乳品中乳酸菌的檢驗

1、 1 無菌器材的準備一一培養(yǎng)基的制備二二樣品的制備三三接種及培養(yǎng)四四計數(shù)報告五五 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學資源庫 目錄頁 2 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學資源庫 無菌器材的準備一一1.檢驗設備的準備2.無菌器皿的準備 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學資源庫 乳品中乳酸菌的檢驗 無菌器材的準備1.檢驗設備的準備檢驗設備的準備：恒溫培養(yǎng)箱：36 1 ，30 1 恒溫水浴箱：46 1 感量為0.1 g 天平均質(zhì)器 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學資源庫 乳品中乳酸菌的檢驗 無菌器材的準備2.無菌器皿的準備無菌器皿的準備：無菌吸管：1 mL （具0.01 mL 刻度）、10 mL （具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸

2、頭。 無菌錐形瓶：容量250 mL、500 mL。 無菌培養(yǎng)皿：直徑 90 mm。 2 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學資源庫 培養(yǎng)基的制備二二1.加熱溶解2.包扎滅菌 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學資源庫 乳品中乳酸菌的檢驗 培養(yǎng)基的制備1.加熱溶解加熱溶解MRS培養(yǎng)基培養(yǎng)基 莫匹羅星鋰鹽改良莫匹羅星鋰鹽改良MRSMRS培養(yǎng)基培養(yǎng)基 MCMC培養(yǎng)基培養(yǎng)基將干粉加于蒸餾水中，加熱溶解，調(diào)節(jié)pH ，分裝。2.包扎滅菌包扎滅菌121 高壓滅菌15-20 min。 2 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學資源庫 樣品的制備三三1.固體和半固體樣品的制備2.液體樣品的制備 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學資源庫 乳品中乳酸菌的檢驗 樣

3、品的制備1.固體和半固體樣品固體和半固體樣品的制備的制備以無菌操作稱取25 g 樣品，置于裝有225 mL 生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi)，于 8000 r/min10000 r/min 均質(zhì) 1 min2 min，制成 1:10 樣品勻液；或置于225 mL 生理鹽水的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打 1 min2 min 制成 1:10 的樣品勻液。 2.液體樣品液體樣品的制備的制備液體樣品應先將其充分搖勻后以無菌吸管吸取樣品25 mL 放入裝有225 mL 生理鹽 水的無菌錐形瓶（瓶內(nèi)預置適當數(shù)量的無菌玻璃珠）中，充分振搖，制成 1:10 的樣品勻液。 2 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學資源庫 接種及培

4、養(yǎng)四四1.系列稀釋2.接種培養(yǎng) 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學資源庫 乳品中乳酸菌的檢驗 接種及培養(yǎng)1.系列稀釋系列稀釋用 1 mL 無菌吸管或微量移液器吸取 1:10 樣品勻液 1 mL，沿管壁緩慢注于裝有9 mL 生理鹽水的無菌試管中（注意吸管尖端不要觸及稀釋液），振搖試管或換用 1 支無菌吸管反復吹打使其混合均勻， 制成 1:100 的樣品勻液。 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學資源庫 乳品中乳酸菌的檢驗 接種及培養(yǎng)2.接種培養(yǎng)接種培養(yǎng)：（1 1）乳酸菌總數(shù)乳酸菌總數(shù) 根據(jù)待檢樣品活菌總數(shù)的估計，選擇 2 個3 個連續(xù)的適宜稀釋度，每個稀釋度吸取 0.1 mL 樣品 勻液分別置于2 個MRS 瓊脂

5、平板，使用 L 形棒進行表面涂布。361，厭氧培養(yǎng)48 h2 h 后計數(shù)平板上的所有菌落數(shù)。從樣品稀釋到平板涂布要求在 15min 內(nèi)完成。 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學資源庫 乳品中乳酸菌的檢驗 接種及培養(yǎng)2.接種培養(yǎng)接種培養(yǎng)：（2 2）雙歧桿菌計數(shù)雙歧桿菌計數(shù) 根據(jù)對待檢樣品雙歧桿菌含量的估計，選擇2 個3 個連續(xù)的適宜稀釋度，每個稀釋度吸取0.1 mL 樣品勻液于莫匹羅星鋰鹽（Li-Mupirocin ）改良MRS 瓊脂平板，使用滅菌 L 形棒進行表面涂布，每個 稀釋度作兩個平板。361，厭氧培養(yǎng)48 h2 h 后計數(shù)平板上的所有菌落數(shù)。從樣品稀釋到平板涂布要求在 15 min 內(nèi)完成。

6、。 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學資源庫 乳品中乳酸菌的檢驗 接種及培養(yǎng)2.接種培養(yǎng)接種培養(yǎng)：（3 3）嗜熱鏈球菌計數(shù)嗜熱鏈球菌計數(shù) 根據(jù)待檢樣品嗜熱鏈球菌活菌數(shù)的估計，選擇2 個3 個連續(xù)的適宜稀釋度，每個稀釋度吸取0.1 mL 樣品勻液分別置于2 個MC 瓊脂平板，使用 L 形棒進行表面涂布。361，需氧培養(yǎng)48 h2 h 后計數(shù)。嗜熱鏈球菌在MC 瓊脂平板上的菌落特征為：菌落中等偏小，邊緣整齊光滑的紅色菌落，直徑2 mm1 mm，菌落背面為粉紅色。從樣品稀釋到平板涂布要求在 15 min 內(nèi)完成。 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學資源庫 乳品中乳酸菌的檢驗 接種及培養(yǎng)2.接種培養(yǎng)接種培養(yǎng)：（4 4

7、）乳桿菌計數(shù)乳桿菌計數(shù) 項乳酸菌總數(shù)結(jié)果減去雙歧桿菌與嗜熱鏈球菌計數(shù)結(jié)果之和即得乳桿菌計數(shù)。 2 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學資源庫 計數(shù)報告五五1.菌落計數(shù)2.結(jié)果報告 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學資源庫 乳品中乳酸菌的檢驗 計數(shù)報告1.菌落計數(shù)菌落計數(shù)：可用肉眼觀察，必要時用放大鏡或菌落計數(shù)器，記錄稀釋倍數(shù)和相應的菌落數(shù)量。菌落計數(shù)以菌落形成單位（colony-forming units，CFU）表示。 選取菌落數(shù)在 30 CFU300 CFU 之間、無蔓延菌落生長的平板計數(shù)菌落總數(shù)。低于 30 CFU 的 平板記錄具體菌落數(shù)，大于 300 CFU 的可記錄為多不可計。每個稀釋度的菌落數(shù)應采用兩個

8、平板的平均數(shù)。 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學資源庫 乳品中乳酸菌的檢驗 計數(shù)報告2.結(jié)果報告結(jié)果報告：菌落數(shù)小于 100 CFU 時，按“四舍五入”原則修約，以整數(shù)報告。 菌落數(shù)大于或等于 100 CFU 時，第3 位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后，取前2 位數(shù)字，后 面用0 代替位數(shù)；也可用 10 的指數(shù)形式來表示，按“四舍五入”原則修約后，采用兩位有效數(shù)字。 稱重取樣以 CFU/g 為單位報告，體積取樣以CFU/mL 為單位報告。 根據(jù)菌落計數(shù)結(jié)果出具報告，報告單位以CFU/g （mL ）表示。 食品安全國家標準食品微生物學檢驗食品安全國家標準食品微生物學檢驗 原始數(shù)據(jù)記錄報告單原始數(shù)據(jù)記錄報告單送檢單位送檢單位 樣品名稱樣品名稱 生產(chǎn)單位生產(chǎn)單位 生產(chǎn)日期生產(chǎn)日期 檢驗日期檢驗日期 檢測依據(jù)檢測