Agilent1200高效液相色譜儀操作規(guī)程

1、Agilent1200高效液相色譜儀操作規(guī)程、Agilent1200化學(xué)工作站開機(jī)順序（LAN卡聯(lián)接）1、將待測(cè)樣品按要求前處理，準(zhǔn)備HPLC所需流動(dòng)相，檢查線路是否連接完好，廢液瓶是否夠用等2、打開計(jì)算機(jī)，進(jìn)入Bootp；3、打開主機(jī)各模塊電源（不分先后），等待Bootp接收,等待各模塊就緒后,再雙擊工作站圖標(biāo),進(jìn)入化學(xué)工作站；4、調(diào)出一個(gè)分析方法，檢查各參數(shù)的設(shè)置；5、旋開泵上的排氣閥，將工作站中的泵流量設(shè)到5ml/min，溶劑A設(shè)到100%6、在工作站中打開泵，排出管線中的氣體數(shù)分鐘；7、依此切換到B、C、D溶劑分別排氣；8將工作站中的泵流量設(shè)到1ml/min，多元泵則再設(shè)定溶劑配比，如

2、A=80%B=20%；9、關(guān)閉排氣閥，檢查柱前壓力；10、待柱前壓力基本穩(wěn)定后,打開檢測(cè)器燈，觀察基線情況；、數(shù)據(jù)采集方法編輯1 由運(yùn)行控制進(jìn)入樣品信息，設(shè)定操作者姓名，樣品數(shù)據(jù)文件名等。2 自動(dòng)進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)定:1）選擇合適的進(jìn)樣方式,“StandardInjection”只能輸入進(jìn)樣體積，此方式無(wú)洗針功能?！癐njectionwithNeedleWash”可以輸入進(jìn)樣體積和洗瓶位置，“UnRegistered”-此方式針從樣品瓶抽完樣品后，會(huì)在洗瓶中洗針?！癠seinjectorprogram”-可以點(diǎn)擊“Edit”鍵進(jìn)行進(jìn)樣程序編輯。2）單擊確定進(jìn)入下一畫面。3 泵參數(shù)設(shè)定：（四元泵）1

3、）在流量（Flow）處輸入流量,如1.5ml/min，在溶劑B處輸入70.0,（A=100-B-C-D）,也可插入一行時(shí)間列表（Timetable）,編輯梯度。在最大壓力極限處（PressureLimitsMax）輸入柱子的最大耐高壓，以保護(hù)柱子。2）單擊確定進(jìn)入下一畫面。4 柱溫箱參數(shù)設(shè)定:1）在柱溫下面的方框內(nèi)輸入所需溫度,并選中它,點(diǎn)擊更多鍵,選中與左側(cè)一致，使柱溫箱的溫度左右一致。2）單擊確定進(jìn)入下一畫面。5 DAD檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定：1）在波長(zhǎng)下方的空白處輸入所需的檢測(cè)波長(zhǎng)，如254nm,在峰寬（響應(yīng)時(shí)間）下方點(diǎn)擊下拉式三角框，選擇合適的響應(yīng)時(shí)間，如0.1min（2s）。2）在時(shí)間列表中

4、可以插入一行，輸入隨時(shí)間切換的波長(zhǎng)，如1min，波長(zhǎng)=300nm。3）點(diǎn)擊確定進(jìn)入下一畫面。6 單擊方法菜單，選中保存方法，輸入一方法名，如“test”，單擊確定。7、運(yùn)行序列：新建序列，在序列參數(shù)中輸入樣品信息，在序列表中輸入樣品位置，方法等，運(yùn)行該序列，等儀器就緒，基線平穩(wěn)，從方法菜單中選擇運(yùn)行方法，進(jìn)樣。三、數(shù)據(jù)處理操作步驟1 由主菜單上的視圖進(jìn)入數(shù)據(jù)分析，到數(shù)據(jù)處理界面；2 由主菜單上的文件進(jìn)入調(diào)用信號(hào)，調(diào)出要分析的數(shù)據(jù)文件色譜圖；3 由主菜單上的圖形進(jìn)入信號(hào)選項(xiàng)，調(diào)整譜圖坐標(biāo):1）點(diǎn)自定義量程，在時(shí)間范圍中輸入橫坐標(biāo)（時(shí)間）（例如0到10）；2）在響應(yīng)范圍:中輸入縱坐標(biāo)（響應(yīng)值）（例

5、如-50到800）；3）在量程框中，調(diào)到全部使用相同量程；4）點(diǎn)擊確定退出。4 由主菜單上的積分進(jìn)入積分事件，設(shè)置、修改積分參數(shù)；1）在斜率靈敏度后，輸入斜率值；2）在峰寬后中，輸入最小峰寬值；3）在最小峰面積后，輸入最小峰面積值；4）在最小峰高后，輸入最小峰高值；5）點(diǎn)擊左上方帶鉤的圖標(biāo)，確認(rèn)；5 由主菜單上的報(bào)告進(jìn)入設(shè)定報(bào)告，設(shè)置報(bào)告參數(shù)：1）在定量結(jié)果欄中，選擇計(jì)算（面積百分比，外標(biāo)法，內(nèi)標(biāo)法等）；2）在目標(biāo)欄，選打印機(jī)打印，或屏幕打??；3）點(diǎn)擊確定退出。6 由主菜單上的報(bào)告進(jìn)入打印報(bào)告，打印報(bào)告；四、關(guān)機(jī)1 關(guān)機(jī)前，用95%水沖洗柱子和系統(tǒng)0.5-1小時(shí)，流量0.51ml/min，再用

6、100%有機(jī)溶劑沖0.5小時(shí)，然后關(guān)泵，（適于反相色譜柱）。正相色譜柱用適當(dāng)?shù)娜軇_洗2 退出化學(xué)工作站，及其它窗口，關(guān)閉計(jì)算機(jī)（用shutdown關(guān)）。3 關(guān)閉Agilent1200各模塊電源開關(guān)。五、Agilent1200高效液相色譜儀維護(hù)保養(yǎng)：1氘燈是易耗品，應(yīng)最后開燈，不分析樣品即關(guān)燈；2 開機(jī)時(shí)，打開排氣閥，100%水，泵流量5ml/min，若此時(shí)顯示壓力>10bar，則應(yīng)更換排氣閥內(nèi)玻璃料。3 流動(dòng)相使用前必須過(guò)濾，不要使用多日存放的蒸餾水（易長(zhǎng)菌）。4 流動(dòng)相使用前必須進(jìn)行脫氣處理，可用超聲波振蕩10-15min。5配制90%水+10%異丙醇，以每分23滴的速度虹吸排出，進(jìn)行seal-wash，溶劑不能干涸