第七章紫外-可見(jiàn)分光光度法2

1、分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材紫外吸收光譜的基本概念紫外吸收光譜的基本概念1紫外紫外-可見(jiàn)分光光度法的基本原理可見(jiàn)分光光度法的基本原理2紫外紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)可見(jiàn)分光光度計(jì)3分析條件的選擇分析條件的選擇456 定性定量分析方法定性定量分析方法UV在有機(jī)藥物分析中的應(yīng)用在有機(jī)藥物分析中的應(yīng)用21第七章紫外第七章紫外-可見(jiàn)分光光度法與檢測(cè)技術(shù)可見(jiàn)分光光度法與檢測(cè)技術(shù)分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)

2、生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第七章第七章 紫外紫外-可見(jiàn)分光光度法可見(jiàn)分光光度法學(xué)習(xí)目標(biāo)學(xué)習(xí)目標(biāo) 知識(shí)要求知識(shí)要求 能力要求能力要求 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材學(xué)習(xí)目標(biāo)學(xué)習(xí)目標(biāo)u 通過(guò)學(xué)習(xí)光譜分析法概論、紫外通過(guò)學(xué)習(xí)光譜分析法概論、紫外- -可見(jiàn)分光光度法可見(jiàn)分光光度法的基本原理、分光光度計(jì)的基本構(gòu)造、降低測(cè)量誤的基本原理、分光光度計(jì)的基本構(gòu)造、降低測(cè)量誤差的方法、常用的定性、定量方法等知識(shí)，了解光差的方法、常用的定性、定量方法等知識(shí)，了解光學(xué)分析法的知識(shí)體系，熟

3、悉紫外學(xué)分析法的知識(shí)體系，熟悉紫外- -可見(jiàn)分光光度法可見(jiàn)分光光度法的實(shí)際應(yīng)用，會(huì)用紫外的實(shí)際應(yīng)用，會(huì)用紫外- -可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定溶液可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定溶液的吸光度，并對(duì)有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行定性定量分析，為學(xué)的吸光度，并對(duì)有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行定性定量分析，為學(xué)習(xí)紅外分光光度法、熒光分光光度法、核磁共振波習(xí)紅外分光光度法、熒光分光光度法、核磁共振波譜法及藥物分析課中有關(guān)藥品的定性鑒別、雜質(zhì)檢譜法及藥物分析課中有關(guān)藥品的定性鑒別、雜質(zhì)檢查和含量測(cè)定方法奠定基礎(chǔ)。查和含量測(cè)定方法奠定基礎(chǔ)。 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二

4、五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材知識(shí)要求知識(shí)要求1掌握光的吸收定律概念、表達(dá)式及條件，吸光系數(shù)和掌握光的吸收定律概念、表達(dá)式及條件，吸光系數(shù)和吸收光譜的意義，常用定量分析方法的原理和應(yīng)用。吸收光譜的意義，常用定量分析方法的原理和應(yīng)用。2熟悉紫外熟悉紫外- -可見(jiàn)分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)、吸光度測(cè)量可見(jiàn)分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)、吸光度測(cè)量條件的選擇、偏離光的吸收定律的主要因素。條件的選擇、偏離光的吸收定律的主要因素。3了解光譜分析法的分類、紫外了解光譜分析法的分類、紫外- -可見(jiàn)吸收光譜的產(chǎn)生可見(jiàn)吸收光譜的產(chǎn)生機(jī)制、定性分析的依據(jù)和方法。機(jī)制、定性分析的依據(jù)和方法。分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝

5、慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材能力要求能力要求1. .能夠用光的吸收定律解決定量計(jì)算問(wèn)題能夠用光的吸收定律解決定量計(jì)算問(wèn)題 。2. .能夠繪制吸收光譜曲線，找出被測(cè)組分的最能夠繪制吸收光譜曲線，找出被測(cè)組分的最 大吸收波長(zhǎng)。大吸收波長(zhǎng)。3. .能夠繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并能應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)樣品能夠繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并能應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)樣品進(jìn)行定量分析。進(jìn)行定量分析。4. .會(huì)使用常見(jiàn)的紫外會(huì)使用常見(jiàn)的紫外- -可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定溶液的可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定溶液的吸光度。吸光度。 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維

6、斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材案例導(dǎo)入 在夏天參加戶外活動(dòng)時(shí)，如果天氣晴朗，就應(yīng)該在夏天參加戶外活動(dòng)時(shí)，如果天氣晴朗，就應(yīng)該注意保護(hù)皮膚，否則，暴露在火辣辣太陽(yáng)之下的皮膚，注意保護(hù)皮膚，否則，暴露在火辣辣太陽(yáng)之下的皮膚，數(shù)小時(shí)后就會(huì)出現(xiàn)紅腫、瘙癢、發(fā)熱、刺痛癥狀，數(shù)數(shù)小時(shí)后就會(huì)出現(xiàn)紅腫、瘙癢、發(fā)熱、刺痛癥狀，數(shù)日后出現(xiàn)蛻皮現(xiàn)象，這表明太陽(yáng)光中有一種光線能傷日后出現(xiàn)蛻皮現(xiàn)象，這表明太陽(yáng)光中有一種光線能傷害生物細(xì)胞?？茖W(xué)家研究證實(shí)，這種光線是紫外線。害生物細(xì)胞?？茖W(xué)家研究證實(shí)，這種光線是紫外線。 根據(jù)可見(jiàn)光、紫外光與物質(zhì)分子的相互作用建立

7、根據(jù)可見(jiàn)光、紫外光與物質(zhì)分子的相互作用建立了紫外了紫外- -可見(jiàn)分光光度法?？梢?jiàn)分光光度法。 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第一節(jié)第一節(jié) 紫外吸收光譜的基本概念紫外吸收光譜的基本概念u根據(jù)待測(cè)物質(zhì)（原子或分子）發(fā)射或吸收的電磁輻根據(jù)待測(cè)物質(zhì)（原子或分子）發(fā)射或吸收的電磁輻射，以及待測(cè)物質(zhì)與電磁輻射的相互作用而建立起射，以及待測(cè)物質(zhì)與電磁輻射的相互作用而建立起來(lái)的定性、定量和結(jié)構(gòu)分析方法，統(tǒng)稱為來(lái)的定性、定量和結(jié)構(gòu)分析方法，統(tǒng)稱為光學(xué)分析光學(xué)分析法。法。 u利用光譜進(jìn)行定性、定

8、量和結(jié)構(gòu)分析的方法稱為光利用光譜進(jìn)行定性、定量和結(jié)構(gòu)分析的方法稱為光譜分析法，簡(jiǎn)稱譜分析法，簡(jiǎn)稱光譜法。光譜法。 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第一節(jié)第一節(jié) 紫外吸收光譜的基本概念紫外吸收光譜的基本概念一、物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收一、物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收從本質(zhì)上講，光是一種電磁輻射，又稱電磁波，從本質(zhì)上講，光是一種電磁輻射，又稱電磁波，具有波動(dòng)性和粒子性，即波粒二象性。具有波動(dòng)性和粒子性，即波粒二象性。波動(dòng)性：反射、折射、干涉、偏振波動(dòng)性：反射、折射、干涉、偏振粒子性：吸收、發(fā)射

9、、光電效應(yīng)粒子性：吸收、發(fā)射、光電效應(yīng)分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材電磁波譜分區(qū)表電磁波譜分區(qū)表輻射區(qū)段輻射區(qū)段波長(zhǎng)范圍波長(zhǎng)范圍輻射區(qū)段輻射區(qū)段波長(zhǎng)范圍波長(zhǎng)范圍 射線射線10-30.1nm 射線射線遠(yuǎn)紫外輻射遠(yuǎn)紫外輻射紫外輻射紫外輻射可見(jiàn)光可見(jiàn)光0.110nm10200nm200400nm400760nm近紅外輻射近紅外輻射中紅外輻射中紅外輻射遠(yuǎn)紅外輻射遠(yuǎn)紅外輻射微波微波無(wú)線電波無(wú)線電波0.762.5 m2.550 m50300 m0.3mm1m11000m分析化學(xué)（第分析化

10、學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材 電磁輻射電磁輻射電磁輻射是一種以電磁輻射是一種以電磁波電磁波的的形式在空間高速傳播的形式在空間高速傳播的粒子流粒子流，具有具有波動(dòng)性波動(dòng)性和和微粒性微粒性。分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材磁場(chǎng)磁場(chǎng)電場(chǎng)電場(chǎng)傳播方向傳播方向電磁輻射的波動(dòng)性電磁輻射與其它波，如聲波不同，電磁波不需傳播介質(zhì)，可在真空中傳輸。 c=v分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝

11、慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材電磁輻射的微粒性電磁輻射是由一顆顆不連續(xù)的電磁輻射是由一顆顆不連續(xù)的光光子子構(gòu)成的構(gòu)成的粒子流粒子流。當(dāng)物質(zhì)吸收或發(fā)射。當(dāng)物質(zhì)吸收或發(fā)射一定波長(zhǎng)的電磁波時(shí)，是以吸收或發(fā)一定波長(zhǎng)的電磁波時(shí)，是以吸收或發(fā)射一顆顆量子化的光子形式進(jìn)行的。射一顆顆量子化的光子形式進(jìn)行的。/hchE分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材一一 、 物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收單色光單色光:

12、 : 單一波長(zhǎng)的光束單一波長(zhǎng)的光束復(fù)合光復(fù)合光: : 含有多種波長(zhǎng)的光束含有多種波長(zhǎng)的光束電磁波譜電磁波譜: : 以波長(zhǎng)大小順序排列的電磁波譜圖以波長(zhǎng)大小順序排列的電磁波譜圖互補(bǔ)光：互補(bǔ)光：兩種適當(dāng)顏色單色光按一定比例混合，可以得兩種適當(dāng)顏色單色光按一定比例混合，可以得 到白光，則這兩種單色光互稱補(bǔ)色光。到白光，則這兩種單色光互稱補(bǔ)色光。波長(zhǎng)波長(zhǎng) 10pm 300pm 200nm 400nm 800nm 500 m 1cm 1m光譜光譜 射線射線 X射線射線 紫外光紫外光 可見(jiàn)光可見(jiàn)光 紅外光紅外光 微波微波 無(wú)線電波無(wú)線電波方法方法 光譜法光譜法 分光光度法分光光度法 光譜法光譜法 核磁共振

13、核磁共振 可可 見(jiàn)見(jiàn) 光光分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材一、 物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收綠綠560560500500白光紫紫400400450450青藍(lán)青藍(lán)480480490490橙橙610610650650青青480480500500紅紅650650750750黃黃560560610610藍(lán)藍(lán)450450480480光的互補(bǔ)色示意圖光的互補(bǔ)色示意圖課堂互動(dòng)1.硫酸銅能夠吸收白色光中的黃色光而呈現(xiàn)-色2.一束白光透過(guò)高錳酸鉀溶液后，何種顏色的光被吸收了？分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版

14、）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材 光的三原色光的三原色 白光的色散白光的色散分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材二、透光率與吸光度二、透光率與吸光度當(dāng)一束平行的單當(dāng)一束平行的單色光照射溶液時(shí)色光照射溶液時(shí) I0Ia + It 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材lgAT 二、透光率

15、與吸光度二、透光率與吸光度u 透射光透射光強(qiáng)度強(qiáng)度It與入射光強(qiáng)度與入射光強(qiáng)度I0的比值稱為透光率或透光的比值稱為透光率或透光度度T T= It I0u 透光率的負(fù)對(duì)數(shù)為吸光度透光率的負(fù)對(duì)數(shù)為吸光度A 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材三、吸收光譜曲線三、吸收光譜曲線 u概念：以波長(zhǎng)概念：以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，吸光度為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)所描為縱坐標(biāo)所描繪的曲線，稱為吸收光譜曲線，簡(jiǎn)稱吸收光譜，繪的曲線，稱為吸收光譜曲線，簡(jiǎn)稱吸收光譜，或或A-曲線曲線 。u特點(diǎn)：在相同條件下，同一

16、物質(zhì)的不同濃度的溶特點(diǎn)：在相同條件下，同一物質(zhì)的不同濃度的溶液，其吸收光譜曲線相似，且液，其吸收光譜曲線相似，且max相同。這是定相同。這是定性分析的基礎(chǔ)。性分析的基礎(chǔ)。分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材三、吸收曲線（吸收光譜）三、吸收曲線（吸收光譜）max525nm吸收光譜能準(zhǔn)確地描述物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收的情況最大吸收波長(zhǎng)定性依據(jù)：不同物質(zhì)因分子結(jié)構(gòu)不同而具有不同的特征吸收曲線定量依據(jù)：同波長(zhǎng)下吸光度隨濃度增大而增大一般情況下選擇最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定動(dòng)畫(huà)動(dòng)畫(huà)分析化學(xué)（第分析化學(xué)（

17、第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材三、吸收光譜曲線三、吸收光譜曲線 吸收光譜曲線示意圖吸收光譜曲線示意圖 A480 520 560nm max=515分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材吸收曲線的討論1.同一種物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)光的吸光度不同。同一種物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)光的吸光度不同。 吸光度最大處對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)稱為吸光度最大處對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)稱為最大吸收波長(zhǎng)最大吸收波長(zhǎng)max2.不同濃度的同一種物質(zhì)，其吸收

18、曲線形狀相似不同濃度的同一種物質(zhì)，其吸收曲線形狀相似 max不變。而對(duì)于不同物質(zhì)，它們的吸收曲線形狀和不變。而對(duì)于不同物質(zhì)，它們的吸收曲線形狀和 max則不同。則不同。3.吸收曲線可以提供物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，并作為物吸收曲線可以提供物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，并作為物 質(zhì)定性分析的依據(jù)之一。質(zhì)定性分析的依據(jù)之一。4.不同濃度的同一種物質(zhì)，在某一定波長(zhǎng)下吸光度不同濃度的同一種物質(zhì)，在某一定波長(zhǎng)下吸光度 A 有差異，在有差異，在max處吸光度處吸光度A 的差異最大。此特性可作為物質(zhì)定量分析的依據(jù)的差異最大。此特性可作為物質(zhì)定量分析的依據(jù) 5.在在max處吸光度隨濃度變化的幅度最大，所以測(cè)定最靈敏。吸處吸光度隨濃度

19、變化的幅度最大，所以測(cè)定最靈敏。吸收曲線是定量分析中選擇入射光波長(zhǎng)的重要依據(jù)。收曲線是定量分析中選擇入射光波長(zhǎng)的重要依據(jù)。分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第一節(jié) 紫外吸收光譜的基本概念四、紫外四、紫外- -可見(jiàn)分光光度的特點(diǎn)可見(jiàn)分光光度的特點(diǎn)特點(diǎn)特點(diǎn)靈敏度高靈敏度高準(zhǔn)確度高準(zhǔn)確度高精密度好精密度好選擇性好選擇性好易于普及易于普及應(yīng)用廣泛應(yīng)用廣泛儀器簡(jiǎn)單儀器簡(jiǎn)單操作簡(jiǎn)便操作簡(jiǎn)便價(jià)格低廉價(jià)格低廉測(cè)定快速測(cè)定快速分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高

20、專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材點(diǎn)滴積累點(diǎn)滴積累1.光的本質(zhì)是電磁波，物質(zhì)對(duì)光的吸收具有選擇性2.吸光度是透光率倒數(shù)的對(duì)數(shù)，或是透光率的負(fù)對(duì)數(shù)3.吸收曲線是溶液在一定條件下的吸收度隨入射光波長(zhǎng)變化而變化的曲線。他與溶液的性質(zhì)有關(guān)，因此A-曲線的形狀和最大吸收波長(zhǎng)可以作為物質(zhì)定性的輔助依據(jù)。分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)

21、生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材1 1紫外紫外- -可見(jiàn)光的波長(zhǎng)范圍是可見(jiàn)光的波長(zhǎng)范圍是 A200400nm B400760nm C200760nm D360800nm2 2下列敘述錯(cuò)誤的是下列敘述錯(cuò)誤的是 A A光的能量與其波長(zhǎng)成反比光的能量與其波長(zhǎng)成反比 B B有色溶液越濃，對(duì)光的吸收也越強(qiáng)烈有色溶液越濃，對(duì)光的吸收也越強(qiáng)烈 C C物質(zhì)對(duì)光的吸收有選擇性物質(zhì)對(duì)光的吸收有選擇性 D D光的能量與其頻率成反比光的能量與其頻率成反比第一節(jié) 概述分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材

22、3 3紫外紫外- -可見(jiàn)分光光度法屬于可見(jiàn)分光光度法屬于 A A原子發(fā)射光譜法原子發(fā)射光譜法 B B原子吸收光譜法原子吸收光譜法 C C分子發(fā)射光譜法分子發(fā)射光譜法 D D分子吸收光譜法分子吸收光譜法4 4分子吸收可見(jiàn)分子吸收可見(jiàn)- -紫外光后，可發(fā)生哪種類型的紫外光后，可發(fā)生哪種類型的分子能級(jí)躍遷分子能級(jí)躍遷 A A轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)躍遷轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)躍遷 B B振動(dòng)能級(jí)躍遷振動(dòng)能級(jí)躍遷 C C電子能級(jí)躍遷電子能級(jí)躍遷 D D以上都能發(fā)生以上都能發(fā)生 第一節(jié) 概述分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教

23、材材第二節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度法的基本原理一、光的吸收定律一、光的吸收定律 u當(dāng)一束平行的單色光通過(guò)均勻、無(wú)散射的含有吸光性當(dāng)一束平行的單色光通過(guò)均勻、無(wú)散射的含有吸光性物質(zhì)的溶液時(shí)，在入射光的波長(zhǎng)、強(qiáng)度及溶液的溫度物質(zhì)的溶液時(shí)，在入射光的波長(zhǎng)、強(qiáng)度及溶液的溫度等條件不變的情況下，該溶液的吸光度等條件不變的情況下，該溶液的吸光度A與溶液的濃與溶液的濃度度c及液層厚度及液層厚度L的乘積成正比，即：的乘積成正比，即： AKL c 。 稱為光的吸收定律（朗伯稱為光的吸收定律（朗伯-比爾定律）。比爾定律）。u光的吸收定律是定量分析的理論依據(jù)。光的吸收定律是定量分析的理論依據(jù)。分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2

24、版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材u朗伯朗伯- -比爾定律不僅適用于可見(jiàn)光，而且也適用于紫比爾定律不僅適用于可見(jiàn)光，而且也適用于紫外光和紅外光；不僅適用于均勻、無(wú)散射的溶液，而外光和紅外光；不僅適用于均勻、無(wú)散射的溶液，而且也適用于均勻、無(wú)散射的固體和氣體且也適用于均勻、無(wú)散射的固體和氣體。u實(shí)驗(yàn)證明：溶液對(duì)光的吸光度具有加和性。如果溶液實(shí)驗(yàn)證明：溶液對(duì)光的吸光度具有加和性。如果溶液中同時(shí)存在兩種或兩種以上的吸光性物質(zhì)，則測(cè)得的中同時(shí)存在兩種或兩種以上的吸光性物質(zhì)，則測(cè)得的該溶液的吸光度等于溶液中各吸光性

25、物質(zhì)吸光度的總該溶液的吸光度等于溶液中各吸光性物質(zhì)吸光度的總和，即：和，即：A（a+b+c）AaAbAc 第二節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度法的基本原理分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材 第二節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度法的基本原理分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第二節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度法的基本原理二、吸光系數(shù)二、吸光系數(shù) u摩爾吸光系數(shù)：在入射光波長(zhǎng)一定時(shí)，溶液濃度摩爾吸光

26、系數(shù)：在入射光波長(zhǎng)一定時(shí)，溶液濃度為為1 mol/L，液層厚度為，液層厚度為1cm時(shí)所測(cè)得的吸光度稱時(shí)所測(cè)得的吸光度稱為摩爾吸光系數(shù)，常用為摩爾吸光系數(shù)，常用表示表示 。 u光吸收系數(shù)光吸收系數(shù) 在入射光波長(zhǎng)一定時(shí)，溶液濃度為在入射光波長(zhǎng)一定時(shí)，溶液濃度為1g/L1g/L，液層厚度為，液層厚度為1cm1cm時(shí)的吸光度，稱為光吸收系時(shí)的吸光度，稱為光吸收系數(shù)，常用表示，其量綱為數(shù)，常用表示，其量綱為L(zhǎng)/(gcm)L/(gcm)。 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第二節(jié) 紫外-可見(jiàn)

27、分光光度法的基本原理u百分吸光系數(shù)：在入射光波長(zhǎng)一定時(shí)，溶液濃度百分吸光系數(shù)：在入射光波長(zhǎng)一定時(shí)，溶液濃度為為1 （W/V）、層厚度為）、層厚度為1cm時(shí)所測(cè)得的吸光度時(shí)所測(cè)得的吸光度稱為百分吸光系數(shù)，常用稱為百分吸光系數(shù)，常用 表示表示。 二者的關(guān)系：二者的關(guān)系：1%110cmME 1%1cmE分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材 第二節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度法的基本原理分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)

28、衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材某有色溶液的物質(zhì)的量濃度濃度為某有色溶液的物質(zhì)的量濃度濃度為c c，在一定條件下用，在一定條件下用1 1cmcm比色杯測(cè)得吸光度為比色杯測(cè)得吸光度為A A，則摩爾吸光系數(shù)應(yīng)為：，則摩爾吸光系數(shù)應(yīng)為： A AcAcA B BcMcM C CA/C DA/C DC/A C/A 第二節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度法的基本原理分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第二節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度法的基本原理三、偏離光的吸收定律的主要因素三、偏離光的吸收定律的主要因素u

29、化學(xué)因素化學(xué)因素:(1)溶液的濃度溶液的濃度 (2)物質(zhì)的化學(xué)變化物質(zhì)的化學(xué)變化 (3)溶劑的影響溶劑的影響 u光學(xué)因素光學(xué)因素:(1)非單色光非單色光 (2)雜散光雜散光 (3)非平行光非平行光 (4)反射現(xiàn)象反射現(xiàn)象 (5)散射現(xiàn)象散射現(xiàn)象分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第二節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度法的基本原理偏離光的吸收定律示意圖偏離光的吸收定律示意圖分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二

30、五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第二節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度法的基本原理點(diǎn)滴積累點(diǎn)滴積累1 1光的吸收定律表明了吸光度與液層厚度光的吸收定律表明了吸光度與液層厚度和濃度之間的關(guān)系，它是吸收光譜法定量分析和濃度之間的關(guān)系，它是吸收光譜法定量分析的依據(jù)。的依據(jù)。2 2吸光系數(shù)的表示方法有多種，隨待測(cè)溶吸光系數(shù)的表示方法有多種，隨待測(cè)溶液濃度的不同標(biāo)度而不同。液濃度的不同標(biāo)度而不同。3 3偏離光的吸收定律的因素主要有化學(xué)因偏離光的吸收定律的因素主要有化學(xué)因素和光學(xué)因素。素和光學(xué)因素。 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二

31、五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第三節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)一、紫外一、紫外- -可見(jiàn)分光光度計(jì)的主要部件：可見(jiàn)分光光度計(jì)的主要部件：光源光源單色器單色器吸收池吸收池檢測(cè)器檢測(cè)器訊號(hào)處理與顯示器訊號(hào)處理與顯示器 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第三節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì) 二、紫外二、紫外- -可見(jiàn)分光光度計(jì)的光學(xué)性能可見(jiàn)分光光度計(jì)的光學(xué)性能1測(cè)光方式 2波長(zhǎng)范圍 3狹縫或光譜帶寬 4雜散光 5波長(zhǎng)準(zhǔn)確度 6吸光度范圍 7波長(zhǎng)重復(fù)性 8測(cè)光準(zhǔn)確度 9光度重復(fù)性 10分辨率 分析化學(xué)（

32、第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第三節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì) 三、紫外三、紫外- -可見(jiàn)分光光度計(jì)的類型可見(jiàn)分光光度計(jì)的類型1.1.可見(jiàn)分光光度計(jì)可見(jiàn)分光光度計(jì) 721721型型 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第三節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì) 三、紫外三、紫外- -可見(jiàn)分光光度計(jì)的類型可見(jiàn)分光光度計(jì)的類型1.1.可見(jiàn)分光光度計(jì)可見(jiàn)分光光度計(jì) 722722型型分析化學(xué)（第分析

33、化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第三節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)三、紫外三、紫外- -可見(jiàn)分光光度計(jì)的類型可見(jiàn)分光光度計(jì)的類型2.2.紫外紫外- -可見(jiàn)分光光度計(jì)可見(jiàn)分光光度計(jì) （1 1）單波長(zhǎng)分光光度計(jì)）單波長(zhǎng)分光光度計(jì) 單光束分光光度計(jì)單光束分光光度計(jì) 雙光束分光光度計(jì)雙光束分光光度計(jì) 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第三節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版

34、） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材課堂活動(dòng)課堂活動(dòng) 1.1.試述紫外試述紫外- -可見(jiàn)分光光度計(jì)的主要部件可見(jiàn)分光光度計(jì)的主要部件及其作用？及其作用？ 2.2.紫外紫外- -可見(jiàn)分光光度計(jì)有哪些類型？可見(jiàn)分光光度計(jì)有哪些類型？第三節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第三節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)點(diǎn)滴積累點(diǎn)滴積累u紫外紫外- -可見(jiàn)分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)相同，都可見(jiàn)分光光度計(jì)的基本

35、結(jié)構(gòu)相同，都由光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器、訊號(hào)處由光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器、訊號(hào)處理與顯示器等主要部件構(gòu)成，但不同型號(hào)儀理與顯示器等主要部件構(gòu)成，但不同型號(hào)儀器的外形差別很大，質(zhì)量和價(jià)格相差懸殊，器的外形差別很大，質(zhì)量和價(jià)格相差懸殊，操作方法迥異，使用之前應(yīng)仔細(xì)閱讀儀器使操作方法迥異，使用之前應(yīng)仔細(xì)閱讀儀器使用說(shuō)明書(shū)。用說(shuō)明書(shū)。 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第四節(jié) 分析條件的選擇一、儀器測(cè)量條件的選擇一、儀器測(cè)量條件的選擇 1.1.應(yīng)選擇最大吸收波長(zhǎng)作為入射光。應(yīng)選擇

36、最大吸收波長(zhǎng)作為入射光。 2.2.應(yīng)控制吸光度讀數(shù)范圍：應(yīng)控制吸光度讀數(shù)范圍： 吸光度在吸光度在0.20.7之間；之間； 透光率在透光率在20%65%之間。之間。 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第四節(jié) 分析條件的選擇二、顯色反應(yīng)條件的選擇二、顯色反應(yīng)條件的選擇1.1.對(duì)顯色劑及顯色反應(yīng)的要求對(duì)顯色劑及顯色反應(yīng)的要求 2.2.控制合適的顯色反應(yīng)條件控制合適的顯色反應(yīng)條件 三、參比溶液的選擇三、參比溶液的選擇1.溶劑參比溶液溶劑參比溶液 2.試樣參比溶液試樣參比溶液 3.試劑參比

37、溶液試劑參比溶液 4.平行操作參比溶液平行操作參比溶液 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第四節(jié) 分析條件的選擇分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第四節(jié) 分析條件的選擇點(diǎn)滴積累點(diǎn)滴積累 1 1選擇吸光性物質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)作為測(cè)定波選擇吸光性物質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)。長(zhǎng)。 2 2使用紫外使用紫外- -可見(jiàn)分光光度計(jì)時(shí)，讀數(shù)范圍應(yīng)可見(jiàn)分光光度計(jì)時(shí)，讀數(shù)范圍應(yīng)控制在

38、吸光度為控制在吸光度為0.20.20.70.7，透光率為，透光率為65% 65% 20%20%之之間。間。 3 3待測(cè)物質(zhì)在紫外待測(cè)物質(zhì)在紫外- -可見(jiàn)光區(qū)無(wú)吸收時(shí)，應(yīng)加可見(jiàn)光區(qū)無(wú)吸收時(shí)，應(yīng)加顯色劑。顯色劑不得有干擾，反應(yīng)必須完全。顯色劑。顯色劑不得有干擾，反應(yīng)必須完全。 4 4一般用溶劑作參比溶液。必要時(shí)采用試樣參一般用溶劑作參比溶液。必要時(shí)采用試樣參比溶液、試劑參比溶液或平行操作參比溶液。比溶液、試劑參比溶液或平行操作參比溶液。 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第五節(jié) 定性

39、定量方法一、定性分析方法一、定性分析方法定性的基本依據(jù)：比較光譜的一致性。定性的基本依據(jù)：比較光譜的一致性。u未知物和標(biāo)準(zhǔn)品的吸收光譜曲線，對(duì)比二者是否一致。未知物和標(biāo)準(zhǔn)品的吸收光譜曲線，對(duì)比二者是否一致。 u比較吸收光譜的特征數(shù)據(jù)及比值的一致性。比較吸收光譜的特征數(shù)據(jù)及比值的一致性。二、雜質(zhì)檢查：二、雜質(zhì)檢查： 將藥品光譜與藥品標(biāo)準(zhǔn)光譜相對(duì)照，利用雜質(zhì)的特將藥品光譜與藥品標(biāo)準(zhǔn)光譜相對(duì)照，利用雜質(zhì)的特征吸收，可以檢測(cè)出微量雜質(zhì)及其含量。征吸收，可以檢測(cè)出微量雜質(zhì)及其含量。 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十

40、二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材案例分析案例分析貝諾酯的定性鑒別貝諾酯的定性鑒別中國(guó)藥典中國(guó)藥典(20(201010年版年版) )規(guī)定：貝諾酯加無(wú)水乙醇制成規(guī)定：貝諾酯加無(wú)水乙醇制成每每1 1mlml約含約含7.57.5g的溶液，在的溶液，在240240nmnm處有最大吸收，相處有最大吸收，相應(yīng)的百分吸光系數(shù)應(yīng)的百分吸光系數(shù)( )( )應(yīng)為應(yīng)為730730760760。維生素維生素B B1212也有三個(gè)吸收峰，分別在也有三個(gè)吸收峰，分別在278278nmnm、361nm361nm、550nm550nm波長(zhǎng)處，它們的吸光度比值應(yīng)為：波長(zhǎng)處，它們的吸光度比值應(yīng)為：A A361nm361nm/ /A A

41、278nm278nm在在1.701.701.881.88之間，之間，A A361nm361nm/ /A A550nm550nm在在3.153.153.453.45之間。之間。 第五節(jié) 定性定量方法%11cmE分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材案例分析案例分析葡萄糖注射液是臨床上常用的藥品之一。制備時(shí)需葡萄糖注射液是臨床上常用的藥品之一。制備時(shí)需要高溫滅菌，葡萄糖會(huì)轉(zhuǎn)化為要高溫滅菌，葡萄糖會(huì)轉(zhuǎn)化為5-5-羥甲基糠醛而引入羥甲基糠醛而引入雜質(zhì)。雜質(zhì)。中國(guó)藥典中國(guó)藥典（20102010

42、年版）規(guī)定葡萄糖注射年版）規(guī)定葡萄糖注射液在液在284nm284nm波長(zhǎng)處的吸收度不得過(guò)波長(zhǎng)處的吸收度不得過(guò)0.320.32，以此控制其，以此控制其雜質(zhì)雜質(zhì)5-5-羥甲基糠醛的量。羥甲基糠醛的量。在在284nm284nm波長(zhǎng)處，葡萄糖無(wú)吸收，而雜質(zhì)波長(zhǎng)處，葡萄糖無(wú)吸收，而雜質(zhì)5-5-羥甲基糠羥甲基糠醛在此波長(zhǎng)處有最大吸收，可以通過(guò)控制供試品溶醛在此波長(zhǎng)處有最大吸收，可以通過(guò)控制供試品溶液在此波長(zhǎng)處的吸收度來(lái)控制雜質(zhì)的含量。液在此波長(zhǎng)處的吸收度來(lái)控制雜質(zhì)的含量。 第五節(jié) 定性定量方法分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)

43、生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第五節(jié) 定性定量方法三、定量分析方法三、定量分析方法定量分析的依據(jù)定量分析的依據(jù): : AK c L（光的吸收定律）（光的吸收定律）（一）單組分溶液的定量方法（一）單組分溶液的定量方法 1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線法：標(biāo)準(zhǔn)曲線法： 是紫外是紫外- -可見(jiàn)分光光度法中最可見(jiàn)分光光度法中最經(jīng)典的定量方法。經(jīng)典的定量方法。 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第五節(jié) 定性定量方法u標(biāo)準(zhǔn)曲線法標(biāo)準(zhǔn)曲線法的方法和步驟如下的方法和步驟如下:（1 1）配制一系列不同濃度的標(biāo)

44、準(zhǔn)溶液，選擇合適）配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，選擇合適的參比溶液，在相同條件下，以待測(cè)組分的最大的參比溶液，在相同條件下，以待測(cè)組分的最大吸收波長(zhǎng)吸收波長(zhǎng) 作為入射光，分別測(cè)定各標(biāo)準(zhǔn)溶液作為入射光，分別測(cè)定各標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)應(yīng)的吸光度。對(duì)應(yīng)的吸光度。（2 2）以濃度）以濃度c c為橫坐標(biāo)、吸光度為橫坐標(biāo)、吸光度A A為縱坐標(biāo)描繪標(biāo)為縱坐標(biāo)描繪標(biāo)準(zhǔn)曲線。準(zhǔn)曲線。max分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第五節(jié) 定性定量方法 （3 3）按照相同的實(shí)）按照相同的實(shí)驗(yàn)條件和操作程序，驗(yàn)條件和操

45、作程序，用待測(cè)溶液配制未知用待測(cè)溶液配制未知試樣溶液并測(cè)定其吸試樣溶液并測(cè)定其吸光度光度A A樣，在標(biāo)準(zhǔn)曲線，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上找到與之對(duì)應(yīng)的未上找到與之對(duì)應(yīng)的未知試樣溶液的濃度知試樣溶液的濃度c c樣 。 如右圖。 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第五節(jié) 定性定量方法2.標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法: 在相同的條件下，配制濃度為在相同的條件下，配制濃度為cs的標(biāo)準(zhǔn)溶液和的標(biāo)準(zhǔn)溶液和濃度為濃度為cx的試樣溶液，在最大吸收波長(zhǎng)處，分別的試樣溶液，在最大吸收波長(zhǎng)處，分別測(cè)定二者的吸光度值為測(cè)定二

46、者的吸光度值為As、Ax ，依據(jù)朗伯，依據(jù)朗伯- -比爾比爾定律得：定律得：As=csLAx=cxL 則則: :SSXxAcAc 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第五節(jié) 定性定量方法3.吸光系數(shù)法吸光系數(shù)法: 吸光系數(shù)法直接利用朗伯吸光系數(shù)法直接利用朗伯- -比爾定律的數(shù)比爾定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式學(xué)表達(dá)式AKcL進(jìn)行計(jì)算的定量分析方法。進(jìn)行計(jì)算的定量分析方法。在手冊(cè)中查出待測(cè)物質(zhì)在最大吸收波長(zhǎng)在手冊(cè)中查出待測(cè)物質(zhì)在最大吸收波長(zhǎng) 處處的吸光系數(shù)的吸光系數(shù) 或或 , ,并在相同條件下測(cè)量

47、并在相同條件下測(cè)量樣品溶液的吸光度樣品溶液的吸光度A，則其濃度為：，則其濃度為： 或或%1cm1EAcLmaxLEA%1cm1分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第五節(jié) 定性定量方法有時(shí)也可以將待測(cè)樣品溶液的吸光度換算成樣品有時(shí)也可以將待測(cè)樣品溶液的吸光度換算成樣品組分的吸光系數(shù)，計(jì)算與標(biāo)準(zhǔn)品的吸光系數(shù)的比組分的吸光系數(shù)，計(jì)算與標(biāo)準(zhǔn)品的吸光系數(shù)的比值，求出樣品中待測(cè)組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。值，求出樣品中待測(cè)組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。 或或樣標(biāo)%1cm1%1cm1標(biāo)樣EE分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）

48、版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第五節(jié) 定性定量方法 實(shí)例實(shí)例：維生素：維生素B12水溶液在水溶液在 =361nm處的百分吸光系處的百分吸光系數(shù)數(shù) =207。取維生素。取維生素B12樣品樣品30.0mg，加純化水溶解，加純化水溶解，用用1L的容量瓶定容。將溶液盛于的容量瓶定容。將溶液盛于1cm的吸收池，測(cè)得的吸收池，測(cè)得361nm波長(zhǎng)處的吸光度波長(zhǎng)處的吸光度A=0.600，試求樣品中維生素，試求樣品中維生素B12的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。 解：解：max%1cm1E330.0 10100%0.00300100

49、020000. 100300. 0600. 0%1cm1LAE樣966. 0207200%1cm1%1cm1標(biāo)樣EE分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第五節(jié) 定性定量方法 （二）二元組分溶液的定量方法（二）二元組分溶液的定量方法 1. 1. 解聯(lián)立方程組法解聯(lián)立方程組法 當(dāng)試樣溶液中各待測(cè)組分相互干擾不太嚴(yán)重時(shí)，當(dāng)試樣溶液中各待測(cè)組分相互干擾不太嚴(yán)重時(shí)，可根據(jù)吸光度具有加和性的特點(diǎn)，在同一試樣溶可根據(jù)吸光度具有加和性的特點(diǎn)，在同一試樣溶液中同時(shí)測(cè)定兩個(gè)或兩個(gè)以上的待測(cè)組分。假設(shè)液

50、中同時(shí)測(cè)定兩個(gè)或兩個(gè)以上的待測(cè)組分。假設(shè)要測(cè)定試樣中有兩個(gè)待測(cè)組分要測(cè)定試樣中有兩個(gè)待測(cè)組分a a和和b b，如果分別繪，如果分別繪制制a a、b b兩個(gè)純物質(zhì)的吸收光譜，則有三種情況。兩個(gè)純物質(zhì)的吸收光譜，則有三種情況。 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第五節(jié) 定性定量方法分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第五節(jié) 定性定量方法（）表明，兩個(gè)待測(cè)組分在各自的最大吸

51、收波長(zhǎng)處，）表明，兩個(gè)待測(cè)組分在各自的最大吸收波長(zhǎng)處，另一組分沒(méi)有吸收，可以用測(cè)定單組分溶液的方法，另一組分沒(méi)有吸收，可以用測(cè)定單組分溶液的方法，分別在分別在1 1和和2 2波長(zhǎng)處測(cè)定組分波長(zhǎng)處測(cè)定組分a a、b b的吸收度的吸收度, , 由光由光的吸收定律求得的吸收定律求得c ca a、c cb b。測(cè)定時(shí)兩組分互不干擾。測(cè)定時(shí)兩組分互不干擾。（）表明，在組分）表明，在組分a a的最大吸收波長(zhǎng)的最大吸收波長(zhǎng)1 1處，組分處，組分b b對(duì)對(duì)組分組分a a的測(cè)定無(wú)干擾，而在組分的測(cè)定無(wú)干擾，而在組分b b的最大吸收波長(zhǎng)的最大吸收波長(zhǎng)2 2處，處，組分組分a a對(duì)組分對(duì)組分b b的測(cè)定有干擾。這時(shí)

52、，先在的測(cè)定有干擾。這時(shí)，先在1 1波長(zhǎng)處單波長(zhǎng)處單獨(dú)測(cè)量組分獨(dú)測(cè)量組分a a；然后在；然后在2 2波長(zhǎng)處測(cè)量組分波長(zhǎng)處測(cè)量組分a a、b b的總吸的總吸光度，根據(jù)吸光度的加和性，從而可以求出光度，根據(jù)吸光度的加和性，從而可以求出c cb b。 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第五節(jié) 定性定量方法（）表明，兩個(gè)待測(cè)組分彼此相互干擾，此時(shí)，）表明，兩個(gè)待測(cè)組分彼此相互干擾，此時(shí)，在波長(zhǎng)在波長(zhǎng)1 1和和2 2處分別測(cè)定試樣溶液的總吸光度處分別測(cè)定試樣溶液的總吸光度 及及 ，同時(shí)測(cè)定

53、，同時(shí)測(cè)定a a、b b純物質(zhì)的吸光系數(shù)純物質(zhì)的吸光系數(shù) 、 和和 、 ，根據(jù)吸光度的加和性，則由聯(lián)立方程，根據(jù)吸光度的加和性，則由聯(lián)立方程組求得組求得c ca a、c cb b。 1a bA2a bA1a1b2a2b分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第五節(jié) 定性定量方法2.2.等吸收波長(zhǎng)消去法（雙波長(zhǎng)分光光度法）等吸收波長(zhǎng)消去法（雙波長(zhǎng)分光光度法）當(dāng)試樣中兩個(gè)待測(cè)組分的相互干擾比較嚴(yán)重時(shí)，用解聯(lián)立方當(dāng)試樣中兩個(gè)待測(cè)組分的相互干擾比較嚴(yán)重時(shí)，用解聯(lián)立方程組的方法進(jìn)行定量分析會(huì)產(chǎn)生

54、較大的誤差，這時(shí)可以用等程組的方法進(jìn)行定量分析會(huì)產(chǎn)生較大的誤差，這時(shí)可以用等吸收波長(zhǎng)消去法進(jìn)行測(cè)定。吸收波長(zhǎng)消去法進(jìn)行測(cè)定。 在試樣中含有兩個(gè)待測(cè)組分在試樣中含有兩個(gè)待測(cè)組分a a和和b b時(shí)，若要測(cè)定組分時(shí)，若要測(cè)定組分b b，組分，組分a a有干擾，應(yīng)設(shè)法消除組分有干擾，應(yīng)設(shè)法消除組分a a的吸收干擾。首先選擇待測(cè)組分的吸收干擾。首先選擇待測(cè)組分b b的最大吸收波長(zhǎng)的最大吸收波長(zhǎng)2 2作為測(cè)量波長(zhǎng)，然后用作圖的方法選擇作為測(cè)量波長(zhǎng)，然后用作圖的方法選擇參比波長(zhǎng)參比波長(zhǎng)1 1，使組分，使組分a a在這兩個(gè)波長(zhǎng)處的吸光度相等。在這兩個(gè)波長(zhǎng)處的吸光度相等。 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝

55、慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第五節(jié) 定性定量方法試樣溶液在試樣溶液在2 2和和1 1兩個(gè)波長(zhǎng)處的吸光度之差，兩個(gè)波長(zhǎng)處的吸光度之差，只與待測(cè)組分只與待測(cè)組分b b（ a a）的濃度成正比，而與干擾）的濃度成正比，而與干擾組分的濃度無(wú)關(guān)。組分的濃度無(wú)關(guān)。 分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材3.3.差示分光光度法差示分光光度法當(dāng)待測(cè)組分含量過(guò)高時(shí)，吸光度超出了準(zhǔn)確測(cè)量當(dāng)待測(cè)組分含量過(guò)高時(shí)，吸光度超出了

56、準(zhǔn)確測(cè)量的讀數(shù)范圍，可以采用差示分光光度法。具體方的讀數(shù)范圍，可以采用差示分光光度法。具體方法是用一個(gè)比試樣溶液濃度稍低的標(biāo)準(zhǔn)溶液作為法是用一個(gè)比試樣溶液濃度稍低的標(biāo)準(zhǔn)溶液作為參比溶液，將分光光度計(jì)調(diào)零（透光率參比溶液，將分光光度計(jì)調(diào)零（透光率100%100%），），測(cè)得的吸光度就是被測(cè)試樣溶液試液與參比溶液測(cè)得的吸光度就是被測(cè)試樣溶液試液與參比溶液的吸光度差值（相對(duì)吸光度）。根據(jù)光的吸收定的吸光度差值（相對(duì)吸光度）。根據(jù)光的吸收定律得：律得： A AA Ax xA As sLL( (c cx xc cs s) ) 即：待測(cè)溶液與參比溶液的吸光度差值與兩溶即：待測(cè)溶液與參比溶液的吸光度差值與兩

57、溶液的濃度之差成正比。液的濃度之差成正比。 第五節(jié) 定性定量方法分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第五節(jié) 定性定量方法課堂活動(dòng)課堂活動(dòng)1.在紫外在紫外-可見(jiàn)分光光度法中，影響吸光系數(shù)的因素是可見(jiàn)分光光度法中，影響吸光系數(shù)的因素是 A溶劑的種類和性質(zhì)溶劑的種類和性質(zhì) B溶液的物質(zhì)量濃度溶液的物質(zhì)量濃度 C物質(zhì)的本性和光的波長(zhǎng)物質(zhì)的本性和光的波長(zhǎng) D吸收池大小吸收池大小 E待測(cè)物的分子結(jié)構(gòu)待測(cè)物的分子結(jié)構(gòu)2.紫外紫外-可見(jiàn)分光光度法常用的定量分析方法有可見(jiàn)分光光度法常用的定量分析方法

58、有 A間接滴定法間接滴定法 B標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法 C標(biāo)準(zhǔn)曲線法標(biāo)準(zhǔn)曲線法 D直接電位法直接電位法 E吸光系數(shù)法吸光系數(shù)法分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第五節(jié) 定性定量方法課堂互動(dòng)課堂互動(dòng)3 3在符合朗伯在符合朗伯- -比爾定律的條件下，有色物質(zhì)的濃度、比爾定律的條件下，有色物質(zhì)的濃度、最大吸收波長(zhǎng)、吸光度三者的關(guān)系是最大吸收波長(zhǎng)、吸光度三者的關(guān)系是 A A增加、增加、增加增加、增加、增加 B B增加、減小、不變?cè)黾?、減小、不變 C C減小、增加、減小減小、增加、減小 D D

59、減小、不變、減小減小、不變、減小4 4維生素維生素D D2 2的摩爾吸收系數(shù)的摩爾吸收系數(shù) 264264nmnm=18200=18200。用。用2.02.0cmcm吸吸收池測(cè)定，如果要控制吸光度收池測(cè)定，如果要控制吸光度A A在在0.6990.6990.1870.187范范圍內(nèi)，應(yīng)使維生素圍內(nèi)，應(yīng)使維生素D D2 2溶液的濃度在什么范圍內(nèi)？溶液的濃度在什么范圍內(nèi)？分析化學(xué)（第分析化學(xué)（第2版）版） 謝慶娟謝慶娟 李維斌李維斌全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部全國(guó)高職高專藥品類專業(yè)衛(wèi)生部“十二五十二五”規(guī)劃教規(guī)劃教材材第五節(jié) 定性定量方法點(diǎn)滴積累（點(diǎn)滴積累（1 1）紫外紫外- -可見(jiàn)分光光度法的各種定

60、量方法的優(yōu)缺點(diǎn)：可見(jiàn)分光光度法的各種定量方法的優(yōu)缺點(diǎn)： 1 1標(biāo)準(zhǔn)曲線法的優(yōu)點(diǎn)：測(cè)定大批量樣品時(shí)，操作簡(jiǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線法的優(yōu)點(diǎn)：測(cè)定大批量樣品時(shí)，操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、快速。缺點(diǎn)：不同人處理相同的測(cè)量數(shù)據(jù)，得單、準(zhǔn)確、快速。缺點(diǎn)：不同人處理相同的測(cè)量數(shù)據(jù)，得到的結(jié)果不易完全相同。到的結(jié)果不易完全相同。 2 2標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法的優(yōu)點(diǎn)：測(cè)量數(shù)據(jù)相同，任何人都能標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法的優(yōu)點(diǎn)：測(cè)量數(shù)據(jù)相同，任何人都能得到完全一致的結(jié)果。缺點(diǎn)：隨機(jī)誤差較大。得到完全一致的結(jié)果。缺點(diǎn)：隨機(jī)誤差較大。 3 3吸光系數(shù)法的優(yōu)點(diǎn)：與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法的優(yōu)點(diǎn)相同。吸光系數(shù)法的優(yōu)點(diǎn)：與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法的優(yōu)點(diǎn)相同。 缺點(diǎn)：測(cè)定條件不易與文獻(xiàn)完全一致，從而引入誤