2020高中生物專題2微生物的培養(yǎng)與應用課題1微生物的試驗室培養(yǎng)第1課時培養(yǎng)基和無菌技術(shù)教案新人教版選修1

1、第1課時培養(yǎng)基和無菌技術(shù)學習目標1.簡述培養(yǎng)基的種類、成分及配制原則。2.說出滅菌和消毒的概念及兩者的區(qū)別。3.簡述常用的消毒與滅菌方法。知識點一培養(yǎng)基知識梳理1 .培養(yǎng)基的概念人們按照彳生物對口01營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其口02生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。2 .培養(yǎng)基的分類液體培養(yǎng)基工配制成的皿液體狀態(tài)的基質(zhì)按物理性質(zhì)分類(加入凝固劑.如園瓊脂)VI固體培養(yǎng)基:配制成的畫同體狀態(tài)的基質(zhì)f天然培養(yǎng)基：化學成分還不清楚，用于按成分工業(yè)生產(chǎn)(2)來源分類1合成培養(yǎng)基：化學成分完全了解，常用于L微生物的分類、鑒定3 .培養(yǎng)基的營養(yǎng)組成(1)各種培養(yǎng)基一般都含有口01印碳源、內(nèi)3氮源和國4無機鹽。(2)

2、培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對口05出特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及口06氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加口07維生素,培養(yǎng)霉菌日需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時則需要提供口08無氧的條件。?可題思考1.加入培養(yǎng)基中的凝固劑(如瓊脂)能被微生物利用嗎？提示：不能。凝固劑只起到凝固的作用。4 .如何通過培養(yǎng)基的營養(yǎng)組成判斷微生物的同化類型？提示：自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基主要以無機營養(yǎng)為主；異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基主要以有機營養(yǎng)為主。5 .為什么各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都有水、無機鹽、碳源和氮源？提示：微生物的化學組成大體相同，主要由CHONP、S等

3、大量元素和Fe、MnCu、Zn、B、Mo等微量元素組成，這些元素最終來自外界環(huán)境中的各種有機物和無機物。典題分析題型一培養(yǎng)基的成分及種類分析例1下列關(guān)于培養(yǎng)基的說法，正確的是()A.任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水及生長因子B.培養(yǎng)基只有兩類：液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基C.固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D.配制培養(yǎng)基時要注意各種養(yǎng)分的濃度和比例解題分析不同微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求不同，如自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基不需要加碳源，自生固氮菌的培養(yǎng)基不需要加氮源，A錯誤；按不同的分類標準，培養(yǎng)基可有不同的種類，如培養(yǎng)基按物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基，按其所含成分可分為

4、合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基之類，B錯誤；固體培養(yǎng)基是在液體培養(yǎng)基里加入瓊脂等凝固劑配制而成的，但在固體培養(yǎng)基中加入水不能制成液體培養(yǎng)基，C錯誤；配制培養(yǎng)基時要注意各種養(yǎng)分的濃度和比例，D正確。答案D知識拓展(1戶養(yǎng)基的成分培養(yǎng)不同的微生物所需要的營養(yǎng)物質(zhì)可能不同，如自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基不需要加入碳源。對異養(yǎng)微生物來說，含C、H。N的化合物既是碳源，又是氮源和能源。微生物需要補充生長因子，是由于缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。(2如養(yǎng)基的種類培養(yǎng)基按物理性質(zhì)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基不加入瓊脂，呈液態(tài)，主要用于工業(yè)生產(chǎn)、連續(xù)培養(yǎng)；半固體培養(yǎng)基中加入少量瓊脂，容器

5、放倒不致流出，劇烈振動時破散。主要用于觀察微生物的運動；固體培養(yǎng)基加入的瓊脂較多，呈固態(tài)，主要用于微生物的鑒定、分離、計數(shù)等。(3)培養(yǎng)基的配制原則目的要明確：配制時應根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等確定配制的培養(yǎng)基種類，因為不同微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求不同。營養(yǎng)要協(xié)調(diào)：注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。pH要適宜：各種微生物適宜生長的pH范圍不同。知識點二無菌技術(shù)O知識梳理1 .目的：獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是口01防止外來雜菌的入侵。2 .主要內(nèi)容(1)對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行口01清潔和消毒。(2)將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行口02滅菌。(3)為避免周圍環(huán)境中微生物的

6、污染，實驗操作應在口03酒精燈火焰附近進行。(4)實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與口04周圍的物品相接觸。3 .主要方法一一消毒與滅菌滅菌概念使用較為由1溫和的物理或化學方法殺死物體由2包或內(nèi)部的部分微生物（不包括:03芽抱和抱子）使用曲4典型的理化因素殺死物體內(nèi)外05所有的彳生物（包括06芽抱和抱子）常用方法07煮沸消毒法、巴氏消毒法、口08化學藥劑消毒法、紫外線消毒法09灼燒火菌、干熱火菌、高壓蒸汽滅菌適用對象操作空間、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等?可題思考1.為什么常選用70%勺酒精作為消毒劑？提示：70%勺酒精殺菌效果最好，原因是濃度過高，會使菌體表面蛋白質(zhì)變性過快

7、而凝固成一層保護膜，酒精不能滲入其中；濃度過低，殺菌能力減弱。2 .進行無菌操作時，如何選擇消毒和滅菌？提示：考慮效果：滅菌的效果比消毒要好；考慮操作對象的承受能力：活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒的方法，而不能采用滅菌的方法。3 .什么是芽抱和抱子？提示：芽抱是某些細菌在其生長發(fā)育后期，在細胞內(nèi)形成的一個圓形的抗逆性休眠體；抱子是微生物產(chǎn)生的一種有繁殖或休眠作用的細胞。一般是單細胞，個體微小，能夠從不利環(huán)境條件中存活下來。典題分析題型二正確區(qū)分消毒與滅菌4 例2關(guān)于滅菌和消毒的下列說法不正確的是（）A.滅菌是指殺死環(huán)境中的所有微生物，包括芽抱和抱子B.滅菌和消毒實質(zhì)上是相同的C.接種環(huán)

8、用灼燒法滅菌D.常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌等解題分析滅菌與消毒的實質(zhì)是不同的。滅菌是指殺死一定環(huán)境中的所有微生物，包括芽抱和抱子，使用的是較為強烈的理化因素，常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌等，根據(jù)不同的材料選用不同的滅菌方法，如接種環(huán)的滅菌用灼燒法；消毒是指殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包括芽孑和抱子），使用的是較為溫和的物理或化學方法。答案B題后歸納（1）消毒與滅菌的共同點滅菌和消毒的目的都是防止外來雜菌的入侵，這是微生物培養(yǎng)的重要環(huán)節(jié)之一。（2）消毒與滅菌的區(qū)別從定義上區(qū)分：消毒與滅菌最大的區(qū)別是芽抱和抱子是否存活。從作用對象上區(qū)分消毒：在微生物

9、培養(yǎng)中對實驗操作的空間、操作者的衣物和手都要進行消毒處理。滅菌：主要適用于培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿和實驗用具的無菌處理。題型三如何選擇無菌操作技術(shù)例3培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種針、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌或消毒方法依次是（）化學消毒灼燒滅菌干熱滅菌紫外線消毒高壓蒸汽滅菌巴氏消毒法A.B.C.D.解題分析培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿能耐高溫且需要保持干燥，可用干熱滅菌；接種針可用灼燒滅菌達到迅速徹底的滅菌效果；實驗操作者的雙手可用化學藥劑如酒精進行消毒；空氣可用紫外線消毒；牛奶為不破壞其營養(yǎng)成分可采用巴氏消毒法。答案A題后歸納幾種常用滅菌和消毒方法的比較滅菌和消毒種類主要方法應用范圍煮沸消毒法1

10、00C煮沸56min家庭餐具等生活用品的消毒巴氏消毒法7075C煮30min或80C煮15min牛奶、啤酒、果酒和醬油等不宜進行局溫火菌的液體紫外線消毒法30W紫外燈照射30min接種室、接種箱、超凈工作臺化學藥物消毒法用體積分數(shù)為70%-75%勺酒精、碘酒涂抹，氯氣消毒水源等用于皮膚、傷口、動植物組織表面消毒和空氣、手術(shù)器械、塑料或玻璃器皿等的消毒續(xù)表火菌和消毒種類主要方法應用范圍灼燒火菌酒精燈火焰灼燒如接種環(huán)、接種針或其他金屬用具等，接種過程中的試管口或瓶口等干熱火菌干熱火菌箱160170C加熱12h玻璃器皿（如吸管、培養(yǎng)皿等）、金屬用具等高壓蒸汽火菌100kPa、121C維持1530mi

11、n培養(yǎng)基及多種器材、物品課堂小結(jié)常用種類：液體培養(yǎng)基和田固體培養(yǎng)基培養(yǎng)加_"I培養(yǎng)基成分：水、無機鹽、閱碳源、物室的知生驗養(yǎng)礎(chǔ)微實培基識場氮源、特殊營養(yǎng)物質(zhì)目的：獲得國純凈培養(yǎng)物_關(guān)鍵：防止隨1外來雜菌的入侵無菌_技術(shù)消毒：胭代沸消碎法、巴氏消盤法、/化學藥劑消法、方法紫外線消毒法J滅菌：質(zhì)I灼燒滅菌、F熱滅菌、質(zhì)，壓蒸汽滅菌當堂檢測一一查漏補缺鞏固提升1,獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是（）A.將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌B.用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)C.適宜條件下培養(yǎng)D.防止外來雜菌的污染答案D解析獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的污染，D正確。2 .不同培養(yǎng)基的具體配方不同

12、，但一般都含（）A.碳源、磷酸鹽和維生素B.氮源和維生素C.水、碳源、氮源和無機鹽D.碳元素、氧元素、氫元素、氮元素答案CpH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)解析培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽，此外還應考慮及C2等條件。3 .下列關(guān)于消毒和滅菌方法的選擇，對應錯誤的是（）A.培養(yǎng)基tWj壓蒸汽火菌B.牛奶一一煮沸消毒C.接種環(huán)一一灼燒滅菌D.實驗者雙手一一化學消毒答案B解析對牛奶應采用巴氏消毒法進行消毒。4 .高溫滅菌的原理是()A.每種微生物生長的最適溫度是一定的B.微生物對于高溫環(huán)境不適應C.高溫破壞了細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)，影響其生命活動D.高溫降低了環(huán)境中氧的濃度答案C解析蛋白質(zhì)是細胞表現(xiàn)生命活動的最重要物質(zhì)，是大分子化合物，具有復雜的空間結(jié)構(gòu)，高溫能使它們的空間結(jié)構(gòu)受到破壞而失去活性，C正確。5 .如下表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方，請回答：成分含量NaNO3gK2HPO1gKCl0.5gMgSO7H2O0.5gFeSO0.01g(CH2O)30gH2O定容至1000mL青霉素(抑制細菌的生長)0.1萬單位(1)按物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。(2)根據(jù)培養(yǎng)基原料，所培養(yǎng)微生物的同