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文檔簡介

1、 附錄三 常用培養(yǎng)基的制備目 錄一、肉浸液肉湯二、營養(yǎng)瓊脂三、鮮血瓊脂四、半固體培養(yǎng)基五、明膠培養(yǎng)基六、乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基七、乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基八、緩沖蛋白胨水(BP)九、氯化鎂孔雀綠增菌液(MM)十、四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB)十一、亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC)十二、GN增菌液十三、腸道菌增菌肉湯十四、HE瓊脂十五、SS瓊脂十六、麥康凱瓊脂十七、伊紅美藍瓊脂(EMB)十八、三糖鐵瓊脂(TSI)一、肉浸液肉湯(一)成份十九、三糖鐵瓊脂(換用方法)二十、血消化湯二十一、克氏雙糖鐵瓊脂(KI)二十二、克氏雙糖鐵瓊脂(換用方法)二十三、動力硝酸鹽增養(yǎng)基(A法)(SPS)二十四、動力硝酸鹽培養(yǎng)基(B法)

2、二十五、馬丁氏肉湯二十六、察氏培養(yǎng)基二十七、馬鈴薯萄萄糖瓊脂(PDA)二十八、馬鈴薯瓊脂二十九、Elek氏培養(yǎng)基(毒索測定用)三十、胰蛋白胨水三十一、3.5氯化鈉三糖鐵瓊脂三十二、牛肉(或中心)消化湯三十三、0.1蛋白胨水稀釋劑一、肉浸液肉湯(一)成份絞碎牛肉 500g 蛋白胨 10g 磷酸氫二鉀 2g氯化鈉 5g蒸餾水 1000 ml(二)制法 將絞碎之去筋膜無油脂牛肉500g加蒸餾水1000ml,混合后放冰箱過夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小時,使肉渣完全凝結(jié)成塊,用絨布過濾,并擠壓收集全部濾液,加水補足原量。加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽,溶解后校正pH7476煮沸并過濾,分裝燒瓶,121高

3、壓滅菌30分。(三)用途 一般細菌培養(yǎng)用。二、營養(yǎng)瓊脂(一)成份肉水 1000ml 蛋白胨 10g磷酸氫二鉀 1g 氯化鈉 5g瓊脂 2030g(二)制法 先將瓊脂剪碎,用冷水洗凈后加入肉湯中,劃線補充水分,加熱溶化。校正pH7.47.6,用紗布夾棉花過濾至透明。分裝中試管或三角瓶。高壓滅菌12120分,滅菌后中試管擺成斜面。(三)用途 一般細菌的分離培養(yǎng),純培養(yǎng),觀察菌落性狀及保存菌種用。為特殊培養(yǎng)基的基礎(chǔ)。三、鮮血瓊脂(一)成份營養(yǎng)瓊脂脫纖維鮮血(馬、綿羊、牛、家兔)58。(二)制法 將滅菌的營養(yǎng)瓊脂加熱溶化,冷至4550時,加入無菌脫纖維鮮血58,分裝試管,即擺成斜面或傾注平皿,待凝固后

4、,置37培養(yǎng)1日,有污染者廢棄,無菌者保存于冰箱備用。無菌脫纖維鮮血:以無菌手術(shù)采取健康動物(馬、綿羊、牛用頸靜脈采血、家兔用心臟采血)血液,加到盛有玻璃殊的三角瓶內(nèi),搖勻510分鐘,置冰箱中備用。(三)用途 用于分離培養(yǎng)和保存菌種。四、半固體培養(yǎng)基(一)成份肉湯培養(yǎng)基(pH7.4pH76) 100 ml瓊脂 0.3g(二)制法 將瓊脂加入肉湯培養(yǎng)基中加熱溶化,校正pH至76,濾過后分接于試管內(nèi),以15磅高壓滅菌2030分鐘,作成高層,經(jīng)無菌檢查合格后,置冰箱中保存?zhèn)溆?。(三)用?菌種保存,觀察細菌的運動性。五、明膠培養(yǎng)基(一)成分普通肉湯 100 ml 明膠 1215g(冬天少用,夏天多用

5、)(二)制法 將上述成分加熱溶化,校正pH至76,趁熱過濾,分裝試管,用8磅15分鐘滅菌或流通蒸氣100,30分鐘間歇,滅菌,經(jīng)無菌檢驗合格的保存于冰箱內(nèi)備用。六、乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基(一)成份蛋白胨 20g 豬膽鹽(或牛、羊腸鹽) 5g乳糖 10g 0.04溴甲酚紫水溶液 25ml蒸餾水 1000ml(二)制法 將蛋白胨、膽鹽及乳糖溶于水中,校正pH74,加入指示劑,分裝每管10ml,并先放入一個小例立的管,115高壓滅菌15分鐘。注:雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管除蒸餾水外,其他成分加倍。七、乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基(一)成份蛋白胨 20g 乳糖 10g0.04溴甲酚紫水溶液 25ml 蒸餾水 1000ml(二)

6、制法:將蛋白胨及乳糖溶于水中,校正pH74,加入指示劑,按檢驗要求分裝30ml、10ml或3ml,并放入一個倒立的小管,115高壓滅菌15分鐘。注:1、雙料乳糖發(fā)酵除蒸餾水外,其他成分加倍。2、30ml和10ml乳糖發(fā)酵管專供醬油及醬類檢驗用,3ml乳糖發(fā)酵管供大腸菌群證實試驗用。八、緩沖蛋白胨水(BP)(一)成份蛋白胨 10g 磷酸二氫鉀 15g磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O) 9g氯化鈉 5g 蒸餾水 1000ml(二)制法 按上述成分稱好后,裝入大燒瓶,121高壓滅菌15分鐘。用時無菌分裝,每瓶225ml。注:本培養(yǎng)基供沙門氏菌前增菌用。九、氯化鎂孔雀綠增菌液(MM)(

7、一)成份1甲液:胰蛋白胨 5g 氯化鈉 8g磷酸二氫鉀 1.6g 蒸餾水 1000ml2乙液:氯化鎂(化學(xué)純) 40g 蒸餾水 100ml3丙液: 0.4孔雀綠水溶液(二)制法分別按上述成分配好后,121高壓,滅菌15分鐘備用。臨用時取甲液90ml、乙液9ml、丙液0.9ml,以滅菌操作混合即可。注:本培養(yǎng)基亦稱Rappaprt10(R10)增菌液。十、四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB)(一)成份1基礎(chǔ)培養(yǎng)基腸胨 5g 膽鹽 1g碳酸鈣 10g 硫代硫酸鈉 30g蒸餾水 1000 ml2碘溶液碘 6g 碘化鉀 5g 蒸餾水 20ml(二)制法 將基礎(chǔ)培養(yǎng)基的各成分加入蒸餾水中,加熱溶解,分裝每瓶1

8、00ml。分裝時應(yīng)隨時振搖,使其中的碳酸鈣混勻。121高壓滅菌15分鐘臨用時每100ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入碘溶液2ml、01煌綠溶液1ml。十一、亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC)(一)成份蛋白胨 5g 乳糖 4g亞硒酸氫鈉 4g 磷酸二氫鉀 5.5 g磷酸二氫鉀 4.5g L胱氨酸 0.01g蒸餾水 1000ml1L胱氨酸氫氨化鈉溶液的配法:稱取L胱氨酸01g(或DL胱氨酸02g),加1N氫氧化鈉15ml,使溶解,再加入蒸餾水85ml即成。(二)制法 將除亞硒酸氫鈉和L胱氨酸以外的各成份溶解于900ml蒸餾水中,加熱煮沸,冷卻后備用。另將亞硒酸氫鈉溶解于100ml蒸餾水中,加熱煮沸,冷卻后以無菌操作

9、與上液混合。再加入1L胱氨酸氫氧化鈉溶液1ml。分裝于滅菌瓶中,每瓶100ml,pH應(yīng)為70±01。十二、GN增菌液(一)成份胰蛋白胨 20g 葡萄糖 1g甘露醇 2g 檸檬酸鈉 5g去氧膽酸鈉 0.5g 磷酸氫二鉀 4g 磷酸二氫鉀 1.5g氯化鈉 5g 蒸餾水 1000ml(二)制法 按上述成分配好,加熱使溶解,校正pH7.0。分裝每瓶225ml,115高壓滅菌15分鐘。十三、腸道菌增菌肉湯(一)成份蛋白胨 10g 葡萄糖 5g 牛膽鹽 20g磷酸氫二鈉 8g 磷酸二氫鉀 2g 煌綠 0.015g蒸餾水 1000ml(二)制法 按上述成分配好,加熱使溶解,校正pH72。分裝每瓶3

10、0ml,115高壓滅菌15分鐘。十四、HE瓊脂(一)成份1. 基礎(chǔ)液:肘胨 12g 牛肉膏 3g 乳糖 12g蔗糖 12g 水楊苷 2g 膽鹽 20g氯化鈉 5g 瓊脂 10g20g0.4溴 香酚藍溶液 16ml蒸餾水 1000ml2. Andrade指示劑: 酸性復(fù)紅 0.5g 1N氫氧化鋼溶液 16ml蒸餾水 100ml將復(fù)紅溶解于蒸餾水中,加入氫氧化鈉溶液,數(shù)小時后如復(fù)紅褪色不全,再加氫氧化鈉溶液12ml。 3. 甲液: 硫代硫酸鈉 34g 檸檬酸鐵銨 4g蒸餾水 100ml4. 乙液: 去氧膽酸鈉 10g 蒸餾水 100ml (二)制法 將前面八種成分溶解于400ml蒸餾水內(nèi)作為基礎(chǔ)液

11、,將瓊脂加入于600ml蒸餾水內(nèi),加熱溶解。加入甲液20ml和乙液20ml于基礎(chǔ)液內(nèi),校正pH7.5。再加入Andrade指示劑20ml,并與瓊脂液合并,待冷至5055,傾注平板。注:此培養(yǎng)基不可高壓滅菌 十五、SS瓊脂(一)成份1基礎(chǔ)培養(yǎng)基牛肉膏 5g 肘胨 5g 三號膽鹽 3.5g瓊脂 17g 蒸餾水 1000ml制法:將牛肉膏、肘胨和膽鹽溶解于400ml蒸餾水中,將瓊脂加入于600ml蒸餾水中,煮沸使其溶解,再將二液混合,121高壓滅菌15分鐘,保存?zhèn)溆谩?完全培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基 1000ml 乳糖 10g檸檬酸鈉 8.5g 硫代硫酸鈉 8.5g10檸檬酸鐵溶液 10ml 1中性紅溶液 2

12、.5ml01煌綠溶液 0.22ml制法:加熱溶化培養(yǎng)基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均勻,校正pH70,加入中性紅和煌綠溶液,傾注平板。注:制好的培養(yǎng)基宜當(dāng)日使用,或保存于冰箱內(nèi)于48小時內(nèi)使用?;途G溶液配好后應(yīng)在10天以內(nèi)使用。可以購用SS瓊脂的干燥培養(yǎng)基。十六、麥康凱瓊脂(一)成份蛋白胨 17g 肘胨 3g豬膽鹽(或牛、羊膽鹽) 5g 氯化鈉 5g瓊脂 17g 乳糖 10g 001結(jié)晶紫水溶液 10ml05中性紅水溶液 5ml蒸餾水 1000ml(二)制法1將蛋白胨、肘胨、膽鹽和氯化鈉溶解于400ml蒸餾水中,校正至pH7.2。將瓊脂加入于600ml蒸餾水中,加熱溶解。將兩液合

13、并,分裝于燒瓶內(nèi),121高滅菌15分鐘備用。2臨用時加熱溶化瓊脂,趁熱加入乳糖。冷至5055時,加入結(jié)晶紫和中性紅水溶液,搖勻后傾注平板。注:結(jié)晶紫及中性紅水溶液配好后須經(jīng)高壓滅菌。十七、伊紅美藍瓊脂(EMB)(一)成份蛋白胨 10g 乳糖 10g 磷酸氫二鉀 2g 瓊脂 17g2伊紅y溶液 20ml 065美藍溶液 10ml蒸餾水 1000ml(二)制法 將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正pH71,分裝于燒瓶內(nèi),121高壓滅菌15分鐘備用。臨用時加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷卻至5055,加入伊紅和美藍溶液,搖勻,傾注平板。十八、三糖鐵瓊脂(一)成份蛋白胨 20g 牛肉膏 5g乳糖 10

14、g 蔗糖 10g葡萄糖 1g 氯化鈉 5g硫酸亞鐵銨Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O 0.2g硫代硫酸鈉 0.2g 酚紅 0.025g瓊脂 12g 蒸餾水 1000ml(二)制法 將除瓊脂和酚紅以外的各成份溶解于蒸餾水中,pH74。加入瓊脂,加熱煮沸,以融化瓊脂。加入02酚紅水溶液125ml,搖勻。分裝試管,裝量宜多些,以便得到較高的底層。121高壓滅菌15分鐘。放置高層斜面?zhèn)溆?。十九、三糖鐵瓊脂(換用方法)(一)成份蛋白胨 15g 肘胨 5g牛肉膏 3g 酵母膏 3g乳糖 10g 蔗糖 10g葡萄糖 1g 氯化鈉 5g硫酸亞鐵 0.2g 疏代硫酸鈉 0.3g瓊脂 12g 酚紅

15、 0.025g蒸餾水 1000ml(二)制法 將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中校正pH74。加入瓊脂,加熱煮沸,以融化瓊脂。加入02酚紅水溶液125ml,搖勻。分裝試管,裝量宜多些,以便得到較高的底層。121高壓滅菌15分鐘,放置高層斜面?zhèn)溆?。二十、血消化湯(一)成份絞碎豬胃 100g 絞碎豬血塊 100g磷酸二氫鉀 1g 2N碳酸鈉溶液 50ml濃鹽酸 10ml蒸餾水 1000ml(二)制法1洗滌豬胃,除去油脂,保留胃粘膜,用絞肉機續(xù)碎。2用絞肉機將豬血塊絞碎。3將蒸餾水加熱至55,加入豬胃、豬血塊和鹽酸,置55水浴中24小時,常加以搖動。4從水浴鍋內(nèi)取出,加入2N碳酸鈉液5ml,煮

16、沸10分鐘,置于冰箱內(nèi)一夜。5吸取上層清液,加磷酸氫二鉀1g,加熱至75,加入2N碳酸鈉溶液45ml,煮沸,校正pH7274。6用濾紙過濾,分裝燒瓶,121高壓滅菌20分鐘。注:本培養(yǎng)基不含糖可供作鑒別培養(yǎng)基的基礎(chǔ),不需加蛋白胨和氯化鈉。2N碳酸鈉溶液的配法:無水碳酸鈉106g,溶于1000ml蒸餾水中。二十一、克氏雙糖鐵瓊脂(KI)(一)成份下層:血消化湯(pH76) 500ml 瓊脂 2g葡萄糖 1g 02酚紅溶液 5ml上層:血消化湯(pH76) 500ml 瓊脂 6.5g硫代硫酸鈉 0.1g 硫酸亞鐵按 0.1g乳糖 5g02酚紅溶液 5ml(二)制法1取血消化湯按上層和下層的瓊脂用量

17、,分別裝入瓊脂,加熱溶解。2分別加入其他各種成分。將上層培養(yǎng)基分裝于燒瓶內(nèi);將下層培養(yǎng)基分裝于滅菌試管內(nèi),(12×100mm),每管約2ml。10磅高壓滅菌15分鐘。3將上層培養(yǎng)基放在56水浴箱內(nèi)保溫;將下層培養(yǎng)基直立放在室溫內(nèi),使其凝固。4俟下層培養(yǎng)基凝固后,以無菌手續(xù)將上層培養(yǎng)基分裝于下層培養(yǎng)基的上面,每管約1.5ml,放成斜面。二十二、克氏雙糖鐵瓊脂(換用方法)(一)成份蛋白胨 20g 牛肉膏 3g酵母膏 3g 乳糖 10g葡萄糖 1g 氯化鈉 5g檸檬酸鐵銨 0.5g 疏代硫酸鈉 0.5g瓊脂 12g 酚紅 0.025g蒸餾水 1000ml(二)制法 將除瓊脂和酚紅以外的各成

18、分溶解于蒸餾水中,校正pH74。加入瓊脂,加熱煮沸,以溶化瓊脂。加入02酚紅水溶液125ml,搖勻。分裝試管,裝量宜多些,以便得到比較高的底層。121高壓滅菌15分鐘。放置高層斜面?zhèn)溆?。二十三、動力硝酸鹽培養(yǎng)基(A法)(一)成份蛋白胨 5g 牛肉膏 3g硝酸鉀 1g 瓊脂 3g蒸餾水 1000ml(二)制法 加熱溶解,校正pH70。分裝試管,每管10ml,121高壓滅菌15分鐘。二十四、動力硝酸鹽培養(yǎng)基(B法)(一)成份蛋白胨 5g 牛肉膏 3g硝酸鉀 5g 磷酸氫二鈉 2.5g半乳糖 5g 甘油 5g瓊脂 3g 蒸餾水 1000ml(二)制法 將上各成份混合,加熱溶解,校正pH74。分別裝試

19、管,121高壓滅菌15分鐘。二十五、馬丁氏肉湯(一)成份豬胃 數(shù)個 過濾清水(普通水) 150ml純鹽酸 15ml(二)制法取豬胃去掉筋膜及脂肪,以絞肉機絞碎,每300g豬胃加鹽酸15ml,過濾水150ml,于50消化24小時(每小時攪拌12次),取出后加熱至80,使消化作用停止,并用NaOH中和,調(diào)PH至72,用濾紙過濾,分裝試管或小三角燒瓶,15磅高壓15分鐘滅菌。二十六、察氏培養(yǎng)基(一)成份硝酸鈉 3g 磷酸氫二押 1g梳酸鎂(MgSO4·7H2O) 0.5g 氯化鉀 0.5g硫酸亞鐵 0.01g 蔗糖 30g瓊脂 20g 蒸餾水 1000ml(二)制法 加熱溶解,分裝后121

20、滅菌20分鐘。(三)用途 青霉、曲霉鑒定及保存菌種用。二十七、馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)(一)成份馬鈴薯(去皮切塊) 300g 葡萄糖 20g瓊脂 20g 蒸餾水 1000ml(二)制法 將馬鈴薯去皮切塊,加1000ml蒸餾水,煮沸1020分鐘。用紗布過濾加蒸餾水至1000ml。加入葡萄糖和瓊脂,加熱溶化,分裝,121高壓滅菌20分鐘。(三)用途:分離培養(yǎng)霉菌。二十八、馬鈴薯瓊脂(一)成份馬鈴薯(去皮切塊) 200g 瓊脂 20g蒸餾水 1000ml(二)制法 同馬鈴薯葡萄糖瓊脂。(三)用途 鑒定霉菌用。二十九、Elek氏培養(yǎng)基(毒素測定用)(一)成份肘胨 20g 麥芽糖 3g乳糖 0.7g

21、氯化鈉 5g瓊脂 15g 40氫氧化鈉溶液 1.5ml蒸餾水 1000ml(二)制法 用500ml蒸餾水溶解除瓊脂外的成份,煮沸,并用濾紙過濾。用1N氫氧化鈉校正pH78。用另外500ml蒸餾水加熱溶解瓊脂。將兩液混合,分裝試管10ml或20ml。121高壓滅菌15分鐘。臨用時加熱溶化瓊脂傾注平板。三十、胰蛋白胨水(一)成份胰蛋白胨 10g 蒸餾水 1000ml(二)制法 將上述成份溶解,校正pH70。分裝試管,121高壓滅菌15分鐘。三十一、35氯化鈉三糖鐵瓊脂(一)成份三糖鐵瓊脂 1000ml 氯化鈉 30g(二)制法 按本附錄十八或十九配制三糖鐵瓊脂,再加入氯化鈉30g,分裝試管,121

22、高壓滅菌15分鐘。放置高層斜面?zhèn)溆?。三十二、牛肉(或牛心)消化湯(一)成份絞碎牛肉(或牛心) 1000g 15氫氧化鈉溶液 27ml胰蛋白酶 40ml 氯仿 1ml氯化鈉 10g 蒸餾水 200ml(二)制法1稱取碎牛肉,加蒸餾水,隔水加熱到80,維持15分鐘;2加氫氧化鈉溶液,對pH試紙呈弱堿性,冷卻至40;3加胰蛋白酶、氯仿,在36±1放置45小時,每小時搖動一、二次;44小時后,吸取上層液5ml于試管中,加1硫酸銅溶液0.1ml、4氫氧化鈉溶液5ml,混合之。若呈紅色,則不須再消化,可由溫箱取出;5加入15乙酸溶液45ml,對pH試紙呈酸性;6煮沸15分鐘,使胰蛋白酶破壞,冷后

23、,放冰箱內(nèi)一夜;7次日吸取上層清液,加氯化鈉10g,并加水補足原量,煮沸;8校正pH7.07.6(加15氫氧化鈉液約10ml)加熱,用濾紙過濾,分裝燒瓶,121高壓滅菌20分鐘。注:此培養(yǎng)基可作為瓊脂培養(yǎng)基的基礎(chǔ),不需要加蛋白胨。胰蛋白酶之配制:稱取去脂絞碎的豬胰500g,加入乙醇500ml,蒸餾水1500ml,混合之,裝入玻塞瓶內(nèi)。每日搖勻三次,三天后,用絨布過濾擠出其汁,加鹽酸至005,放冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?。三十三?.1蛋白胨水稀釋劑(一)成份蛋白胨 1g 蒸餾水 1000ml(二)制法 溶解蛋白胨于蒸餾水中,校正pH至7.0,121滅菌15分鐘。Yeast extract 3 酵母膏Mal

24、t extract 3Peptone from soybeans 5Glucose 10Agar 15Distilled water 1000MA medium (Ichimura,1979)Working solutiong/lNaNO30.05KNO30.1Ca(NO3)2·4H2O0.05Na2SO40.04MgCl2.6H2O0.05-Sodiumglycerophosphate0.1Na2EDTA0.005FeCl3.6H2O0.0005MnCl2.4H2O0.005ZnCl20.0005CoCl2 .6H2O0.005Na2MoO4.2H2O0.0008H3BO30.02

25、Bicine0.5Distilled water1000mlpH8.6F/2培養(yǎng)基WORK(mg/L)Mother(g/L)A:NaNO37575B:NaH2PO4·H2O55C:Na2SiO3·9H2O2020D:Na2EDTA4.364.36E:FeCl3 ·6H2O3.163.16F:CuSO4·5H2O ZnSO4·7H2O CoCl2·6H2O MnCl·4H2O Na2MO4·2H2O0.010.010.0230.0230.0120.0120.180.180.070.07G:B10.1ug/L0.1mg

26、/LB120.5ug/L0.5mg/L生物素0.5ug/L0.5mg/LH:海鹽24g/L對于藻體的高密度培養(yǎng),將F/2培養(yǎng)基的A改為乙酸銨:0.5g/L,B改為NaH2PO4:0.2g/LSE MediumWorking solution (g/l)NaNO30.25gK2HPO4 .3H2O0.075gMgSO4 .7H2O0.075gCaCl2 .2H2O0.025gKH2PO40.175gNaCl 0.025Soil extract *40mlFeCl3·6H2O0.005FeEDTA1mlA5 solution *1distilled water958Soil Extrac

27、t(土壤提取液)配置方法取花園土未施過肥0。5kg置于燒杯或三角瓶中,加入蒸餾水1000毫升,瓶口用透氣塞封口,在水浴中沸水加熱2小時,冷卻數(shù)小時,在無菌條件下過濾,取上清液,將滅菌蒸餾水加入上清液至總體積1000毫升。土壤提取液保存在4ºC備用。* position of the A5 solutionAdd to 100 ml of distilled water:H3BO3286 mgMnCl2 .4H2O181 mgZnSO4 .7H2O22 mgCuSO4 .5 H2ONa2MoO4·2H2O7.9 mg39mg刪掉,改為Co(NO3)2·6H2O 5m

28、g(NH4)6Mo7O24 . 4H2O3.9 mgEDTA-Fe的配置方法:將EDTA和FeCl3·6H2O分別溶于水和HCl(0.1N),混勻即可。Na2EDTA1gdistilled water50mlFeCl3·6H2O81 mgHCl(0.1N)50ml微量元素溶液 A5 是BG-11培養(yǎng)基微量元素的重要組成部分。 BG-11是培養(yǎng)藍藻使用最廣泛的培養(yǎng)基,除了極少數(shù)藍藻,大部分都可以用BG-11培養(yǎng)基。 A5微量溶液組成成分Add to 1000 ml of distilled water: 將以下物質(zhì)稱量并定容至1000ml H3BO3 2.86g MnCl2

29、·H2O 1.81g ZnSO4 ·7H2O 0.222g CuSO4 ·5 H2O 0.079g Na2MoO4 ·2H2O0.390g Co(NO3)2 ·6H2O 0.049gBBM培養(yǎng)基BBM Medium(雨生紅球藻生長最好的培養(yǎng)基(若要用于蝦青素積累要加0.25g/L的乙酸鈉) ponent             Amount       &#

30、160; Stock Solution     (1) NaNO3                   1 mL/L             25 g/100mldH2O       

31、60;  (2) K2HPO4                  1 mL/L             7.5 g/100 mL dH2O         (3) MgSO4·7H2O &#

32、160;       1 mL/L             7.5 g/100 mL dH2O         (4 )CaCl2·2H2O           1 mL/L  &

33、#160;          2.5 g/100 mL dH2O       (5 ) KH2PO4                 1 mL/L            

34、 17.5 g/100 mL dH2O        (6 ) NaCl                     1mL/L              2.5g/100ml dH2O(7 )

35、   B1                      1mg/L(8)   biotin                   0.25ug/L(9) 

36、  B12                     0.15ug/L(10)  PIV ( Trace mental solution )  1ml/L                 Na2EDTA 

37、0;                0.75g/L dH2O        MnCl2·4H2O              0.041g/L dH2O      

38、0; ZnCl2·7H2O               0.005g/L dH2O        Na2MoO4·2H2O          0.004g/L dH2O        FeCl3·6

39、H2O              0.097g/L dH2O        CoCl2.6 H2O                0.002g/L dH2OBG11 ( Blue-Green Medium)   pone

40、nt                           Amount         Stock Solution      (1) NaNO3      &

41、#160;                   100 mL/L           15.0 g/L dH2O      (2) K2HPO4          

42、60;              10 mL/L            2 g/500 mL dH2O          (3) MgSO4·7H2O        &#

43、160;       10 mL/L            3.75 g/500 mLdH2O          (4 ) CaCl2·2H2O              

44、;   10 mL/L            1.8 g/500 mL dH2O        (5 ) Citric acid                     10 mL/L &#

45、160;           0.3 g/500 mL dH2O  (6 )Ferric ammonium citrate    10 mL/L            0.3g/500ml dH2O (7 ) EDTANa2         

46、;              10 mL/L            0.05g/500ml dH2O (8) Na2CO3                   

47、             10 mL/L            1.0g/500ml dH2O (9) A5 (Trace mental solution )1ml/L                

48、               H3BO3                                    

49、0;2.86g/L dH2O                    MnCl2·4H2O                         &

50、#160;      1.86g/L dH2O                    ZnSO4·7H2O                    &#

51、160;           0.22g/L dH2O                   Na2MoO4.2H2O                 

52、             0.39g/L dH2O                  CuSO4. 5 H2O                     

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