PPE；每一工作場所均需檢查，列明檢查結果及所需的具體防護裝置。 OHS及管理人員共同負責指導對每一工作場所進行初步檢查，確定危險源，包括撞擊、刺傷、 壓力、化學試劑、熱、灰塵、電源、材料處理及光輻射。每次檢查均應建檔，包括所檢查的工作場所、執(zhí)行檢查的人員、潛在危險源的檢測結果 及檢查日期。 一旦確定危險源， OHS將負責確定合適的PPE，確保防護水平大大高于保護工作人員免受傷害所需要的最低防護水平。 注意識別同時暴露于多種危險源的可能性。提供或建議購買對每一種危險

6、因子最高水平的充分的防護裝備。 眼及面部防護戴護目鏡或眼部防護裝置：工作人員、參觀者、研究人員、承包商、或其他經(jīng)過對眼部有傷害區(qū)域的人。 危險源：飛揚的顆粒, 熔化的金屬, 酸或腐蝕性液體, 化學試劑, 氣體, 或蒸汽, 生物氣溶膠, 或潛在的有害的光輻射。 側面防護器：飛揚物 護目鏡及面部防護器：化學試劑的飛濺 帶濾光鏡的裝備：光輻射戴近視遠視眼鏡者？戴隱形眼鏡者？緊急洗眼設備在工作人員可能暴露于腐蝕性材料的所有場所均需提供緊急洗眼設備，且該設備應位于緊急情況下易接近的位置。呼吸防護設備頭部防護使用人員：職員、建筑承包商、工程師、檢驗員、參觀者及其他工作人員。 危險源：墜落物或某些確定的物體

7、，或電擊。防撞帽頭盔：保護頭皮免受尖銳物體劃傷。但不能替代安全帽，因其不能承受高度撞擊力或墜落物體的穿透力。腳部防護防撞擊的防護鞋靴：搬運或處理可能會掉落的包裹、物體、零件或重的工具時；物體有可能砸到腳面時。防壓力的防護鞋靴：使用滑輪車或使用可能翻滾到工作人員腳上的材料或設備時。防刺穿的防護鞋靴：行走時可能被釘子、金屬絲、大頭針、螺絲釘、大U形釘、金屬片等尖銳物扎傷時。 手部防護戴手套：化學試劑、切割、劃傷、擦傷、刺傷、燒傷、生物學傷害及極端溫度傷害。手套的選擇：性能（厚度、滲透性）、條件、耐用性及危險因子 One type of glove will not work in all situ

8、ations. PPE的清潔及養(yǎng)護眼及面部防護裝備的清潔尤其重要！定期檢查、清潔、及養(yǎng)護PPE未清潔消毒之前，工作人員不能共用培訓何時必須穿戴PPE 需要什么樣的PPE 如何穿、脫、戴及調整PPE PPE的局限性 PPE的養(yǎng)護及處理記錄培訓人員名單， 培訓類型，培訓時間人員培訓記錄至少保持3年根據(jù)實驗室的安全級別選擇及使用不同的PPE基本要求工作人員在進入實驗室工作區(qū)前，應在專用的更衣室（或緩沖間）穿著背開式工作服或其他防護服。工作完畢必須脫下工作服，不得穿工作服離開實驗室?？稍俅问褂玫墓ぷ鞣仨毾认竞笄逑?。 工作時必須戴手套（兩付為宜）。一次性手套必須先消毒后丟棄。 在實驗室中必須配備有效

9、的消毒劑、眼部清洗劑或生理鹽水，且易于取用。可配備應急藥品。BSL1實驗室的個體防護工作人員在實驗時應穿工作服，戴防護眼鏡工作人員手上有皮膚破損或皮疹時應戴手套BSL2實驗室的個體防護除符合BSL1的要求外，還應該符合下列條件： 在實驗室中應穿著工作服或罩衫等防護服。離開實驗室時，防護服必須脫下并留在實驗室內。不得穿著外出。用過的工作服應先在實驗室中消毒，然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。當手可能接觸感染材料、污染的表面或設備時應戴手套。如可能發(fā)生感染性材料的溢出或濺出，宜戴兩副手套。不得戴著手套離開實驗室。工作完全結束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。當微生物的操作不可能在生物安全柜內進行，而

10、必須采取外部操作時，為防止感染性材料濺出或霧化危害，必須使用面部保護裝置（護目鏡、面罩、個體呼吸保護用品或其他防濺出保護設備）。BSL3實驗室的個體防護除符合BSL2的要求外，還應該符合下列條件： 在進行感染性組織培養(yǎng)、有可能產(chǎn)生感染性氣溶膠的操作時，必須使用個體防護設備。 當不能安全有效地將氣溶膠限定在一定范圍內時，應使用呼吸保護裝置。工作人員在進入實驗室工作區(qū)前，應在專用的更衣室（或緩沖間）穿著背開式工作服或其他防護服。工作完畢必須脫下工作服，不得穿工作服離開實驗室?？稍俅问褂玫墓ぷ鞣仨毾认竞笄逑础?工作時必須戴手套（兩付為宜）。一次性手套必須先消毒后丟棄。 在實驗室中必須配備有效的消

11、毒劑、眼部清洗劑或生理鹽水，且易于取用?？膳鋫鋺彼幤贰Ｔ谑褂脗魅拘晕镔|或已被污染的儀器時，需戴手套。在使用電話、計算機等設備進行文書工作前，必須 脫掉手套。 切記不能帶著手套離開BSL-3實驗室。所有離開BSL-3實驗室的物品必須正確消除污染，并放在干凈的容器或袋子中。有可能濺出或噴出傳染性物質、危險試劑時，需使用面部和眼部防護器具。 當有程序不能在生物安全柜內處理時，要組合使用適當?shù)牟僮魅藛T防護設備（如面罩、呼吸器）和物理容器設備。BSL4實驗室的個體防護除符合BSL3的要求外，還應該符合下列條件： 在實驗室中所有感染性材料的操作時，都必須在III級生物安全柜中進行。如果工作人員穿著整體的

12、（生命維持系統(tǒng)供氣的正壓工作服），則相關操作可在II級B型生物安全柜中進行。所有工作人員進入BSL4實驗室時都必須換上全套實驗室服裝，包括內衣、內褲、襯衣或連衫褲、鞋和手套等。所有這些實驗室保護服在淋浴和離開實驗室前均必須在更衣室內脫下。 當不能安全有效地將氣溶膠限定在一定范圍內時，應使用呼吸保護裝置。與靈長類動物接觸時，應考慮其粘膜暴露對人的感染危險，要戴防護眼鏡和面部防護器具。 室內有傳染性靈長類動物時，必須使用面部保護裝置（護目鏡、面罩、個體呼吸保護用品或其他防濺出保護設備）。進行容易產(chǎn)生高危險氣溶膠的操作時，包括對感染動物和雞胚的尸體、體液的收集、動物鼻腔接種，都要同時使用生物安全柜或

13、其它物理防護設備和個人防護器具（例如口罩和面罩）。 在危害評估的基礎上使用個體防護設備。操作感染動物和傳染性材料時都要使用個體防護設備實驗室污染及其防護實驗室污染問題是：實驗能否進行及維護實驗室安全的重要問題，污染是多向及多因素的，可由病毒污染人或人污染細胞，細胞與病毒間的交叉污染。病毒污染的防護病毒對人的污染是一個重要的實驗安全問題，除上述實驗操作中應嚴格按照要求穿無菌服，帶手套、口罩、帽子，眼鏡外，還應注意以下事項： 實驗室中必備下述消毒液體，并由值日人員及時更換以保證其有效的消毒作用：（1）0.5%的次氯酸鈉溶液;（2）1.0%的來蘇爾溶液;（3）70%乙醇溶液及棉球實驗室內不可有銳器（

14、刀、針、碎玻璃等）暴露，剪刀用完后應立即放回盒中，一次性針頭用完要放入飯盒內高壓消毒；不慎打破玻璃器皿必須立即將全部碎片收集干凈 手套在使用前應檢查是否漏氣； 遇到有手部或其它身體暴露部位有皮膚破損時應停止一切工作，待創(chuàng)面愈合后才能從事實驗工作；如在帶毒實驗中割傷皮膚，應立即將傷部浸泡入消毒液中，并盡量擠出傷部血液。 在實驗中遇到其它意外事故（如火災等）在排除事故的同時應立即消滅傳染源，嚴防被感染或感染其他人； 實驗完成后，必須消毒工作臺面及打開紫外燈照射30分鐘。細胞污染的防護應嚴格遵守無菌操作； 每批培養(yǎng)液或血清必須預先作培養(yǎng)后才能使用； 含抗生素的培養(yǎng)液不應長期存放于4，因PS易失效，若用已放置過久的生長液，應追加新鮮的抗生素；為防止霉菌污染可加入10ul/ml制霉菌素；細胞污染應立即放棄培養(yǎng)，對必需保留的輕度霉菌污染的培養(yǎng)物，可將細胞與霉菌盡量分開，然后加大制霉菌素的量（30ul/ml）； 實驗前應做好充分準備，實驗開始后不應再出實驗室，或盡量不要離開生物安全柜。操作者間交互污染的防護帶毒操作時應盡量減少接觸其它無關物品，工作中污染的區(qū)域或物品必須立即消毒，以免忘記，實驗后必須立即處理實