高效液相色譜法習題

1、第12章 高效液相色譜法習題（一）選擇題單選題1. 在高效液相色譜中影響柱效的主要因素是( )A 渦流擴散 B 分子擴散 C 傳質(zhì)阻力 D 輸液壓力2. 在高效液相色譜中，提高柱效能的有效途徑是( )A 提高流動相流速 B 采用小顆粒固定相C 提高柱溫 D 采用更靈敏的檢測器3. 高效液相色譜法的分離效果比經(jīng)典液相色譜法高，主要原因是( )A 流動相種類多 B 操作儀器化 C 采用高效固定相 D 采用高靈敏檢測器4. 在高效液相色譜中，通用型檢測器是( )A 紫外檢測器 B 熒光檢測器 C 示差折光檢測器 D 電導檢測器5. HPLC與GC的比較，可忽略縱向擴散項，這主要是因為( )A 柱前壓

2、力高 B 流速比GC的快C 流動相黏度較小 D 柱溫低6液相色譜定量分析時，要求混合物中每一個組分都出峰的是( )A 外標標準曲線法 B 內(nèi)標法 C 面積歸一化法 D 外標法 7下述四種方法中最適宜分離異構體的是是( )A 吸附色譜 B 反離子對色譜C 親和色譜 D 空間排阻色譜8在液相色譜中，梯度洗脫適用于分離( )A 異構體 B 沸點相近，官能團相同的化合物 C 沸點相差大的試樣 D 極性變化范圍寬的試樣9在HPLC中，范氏方程中對柱效影響可以忽略不計的因素是( ) A 渦流擴散 B 縱向擴散 C 固定相傳質(zhì)阻力 D 流動相傳質(zhì)阻力10當用硅膠為基質(zhì)的填料作固定相時，流動相的pH范圍應為(

3、 ) A 在中性區(qū)域 B 5一8 C 1一14 D 2一811高效液相色譜法中，常用的流動相有水、乙腈、甲醇、正己烷，其極性大小順序為( ) A 乙腈水甲醇正己烷 B 乙腈甲醇 水正己烷 C 水 乙腈甲醇正己烷 D 水甲醇 乙腈正己烷12高效液相色譜法中,使用高壓泵主要是由于( ) A 可加快流速，縮短分析時間 B 高壓可使分離效率顯著提高C 采用了細粒度固定相所致 D 采用了填充毛細管柱13液相色譜的H-u曲線（ ）。 A 與氣相色譜的一樣，存在著Hmin B H隨流動相的流速增加而下降 C H隨流動相的流速增加而上升 D H受u影響很小14. 與氣相色譜相比，在液相色譜中（ ）。 A 分子

4、擴散項很小，可忽略不計，速率方程式由兩項構成 B 渦流擴散項很小，可忽略不計，速率方程式由兩項構成 C 傳質(zhì)阻力項很小，可忽略不計，速率方程式由兩項構成 D 速率方程式同樣由三項構成，兩者相同15液相色譜中不影響色譜峰擴展的因素是（ ）。A 渦流擴散項 B 分子擴散項 C 傳質(zhì)擴散項 D 柱壓效應16在液相色譜中，常用作固定相又可用作鍵合相基體的物質(zhì)是（ ）。 A 分子篩 B 硅膠 C 氧化鋁 D 活性炭 17樣品中各組分的出柱順序與流動相的性質(zhì)無關的色譜是（ ）。 A 離子交換色譜 B 環(huán)糊精色譜 C 親和色譜 D 凝膠色譜 18高效液相色譜法中，對于極性成分，當增大流動相的極性，可使其保留

5、值（ ）。A 不變 B 增大 C 減小 D 不一定 19在反相色譜法中，若以甲醇-水為流動相，增加甲醇的比例時，組分的容量因子k與保留時間tR的變化為（ ）。 A k與tR增大 B k與tR減小 C k與tR不變 D k增大，tR減小多選題20下列檢測器中，不屬于高效液相色譜中的檢測器是（ ）A 紫外檢測器 B 氫火焰離子化檢測器 C 熒光檢測器 D 氮磷檢測器 E 示差折光檢測器21化學鍵合固定相具備下列何種特點（ ）A 固定液不易流失 B 選擇性好 C 不適用于梯度洗脫 D 柱效高 E 易和組分形成氫鍵吸附22高效液相色譜法中，不能用于梯度洗脫實驗的檢測器為（ ）A 紫外檢測器 B 示差折

6、光檢測器 C 熒光檢測器 D 電化學檢測器23梯度洗脫是將兩種或兩上性質(zhì)不同但能互溶的溶劑，按一定的程序連續(xù)改變其配比進行洗脫，此方式可改變（ ）A 流動相的極性 B 流動相的溫度 C 被測組分的分離效果 D 流動相的流速24在高效液相色譜法中，選擇流動相時應注意（ ）A 對被分離的組分有適宜的溶解度 B 黏度大C 與檢測器匹配 D 與固定相不互溶25評價高效液相色譜柱柱效的指標是（ ）A 理論塔板高度 B 分配比 C 理論塔板數(shù) D 分離度 26高效液相色譜法的定量指標為（ ）A 相對保留值 B 峰面積 C 峰高 D 半峰寬27高效液相色譜中，提高流動相的流速可以（ ）A 減少渦流擴散 B

7、降低保留時間C 改變相對保留值 D 增大傳質(zhì)阻力項28下列因素影響高效液相色譜塔板高度的是（ ）A 固定相粒度 B 流動相的流速C 色譜柱長度 D 色譜柱直徑29高效液相色譜法分離不同組分的先決條件是（ ）A 色譜柱要長 B 流動相流速要大C 各組分的分配系數(shù)不等 D 理論塔板數(shù)要多（二）填空題1高效液相色譜儀一般由 、 、 、 、 和 等部分組成。2高效液相色譜中常用的檢測器主要包括 、 、 、 、 和 等。3高效液相色譜中的洗脫方式主要包括 和 ，其中 類似于氣相色譜中的程序升溫，前者連續(xù)改變的是流動相的 ，而不是溫度。5高效液相色譜的類型主要包括 、 、 、 和 等。6在液液分配色譜中，

8、對于親水固定液采用 流動相，即流動相的極性 _（大于或小于）_固定相的極性稱為正相分配色譜。7正相分配色譜適用于分離 化合物、極性 （大或小）的組分先流出、極性 （大或小）的組分的后流出。8流動相常用的脫氣方法有 、 和 。9高效液相色譜中的高壓泵按工作原理分為 和 兩大類。11離子對色譜法是把 加人流動相中，被分析樣品離子與 生成中性離子對，從而增加了樣品離子在非極性固定相中的 ，使 增加，從而改善分離效果。14高效液相色譜法中，如果色譜柱超載則會造成柱效_，峰形變_。17在液相色譜中，為改善分離度并調(diào)整出峰時間，可通過改變流動相 和_的方法達到。18在液相色譜中，速率理論方程中的 項很小，

9、可忽略不計，Van Deemter方程式可寫成 。19通過化學反應，將 鍵合到 表面，此固定相稱為化學鍵合固定相。21液相色譜流動相應使用 （高或低）黏度溶劑，可減小溶質(zhì)的 ，有利于提高柱效。22在液相色譜中， 色譜特別適合于分離異構體， 洗脫方式適用于分離極性變化范圍寬的試樣。 23以ODS鍵合固定相，以甲醇一水為流動相時的色譜為 色譜（正相或反相）。24用凝膠為固定相，利用凝膠的 與被分離組分分子 間的相對大小關系，而分離、分析的色譜法，稱為空間排阻（凝膠）色譜法。凝膠色譜的選擇性只能通過選擇合適的 來實現(xiàn)。25在正相色譜中，極性的 （強或弱）組分先出峰，極性的 （強或弱）組分后出峰。（三

10、）判斷題1熒光檢測器是高效液相色譜法的通用型檢測器。（ ）2檢測器性能好壞將對組分分離產(chǎn)生直接影響。 （ ）3面積歸一化法只能適用于檢測器對所有組分均有響應的情況。 （ ）4高效液相色譜中常采用程序升溫來提高分離效果、改善峰形、降低檢測限。（ ） 5Van Deemter方程用于高效液相色譜時，Cu項可以忽略不計。 （ ）6在液相色譜中為避免固定相的流失，流動相與固定相的極性差別越大越好。（ ）7在反相高效液相色譜中，流動相的極性較固定相大。適合于分離極性較性組分。（ ） 8流動相的黏度影響高效液相色譜柱柱效，黏度越小，柱效越高。 （ ） 9高效液相色譜法采用梯度洗脫，是為了改變被測組分的保留

11、值，提高分離度。（ ）10示差折光檢測器是屬于通用型檢測器，適于梯度淋洗色譜。（ ）11化學鍵合固定相具有固定液不易流失，傳質(zhì)速度快，柱效高，熱穩(wěn)定性好，選擇性好等特點，可用梯度洗脫。（ ）12液相色譜的流動相又稱為淋洗液，改變淋洗液的組成、極性可顯著改變組分分離效果。（ ）13高效液相色譜法中，若采用內(nèi)標法進行定量時，選用的內(nèi)標物應為樣品中不含有的純物質(zhì)。（ ）14高效液相色譜能分離的物質(zhì)都不能用氣相色譜法分離。（ ） 15在液相色譜中，流動相的流速大小對柱效影響不大。（ ）16液相色譜的H-u曲線與氣相色譜的H-u曲線一樣，流速都存在一個最低點。（ ）17液相色譜的中引起色譜擴展的主要原因

12、是縱向擴散項。（ ）18正相鍵合色譜的固定相為非（弱）極性固定相，反相色譜的固定相為極性固定相。（ ）19用凝膠色譜分離樣品時，若分離情況很差，可考慮改變流動相的組成以改善分離效果 （ ） 20高效液相色譜中，流動相的流速越大，傳質(zhì)阻力項越大，柱效越低。（ ） 21紫外檢測器因對流動相溫度和流速非常敏感，所以不能用于梯度洗脫。（ ）22高效液相色譜法中使用的最多的固定相為化學鍵合固定相，它是用化學反應的方法將固定液的官能團鍵合在載體表面上而形成的。 （ ）23化學鍵合固定相包括非極性、中等極性和極性三類，廣泛使用的十八烷基（C18或ODS）鍵合固定相為非極性，用于分離非極性及中等極性的物質(zhì)。

13、（ ）24高效液相色譜所用的流動相，一般要經(jīng)過純化及脫氣處理。（ ）25在反相高效液相色譜法中，流動相的極性增強，組分的分配比k及保留時間tR則會減少。 （ ）26高效液相色譜柱中存在的流動相的傳質(zhì)阻力，包括在流動的流動相及靜態(tài)的流動相中的傳質(zhì)阻力。（ ）（四）簡答題1提高高效液相色譜的柱效的關鍵在哪里？2高效液相色譜法中化學鍵合固定相有哪些優(yōu)點？3簡述高效液相色譜儀主要部件及其作用。4高效液相色譜常用檢測器有哪幾種，其適用范圍是什么?5從分離原理、儀器構造及應用范圍上簡要比較氣相色譜及液相色譜的異同點。6液相色譜中影響色譜峰展寬的因素有哪些? 與氣相色譜相比較, 有哪些主要不同之處?7液-液

14、分配色譜和液-固分配色譜的分離原理分別是什么？分別適宜分離何種物質(zhì)？8化學鍵合相色譜、離子交換色譜、空間排阻色譜的分離機理分別是什么？分別適合分離何種物質(zhì)？ 9什么是正相色譜和反相色譜？10什么是梯度洗脫？試比較梯度洗脫與氣相色譜中的程序升溫之間的異同點？ （五）計算題 1用高效液相色譜法分離甲、乙兩組分，測得甲的保留時間為4.65min，半峰寬為0.15min；乙的保留時間為6.60min，半峰寬為0.22min。試計算該色譜柱對甲、乙兩組分的理論塔板數(shù)、平均理論塔板數(shù)和兩組分的分離度。 （15376，14400，14888，5.27）2在25cm長的柱上分離A、B混合物，A物質(zhì)保留時間為1

15、5.20min，峰底寬1.11min；B物質(zhì)保留時間為16.63min，峰底寬1.21min；不保留物1.30min流出色譜柱。計算：（1）A、B兩峰的分離度；（2）平均理論塔板數(shù)及理論塔板高度；（3）分離度如要達到1.5，柱長應為多少？ （1.23；2999，3022，3011；27.5cm）3準確稱取樣品0.100g，加入內(nèi)標物0.100g，測得待測物A及內(nèi)標物的峰面積分別為51430，84153。已知待測物及內(nèi)標物的相對校正因子分別為0.80、1.00。計算組分A的百分含量。 (48.89%)4高效液相色譜法測定某復方藥M中有效成分A和B的含量，采用內(nèi)標對比法定量。精密稱取M片劑的質(zhì)量，求得平均片重m1=0.5012g，然后稱取片劑的細粉m2=0.5010g，加入內(nèi)標物S的質(zhì)量(ms)樣品=0.0350g，經(jīng)適當處理制備成100mL混合溶液（樣品溶液）。另按藥典中該藥的片劑處方含量