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文檔簡介
1、多糖的研究方法及其現(xiàn)狀多糖的研究方法及其現(xiàn)狀活性多糖的研究活性多糖的研究 -正在形成中的熱點(diǎn)正在形成中的熱點(diǎn)2004.11.2004.11.生命的四大物質(zhì):生命的四大物質(zhì): 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)核酸核酸脂類脂類多糖多糖 六十年代以后六十年代以后, , 隨著隨著現(xiàn)代儀器現(xiàn)代儀器分析方法分析方法的飛速發(fā)展的飛速發(fā)展, ,使人們能成使人們能成功的分離純化和鑒定生物體內(nèi)功的分離純化和鑒定生物體內(nèi)微量微量活性物質(zhì)活性物質(zhì), , 從而對(duì)糖特別是多糖的從而對(duì)糖特別是多糖的認(rèn)識(shí)產(chǎn)生了飛躍。認(rèn)識(shí)產(chǎn)生了飛躍。 愈來愈多的研究發(fā)現(xiàn)愈來愈多的研究發(fā)現(xiàn), , 人的生命過程幾人的生命過程幾乎都與糖鏈有關(guān)乎都與糖鏈有關(guān): : 如如
2、 細(xì)胞間通訊細(xì)胞間通訊, , 識(shí)別和相互作用識(shí)別和相互作用 細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)和粘附細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)和粘附 病原與宿主細(xì)胞的作用病原與宿主細(xì)胞的作用 等等等等. . 這是因?yàn)檫@是因?yàn)樘擎湐y帶著生物信息糖鏈攜帶著生物信息. . 它在細(xì)它在細(xì)胞表面的分子識(shí)別過程中起著決定性作用胞表面的分子識(shí)別過程中起著決定性作用. . 血型血型 -紅血球表面糖鏈末端糖基的不同紅血球表面糖鏈末端糖基的不同 惡性腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞的不同惡性腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞的不同 -糖鏈的不同糖鏈的不同 19951995年年HirabayashiHirabayashi提出提出 “ “類似于基因密碼類似于基因密碼, , 可可能也存在能也存在多糖密碼
3、多糖密碼”的論點(diǎn)的論點(diǎn). .多糖的研究己愈來愈受到人們的關(guān)注多糖的研究己愈來愈受到人們的關(guān)注. . 國內(nèi)外正在形成國內(nèi)外正在形成熱點(diǎn)熱點(diǎn)生物細(xì)胞生物細(xì)胞 特征特征: : 繁殖繁殖( (復(fù)制復(fù)制) ) 凋亡凋亡 -平衡平衡 平衡破壞平衡破壞: : 細(xì)胞細(xì)胞過度過度增生增生-組織表組織表 面大體積堆積面大體積堆積( (腫瘤腫瘤)-)-增生增生 細(xì)胞基因突變細(xì)胞基因突變( (癌癌) )癌細(xì)胞源于正常細(xì)胞癌細(xì)胞源于正常細(xì)胞 找既抑制癌細(xì)胞又不找既抑制癌細(xì)胞又不傷正常細(xì)胞傷正常細(xì)胞-困難困難 多糖是一種免疫調(diào)節(jié)劑多糖是一種免疫調(diào)節(jié)劑 ( (激活機(jī)體免疫反應(yīng)激活機(jī)體免疫反應(yīng)) ) 但也有少數(shù)多糖具直接殺死
4、癌細(xì)胞作用但也有少數(shù)多糖具直接殺死癌細(xì)胞作用 或兩者俱存或兩者俱存- - 治療機(jī)體免疫功能受到嚴(yán)重?fù)p傷的治療機(jī)體免疫功能受到嚴(yán)重?fù)p傷的癌癥癌癥和和愛滋病愛滋病 - -治療多種免疫缺損疾病和某些細(xì)菌治療多種免疫缺損疾病和某些細(xì)菌, ,病病毒引起的疾病毒引起的疾病 多糖作為藥物的最大特點(diǎn)是毒副作用很小多糖作為藥物的最大特點(diǎn)是毒副作用很小 -多糖還具有明顯的抗病毒、抗感染、降多糖還具有明顯的抗病毒、抗感染、降血糖、降膽固醇、降血脂以及最近我們實(shí)驗(yàn)室血糖、降膽固醇、降血脂以及最近我們實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)的發(fā)現(xiàn)的刺激神經(jīng)細(xì)胞生長作用刺激神經(jīng)細(xì)胞生長作用徐徐, 馮教授馮教授: 抗心肌缺血作用抗心肌缺血作用但是但是
5、多糖的研究必竟起步較晚多糖的研究必竟起步較晚-各方面尚須進(jìn)行深入的研究各方面尚須進(jìn)行深入的研究-大量大量新的活性多糖新的活性多糖有待于研究與開發(fā)有待于研究與開發(fā)-作用機(jī)制有待于完善作用機(jī)制有待于完善 多糖的構(gòu)效關(guān)系的研究是尋找高活性多糖的構(gòu)效關(guān)系的研究是尋找高活性多糖及深入研究多糖作用機(jī)制的基礎(chǔ)多糖及深入研究多糖作用機(jī)制的基礎(chǔ)目前研究得較為深入:目前研究得較為深入:高等真菌高等真菌( (主要是蘑菇類主要是蘑菇類) )產(chǎn)生的產(chǎn)生的 -葡聚糖葡聚糖 某些植物產(chǎn)生的具抗補(bǔ)體作用的某些植物產(chǎn)生的具抗補(bǔ)體作用的 果膠類多糖果膠類多糖影響構(gòu)效關(guān)系研究影響構(gòu)效關(guān)系研究: :1) 1) 多糖的化學(xué)平面結(jié)構(gòu)測定
6、比較困難多糖的化學(xué)平面結(jié)構(gòu)測定比較困難, , 特特別是含有幾種糖殘基的雜多糖別是含有幾種糖殘基的雜多糖, , 至于決定多至于決定多糖活性的高級(jí)結(jié)構(gòu)糖活性的高級(jí)結(jié)構(gòu)( (三維結(jié)構(gòu)三維結(jié)構(gòu)) )測定更難測定更難. .因?yàn)橐驗(yàn)槎嗵鞘撬苄阅z狀物質(zhì)不能結(jié)晶多糖是水溶性膠狀物質(zhì)不能結(jié)晶, ,這樣限制了這樣限制了用通常用通常X-X-衍射方法去測定立體結(jié)構(gòu)衍射方法去測定立體結(jié)構(gòu). . 2) 2) 多糖的體內(nèi)藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究困難多糖的體內(nèi)藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究困難3) 3) 多糖在分子水平下與蛋白質(zhì)多糖在分子水平下與蛋白質(zhì), ,核酸等其核酸等其他分子相互作用的認(rèn)識(shí)還不清楚他分子相互作用的認(rèn)識(shí)還不清楚. . 由于
7、目由于目前有關(guān)多糖的藥理研究主要局限于觀察多前有關(guān)多糖的藥理研究主要局限于觀察多糖在體外或體內(nèi)的生物效應(yīng)糖在體外或體內(nèi)的生物效應(yīng), , 要達(dá)到分子要達(dá)到分子水平水平, ,細(xì)胞水平還需大量研究細(xì)胞水平還需大量研究. . 己有的實(shí)驗(yàn)證明影響多糖生物活性的主要己有的實(shí)驗(yàn)證明影響多糖生物活性的主要因素:因素: 分子量分子量, ,分枝度分枝度, ,高級(jí)結(jié)構(gòu)高級(jí)結(jié)構(gòu), ,溶解度溶解度, ,粘度粘度等等 多糖多糖-大分子大分子-分子內(nèi)的分子內(nèi)的糖苷鍵糖苷鍵有較強(qiáng)有較強(qiáng)的旋轉(zhuǎn)性的旋轉(zhuǎn)性 -決定了多糖的二級(jí)結(jié)構(gòu)決定了多糖的二級(jí)結(jié)構(gòu) 氫鍵氫鍵, ,范德華力范德華力, ,色散力色散力和和疏水性疏水性等非共等非共價(jià)作
8、用價(jià)作用 -決定了多糖的三級(jí)結(jié)構(gòu)決定了多糖的三級(jí)結(jié)構(gòu)蘑菇類產(chǎn)生具抗腫瘤作用的多糖蘑菇類產(chǎn)生具抗腫瘤作用的多糖: :分子量分子量 1010萬至萬至100100萬萬分枝度為分枝度為2:32:3至至1:51:5三股螺旋立體結(jié)構(gòu)的三股螺旋立體結(jié)構(gòu)的-葡聚糖葡聚糖 香菇多糖香菇多糖, ,云芝糖肽云芝糖肽, ,裂褶菌多糖裂褶菌多糖 -正式在臨床上應(yīng)用正式在臨床上應(yīng)用 證明在證明在提高機(jī)體免疫提高機(jī)體免疫功能上特別是功能上特別是腫瘤輔助治療腫瘤輔助治療中具有顯著作用中具有顯著作用-受到受到臨床醫(yī)生的青睞臨床醫(yī)生的青睞 但是但是, ,人們期待更有效的活性多糖人們期待更有效的活性多糖的問世的問世 特別是具有抗炎
9、作用特別是具有抗炎作用, ,抗病毒作用抗病毒作用, ,降降血糖作用血糖作用, ,刺激神經(jīng)細(xì)胞作用的多糖問世刺激神經(jīng)細(xì)胞作用的多糖問世目前主要可從二方面著手目前主要可從二方面著手: : 一是繼續(xù)從一是繼續(xù)從高等真菌高等真菌( (如靈芝如靈芝, ,豬苓豬苓, ,猴頭菇猴頭菇, ,冬蟲夏草冬蟲夏草, ,姬松茸姬松茸) )中尋找活性多中尋找活性多糖糖. . 同時(shí)重點(diǎn)從動(dòng)植物特別是從傳統(tǒng)的同時(shí)重點(diǎn)從動(dòng)植物特別是從傳統(tǒng)的中中草藥草藥及及海洋生物海洋生物(如海藻)(如海藻)中尋找高效的中尋找高效的活性多糖活性多糖. . 實(shí)驗(yàn)證明實(shí)驗(yàn)證明: : 許多屬去邪扶正的中藥許多屬去邪扶正的中藥-發(fā)揮主要作用的大多是發(fā)
10、揮主要作用的大多是多糖多糖成份成份-從中草藥及海洋生物中尋找有效的從中草藥及海洋生物中尋找有效的活性多糖活性多糖-方向方向 最新報(bào)道最新報(bào)道藻類中主要存在的硫酸酯多糖藻類中主要存在的硫酸酯多糖可以抑制可以抑制HIV-I表面糖蛋白表面糖蛋白gp120與免疫與免疫細(xì)胞表面細(xì)胞表面CD4受體的結(jié)合受體的結(jié)合抑制合胞體的形成抑制合胞體的形成特別適合制成一種外用型殺菌劑以防止特別適合制成一種外用型殺菌劑以防止Aids通過性交途徑的感染通過性交途徑的感染具有成本較低,水溶性好,不產(chǎn)生機(jī)體不良具有成本較低,水溶性好,不產(chǎn)生機(jī)體不良 我們認(rèn)為影響發(fā)現(xiàn)活性多糖的我們認(rèn)為影響發(fā)現(xiàn)活性多糖的關(guān)鍵關(guān)鍵: : 分離純化
11、方法及檢測手段分離純化方法及檢測手段, , 多糖是水溶性大多糖是水溶性大分子物質(zhì)分子物質(zhì), ,它的分離純化方法它的分離純化方法不同于一般小分子物不同于一般小分子物質(zhì)質(zhì), ,而且常用的而且常用的檢測手段又不靈敏檢測手段又不靈敏, ,所以常會(huì)將微量所以常會(huì)將微量高活性成份的多糖高活性成份的多糖作為雜質(zhì)而丟棄作為雜質(zhì)而丟棄. . 結(jié)構(gòu)改造結(jié)構(gòu)改造及及結(jié)構(gòu)修飾結(jié)構(gòu)修飾-結(jié)構(gòu)改造或結(jié)構(gòu)修飾可以提高或改變多結(jié)構(gòu)改造或結(jié)構(gòu)修飾可以提高或改變多糖的活性糖的活性. .如如 具有抗腫瘤作用但無抗愛滋病毒作具有抗腫瘤作用但無抗愛滋病毒作用的用的香菇多糖香菇多糖, ,如分子中引入如分子中引入 硫酸基硫酸基 后后, ,
12、則幾乎不再具抗腫瘤作用則幾乎不再具抗腫瘤作用, ,卻具顯著抗愛卻具顯著抗愛滋病毒作用滋病毒作用. . 同樣結(jié)構(gòu)修飾或改造也可以改變給同樣結(jié)構(gòu)修飾或改造也可以改變給藥途徑藥途徑, ,如高等真菌產(chǎn)生的具提高兔疫功如高等真菌產(chǎn)生的具提高兔疫功能的能的-葡聚糖葡聚糖, ,一般注射有效一般注射有效, ,口服無效口服無效. .但如果連接有少量但如果連接有少量 肽肽 成為多糖肽成為多糖肽, ,或連或連接一些其他糖殘基成為雜多糖接一些其他糖殘基成為雜多糖, ,則口服有則口服有效效. . 這是制作真菌來源的保健品中值得注意這是制作真菌來源的保健品中值得注意的問題的問題. .卻被許多人疏忽卻被許多人疏忽. .譬如
13、說市場上已有的譬如說市場上已有的香菇多糖保健品香菇多糖保健品, ,實(shí)質(zhì)上香菇多糖實(shí)質(zhì)上香菇多糖(Lentinan)(Lentinan)口服是口服是無效無效的的, ,那么為什么這些保健品確實(shí)還那么為什么這些保健品確實(shí)還是對(duì)人體有良好作用呢是對(duì)人體有良好作用呢? ? 這是因?yàn)橄愎教崛∥镞@是因?yàn)橄愎教崛∥镏胁粌H存在香菇多糖中不僅存在香菇多糖, , 還存在其他對(duì)人體有效還存在其他對(duì)人體有效的活性物質(zhì)的活性物質(zhì), ,而真正起作用的就是這些活性物而真正起作用的就是這些活性物質(zhì)質(zhì), ,可以這么說保健品中香菇多糖含量越高可以這么說保健品中香菇多糖含量越高, ,其其效果越差效果越差. .所以如果將香菇提取物命名
14、為香菇所以如果將香菇提取物命名為香菇多糖保健品是不恰當(dāng)?shù)亩嗵潜=∑肥遣磺‘?dāng)?shù)? . 目前對(duì)于多糖進(jìn)行目前對(duì)于多糖進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造結(jié)構(gòu)改造或或修飾修飾常用的方法常用的方法: :過碘酸鹽氧化過碘酸鹽氧化 SmithSmith降解降解 部分水解部分水解 衍生化衍生化 硫酸化硫酸化, ,羧甲基化羧甲基化, ,羧乙基化羧乙基化, ,磷酸化磷酸化, ,棕櫚?;貦磅;?多糖的多糖的羧甲基化羧甲基化可以提高多糖的水溶可以提高多糖的水溶性性, ,一般水溶性提高其抗腫瘤活性也提高一般水溶性提高其抗腫瘤活性也提高 多糖中引入多糖中引入硫酸基硫酸基一般均可顯著提高一般均可顯著提高其抗愛滋病毒的活性其抗愛滋病毒的活性,
15、,且其活性隨主鏈中的且其活性隨主鏈中的氨基糖及分枝度的增加而增加氨基糖及分枝度的增加而增加, ,但隨主鏈中但隨主鏈中去氧已糖及分枝度的增加而減少去氧已糖及分枝度的增加而減少 從從高等真菌高等真菌中獲得的中獲得的-葡聚糖葡聚糖大多具明大多具明顯的免疫活性顯的免疫活性, ,但它們?cè)谙纼?nèi)難以被腸道但它們?cè)谙纼?nèi)難以被腸道壁直接吸收而進(jìn)入血液壁直接吸收而進(jìn)入血液, ,所以必須通過注射才所以必須通過注射才能發(fā)揮作用能發(fā)揮作用. .如果進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾如果進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾, ,使其能被消使其能被消化道吸收化道吸收, ,變注射為口服變注射為口服, ,則將大大簡化給藥則將大大簡化給藥途徑途徑. . 從從植物植物
16、及及海藻海藻中獲得的活性多糖一般是中獲得的活性多糖一般是雜多糖雜多糖-它們大多口服也有效它們大多口服也有效. .-植物及海藻來源的活性多糖可以植物及海藻來源的活性多糖可以作為保健品的優(yōu)越之處作為保健品的優(yōu)越之處 多糖是親水性大分子多糖是親水性大分子, ,難以透過由脂質(zhì)難以透過由脂質(zhì)構(gòu)成的細(xì)胞膜構(gòu)成的細(xì)胞膜, ,所以口服有效常受到質(zhì)疑所以口服有效常受到質(zhì)疑. .有人認(rèn)為多糖主要與腸道細(xì)胞表面的相應(yīng)有人認(rèn)為多糖主要與腸道細(xì)胞表面的相應(yīng)受體分子起作用受體分子起作用, ,或者通過胞飲內(nèi)吞作用或者通過胞飲內(nèi)吞作用(pinocytosis)(pinocytosis)由消化道進(jìn)入血液由消化道進(jìn)入血液, ,然
17、后刺然后刺激人體免疫細(xì)胞的成熟激人體免疫細(xì)胞的成熟, ,分化和繁殖分化和繁殖, ,誘導(dǎo)誘導(dǎo)專一性細(xì)胞因子的產(chǎn)生與激活專一性細(xì)胞因子的產(chǎn)生與激活( (所謂多糖是所謂多糖是多細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑多細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑),),結(jié)果由這些免疫細(xì)胞結(jié)果由這些免疫細(xì)胞去吞噬或殺死腫瘤細(xì)胞或阻斷細(xì)菌去吞噬或殺死腫瘤細(xì)胞或阻斷細(xì)菌, ,病毒的病毒的吸附或繁殖吸附或繁殖. . 有人認(rèn)為有人認(rèn)為-葡聚糖是一種葡聚糖是一種融合誘融合誘導(dǎo)導(dǎo)劑劑, ,它能誘導(dǎo)免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞的它能誘導(dǎo)免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞的融合融合, ,從而使腫瘤細(xì)胞消失從而使腫瘤細(xì)胞消失. .上述這些上述這些作用機(jī)制的理論有的雖被初步實(shí)驗(yàn)證作用機(jī)制的理論有的雖被
18、初步實(shí)驗(yàn)證實(shí)實(shí), ,有的卻是推測有的卻是推測, ,有待人們?nèi)ミM(jìn)一步有待人們?nèi)ミM(jìn)一步完善完善. . 由此可見由此可見, ,至今活性多糖的研究至今活性多糖的研究尚屬初級(jí)階段尚屬初級(jí)階段. .多糖的應(yīng)用可分為兩個(gè)方面多糖的應(yīng)用可分為兩個(gè)方面一類是利用多糖的獨(dú)特理化性質(zhì),一類是利用多糖的獨(dú)特理化性質(zhì),如易形成凝膠、高滲透壓、高粘度和吸如易形成凝膠、高滲透壓、高粘度和吸水性,制備醫(yī)藥材料、藥物緩釋劑、血水性,制備醫(yī)藥材料、藥物緩釋劑、血漿代用品等漿代用品等另一類利用多糖的抗原性、抗腫瘤、另一類利用多糖的抗原性、抗腫瘤、降血糖、促進(jìn)免疫功能等生物功能或活降血糖、促進(jìn)免疫功能等生物功能或活性制備疫苗或新藥。
19、性制備疫苗或新藥。至今從多糖中尋找至今從多糖中尋找具有抗愛滋病的新藥已引起人們很大的具有抗愛滋病的新藥已引起人們很大的興趣。興趣。 美國學(xué)者美國學(xué)者M(jìn).YalpaniM.Yalpani認(rèn)為認(rèn)為: :“至今多糖在生物技術(shù)領(lǐng)域仍是一個(gè)至今多糖在生物技術(shù)領(lǐng)域仍是一個(gè)沉睡的巨人沉睡的巨人, ,有待于大家去喚醒有待于大家去喚醒.”.”可以預(yù)言可以預(yù)言: : 活性多糖的研究與開發(fā)將成為生命活性多糖的研究與開發(fā)將成為生命科學(xué)中的重要課題科學(xué)中的重要課題. . 多糖多糖多糖是由十個(gè)以上單糖通過糖苷鍵以共價(jià)鍵形式多糖是由十個(gè)以上單糖通過糖苷鍵以共價(jià)鍵形式結(jié)合起來的聚糖結(jié)合起來的聚糖(Polysaccharide
20、或或glycan)可用可用(C6H10O5)n表示,其中表示,其中n10自然界很少存在自然界很少存在n為為10-30的多糖的多糖勻多糖勻多糖只有一種類型的單糖組成的多糖只有一種類型的單糖組成的多糖雜多糖雜多糖幾種類型的單糖組成的多糖幾種類型的單糖組成的多糖 表表1記錄了來自天然界的一些重要多糖。記錄了來自天然界的一些重要多糖。天然界存在的單糖種類很多天然界存在的單糖種類很多,但組成多糖的單糖大致由表但組成多糖的單糖大致由表2 所示的一些單糖組成。所示的一些單糖組成。取代線狀型取代線狀型直線型直線型分枝型分枝型環(huán)狀型環(huán)狀型多糖結(jié)構(gòu)多糖結(jié)構(gòu) 表1. 幾種天然存在的多糖 表表2. 構(gòu)成多糖的通常的單
21、糖構(gòu)成多糖的通常的單糖 多糖研究與開發(fā)的關(guān)鍵多糖研究與開發(fā)的關(guān)鍵 多糖多糖均一組分均一組分 深入研究結(jié)構(gòu)分析、構(gòu)效關(guān)系深入研究結(jié)構(gòu)分析、構(gòu)效關(guān)系多糖的多糖的純度標(biāo)準(zhǔn)純度標(biāo)準(zhǔn):不能用通常小分子化合物的純度標(biāo)準(zhǔn)來衡量不能用通常小分子化合物的純度標(biāo)準(zhǔn)來衡量多糖純品微觀是不均一的,純度只代表同一種多糖純品微觀是不均一的,純度只代表同一種多糖的相似鏈長的平均配布多糖的相似鏈長的平均配布 通常符合下列標(biāo)準(zhǔn)即可肯定為均一多糖:通常符合下列標(biāo)準(zhǔn)即可肯定為均一多糖:1.在重復(fù)的純化過程中其單糖的組成及摩爾比恒在重復(fù)的純化過程中其單糖的組成及摩爾比恒定或其它理化性質(zhì)不變化。如分步沉淀定或其它理化性質(zhì)不變化。如分步
22、沉淀(如(如30%,50%乙醇沉淀)得到的兩組分其乙醇沉淀)得到的兩組分其比旋度或單糖摩爾比不變。比旋度或單糖摩爾比不變。2.超離心后,具有相同沉降速率,即具有一個(gè)對(duì)超離心后,具有相同沉降速率,即具有一個(gè)對(duì)稱峰。稱峰。3.高效凝膠層析(高效凝膠層析(HPGPC)得到的一個(gè)對(duì)稱)得到的一個(gè)對(duì)稱峰峰 。 HPGPC目前檢測多糖均一性最常用也是誤差最小的一種目前檢測多糖均一性最常用也是誤差最小的一種方法方法多糖專用柱多糖專用柱(不是通常的反相柱及氨基柱)(不是通常的反相柱及氨基柱)檢測儀(示差檢測器或激光光散射儀)檢測儀(示差檢測器或激光光散射儀)過去常用常壓凝膠層析過去常用常壓凝膠層析/分步收集分
23、步收集/硫酸硫酸-苯酚法苯酚法檢測檢測誤差很大。誤差很大。一一.多糖的分離提取方法多糖的分離提取方法通過分離純化不使原有的多糖性質(zhì)改變通過分離純化不使原有的多糖性質(zhì)改變(如結(jié)構(gòu)改變、降解等)。(如結(jié)構(gòu)改變、降解等)。存在于動(dòng)植物細(xì)胞壁外存在于動(dòng)植物細(xì)胞壁外胞外多糖胞外多糖存在于細(xì)胞壁內(nèi)存在于細(xì)胞壁內(nèi)胞內(nèi)多糖(大多數(shù)多糖)胞內(nèi)多糖(大多數(shù)多糖)超聲波氣流粉碎技術(shù)超聲波氣流粉碎技術(shù)將動(dòng)植物或真菌孢子的細(xì)胞壁破裂,大大提高了將動(dòng)植物或真菌孢子的細(xì)胞壁破裂,大大提高了多糖的提取效率多糖的提取效率動(dòng)植物的細(xì)胞大多由脂質(zhì)包圍,用機(jī)械粉碎后還動(dòng)植物的細(xì)胞大多由脂質(zhì)包圍,用機(jī)械粉碎后還必須脫脂(沙氏提取器,乙
24、醇回流)必須脫脂(沙氏提取器,乙醇回流)脫脂后就可以進(jìn)行提取脫脂后就可以進(jìn)行提取第一步第一步動(dòng)植物體的粉碎動(dòng)植物體的粉碎A. 熱水提取法熱水提取法:根據(jù)大多數(shù)多糖在熱水中溶解度較大且穩(wěn)根據(jù)大多數(shù)多糖在熱水中溶解度較大且穩(wěn)定的性質(zhì)進(jìn)行提取定的性質(zhì)進(jìn)行提取這種方法提取多糖這種方法提取多糖的破壞最小。的破壞最小。即經(jīng)過上述方法處理過的植物用沸水提取即經(jīng)過上述方法處理過的植物用沸水提取2-6小時(shí)。提取小時(shí)。提取液如粘度不大,則可采用過濾法過濾去殘?jiān)瑢?duì)于粘度大液如粘度不大,則可采用過濾法過濾去殘?jiān)?,?duì)于粘度大的提取液則必須采用離心法去殘?jiān)?,即得到多糖提取液或的提取液則必須采用離心法去殘?jiān)吹玫蕉嗵翘?/p>
25、取液或上清液。有時(shí)可在熱水中加入上清液。有時(shí)可在熱水中加入2-10%尿素,使多糖的構(gòu)型尿素,使多糖的構(gòu)型改變(這種改變是可逆的),粘度降低,增加其在熱水中改變(這種改變是可逆的),粘度降低,增加其在熱水中的溶解度。的溶解度。 多糖的提取常用四種方法:多糖的提取常用四種方法:B. 稀堿水溶液提取法稀堿水溶液提取法:酸性多糖或分子量較大的多糖在熱水中溶解酸性多糖或分子量較大的多糖在熱水中溶解度不大,所以常用度不大,所以常用5-15% NaOH或或Na2CO3水水溶液提取。溶液提取。不過用稀堿溶液提取時(shí),溫度必須保持在不過用稀堿溶液提取時(shí),溫度必須保持在10以下,以下,否則多糖容易發(fā)生降解反應(yīng)。通常在冷卻的條件下否則多糖容易發(fā)生降解反應(yīng)。通常在冷卻的條件下(4),放置),放置6-8小時(shí),然后過濾或離心,濾液用小時(shí),然后過濾或離心,濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)稀鹽酸調(diào)節(jié)pH至中性即得堿性多糖提
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