HepG2細(xì)胞介紹及生長培養(yǎng)方法

1、HepG2細(xì)胞介紹及生長培養(yǎng)方法簡介：HepG2細(xì)胞，來源于一個(gè)15歲白人的肝癌組織。該細(xì)胞分泌多種血漿蛋白：清蛋白、a2-巨球蛋白、血纖維蛋白溶酶原、鐵傳遞蛋白等。該細(xì)胞能大容量培養(yǎng)，乙肝表面抗原陰性，對G418有抗性,對人生長激素有刺激反應(yīng)。來源：人肝癌細(xì)胞。形態(tài)：上皮細(xì)胞。生長特性：貼壁。HepG2細(xì)胞特點(diǎn)：1、HepG2細(xì)胞分泌多種血漿蛋白：清蛋白、a2-巨球蛋白、血纖維蛋白溶酶原、鐵傳遞蛋白等。該細(xì)胞能大容量培養(yǎng)，乙肝表面抗原陰性，對G418有抗性，對人生長激素有刺激反應(yīng)。2、該細(xì)胞表達(dá)3-羥基-3-甲基戊二酸輔酶A還原酶和肝甘油三酸脂脂肪酶。該細(xì)胞在有百草枯（英文名：gramoxo

2、ne）的環(huán)境下過氧化氫酶mRNA表達(dá)增加，ApoA-ImRNA表達(dá)減少。培養(yǎng)液：MEM（含2mML-谷氨酰胺和Earle'sBSS，1.5g/LNaHCO3,0.1mM非必需氨基酸,1.0mM丙酮酸鈉）+10%胎牛血清。傳代：吸去培養(yǎng)液。用0.25%（w/v）Trypsin-0.53mMEDTA洗一次，以去除血清（血清會抑制胰酶的活性）。加2-3毫升Trypsin（胰蛋白酶）-EDTA，放在37°C培養(yǎng)箱內(nèi)約5分鐘，直到細(xì)胞全部脫落。加6-8毫升培養(yǎng)液，用移液器把細(xì)胞吹散。加適量的細(xì)胞到新的培養(yǎng)器皿中。（以1:4至1:6為宜，傳代期間培養(yǎng)液每周更換2次）凍存：95%培養(yǎng)液+5

3、%DMSO凍存于液氮。注釋：apoA-I是高密度脂蛋白（HDL）的主要成分，是一種對機(jī)體有益的膽固醇，是細(xì)胞膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)的特殊重要因素，可將細(xì)胞內(nèi)的膽固醇和脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟進(jìn)行代謝，最終排出體外。apoA-I還具有抗炎和抗氧化的特性。因?yàn)橹|(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、炎癥和氧化應(yīng)激均與癌癥的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)。Farias-Eisner和Reddy猜測卵巢癌患者體內(nèi)apoA-I水平減少有可能是疾病惡化的主要原因。進(jìn)而研究人員證實(shí)當(dāng)被誘導(dǎo)卵巢癌時(shí)，表達(dá)多拷貝人類apoA-I基因的基因工程小鼠癌癥發(fā)生的幾率非常低，而對照組小鼠則患病比率大大增高。此外，與對照組相比，多拷貝apoA-I基因工程小鼠的生存期要長30%-50%。apoA-I是高密度脂蛋白（HDL）的主要成分，是一種對機(jī)體有益的膽固醇，是細(xì)胞膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)的特殊重要因素，可將細(xì)胞內(nèi)的膽固醇和脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟進(jìn)行代謝，最終排出體外。apoA-I還具有抗炎和抗氧化的特性。因?yàn)橹|(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、炎癥和氧化應(yīng)激均與癌癥的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)。Farias-Eisner和Reddy猜測卵巢癌患者體內(nèi)apoA-I水平減少有可能是疾病惡化的主要原因進(jìn)而研究人員證實(shí)當(dāng)被誘導(dǎo)卵巢癌時(shí)，表達(dá)多拷貝人類apoA-I基因的基因工程小鼠癌癥發(fā)生的幾率