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1、南昌大學(xué) 20072008學(xué)年第二學(xué)期期末考試試卷 試卷編號: ( B )卷課程編號: 課程名稱: 生物檢驗技術(shù) 考試形式: 閉卷 適用班級: 姓名: 學(xué)號: 班級: 學(xué)院: 生命科學(xué)學(xué)院 專業(yè): 考試日期: 題號一二三四五六七八九十總分累分人 簽名題分303040 100得分考生注意事項:1、本試卷共 4頁,請查看試卷中是否有缺頁或破損。如有立即舉手報告以便更換。 2、考試結(jié)束后,考生不得將試卷、答題紙和草稿紙帶出考場。一、 填空題(每空 1 分,共 30 分) 得分評閱人 1、 采集的生物樣品要具有典型性、代表性、適時性。適時性是指采集樣品時要注意發(fā)育階段和及時處理。2、 固定的目的在于保
2、存組織內(nèi)細胞原有的結(jié)構(gòu)和形態(tài),使其與生活時相似。3、 掃描隧道顯微鏡在成像過程中探針與樣品表面之間的距離小于1nm,電子云互相重疊,在這兩物體間施加2mv2v的電壓,電子就可因量子隧道效應(yīng)由針尖(或樣品)轉(zhuǎn)移到樣品(或針尖),從而在針尖和樣品間形成隧道電流。4、 分光光度法的定量方法有標(biāo)準(zhǔn)曲線法、對比法、標(biāo)準(zhǔn)增量法、多組分混合物分析法、雙波長分光光度法。5、 按照層析的原理分,層析分為吸附層析、分配層析、離子交換層析、凝膠層析、親和層析等。6、 聚丙烯酰胺凝膠是丙烯酰胺與甲叉雙丙烯酰胺交聯(lián)而成。改變丙烯酰胺的濃度,就可以得到不同交聯(lián)度的產(chǎn)物。7、 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在
3、這種測定方法中有3種必要的試劑:固相的抗原或抗體;酶標(biāo)記的抗原或抗體;酶作用的底物。8、 SDS-PAGE是在要走電泳的樣品中加入含有SDS和-巰基乙醇的樣品處理液。9、 檢測蛋白質(zhì)最常用的染色劑是考馬斯亮藍R-250,糖蛋白靈敏的檢測方法是凝膠印跡后用凝集素。10、 基因芯片包括三個典型類型:DNA芯片、cDNA芯片和Oligo芯片。二、 名詞解釋題(每題 3 分,共 30 分) 得分評閱人 1、 分光光度法或分光光度技術(shù):利用紫外光、可見光、紅外光和激光等測定物質(zhì)的吸收光譜,利用此吸收光譜對物質(zhì)進行定性定量分析和物質(zhì)結(jié)構(gòu)分析的方法,稱為分光光度法或分光光度技術(shù),使用的儀器稱為分光光度計。2
4、、 保留時間:從進樣開始到某組分色譜峰頂(濃度極大點)的時間,即組分在色譜柱中的停留時間或組分流經(jīng)色譜柱所需要的時間。3、 排阻極限:是指不能進入凝膠顆粒孔穴內(nèi)部的最小分子的分子量。所有大于排阻極限的分子都不能進入凝膠顆粒內(nèi)部,直接從凝膠顆粒外流出,所以它們同時被最先洗脫出來。4、 酶循環(huán)分析法:是利用在專一性上相互關(guān)聯(lián)的兩種酶反應(yīng)進行組合、循環(huán),使微量的酶活性或其它物質(zhì)增幅放大,以達到定量測定目的的分析方法。5、 抑制性扣除雜交(SSH):該方法運用了雜交二級動力學(xué)原理,即豐度高的單鏈cDNA在退火時產(chǎn)生同源雜交速度快于豐度低的單鏈cDNA,從而使原來在豐度上有差別的單鏈cDNA相對含量達到
5、基本一致。6、 分配系數(shù):是指在一定的條件下,某種組分在固定相和流動相中含量(濃度)的比值,常用K來表示。分配系數(shù)與組分性質(zhì)、固定相性質(zhì)、流動相性質(zhì)及溫度有關(guān)。7、 等電聚焦技術(shù):是一種根據(jù)樣品的等電點(pI)不同而使它們在pH梯度中相互分離的一種電泳技術(shù)。8、 正相色譜:是指固定相的極性高于流動相的極性,因此,在這種層析過程中非極性分子或極性小的分子比極性大的分子移動的速度快,先從柱中流出來。9、 不對稱PCR:是用不等量的一對引物,PCR擴增后產(chǎn)生大量的單鏈DNA(ssDNA)。這對引物分別稱為非限制引物與限制性引物,其比例一般為501001。10、 引物的延伸:在TaqDNA聚合酶的作用
6、下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA 鏈互補的半保留復(fù)制鏈。三、 問答題(每題 10 分,共 40 分) 得分評閱人 1、 利用離子交換樹脂制作純水的一般方法是怎樣的?聚苯乙烯樹脂廣泛的應(yīng)用于高純水的制備、硬水軟化以及污水處理等方面。先將水依次通過H+ 型強陽離子交換劑,去除各種陽離子及與陽離子交換劑吸附的雜質(zhì);然后通過OH- 型強陰離子交換劑,去除各種陰離子及與陰離子交換劑吸附的雜質(zhì),即可得到純水。再通過弱型陽離子和陰離子交換劑進一步純化,就可以得到純度較高的純水。2、 免疫熒光顯微技術(shù)的實驗類型有哪些?免疫熒光顯微技術(shù)的實驗類型有直接
7、法(用特異熒光抗體直接滴加于標(biāo)本上,使之與抗原發(fā)生特異性結(jié)合。)、間接法(本法有兩種抗體相繼作用,第一抗體為針對抗原的特異抗體,第二抗體(熒光抗體)為針對第一抗體的抗抗體。)、補體結(jié)合法(在間接法的第一步抗原抗體反應(yīng)時,加入補體(多用豚鼠補體),再用熒光標(biāo)記的抗補體抗體進行示蹤。)、標(biāo)記法標(biāo)本法(用FITC及羅丹明分別標(biāo)記不同的抗體,而對同一標(biāo)本作熒光染色。在有兩種相應(yīng)抗原存在時,可同時見到橙紅和黃綠兩種熒光色澤。)。3、 細胞培養(yǎng)的傳代過程中有哪些注意事項?傳代時注意事項:(1)細胞生長密度不高時,或未能達到覆蓋整個瓶底時不能急于傳代;(2)原代培養(yǎng)的貼壁細胞多混雜細胞,形態(tài)各異,用胰蛋白酶消化時要掌握好消化時間;(3)吹打已消化的細胞要輕巧,既不能聽到有明顯的吹打聲,又不能有大量泡沫在懸液中形成,以盡可能減少對細胞的機械損傷;(4)首次傳代時細胞接種數(shù)量要多一些,以利于細胞的生存和繁殖,如果消化分離的細胞懸液有組織塊,也一并傳入到培養(yǎng)瓶,盡量減少細胞損失;(5)首次傳代培養(yǎng)時的pH不能高,寧可偏低一些。此外,小牛血清濃度可適當(dāng)加大。4、 PCR引物設(shè)計的原則有哪些?引物的特異性;避開產(chǎn)物的二級結(jié)構(gòu)區(qū);長度;G+C含量;堿基礎(chǔ)隨機分布;引物自身;引物之間;引物的3端不修飾;引物的5端可修飾;密碼子的簡并。引物應(yīng)用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設(shè)計并具有特異性。產(chǎn)物
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