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文檔簡介
1、紫外可見分光光度法劉曉燕&qqqqq朗伯比耳定律、朗伯比耳定律、。朗伯比耳定律。朗伯比耳定律。第一章分光光度分析第一章分光光度分析(Vis-UV Spectrophotometry)第二章 紫外可見分光光度法 分光光度法是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜和光的吸收定律,對物質(zhì)進行定量、定性分析的一種儀器分析方法。 根據(jù)測定時所選用的光源:可見分光光度法(400800nm) 紫外分光光度法(200400 nm)紅外分光光度法(800nm50m) 11.定性分析各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線2純度的鑒定
2、 用紫外吸收光譜確定試樣的純度是比較方便的。如果一化合物在紫外區(qū)沒有吸收峰,而其雜質(zhì)有較強吸收,就可方便的檢出該化合物中的痕量雜質(zhì)。3結(jié)構(gòu)分析 紫外-可見吸收光譜一般不用于化合物的結(jié)構(gòu)分析,但利用紫外吸收光譜鑒定化合物中的共軛結(jié)構(gòu)和芳環(huán)結(jié)構(gòu)還是有一定價值。應用5第一節(jié)第一節(jié) 紫外可見分光光度計的構(gòu)造紫外可見分光光度計的構(gòu)造v分光光度計工作原理:v 采用一個可以產(chǎn)生多個波長的裝置,通過系列分光裝置,得到一束平行的波長范圍很窄的單色光,透過一定厚度的試樣溶液后,部分光被吸收,剩余的光照射到光電元件上,產(chǎn)生光電流,在儀器上可讀取相應的吸光度或透光率,完成測定。一紫外可見分光光度計的基本組成光源光源單
3、色器單色器吸收池吸收池檢測器檢測器讀出系統(tǒng)讀出系統(tǒng)1光源 在所需光譜區(qū)域內(nèi)發(fā)射連續(xù)的、足夠強度、穩(wěn)定的輻射光。 可見區(qū):鎢燈;紫外區(qū):氫燈、氘燈 通常用通常用612 V鎢絲燈作可見光區(qū)的光源,最鎢絲燈作可見光區(qū)的光源,最適宜的使用范圍在適宜的使用范圍在360800nm。光源應該穩(wěn)定,。光源應該穩(wěn)定,即要求電源電壓保持穩(wěn)定。為此,通常在儀器內(nèi)同即要求電源電壓保持穩(wěn)定。為此,通常在儀器內(nèi)同時配有電源穩(wěn)壓器。時配有電源穩(wěn)壓器。 /nm鎢燈(鎢燈(熱輻射光源熱輻射光源)40040060060080080010001000氙燈(氙燈(氣體放電光源氣體放電光源)氫燈氫燈強度強度氙燈氙燈氫燈氫燈鎢燈鎢燈色散
4、原理:色散原理:依據(jù)不同波長光通過棱鏡時折射率不同分依據(jù)不同波長光通過棱鏡時折射率不同分光光入射狹縫入射狹縫準直透鏡準直透鏡棱鏡棱鏡聚焦透鏡聚焦透鏡出射狹縫出射狹縫白光白光紅紅紫紫1 12 2800 600 5004002單色器單色器是將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解為單色光的裝置。單色器由棱鏡或光柵等色散元件及狹縫和透鏡等組成。其中色散元件是關鍵部件。 棱鏡棱鏡是根據(jù)光的折射原理而將復合光色散為不是根據(jù)光的折射原理而將復合光色散為不同波長的單色光,然后再讓所需波長的光通過一個同波長的單色光,然后再讓所需波長的光通過一個很窄的狹縫照射到吸收池上。它由玻璃或石英制成。很窄的狹縫照射到吸收池上。它由玻璃或
5、石英制成。玻璃棱鏡用于可見光范圍,石英棱鏡則在紫外和可玻璃棱鏡用于可見光范圍,石英棱鏡則在紫外和可見光范圍均可使用。見光范圍均可使用。光柵:光柵:在鍍鋁的玻璃表面刻有數(shù)量很大的等寬度在鍍鋁的玻璃表面刻有數(shù)量很大的等寬度等間距條痕等間距條痕(600、1200、2400條條/mm )。M1M2出出射射狹狹縫縫光屏光屏透透鏡鏡平面透平面透射光柵射光柵光柵衍射示意圖光柵衍射示意圖原理原理:利用光通過光柵時利用光通過光柵時發(fā)生衍射和干涉現(xiàn)象而發(fā)生衍射和干涉現(xiàn)象而分光分光. 光柵光柵是根據(jù)光的衍射和干涉原理將復合光色散為不是根據(jù)光的衍射和干涉原理將復合光色散為不同波長的單色光,然后再讓所需波長的光通過狹縫
6、同波長的單色光,然后再讓所需波長的光通過狹縫照射到吸收池上。它的分辨率比棱鏡大,可用的波照射到吸收池上。它的分辨率比棱鏡大,可用的波長范圍也較寬。長范圍也較寬。v入射狹縫:光源的光由此進入單色器,用于限制雜入射狹縫:光源的光由此進入單色器,用于限制雜散光進入單色器散光進入單色器 v 準直鏡:透鏡或凹面反射鏡,使入射光成為平行光準直鏡:透鏡或凹面反射鏡,使入射光成為平行光束束 v色散元件:棱鏡或光柵,將復合光分解成單色光色散元件:棱鏡或光柵,將復合光分解成單色光v準直鏡:透鏡或凹面反射鏡,將分光后所得單色光準直鏡:透鏡或凹面反射鏡,將分光后所得單色光聚焦至出射狹縫聚焦至出射狹縫 v出射狹縫:用于
7、限制通帶寬度出射狹縫:用于限制通帶寬度3吸收池吸收池也稱比色皿,用于盛放參比溶液或待測溶液。它是由無色透明、耐腐蝕、化學性質(zhì)相同、它是由無色透明、耐腐蝕、化學性質(zhì)相同、厚度相等的玻璃制成的,按其厚度分為厚度相等的玻璃制成的,按其厚度分為0.5 cm,1 cm,2 cm,3 cm和和5 cm。在可見光區(qū)測量吸。在可見光區(qū)測量吸光度時使用玻璃吸收池,紫外區(qū)則使用石英吸收光度時使用玻璃吸收池,紫外區(qū)則使用石英吸收池。使用比色皿時應注意保持清潔、透明,避免池。使用比色皿時應注意保持清潔、透明,避免磨損透光面。磨損透光面。 使用時注意點使用時注意點4檢測器檢測器 檢測器的作用是接受從比色皿發(fā)出的透射光并
8、轉(zhuǎn)檢測器的作用是接受從比色皿發(fā)出的透射光并轉(zhuǎn)換成電信號進行測量。分為光電管和光電倍增管。換成電信號進行測量。分為光電管和光電倍增管。 光電管是一個真空或充有少量惰性氣體的二極管。光電管是一個真空或充有少量惰性氣體的二極管。陰極是金屬做成的半圓筒,內(nèi)側(cè)涂有光敏物質(zhì),陽極陰極是金屬做成的半圓筒,內(nèi)側(cè)涂有光敏物質(zhì),陽極為一金屬絲。光電管依其對光敏感的波長范圍不同分為一金屬絲。光電管依其對光敏感的波長范圍不同分為紅敏和紫敏兩種。紅敏光電管是在陰極表面涂銀和為紅敏和紫敏兩種。紅敏光電管是在陰極表面涂銀和氧化銫,適用波長范圍為氧化銫,適用波長范圍為6251 000nm;紫敏光電管;紫敏光電管是陰極表面涂銻
9、和銫,適用波長范圍為是陰極表面涂銻和銫,適用波長范圍為200625nm。 光電倍增管是由光電管改進而成的,管中有若光電倍增管是由光電管改進而成的,管中有若干個稱為倍增極的附加電極。因此,可使光激發(fā)的干個稱為倍增極的附加電極。因此,可使光激發(fā)的電流得以放大,一個光子約產(chǎn)生電流得以放大,一個光子約產(chǎn)生106107個電子。個電子。它的靈敏度比光電管高它的靈敏度比光電管高200多倍。適用波長范圍為多倍。適用波長范圍為160700 nm。光電倍增管在現(xiàn)代的分光光度計中。光電倍增管在現(xiàn)代的分光光度計中被廣泛采用。被廣泛采用。 5顯示裝置顯示裝置 顯示裝置的作用是把放大的信號以吸光度顯示裝置的作用是把放大的
10、信號以吸光度A或透或透光率光率T的方式顯示或記錄下來。分光光度計常用的顯的方式顯示或記錄下來。分光光度計常用的顯示裝置是檢流計、微安表、數(shù)字顯示記錄儀。示裝置是檢流計、微安表、數(shù)字顯示記錄儀。二、紫外可見分光光度計類型二、紫外可見分光光度計類型1. 單光束分光光度計單光束分光光度計2. 雙光束分光光度計雙光束分光光度計3. 雙波長分光光度計雙波長分光光度計721分光光度計分光光度計0.5750.575光源光源單色器單色器吸收池吸收池檢測器檢測器顯示顯示單波長單光束分光光度計單波長單光束分光光度計簡單,價廉,適于在給定波長處測量吸光度或透光度,簡單,價廉,適于在給定波長處測量吸光度或透光度,一般
11、不能作全波段光譜掃描,要求光源和檢測器具有一般不能作全波段光譜掃描,要求光源和檢測器具有很高的穩(wěn)定性,且操作麻煩,任一波長的光均要用參很高的穩(wěn)定性,且操作麻煩,任一波長的光均要用參比調(diào)比調(diào)T=100T=100后,再測樣品后,再測樣品儀器儀器 可見分光光度計雙光束分光光度計雙光束分光光度計自動記錄,快速全波段掃描??上庠床环€(wěn)定、檢測器靈自動記錄,快速全波段掃描。可消除光源不穩(wěn)定、檢測器靈 敏度變化等因素的影響,特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復雜,敏度變化等因素的影響,特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復雜, 價格較高。價格較高。儀器儀器 紫外-可見分光光度計v雙波長分光光度計雙波長分光光度計光源單色器單色器
12、切光源檢測器吸收池不需要參比溶液;可以消除背景吸收干擾;適合多組分混不需要參比溶液;可以消除背景吸收干擾;適合多組分混合物、渾濁試樣的定量分析,可進行導數(shù)光譜分析。價格合物、渾濁試樣的定量分析,可進行導數(shù)光譜分析。價格昂貴昂貴三、儀器使用基本流程v紫外可見分光光度計1、分光光度計的保養(yǎng)與維護2、操作的注意事項3、定性分析依據(jù)? 定量依據(jù)?定性分析基礎定性分析基礎定量分析基礎定量分析基礎物質(zhì)對光的選擇性吸收物質(zhì)對光的選擇性吸收在一定實驗條件下在一定實驗條件下, AcA c增增大大AB )(maxA)(maxBA 第二節(jié)第二節(jié) 紫外可見分光光度法的定性紫外可見分光光度法的定性分析分析1分子吸收光譜
13、的產(chǎn)生 當一束光照射到某物質(zhì)或某溶液時,組成該物質(zhì)的分子、原子或離子等粒子與吸光子作用,光子的能量發(fā)生轉(zhuǎn)移,使這些粒子由低能量軌道躍遷到高能量軌道,即由基態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài)。M(基態(tài)) + h M*(激發(fā)態(tài))M(基態(tài)) + h M*(激發(fā)態(tài))這個過程即是物質(zhì)對光的吸收。由于分子、原子或離子的能級是量子化的,不連續(xù)的,只有光子的能量(h)與被照射物質(zhì)粒子的基態(tài)和激發(fā)態(tài)能量之差(E)相等時,才能被吸收。不同物質(zhì)的基態(tài)和激發(fā)態(tài)的能量差不同,選擇吸收光子的能量也不同,即吸收的波長不同。2、光的種類具有單一波長的光叫單色光,比如紅光,藍光等。 由不同波長的光組成的光叫復色光。比如日光等 如果兩種適當顏色的單
14、色光按適當?shù)膹姸缺壤旌夏艿玫桨坠?,則這兩種顏色的光叫做互補色光。互補色光紫紫紅紅橙橙黃黃綠綠青青藍藍青藍青藍白光溶液的顏色溶液的顏色KMnO綠光紫色紫色2、吸收光譜曲線、吸收光譜曲線溶液的光吸收曲線溶液的光吸收曲線最大吸收波長最大吸收波長 maxKMnO4溶液的溶液的 max=525nm max / nm吸吸收收強強度度吸吸收收強強度度特點: 具有最大吸收波長。不同濃度的同一種物質(zhì),其吸收曲線形狀相似,max不變。但是不同物質(zhì),其吸收曲線形狀和max不一樣,所以可作為定性分析的依據(jù)。 不同濃度的同一種物質(zhì),在max處吸光度隨濃度變化的幅度最大,測定的靈敏度最高,所以通常選取在max處測量。v
15、3、常用術(shù)語v1)生色團:)生色團:含有鍵的不飽和基團,簡單的生色團由雙鍵或三鍵組成(如乙烯基、乙炔基等)v2)助色團:)助色團:本身沒有生色功能(不能吸收波長大于200nm的光),但當與生色團連接時,有增強生色團生色能力的基團(如OH,NH2,NHR等)3)藍移(或紫移):)藍移(或紫移):指吸收峰向短波長方向移動,指吸收峰向短波長方向移動, 紅移:紅移:指吸收峰向長波長方向移動。指吸收峰向長波長方向移動。 吸收峰強度變化包括增色效應和減色效應。前吸收峰強度變化包括增色效應和減色效應。前者指吸收強度增加,后者指吸收強度減小。各種因素者指吸收強度增加,后者指吸收強度減小。各種因素對吸收譜帶的影
16、響結(jié)果下圖對吸收譜帶的影響結(jié)果下圖 4、常見有機化合物的紫外可見吸收光譜、常見有機化合物的紫外可見吸收光譜(1)270-750nm 無吸收峰。飽和化合物,單烯。無吸收峰。飽和化合物,單烯。(2) 270-350 nm有吸收峰(有吸收峰(=10-100L/(mol*cm),),n* 躍遷,含有一個簡單的非共軛且含有躍遷,含有一個簡單的非共軛且含有n電子的生色團電子的生色團(3) 250-300 nm 有中等強度的吸收峰有中等強度的吸收峰,(=200-2000L /(mol*cm ),如苯環(huán)。),如苯環(huán)。(4) 210-250 nm有強吸收峰,表明可能含有有強吸收峰,表明可能含有2個共軛雙鍵;個共
17、軛雙鍵;在在260nm,300 nm,330 nm有強吸收峰,說明是有強吸收峰,說明是3個或個或3個以上雙個以上雙鍵的共軛體系。鍵的共軛體系。 (5)若吸收峰延伸至可見光區(qū),則可能是長鏈共軛或稠環(huán)化若吸收峰延伸至可見光區(qū),則可能是長鏈共軛或稠環(huán)化合物合物v一、朗伯-比爾定律v v 朗伯-比爾定律是說明物質(zhì)對單色光吸收的強弱與吸光物質(zhì)的濃度和液層厚度間關系的定律第三節(jié)第三節(jié) 紫外可見分光光度法的定量紫外可見分光光度法的定量分析分析1、透光率和吸光度入射光強度I0,吸收光強度Ia,透過光強度It, 反射光強度為IrI0 Ia + It + Ir被測溶液和參比溶液的吸收池同樣材料和厚度,反射光強度影
18、響相互抵消,上式簡化為I0 Ia + It 透射光的強度 It與入射光的強度I0的 比值稱為透光率(T)透光率愈大,溶液對光的吸收愈少。透光率的負對數(shù)稱為 吸光度(A)吸光度愈大,溶液對光的吸收愈多。0tITI0lglgtIATI 1760 年, Lambert 指出:一束平行單色光通過有色溶液后,光的吸收程度與溶液液層的厚度成正比。A = k1 b1852年,Beer 指出:一束平行單色光通過有色溶液后,光的吸收程度與溶液的濃度成正比。A = k2 c將 Lambert 定律和 Beer 定律合并起來,就得到 Lambert-Beer定律。A = K b c2、光的吸收定律、光的吸收定律(L
19、ambert-Beer定律定律)A = K b c c:物質(zhì)的量濃度(mol L-1)b:為液層厚度(cm) K:吸光系數(shù)。v應用的條件:v入射光必須是單色光;v吸收發(fā)生在稀的均勻的介質(zhì)中;v吸收過程中,吸收物質(zhì)互相不發(fā)生作用。3、吸光系數(shù) 其數(shù)值的大小,與物質(zhì)的性質(zhì)、入射光波長、溶劑種類及溶液溫度等因素有關。當波長等其他因素一定時,只與物質(zhì)的性質(zhì)有關。 兩種表示方法: a:質(zhì)量吸光系數(shù)(Lg-1cm-1) ; :摩爾吸光系數(shù)(Lmol-1cm-1)。特點:v不隨濃度和液層厚度的改變而改變,作為定性鑒別的參數(shù);v在 max處的摩爾吸光系數(shù),常用max表示,。不同物質(zhì)的vmax有時可能相同,但m
20、ax不一定相同,作為定性的依據(jù);vmax越大表明該物質(zhì)的吸光能力越強,用光度法測定該物質(zhì)的靈敏度越高例:Cd2+濃度為140 umol L-1 ,雙硫腙法顯色測定波長為520nm,液層厚度2cm,吸光度為0.22,求 和T。解:(1)A = b c 0.22 = 2 140 10-6 = 785.7 L mol-1 cm-1(2) A =lgT = 0.22lgT = 0.22T = 100.22 = 0.60 = 60%例例 一有色溶液的濃度為一有色溶液的濃度為c mol/L,透光率為,透光率為T 。求濃度為原來的求濃度為原來的1/2時,透光率為多少?時,透光率為多少?解:解: T = 10
21、 - bc c T 例例 有色溶液的液層厚度增加一倍后,透光率和吸有色溶液的液層厚度增加一倍后,透光率和吸光度的改變?yōu)槎嗌伲抗舛鹊母淖優(yōu)槎嗌??解:解?T = 10 - bc b T A 1/2cT 1/2T2 2A2b4、對朗伯、對朗伯比耳定律的偏離比耳定律的偏離v標準曲線法測定未知溶液的濃度時,發(fā)現(xiàn):標準曲線常發(fā)生彎曲(尤其當溶液濃度較標準曲線法測定未知溶液的濃度時,發(fā)現(xiàn):標準曲線常發(fā)生彎曲(尤其當溶液濃度較高時),這種現(xiàn)象稱為對朗伯高時),這種現(xiàn)象稱為對朗伯比耳定律的偏離。比耳定律的偏離。v 引起這種偏離的因素(兩大類):引起這種偏離的因素(兩大類):v (1)物理性因素,即儀器的非理想
22、引起的;)物理性因素,即儀器的非理想引起的;v (2)化學性因素。)化學性因素。1.非單色光引起的偏離非單色光引起的偏離abA2A1A3A4 1 2 3A正偏離正偏離負偏離負偏離Ac標準曲線標準曲線非單色光的影響非單色光的影響(1)物理性因素物理性因素 單色光不純,導致負偏差。單色光不純,導致負偏差。 散射光的影響,膠體、乳濁液或懸濁液散射光的影響,膠體、乳濁液或懸濁液由于散射的作用使吸光度增大,或入射光不由于散射的作用使吸光度增大,或入射光不是垂直通過比色皿(是垂直通過比色皿(非平行入射光非平行入射光)產(chǎn)生正偏差)產(chǎn)生正偏差為克服非單色光引起的偏離,首先應選擇比較好的單色器為克服非單色光引起
23、的偏離,首先應選擇比較好的單色器此外還應將入射波長選定在待測物質(zhì)的最大吸收波長且吸此外還應將入射波長選定在待測物質(zhì)的最大吸收波長且吸收曲線較平坦處。收曲線較平坦處。(2) (2) 化學性因素化學性因素吸光質(zhì)點的相互作用,吸光質(zhì)點的相互作用,濃度較大時,產(chǎn)生負偏差,濃度較大時,產(chǎn)生負偏差, 朗伯朗伯-比爾定律只適合于稀溶液比爾定律只適合于稀溶液(C 12 Fe(OH)3 沉淀pH1pHpH2選擇曲線中吸光度較大且恒定的平坦區(qū)選擇曲線中吸光度較大且恒定的平坦區(qū)ApH五五.干擾離子的影響及其消除方法干擾離子的影響及其消除方法A、控制溶液酸度、控制溶液酸度B、加入掩蔽劑、加入掩蔽劑C、利用氧化還原反應
24、,改變干擾離子的價態(tài)、利用氧化還原反應,改變干擾離子的價態(tài)D、利用校正系數(shù)、利用校正系數(shù)E、利用參比溶液、利用參比溶液F、選擇適當?shù)牟ㄩL、選擇適當?shù)牟ㄩLG、增加顯色劑用量、增加顯色劑用量H、采用適當?shù)姆蛛x方法,分離干擾離子、采用適當?shù)姆蛛x方法,分離干擾離子 E.參比溶液參比溶液(空白溶液空白溶液)在測定時用空白溶液調(diào)節(jié)儀器在測定時用空白溶液調(diào)節(jié)儀器A=0(T =100%),以消除溶液中其它物質(zhì)的干擾以消除溶液中其它物質(zhì)的干擾,抵消比色皿對光反射、吸收抵消比色皿對光反射、吸收.1)溶劑參比溶劑參比 試液、試劑、顯色劑均無色試液、試劑、顯色劑均無色(無吸收無吸收) 則可用溶劑如純水作參比溶液則可用
25、溶劑如純水作參比溶液. 2)試劑參比試劑參比 試液無色試液無色, 顯色劑或其它試劑有色顯色劑或其它試劑有色(有吸收有吸收), 則應選試劑空白則應選試劑空白.3)試液參比試液參比 試劑、顯色劑均無色試劑、顯色劑均無色(無吸收無吸收),試試液中其它組分有色液中其它組分有色, 則應采用不加顯則應采用不加顯色劑的試液作參比溶液色劑的試液作參比溶液.v選擇參比溶液的總原則是選擇參比溶液的總原則是:使試液的使試液的吸光度能真正反映待測組分的濃度吸光度能真正反映待測組分的濃度.1:16:57例例1取咖啡酸,在取咖啡酸,在165干燥至恒重,精密稱取干燥至恒重,精密稱取10.00mg,加少,加少量乙醇溶解,轉(zhuǎn)移
26、至量乙醇溶解,轉(zhuǎn)移至200mL容量瓶中,加水至刻度線,取此溶容量瓶中,加水至刻度線,取此溶 液液5.00mL,置于,置于50mL容量瓶中,加容量瓶中,加6mol/L的的HCL 4mL,加水,加水至刻度線。取此溶液于至刻度線。取此溶液于1cm比色池中,在比色池中,在323nm處測定吸光度為處測定吸光度為0.463,已知該波長處的,已知該波長處的 ,求咖啡酸百分含量。,求咖啡酸百分含量。1%1927.9cmE解:解:460.4634.900 10/1004.900 10/927.9 1iCgmLg mL3610.00 1055.000 10/20050Cg mL樣664.900 10%100%10
27、0%98.0%5.000 10iCC樣咖啡酸1520050注:稀釋因子1 1、雙光束分光光度計與單光束分光光度計相比,其突、雙光束分光光度計與單光束分光光度計相比,其突出優(yōu)點是出優(yōu)點是 ( )( )(1) (1) 可以擴大波長的應用范圍可以擴大波長的應用范圍(2) (2) 可以采用快速響應的檢測系統(tǒng)可以采用快速響應的檢測系統(tǒng)(3) (3) 可以抵消吸收池所帶來的誤差可以抵消吸收池所帶來的誤差(4) (4) 可以抵消因光源的變化而產(chǎn)生的誤差可以抵消因光源的變化而產(chǎn)生的誤差1 1、雙光束分光光度計與單光束分光光度計相比,其突、雙光束分光光度計與單光束分光光度計相比,其突出優(yōu)點是出優(yōu)點是 ( )(
28、)(1) (1) 可以擴大波長的應用范圍可以擴大波長的應用范圍(2) (2) 可以采用快速響應的檢測系統(tǒng)可以采用快速響應的檢測系統(tǒng)(3) (3) 可以抵消吸收池所帶來的誤差可以抵消吸收池所帶來的誤差(4) (4) 可以抵消因光源的變化而產(chǎn)生的誤差可以抵消因光源的變化而產(chǎn)生的誤差2 2、雙波長分光光度計的輸出信號是、雙波長分光光度計的輸出信號是 ( )( )(1) (1) 試樣吸收與參比吸收之差試樣吸收與參比吸收之差(2) (2) 試樣在試樣在 1 1和和 2 2處吸收之差處吸收之差(3) (3) 試樣在試樣在 1 1和和 2 2處吸收之和處吸收之和(4) (4) 試樣在試樣在 1 1的吸收與參
29、比在的吸收與參比在 2 2的吸收之差的吸收之差 3 3、物質(zhì)的顏色是由于選擇性地吸收了白光中的某些波、物質(zhì)的顏色是由于選擇性地吸收了白光中的某些波長所致,長所致,CuSOCuSO4 4 溶液呈藍色是由于它吸收了白光中的溶液呈藍色是由于它吸收了白光中的( ) (1) (1) 藍色光藍色光 (2) (2) 綠色光綠色光 (3) (3) 黃色光黃色光 (4) (4) 紅色光紅色光2 2、雙波長分光光度計的輸出信號是、雙波長分光光度計的輸出信號是 ( )( )(1) (1) 試樣吸收與參比吸收之差試樣吸收與參比吸收之差(2) (2) 試樣在試樣在 1 1和和 2 2處吸收之差處吸收之差(3) (3)
30、試樣在試樣在 1 1和和 2 2處吸收之和處吸收之和(4) (4) 試樣在試樣在 1 1的吸收與參比在的吸收與參比在 2 2的吸收之差的吸收之差 3 3、物質(zhì)的顏色是由于選擇性地吸收了白光中的某些波、物質(zhì)的顏色是由于選擇性地吸收了白光中的某些波長所致,長所致,CuSOCuSO4 4 溶液呈藍色是由于它吸收了白光中的溶液呈藍色是由于它吸收了白光中的( ) (1) (1) 藍色光藍色光 (2) (2) 綠色光綠色光 (3) (3) 黃色光黃色光 (4) (4) 紅色光紅色光2 2、雙波長分光光度計的輸出信號是、雙波長分光光度計的輸出信號是 ( )( )(1) (1) 試樣吸收與參比吸收之差試樣吸收
31、與參比吸收之差(2) (2) 試樣在試樣在 1 1和和 2 2處吸收之差處吸收之差(3) (3) 試樣在試樣在 1 1和和 2 2處吸收之和處吸收之和(4) (4) 試樣在試樣在 1 1的吸收與參比在的吸收與參比在 2 2的吸收之差的吸收之差 3 3、物質(zhì)的顏色是由于選擇性地吸收了白光中的某些波、物質(zhì)的顏色是由于選擇性地吸收了白光中的某些波長所致,長所致,CuSOCuSO4 4 溶液呈藍色是由于它吸收了白光中的溶液呈藍色是由于它吸收了白光中的( ) (1) (1) 藍色光藍色光 (2) (2) 綠色光綠色光 (3) (3) 黃色光黃色光 (4) (4) 紅色光紅色光5、K O4法氧化法氧化Mn
32、2+到到MnO4,然后用分光光度法,然后用分光光度法測定,選擇合適的空白為(測定,選擇合適的空白為( ) (1) 蒸餾水蒸餾水 (2) 試劑空白試劑空白 (3) 除除K 外的試劑空白外的試劑空白 (4) 不含不含K O4的溶液空白的溶液空白 6、現(xiàn)有紫外可見吸收光譜相互干擾的、現(xiàn)有紫外可見吸收光譜相互干擾的A和和B兩組分,它兩組分,它們的最大波長分別為們的最大波長分別為 A和和 B,若用雙波長測定,若用雙波長測定A組分的含組分的含量,則下面哪一種選擇量,則下面哪一種選擇 1和和 2的方法是正確的?的方法是正確的?( ) (1)使)使 1和和 2分別等于分別等于 A和和 B (2)選)選 1等于等于 A,選,選 2使使B組分在組分在 2的吸光度和它在的吸光度和它在 1處處 的吸光度相等的吸光度相等 (
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