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1、.階段質(zhì)量檢測(cè)二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用A卷學(xué)業(yè)程度達(dá)標(biāo)總分值:100分時(shí)間:40分鐘一、選擇題每題4分,共48分1平板冷凝后,要將平板倒置,其原因是A接種時(shí)再拿起來方便B在皿底上標(biāo)記日期等方便C正著放置容易破碎D防止皿蓋上的冷凝水珠落入培養(yǎng)基造成污染解析:選D平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基外表濕度也比較高。將平板倒置,可以使培養(yǎng)基外表的水分更好地?fù)]發(fā),防止皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。2產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是A一個(gè)細(xì)菌、液體培養(yǎng)基B許多細(xì)菌、液體培養(yǎng)基C一個(gè)細(xì)菌、固體培養(yǎng)基D許多細(xì)菌、固體培養(yǎng)基解析:選C菌落是一個(gè)或幾個(gè)細(xì)菌的子細(xì)胞群體,在固體培養(yǎng)基上有一定
2、的形態(tài),肉眼可見,而液體培養(yǎng)基不具備該條件。3需要在火焰旁操作的有土壤取樣稱取土壤稀釋土壤溶液涂布平板微生物的培養(yǎng)ABCD解析:選D為了防止雜菌污染,稱取土壤、稀釋土壤和涂布平板均應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)展,土壤取樣不用在火焰旁進(jìn)展,但所用器具均應(yīng)先滅菌再使用;微生物的培養(yǎng)在恒溫箱中進(jìn)展,無需滅菌。4以下關(guān)于微生物培養(yǎng)的表達(dá),錯(cuò)誤的選項(xiàng)是A獲得純潔培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌入侵B高溫滅菌的目的是殺死微生物的細(xì)胞、孢子、芽孢C劃線別離可在培養(yǎng)基上獲得均勻分布的單菌落D稀釋涂布平板法易獲得單菌落和計(jì)數(shù)活菌數(shù)目解析:選C獲得純潔培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌入侵;高溫滅菌的目的是殺死微生物的細(xì)胞、孢子、芽孢;
3、稀釋涂布平板法易獲得單菌落和計(jì)數(shù)活菌數(shù)目;劃線別離可在培養(yǎng)基上獲得單菌落,但不是均勻分布的。5以下有關(guān)平板劃線接種法的操作錯(cuò)誤的選項(xiàng)是A將接種環(huán)放在火焰上灼燒B將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液C在挑取菌種前和接種完畢后均要將試管口通過酒精燈火焰D劃線時(shí)要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連解析:選D劃線時(shí)最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線不能相連。6制備各種牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基,倒平板的詳細(xì)描繪正確的選項(xiàng)是待培養(yǎng)基冷卻至40 左右時(shí),在酒精燈火焰附近倒平板將滅過菌的培養(yǎng)皿放在桌面上,左手拔出棉塞右手拿錐形瓶,使瓶口迅速通過火焰用左手的拇指和食指翻開皿蓋右手將錐形瓶中培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋
4、上培養(yǎng)皿的皿蓋等待平板冷卻510 s,將平板倒過來放置,使皿蓋在下,皿底在上A BCD解析:選C待培養(yǎng)基冷卻至50 左右,在酒精燈火焰附近倒平板;將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,左手拔出棉塞,用左手將培養(yǎng)皿翻開一條稍大于瓶口的縫隙,等待平板冷卻凝固510 min后,將平板倒過來放置。7在農(nóng)田土壤的表層自生固氮菌較多。將用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培養(yǎng)基上培養(yǎng),可將自生固氮菌與其他細(xì)菌分開,對(duì)培養(yǎng)基的要求是加抗生素不加抗生素加氮素不加氮素加葡萄糖不加葡萄糖37 恒溫箱中培養(yǎng)2830 溫度下培養(yǎng)A BCD解析:選C自生固氮菌有固氮功能,因此培養(yǎng)基中不需要加氮素;細(xì)菌對(duì)抗生素敏感,因此,不能
5、加抗生素;自生固氮菌是異養(yǎng)型的,應(yīng)加葡萄糖;其生長(zhǎng)繁殖的適宜溫度是2830 。8假設(shè)將酵母菌和圓褐固氮菌混合在一起,可采用以下哪組培養(yǎng)基將它們分開A加食鹽的培養(yǎng)基和牛肉膏、蛋白胨培養(yǎng)基B固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基C加伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基和含硝酸鹽的培養(yǎng)基D加青霉素的培養(yǎng)基和無氮培養(yǎng)基解析:選D青霉素可殺死原核生物如細(xì)菌,酵母菌為真菌,因此不會(huì)被殺死。圓褐固氮菌是固氮菌,無氮源也能存活,但酵母菌無法存活,借此可別離兩種微生物。9細(xì)菌別離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)操作過程應(yīng)注意無菌操作做好標(biāo)記規(guī)劃時(shí)間土樣滅菌A BCD解析:選C由于本實(shí)驗(yàn)操作復(fù)雜,目的是對(duì)細(xì)菌進(jìn)展別離和計(jì)數(shù),整個(gè)過程需要無菌操作,如取土樣時(shí)用到的小鐵鏟和
6、盛土樣的信封及容器等均需滅菌,土樣稱量、樣品稀釋及涂布平板等操作均在火焰旁進(jìn)展;本實(shí)驗(yàn)用到的平板和試管比較多,為防止混淆,最好在使用前就做好標(biāo)記;本實(shí)驗(yàn)耗時(shí)較長(zhǎng),需事先規(guī)劃好時(shí)間,以便進(jìn)步工作效率,在操作時(shí)更加有條不紊。10.在涂布有大腸桿菌的培養(yǎng)基上進(jìn)展抑菌實(shí)驗(yàn),在a、b、c處分別貼浸有不同抗生素濃度一樣的無菌濾紙片,d處濾紙片浸有無菌水。培養(yǎng)后的結(jié)果如下圖。以下判斷錯(cuò)誤的選項(xiàng)是Aa處抑菌效果小于b處Bb處的濾紙片沒有瀝干Cc處抗生素?zé)o效Dd為對(duì)照解析:選A培養(yǎng)皿中不同濾紙片四周透明圈的大小不同,透明圈越大,說明浸有的抗生素抑菌效果越好。a處的透明圈并不小于b處;b處不是圓形的透明圈,可能是
7、濾紙片沒有瀝干,抗生素流出濾紙片;c處無透明圈,說明c處抗生素對(duì)大腸桿菌無效;d為空白對(duì)照。11做“微生物的別離與培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí),以下表達(dá)正確的選項(xiàng)是A高壓滅菌加熱完畢時(shí),翻開放氣閥使壓力表指針回到零后,開啟鍋蓋B倒平板時(shí),應(yīng)將翻開的皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí),應(yīng)標(biāo)記在皿底上解析:選D在高壓滅菌的操作過程中,加熱完畢后應(yīng)讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降,待壓力表的指針指到零時(shí),翻開放氣閥,旋松螺栓,翻開蓋子。倒平板時(shí),用左手將培養(yǎng)皿翻開一條稍大于瓶口的縫隙,而不是完全取下放到一邊。接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后應(yīng)在火焰旁冷卻后,
8、再用其挑取菌落。在微生物的培養(yǎng)中,一般將培養(yǎng)皿倒置,在皿底上用記號(hào)筆做標(biāo)記。12漆酶屬于木質(zhì)素降解酶類,在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)消費(fèi)等領(lǐng)域有著廣泛用處。以下圖是別離、純化和保存漆酶菌株的過程,相關(guān)表達(dá)錯(cuò)誤的選項(xiàng)是A生活污水中含有大量微生物,是別離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品B挑選培養(yǎng)基中需要參加漆酶的底物,通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落C在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落,再通過劃線進(jìn)一步純化D假設(shè)要長(zhǎng)期保存菌株可采用甘油管藏的方法解析:選A生活污水中含木質(zhì)素的物質(zhì)相對(duì)較少,產(chǎn)漆酶菌株也較少,不宜作為別離產(chǎn)漆酶菌株的樣品;產(chǎn)漆酶菌株可降解木質(zhì)素,在挑選培養(yǎng)基中參加木質(zhì)素可挑選產(chǎn)漆酶的菌株,挑選時(shí)可通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌
9、落;在涂布平板上生長(zhǎng)的菌落可能還有其他雜菌,可再通過平板劃線法進(jìn)一步純化;對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種,可以采用甘油管藏的方法,即在20 的冷凍箱中保存。二、非選擇題共52分1316分莠去津是一種含氮農(nóng)藥,在土壤中不易降解,為修復(fù)被其污染的土壤,可按下面程序選育能降解莠去津的細(xì)菌目的菌。請(qǐng)據(jù)圖答復(fù)莠去津在水中溶解度低,含過量莠去津的固體培養(yǎng)基不透明。1由圖推斷,從A瓶到C瓶液體培養(yǎng)的過程稱為_,目的是_。2在將C瓶菌種接種到固體培養(yǎng)基之前通常要進(jìn)展_,將菌種接種到固體培養(yǎng)基的方法有平板劃線法和_法,從圖中看本實(shí)驗(yàn)采用的是_填“前者或“后者。3一段時(shí)間后,培養(yǎng)基出現(xiàn)無透明圈和有透明圈兩種菌落,我們挑選
10、的目的菌是菌落中_的細(xì)菌,該菌落生長(zhǎng)所需的氮元素主要來自_。4為弄清固體培養(yǎng)基中的非目的菌落來自C瓶菌種還是培養(yǎng)基,應(yīng)如何設(shè)置對(duì)照組?_。解析:1圖中從A瓶到C瓶液體培養(yǎng)的過程稱為選擇培養(yǎng),目的是初步選擇能降解莠去津的細(xì)菌目的菌并進(jìn)步其密度。2將菌種接種到固體培養(yǎng)基的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種,由圖中固體培養(yǎng)基上的菌落分布可知,該接種方法是稀釋涂布平板法,包括梯度稀釋操作和涂布平板操作。3根據(jù)題目信息“莠去津在水中溶解度低,含過量莠去津的固體培養(yǎng)基不透明可知,可以降解莠去津的目的菌會(huì)使菌落周圍出現(xiàn)透明圈,因此可以選擇菌落周圍存在透明圈的細(xì)菌。由于培養(yǎng)基中只有莠去津一種氮源,因此分解莠
11、去津的微生物所需的氮元素主要由莠去津提供。4為弄清固體培養(yǎng)基中的非目的菌落來自C瓶菌種還是培養(yǎng)基,應(yīng)設(shè)置滅菌后不接種菌種的培養(yǎng)基,與實(shí)驗(yàn)組放在一樣條件下培養(yǎng),假設(shè)培養(yǎng)基上無菌落出現(xiàn),那么非目的菌落一定來自C瓶菌種,假設(shè)培養(yǎng)基上出現(xiàn)菌落,那么說明非目的菌落可能來自培養(yǎng)基。答案:1選擇培養(yǎng)初步選擇能降解莠去津的細(xì)菌目的菌并進(jìn)步其密度2梯度稀釋稀釋涂布平板后者3有透明圈莠去津4配制的培養(yǎng)基滅菌后不接種菌種,與實(shí)驗(yàn)組放在一樣條件下培養(yǎng)1416分臨床使用抗生素前,有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí),首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作,以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性。答復(fù)以下問題:1
12、為了從樣本中獲取致病菌單菌落,可用_法或_法將樣本接種于固體培養(yǎng)基外表,經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。2取該單菌落適當(dāng)稀釋,用_法接種于固體培養(yǎng)基外表,在37 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,使其均勻生長(zhǎng),布滿平板。3為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性,將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板的不同位置上,培養(yǎng)一段時(shí)間后,含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對(duì)抗生素A_;含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對(duì)抗生素B_;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,說明_;含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素D的_
13、。4根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,為到達(dá)抗菌目的,最好選用抗生素_。解析:1微生物的常用別離方法為劃線法和稀釋涂布平板法。2可以使菌落均勻生長(zhǎng)、布滿平板的接種方法為涂布法。34含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對(duì)抗生素A敏感;含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對(duì)抗生素B不敏感;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,說明該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A的弱;含D的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落排除雜菌污染,說明該致病菌可能對(duì)抗生素D產(chǎn)生了抗藥性。答案:1劃線稀釋涂布平板或涂布2涂布3敏感不敏感該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A弱耐藥菌4A1520分人工瘤胃模擬了牛羊等反芻動(dòng)物的胃,可
14、用來發(fā)酵處理秸稈,進(jìn)步秸稈的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。為了增強(qiáng)發(fā)酵效果,研究人員從牛胃中挑選纖維素酶高產(chǎn)菌株,并對(duì)其降解纖維素才能進(jìn)展了研究。請(qǐng)答復(fù)以下問題:1在樣品稀釋和涂布平板步驟中,以下選項(xiàng)不需要的是_填序號(hào)。酒精燈培養(yǎng)皿顯微鏡無菌水2在涂布平板時(shí),滴加到培養(yǎng)基外表的菌懸液量不宜過多的原因是_。3向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí),假設(shè)試管口粘附有培養(yǎng)基,需要用酒精棉球擦凈的原因是_。4剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反響。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上,篩到了幾株有透明降解圈的菌落見右圖。圖中降解圈大小與纖維素酶的_有關(guān)。圖中降解纖維素才能最強(qiáng)的菌株是_填圖中序
15、號(hào)。5研究人員用挑選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4,在不同溫度和pH條件下進(jìn)展發(fā)酵,測(cè)得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見以下圖,推測(cè)菌株_更合適用于人工瘤胃發(fā)酵,理由是_。解析:1在樣品稀釋和涂布平板過程中,需要在酒精燈火焰附近進(jìn)展操作,培養(yǎng)皿用于盛放培養(yǎng)基并培養(yǎng)細(xì)菌,無菌水做稀釋的溶劑,此處唯一用不到的是顯微鏡。2在涂布平板時(shí),要取少量菌懸液滴加到培養(yǎng)基外表,因?yàn)榧偃绲渭泳鷳乙毫窟^多,菌懸液就會(huì)堆積在培養(yǎng)基外表,影響別離效果。3在向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí),假如試管口粘附有培養(yǎng)基,就很容易使棉塞受到污染,因此,需要用無菌的酒精棉球?qū)⒃嚬芸诓潦酶蓛簟?因?yàn)閯偣t可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,且不與纖維素降解產(chǎn)物反響。所以在剛果紅培養(yǎng)基平板上,菌落周圍有透明降解圈是纖維素被降解的結(jié)果,降解圈大小
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