實(shí)驗(yàn)1微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用儀器洗滌及干熱滅菌___第1頁(yè)
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1、實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用儀器洗滌及干微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用儀器洗滌及干熱滅菌熱滅菌 目目 的的 要要 求求l 認(rèn)識(shí)微生物實(shí)驗(yàn)所需要的各種器皿,了解常認(rèn)識(shí)微生物實(shí)驗(yàn)所需要的各種器皿,了解常用工具和儀器的名稱(chēng)、用途。用工具和儀器的名稱(chēng)、用途。l 掌握對(duì)玻璃器皿的清洗、包扎方法與干熱滅掌握對(duì)玻璃器皿的清洗、包扎方法與干熱滅菌的操作過(guò)程。菌的操作過(guò)程。實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理l 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)要求較高的無(wú)菌狀態(tài)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)要求較高的無(wú)菌狀態(tài),因此,實(shí)驗(yàn)所用的器,因此,實(shí)驗(yàn)所用的器皿,大多數(shù)要進(jìn)行消毒、滅菌從而用以培養(yǎng)微生物,所以皿,大多數(shù)要進(jìn)行消毒、滅菌從而用以培養(yǎng)微生物,所以對(duì)其質(zhì)量、規(guī)格、洗滌和包扎方法均有

2、一定要求。對(duì)其質(zhì)量、規(guī)格、洗滌和包扎方法均有一定要求。l干熱滅菌干熱滅菌是利用高溫使微生物細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固變性而是利用高溫使微生物細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。達(dá)到滅菌的目的。 l與濕熱滅菌相比,干熱滅菌所需與濕熱滅菌相比,干熱滅菌所需溫度要高(溫度要高(160170),),時(shí)間要長(zhǎng)(時(shí)間要長(zhǎng)(12h),但干熱滅菌溫度不能超過(guò),但干熱滅菌溫度不能超過(guò)180,否則,包器皿的紙或棉塞就會(huì)燒焦,甚至引起燃燒。否則,包器皿的紙或棉塞就會(huì)燒焦,甚至引起燃燒。實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 材材 料料玻璃儀器:玻璃儀器: 每人數(shù):每人數(shù):培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿 3套;套; 大試管大試管 3只。只。 每組數(shù):每組數(shù):三角瓶三

3、角瓶 6只;只; 燒杯(燒杯(500ml)2只;只; 燒杯(燒杯(1000ml)1只;只; 小試管小試管 6只;只; 吸管(吸管( 0.2ml 2支,支, 0.5ml 2支,支,1ml 2支)共支)共6支支 每櫥數(shù):每櫥數(shù):量筒(量筒(500ml)1只;只;洗滌用品:洗滌用品: 去污粉、肥皂、清洗劑、毛刷等。去污粉、肥皂、清洗劑、毛刷等。包扎用品:包扎用品:棉花、扎繩、包扎紙等。棉花、扎繩、包扎紙等。l 由一底一蓋組成一套,常用的培養(yǎng)皿皿底直徑直徑90 mm,高,高15mm,皿底皿蓋均為玻璃制成。l 制成平板,可用于分離、純化、鑒定菌種、活菌計(jì)數(shù)分離、純化、鑒定菌種、活菌計(jì)數(shù)以及測(cè)定抗生素測(cè)定

4、抗生素、噬菌體的效價(jià)噬菌體的效價(jià)等。 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序(儀器的認(rèn)識(shí)、清洗與包扎儀器的認(rèn)識(shí)、清洗與包扎)(一)學(xué)習(xí)下列常用儀器的種類(lèi)、規(guī)格和應(yīng)用范圍:(一)學(xué)習(xí)下列常用儀器的種類(lèi)、規(guī)格和應(yīng)用范圍: 培培養(yǎng)養(yǎng)皿皿l 大試大試管管( (約約18mm18mm180mm) :180mm) : 可裝倒平板用的培養(yǎng)基可裝倒平板用的培養(yǎng)基; 可作制備斜面用可作制備斜面用; 裝液體培養(yǎng)基用于微生物的振蕩培養(yǎng)裝液體培養(yǎng)基用于微生物的振蕩培養(yǎng) (2)(2)中試管中試管(13(1315)mm15)mm(100(100150)mm: 150)mm: 裝液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌或做斜面用裝液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌或做斜面用; 用于細(xì)

5、菌、霉菌、病毒等的稀釋和血用于細(xì)菌、霉菌、病毒等的稀釋和血清學(xué)試驗(yàn)清學(xué)試驗(yàn)。l (3)(3)小試管小試管(10(1012)mm12)mm100mm:100mm: 一般用于糖發(fā)酵或血清學(xué)試驗(yàn),和其一般用于糖發(fā)酵或血清學(xué)試驗(yàn),和其它需要節(jié)省材料的試驗(yàn)。它需要節(jié)省材料的試驗(yàn)。試管試管l三角瓶三角瓶 用來(lái)裝無(wú)菌水、培養(yǎng)基和振蕩培無(wú)菌水、培養(yǎng)基和振蕩培養(yǎng)微生物養(yǎng)微生物等。l燒杯燒杯 用來(lái)配制培養(yǎng)基與各種溶液等。用來(lái)配制培養(yǎng)基與各種溶液等。l玻璃吸管玻璃吸管 (二)學(xué)習(xí)(二)學(xué)習(xí)玻璃器皿的洗滌方法玻璃器皿的洗滌方法1、新玻璃器皿的洗滌、新玻璃器皿的洗滌 在在2%的鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時(shí),用自來(lái)水沖洗干凈。的

6、鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時(shí),用自來(lái)水沖洗干凈。2、舊玻璃器皿的洗滌、舊玻璃器皿的洗滌(1)試管、培養(yǎng)皿、三角瓶試管、培養(yǎng)皿、三角瓶:洗衣粉和去污粉洗刷,自來(lái)水洗衣粉和去污粉洗刷,自來(lái)水沖洗沖洗 A 裝有固體培養(yǎng)基裝有固體培養(yǎng)基:刮掉,洗滌刮掉,洗滌 B 帶菌的器皿帶菌的器皿:2%來(lái)蘇爾或來(lái)蘇爾或0.25%新潔爾滅消毒液中浸泡新潔爾滅消毒液中浸泡24小時(shí)或煮沸小時(shí)或煮沸0.5小時(shí),然后洗滌小時(shí),然后洗滌 C 帶病原菌培養(yǎng)物的器皿帶病原菌培養(yǎng)物的器皿:先高壓蒸汽滅菌,倒去培養(yǎng)物先高壓蒸汽滅菌,倒去培養(yǎng)物洗凈后的洗凈后的試管試管倒置于試管筐內(nèi),倒置于試管筐內(nèi),三角瓶三角瓶倒置于洗滌架上,倒置于洗滌架上,培

7、養(yǎng)皿培養(yǎng)皿的的皿底和皿蓋分開(kāi),依次壓著皿邊排列倒扣在桌上皿底和皿蓋分開(kāi),依次壓著皿邊排列倒扣在桌上,晾干晾干. (2)玻璃吸管玻璃吸管:吸管尖端與裝在水龍頭上的橡皮管連接,反吸管尖端與裝在水龍頭上的橡皮管連接,反復(fù)沖洗復(fù)沖洗 a 吸過(guò)血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管吸過(guò)血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管:立立即投入盛有自來(lái)水的容器中浸泡,實(shí)驗(yàn)后集中沖洗。即投入盛有自來(lái)水的容器中浸泡,實(shí)驗(yàn)后集中沖洗。 b 塞有棉花的吸管塞有棉花的吸管:用水將棉花沖出,然后沖洗用水將棉花沖出,然后沖洗 c 吸過(guò)含有微生物培養(yǎng)物的吸管吸過(guò)含有微生物培養(yǎng)物的吸管:2%來(lái)蘇爾或來(lái)蘇爾或0.25%新潔新潔爾

8、滅消毒液中浸泡爾滅消毒液中浸泡24小時(shí)然后洗小時(shí)然后洗 d 吸管內(nèi)壁有油垢吸管內(nèi)壁有油垢:洗滌液中浸泡數(shù)小時(shí),再?zèng)_洗洗滌液中浸泡數(shù)小時(shí),再?zèng)_洗 洗滌后,若內(nèi)壁的水均勻分布成一洗滌后,若內(nèi)壁的水均勻分布成一薄層薄層,表示完全洗凈,表示完全洗凈,若還掛有水珠,則需用洗滌液浸泡數(shù)小時(shí),然后再用自若還掛有水珠,則需用洗滌液浸泡數(shù)小時(shí),然后再用自來(lái)水沖洗。來(lái)水沖洗。 l 培養(yǎng)皿的包扎培養(yǎng)皿的包扎:l 培養(yǎng)皿常用舊報(bào)紙緊培養(yǎng)皿常用舊報(bào)紙緊緊包裹,一包緊包裹,一包710套,包好后干熱或濕套,包好后干熱或濕熱滅菌。熱滅菌。l 也可用金屬筒包裝。也可用金屬筒包裝。(三)學(xué)習(xí)各種器皿的包扎(三)學(xué)習(xí)各種器皿的包扎

9、 吸管吸管的包扎的包扎:l 1 在上端約在上端約0.5cm處,塞入一小段處,塞入一小段1.5 cm長(zhǎng)的棉花長(zhǎng)的棉花(勿用脫脂棉),目的是避免將外界或嘴中雜菌吹入管內(nèi),(勿用脫脂棉),目的是避免將外界或嘴中雜菌吹入管內(nèi),或不慎將菌液吸出管外?;虿簧鲗⒕何龉芡?。l 2 45 cm寬的長(zhǎng)紙條寬的長(zhǎng)紙條.試管和三角瓶等的包扎:試管和三角瓶等的包扎: l 試管口和三角瓶瓶口塞棉花塞或硅膠塞;試管口和三角瓶瓶口塞棉花塞或硅膠塞;l 用二層報(bào)紙包扎好(如有牛皮紙,效果更好),進(jìn)行干熱用二層報(bào)紙包扎好(如有牛皮紙,效果更好),進(jìn)行干熱或濕熱滅菌?;驖駸釡缇?。l 試管較多時(shí),一般試管較多時(shí),一般7個(gè)或個(gè)或1

10、0個(gè)一組,再用雙層報(bào)紙包扎。個(gè)一組,再用雙層報(bào)紙包扎。 視頻:視頻:玻璃器皿玻璃器皿的包扎的包扎實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序(干熱滅菌的操作方法干熱滅菌的操作方法 )1裝入待滅菌物品裝入待滅菌物品 將包好的待滅菌物品放入電烘箱內(nèi),關(guān)好箱門(mén)。物品將包好的待滅菌物品放入電烘箱內(nèi),關(guān)好箱門(mén)。物品不要擺得不要擺得太擠,太擠,以免妨礙空氣流通;以免妨礙空氣流通;不要接觸電烘箱內(nèi)壁的鐵板不要接觸電烘箱內(nèi)壁的鐵板。2升溫升溫 接通電源,撥動(dòng)開(kāi)關(guān),接通電源,撥動(dòng)開(kāi)關(guān),打開(kāi)電烘箱排氣孔打開(kāi)電烘箱排氣孔,讓溫度逐漸上升。,讓溫度逐漸上升。當(dāng)溫度升至當(dāng)溫度升至100時(shí),關(guān)閉排氣孔。時(shí),關(guān)閉排氣孔。3恒溫恒溫 當(dāng)溫度升達(dá)到當(dāng)溫度升達(dá)到160170時(shí),保持此溫度時(shí),保持此溫度2h。4降溫降溫 切斷電源、自然降溫。切斷電源、自然降溫。5開(kāi)箱取物開(kāi)箱取物 待電烘箱內(nèi)溫度降到待電烘箱內(nèi)溫

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