五味子藥材檢驗標準操作規(guī)程

1、五味子藥材檢驗操作規(guī)程1 范圍 本標準建立了五味子藥材的檢驗操作規(guī)程。本標準適用于五味子藥材的檢驗。 2 規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款，其最新版本適用于本標準。中華人民共和國藥典 2010版一部 五味子藥材質(zhì)量標準 編號 3 職責 檢驗人員、復核人員對實施本標準負責。4 操作規(guī)程4.1 試藥與試劑 甲酸乙酯、甲酸、石油醚（36-60）水合氯醛、甘油醋酸試液、稀甘油、羧甲基纖維素鈉、硅膠GF254薄層板、三氯甲烷、甲醇、 水、五味子對照藥材、五味子甲素對照品。4.2 設備及儀器放大鏡、直尺、生物顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、酒精燈、層析缸、天平、3號藥典篩、回

2、流裝置、點樣毛細管、紫外光燈、水浴鍋、坩堝、扁形稱量瓶、高效液相色儀、烘箱、具塞錐形瓶、20量瓶、高溫電阻爐、電爐、干燥器。4.3 檢驗項目 性狀（1） 操作方法 取用供試品，用目視或用放大鏡觀察，并用直尺測量其直徑；聞其氣，用口嘗其味。（2） 記錄 記錄觀察的形狀，供試品其直徑數(shù)值和氣味。（3） 結果判定 呈不規(guī)則的球形或扁球形，直徑58mm。表面紅色、紫紅色或暗紅色，皺縮，顯油潤；有的表面呈黑紅色或出現(xiàn)“白霜”。果肉柔軟，種子12，腎形，表面棕黃色，有光澤，種皮薄而脆。果肉氣微，味酸；種子破碎后，有香氣，味辛、微苦。判為符合規(guī)定。 鑒別.1 顯微鑒別（1） 操作方法 取本品橫切面和粉末，滴

3、加水合氯醛試液后，加熱透化，再加稀甘油裝片，在顯微鏡下觀察。（2） 記錄 記錄橫切面和粉末鑒別特征。（3） 結果判定 橫切面：外果皮為1列方形或長方形細胞，壁稍厚，外被角質(zhì)層。散有油細胞；中果皮薄壁細胞10余列，含淀粉粒，散有小型外韌性維管束；內(nèi)果皮為1列小方形薄壁細胞。種皮最外層為1列徑向延長的石細胞，壁厚，紋孔及孔溝細密；其下為數(shù)列類圓形、三角形或多角形石細胞，紋孔較大；石細胞層下為數(shù)列薄壁細胞，種脊部位有維管束；油細胞層為1列長方形細胞，含棕黃色油滴；再下為35列小型細胞；種皮內(nèi)表皮為1列小細胞，壁稍厚，胚乳細胞含脂肪油滴及糊粉粒。判為符合規(guī)定。 粉末暗紫色，種皮表皮石細胞表面呈多角形或

4、長多角形，直徑1850m，壁厚，孔溝極細密，胞腔內(nèi)含深棕色物。種皮內(nèi)層石細胞呈多角形、類圓形或不規(guī)則形，直徑約至83m，壁稍厚，紋孔較大。果皮表皮細胞表面觀類多角形，垂周壁略呈連珠狀增厚，表面有角質(zhì)線紋；表皮中散有油細胞。中果皮細胞皺縮，含暗棕色物，并含淀粉粒。判為符合規(guī)定。.2 理化鑒別 照薄層色譜法（中國藥典2010版一部附錄VI B）。（1）操作方法 取本品粉末1g，加三氯甲烷20ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加三氯甲烷1ml使溶解，作為供試品溶液。另取五味子對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。再取五味子甲素對照品，加三氯甲烷制成每1ml含1ml的溶液，作為對照品溶液。照薄

5、層色譜法（附錄B）試驗，吸取上述三種溶液各2l，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以石油醚（3060）-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（254nm）下檢視。（2） 記錄 記錄供試品和對照藥材的用量，吸附劑、展開劑及其配比、點樣量、薄層色譜圖及結果。（3） 結果判定 供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點。判為符合規(guī)定。 檢查：.1 雜質(zhì) 照雜質(zhì)檢查法（中國藥典2010版一部附錄 A）。（1）操作方法 取本品量，攤開，用肉眼或放大鏡觀察，將雜質(zhì)揀出；如其中有可以篩分的雜質(zhì)，則通過適當?shù)暮Y，將雜質(zhì)分出，將各類雜質(zhì)分別稱重

6、，計算其在供試品中的含量（%）。（2）記錄 記錄供試品取用量、雜質(zhì)重量、雜質(zhì)含量的計算和結果。計算公式： m z 雜質(zhì)含量= 100% m y式中：my為樣品重；(g) m z為雜質(zhì)重；(g)（3）結果判斷本品的雜質(zhì)小于或等于1%，判為符合規(guī)定。.2 水分 照水分測定法（中國藥典2010版一部附錄 H第一法）。（1）操作方法 取本品25g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過5mm，精密稱定，打開瓶蓋在100105干燥5小時，將瓶蓋蓋好，移至干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定，再在上述溫度干燥1小時，冷卻，稱重，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據(jù)減失的重量，計算供試品中含水量（%）

7、。（2）記錄 記錄供試品取用量、干燥溫度、干燥時間、水分的計算和結果。計算公式： m p+ my - m z 水分= 100% m y式中：m p為恒重的稱量瓶；（g） m y為樣品重；(g) m z為恒重的（瓶+樣品）(g)（3）結果判斷本品的水分小于或等于16.0%，判為符合規(guī)定。.3 總灰分 照灰分測定法（中國藥典2010版一部附錄 K）（1） 操作方法 取本品35g，至灼灼至恒重的坩堝中，稱定重量（準確至0.01g），緩緩熾熱，注意避免燃燒，至完全炭化，逐漸升高溫度至500600，使完全灰化并至恒重。 根據(jù)殘渣重量，計算供試品中總灰分的含量（%）。（2）記錄 記錄供試品取用量、熾灼溫度

8、、熾灼時間、灰分的計算和結果。計算公式： mzmp 總灰分= 100% my式中：mp 為坩堝恒重；my為樣品重；mz為熾灼后（坩堝+樣品）恒重（3）結果判斷 本品的灰分小于或等于7.0%，判為符合規(guī)定。4.3.4含量測定 照高效液相色譜法（附錄 ）測定。（1）操作方法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水（65：36）為流動相；檢測波長為250nm。理論板數(shù)按五味子醇甲峰計算應不低于2000。對照品溶液的制備 取五味子醇甲對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲0.3mg的溶液，即得。供試品溶液的制備 取本品粉末（過三號篩）約0.25g，精密稱定，置

9、20ml量瓶中，加甲醇約18ml，超聲處理（功率250W，頻率20kHz）20分鐘，取出，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10l，注入液相色譜儀，測定，即得。（2）記錄 記錄對照品濃度、對照品峰面積、樣品峰面積、樣品稱樣量、含量的計算和結果。A樣C標V樣計算公式 ： C樣= 100% A標m樣1000式中：C樣：樣品百分含量A樣：樣品峰面積m樣：樣品稱樣量A標：對照品峰面積C標：對照品濃度V樣：樣品溶液體積（3）結果判定 本品含五味子醇甲（24327）不得少于0.40%。 五味子藥材原始檢驗記錄批 號數(shù) 量規(guī) 格檢驗項目請驗部門檢驗日期年

10、月 日來 源報告日期年 月 日檢驗依據(jù)五味子藥材質(zhì)量標準及中國藥典2010版一部【性狀】 本品呈不規(guī)則的 形，直徑 mm；表面 色，皺縮，顯油潤；表面呈 。果肉柔軟，種子12，腎形，表面 色，油光澤，種皮 。果肉 ， ；種子破碎后，有 ，味 。 結論： 橫切面：外果皮為1列 形細胞，壁稍厚，外被角質(zhì)層，散有 ；中果皮薄壁細胞 余列，含 ，散有小型 ；內(nèi)果皮為1列小方型 。種皮最外層為1列徑向延長的 ，壁厚，紋孔及孔溝細密；其下為數(shù)列類圓形、三角形或多角形 ， ；石細胞層下為數(shù)列 ，種脊部位有 ；油細胞層為1列 ，含棕色油滴；再下為 列小形 ；種皮內(nèi)表皮為1列 ，壁稍厚，胚乳細胞含 。 結論：

11、【鑒別】 粉末鑒別：粉末 色。種皮表皮石細胞表面觀呈 形，直徑1850m,壁厚，孔溝極細密，胞腔內(nèi)含 物。種皮內(nèi)層 呈多角形、類圓形或不規(guī)則形，直徑約至83m，壁稍厚，紋孔較大。果皮表皮 表面觀 ，垂周壁約呈連珠狀增厚，表面有 ；表皮中散有 。中果皮 皺縮，含 物，并含 。 結論： 薄層鑒別：取本品粉末1g，加三氯甲烷20ml,加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加三氯甲烷1ml使溶解，作為供試品溶液。另取五味子對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。再取五味子甲素對照品，加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（附錄VI B）試驗，吸取上述三種溶液各2l,分別點于同一

12、硅膠GF254薄層板上，以石油醚（3060）-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干， 1： 2： 第1頁 共3頁 檢驗人： 復核人： 日 期： 年 月 日 日 期： 年 月 日置紫外光燈（254nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照 3： 藥材和對照品色譜 。 結論： 【檢查】 雜質(zhì)：照附錄A雜質(zhì)檢查法，不得過1% 取本品 g； g，肉眼、放大鏡觀察，揀出雜質(zhì)重 g； g。 100%= 100%= 平均值： = 結論： 水分 ：不得過16.0%(附錄 H第一法)。項目序號稱量瓶恒重樣品重（瓶+樣品）105干燥5h后重105繼續(xù)烘1h后（瓶+樣品）重如未恒重：105繼

13、續(xù)烘1h（1）（2）計算：（1） 100%= （2） 100%= 平均值： = 結論： 總灰分： 不得過7.0%(附錄 K)。項目序號坩堝恒重/g樣品重/g（坩堝+樣）550熾灼4h后重/g550繼續(xù)熾灼1h后（坩堝+樣）恒重/g如未恒重550繼續(xù)熾灼1h（1）（2）計算： （1） 100%= （2） 100%= 平均值： = 結論： 【含量測定】第2頁 共3頁 檢驗人： 復核人： 日 期： 年 月 日 日 期： 年 月 日 色譜條件與系統(tǒng)適應性：C18柱，甲醇水（13：7）為流動相，檢測波長為250nm。理論板數(shù)按 五味子醇甲計應不得低于2000。 對照品溶液制備：精密稱取五味子醇甲對照品15mg，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液。 供試品溶液制備：取本品粉末（過三號篩）約0.3g精密稱定， 置25ml瓶中，加甲醇約20ml，超聲處理20分鐘，取出，加