病原性球鑒定ppt課件

1、總目錄下頁退出病原性球菌鑒定病原性球菌鑒定u南華大學(xué)預(yù)防醫(yī)學(xué)與放射衛(wèi)生實驗教學(xué)中心總目錄上頁退出下頁返回退出u教學(xué)對象：高等醫(yī)學(xué)院校衛(wèi)生檢驗專業(yè)學(xué)生u實驗課時：6學(xué)時u課程類型：專業(yè)實驗課u課程要求：必修u每組人數(shù)：2人總目錄上頁退出下頁返回退出實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康?掌握葡萄球菌屬的分離培養(yǎng)與鑒定方法掌握葡萄球菌屬的分離培養(yǎng)與鑒定方法 、菌落特點、菌落特點、菌體形態(tài)及染色性菌體形態(tài)及染色性 掌握鏈球菌屬的分離培養(yǎng)與鑒定方法掌握鏈球菌屬的分離培養(yǎng)與鑒定方法 、菌落特點、菌、菌落特點、菌體形態(tài)及染色性體形態(tài)及染色性總目錄上頁退出下頁返回退出實驗器材和試劑實驗器材和試劑u顯微鏡顯微鏡u恒溫培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)

2、箱u菌種菌種u金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌u表皮葡萄球菌葡萄球菌表皮葡萄球菌葡萄球菌u超凈工作臺超凈工作臺 總目錄上頁退出下頁返回退出一、葡萄球菌屬的鑒定一、葡萄球菌屬的鑒定u形態(tài)觀察形態(tài)觀察u取金黃色葡葡球菌與表皮葡萄球菌做革蘭氏染色后取金黃色葡葡球菌與表皮葡萄球菌做革蘭氏染色后置顯微鏡下觀察細菌染色性、大小、形態(tài)、排列置顯微鏡下觀察細菌染色性、大小、形態(tài)、排列u結(jié)果：可見革蘭氏陽性葡萄狀排列的球菌結(jié)果：可見革蘭氏陽性葡萄狀排列的球菌u菌落觀察菌落觀察 u取金黃色葡葡球菌與表皮葡萄球菌接種血平板，取金黃色葡葡球菌與表皮葡萄球菌接種血平板，37C培養(yǎng)培養(yǎng)1824h，觀察其菌落大小、形態(tài)、色素及

3、，觀察其菌落大小、形態(tài)、色素及溶血現(xiàn)象溶血現(xiàn)象總目錄上頁退出下頁返回退出葡萄球菌革蘭染色葡萄球菌革蘭染色10001000）總目錄上頁退出下頁返回退出葡萄球菌的普通平板菌落照片葡萄球菌的普通平板菌落照片總目錄上頁退出下頁返回退出金黃色葡萄球菌血平板菌落照片金黃色葡萄球菌血平板菌落照片寬大透明溶血環(huán)寬大透明溶血環(huán)溶血）溶血）總目錄上頁退出下頁返回退出一、葡萄球菌屬的鑒定一、葡萄球菌屬的鑒定u生化反應(yīng)生化反應(yīng) u觸酶試驗觸酶試驗u原理：葡萄球菌產(chǎn)生的觸酶，能將對細菌有害的原理：葡萄球菌產(chǎn)生的觸酶，能將對細菌有害的H2O2分解成無害的水和氧氣分解成無害的水和氧氣 u方法：用接種環(huán)挑取普通瓊脂平板上的葡

4、萄球菌，方法：用接種環(huán)挑取普通瓊脂平板上的葡萄球菌，置于潔凈玻片上，滴加置于潔凈玻片上，滴加3% H2O2溶液溶液1-2滴，觀察結(jié)滴，觀察結(jié)果果u結(jié)果：半分鐘內(nèi)產(chǎn)生大量氣泡為陽性，不產(chǎn)生氣泡結(jié)果：半分鐘內(nèi)產(chǎn)生大量氣泡為陽性，不產(chǎn)生氣泡為陰性為陰性總目錄上頁退出下頁返回退出u生化反應(yīng)生化反應(yīng)u血漿凝固酶試驗血漿凝固酶試驗 u原理：金葡菌能產(chǎn)生血漿凝固酶，可使血漿中可溶性原理：金葡菌能產(chǎn)生血漿凝固酶，可使血漿中可溶性纖維蛋白變?yōu)椴蝗苄岳w維蛋白，附著于細菌表面，在纖維蛋白變?yōu)椴蝗苄岳w維蛋白，附著于細菌表面，在玻片上形成凝塊；游離型的血漿凝固酶則可使試管中玻片上形成凝塊；游離型的血漿凝固酶則可使試管中

5、血漿發(fā)生凝固血漿發(fā)生凝固u玻片法：取未稀釋的新鮮兔血漿和生理鹽水各玻片法：取未稀釋的新鮮兔血漿和生理鹽水各1滴分滴分別滴加于載玻片上，挑取待檢葡萄球菌菌落少許，分別滴加于載玻片上，挑取待檢葡萄球菌菌落少許，分別與生理鹽水和血漿混合，立即觀察結(jié)果，此法測結(jié)別與生理鹽水和血漿混合，立即觀察結(jié)果，此法測結(jié)合型凝固酶。合型凝固酶。u試管法：取試管法：取3支支1010mm試管，各加入試管，各加入0.5ml 1:4稀稀釋的新鮮兔血漿，在其中釋的新鮮兔血漿，在其中1支試管中加支試管中加3-5個待檢菌落，個待檢菌落，充分研磨混勻，另充分研磨混勻，另2支試管中分別加凝固酶陽性株和支試管中分別加凝固酶陽性株和陰性

6、株作對照，陰性株作對照，37C水浴水浴3-4h，觀察結(jié)果。此法用于，觀察結(jié)果。此法用于測定游離型凝固酶。測定游離型凝固酶。一、葡萄球菌屬的鑒定一、葡萄球菌屬的鑒定總目錄上頁退出下頁返回退出u生化反應(yīng)生化反應(yīng)u甘露醇發(fā)酵試驗甘露醇發(fā)酵試驗 u原理：致病性葡萄球菌多能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸，使培養(yǎng)原理：致病性葡萄球菌多能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸，使培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色?；勺仙?yōu)辄S色。u方法：將三種葡萄球菌分別接種于甘露醇發(fā)酵管，方法：將三種葡萄球菌分別接種于甘露醇發(fā)酵管，35C，24h觀察結(jié)果：培養(yǎng)基呈混濁，由紫色變?yōu)辄S觀察結(jié)果：培養(yǎng)基呈混濁，由紫色變?yōu)辄S色為陽性，仍為紫色者為陰性色為陽性，仍為紫色者為陰性 一

7、、葡萄球菌屬的鑒定一、葡萄球菌屬的鑒定總目錄上頁退出下頁返回退出二、鏈球菌屬的鑒定二、鏈球菌屬的鑒定u形態(tài)學(xué)觀察形態(tài)學(xué)觀察u甲、乙、丙溶血鏈球菌分別做革蘭氏染色，觀察其形甲、乙、丙溶血鏈球菌分別做革蘭氏染色，觀察其形態(tài)與排列態(tài)與排列 u菌落觀察菌落觀察u鏈球菌在血瓊脂平板上生長后出現(xiàn)灰白色、圓形凸起、鏈球菌在血瓊脂平板上生長后出現(xiàn)灰白色、圓形凸起、表面光滑、邊緣整齊的針尖大小的菌落，周圍可出現(xiàn)表面光滑、邊緣整齊的針尖大小的菌落，周圍可出現(xiàn)不同的溶血情況；不同的溶血情況；u甲鏈出現(xiàn)草綠色溶血環(huán)甲鏈出現(xiàn)草綠色溶血環(huán)溶血，不完成溶血），乙溶血，不完成溶血），乙鏈出現(xiàn)透明的溶血環(huán)鏈出現(xiàn)透明的溶血環(huán)溶血，完成溶血），丙鏈無溶血，完成溶血），丙鏈無溶血環(huán)溶血環(huán)總目錄上頁退出下頁返回退出鏈球菌形態(tài)觀察鏈球菌形態(tài)觀察總目錄上頁退出下頁返回退出總目錄上頁退出下頁返回退出本卷須知本卷須知 對血漿凝固酶試