羅濤的答辯報(bào)告PPT精選文檔

1、 學(xué)校： 綿 陽 師 范 學(xué) 院 年級(jí)： 2006 級(jí) 1 班 專業(yè)： 化 學(xué) 姓名： 羅 濤 學(xué)號(hào)： 0610410160 導(dǎo)師： 胡 曉 黎 副研究員 血清白蛋白是血漿中最為豐富的蛋白質(zhì)，不僅對(duì)維持透壓起重要作用，而且能與進(jìn)入血液中的大部分內(nèi)源性和外源性物質(zhì)如藥物等進(jìn)行可逆的結(jié)合從而起到在體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)的作用。藥物與白蛋白的親和力大小也影響到藥物在體內(nèi)的分布、清理以及通過改變血液或組織中游離藥物濃度來影響藥效。因此，研究藥物與血清白蛋白的結(jié)合作用對(duì)理解藥物的作用機(jī)制具有重要意義。 本文研究了蘆丁與牛血清白蛋白(BSA)的相互作用，對(duì)于闡明藥物的運(yùn)輸過程以及其在體內(nèi)的作用機(jī)制具有一定的意義。 關(guān)于

2、研究蘆丁與血清白蛋白作用的研究已有報(bào)道，本文在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步用熱力學(xué)法研究蘆丁與血清白蛋白的作用機(jī)制，得出了蘆丁與血清白蛋白的結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點(diǎn)數(shù)和結(jié)合過程的基本熱力學(xué)參數(shù)，為蘆丁在體內(nèi)的儲(chǔ)存、運(yùn)輸、作用機(jī)理及臨 床 試 驗(yàn) 提 供 有 用 的 信 息 。實(shí)驗(yàn)儀器： RF-4500PC熒光光譜儀； 微量可調(diào)移液器； SWQ-Ic數(shù)字控溫儀等實(shí)驗(yàn)藥品： 一定濃度蘆丁的乙醇溶液 1.010-4molL-1牛血清白蛋白 pH 7.4 的Tris緩沖溶液等 熒光測量： 嚴(yán)格按照RF-4500PC熒光光譜儀規(guī)范操作步驟進(jìn)行熒光測量 連續(xù)加入法分別對(duì)290K， 298K時(shí)牛血清白蛋白和不同濃度蘆丁混合溶

3、液的進(jìn)行熒光測量 300320340360380400420440460020040060080010001200140016001800FluorescenceWavelength/nm08 圖 1數(shù)據(jù)處理與結(jié)果討論 ： 290K時(shí)熒光光譜圖：序號(hào) C(蘆丁)/molL-1 F F0- F (F0-F)/F 1015020020.0541010-3 141785.000.0600030.108210-3 1176326.00.277140.162310-3 1165337.00.289350.216410-3 930.3571.70.614760.270510-3 782.6719.40.9

4、19270.324610-3 296.512054.071300350400450020040060080010001200140016001800FluorescenceWavelength/nm09 298K時(shí)熒光光譜圖 圖 2序號(hào) C(蘆丁)/molL-1 F F0- F (F0-F)/F 1017000020.054110-3 1232468.00.379830.108210-3 1199501.00.417840.162310-3 1176524.00.445650.216410-3 1146554.00.483460.270510-3 1126574.00.509870.32461

5、0-3 1102598.00.54270.100.150.200.250.300.350.00.20.40.60.81.0y=4.38423x-0.37894(Fo-F)/FC/10-3molL-1根據(jù)Stern-Volmer方程繪制290K時(shí)的(F0-F)/FQ曲線 圖 30.050.100.150.200.250.300.350.300.350.400.450.500.55y=0.70323x+0.2932(Fo-F)/FC/10-3molL-1 圖 4溫度/K Stern-Volmer方程 Stern-Volmer猝滅常數(shù)Ka 290y=4.384x-0.3789 4.384103 29

6、8y=0.7032x+0.2932 0.7032103 由該表可看出：隨溫度升高直線斜率減小，表明猝滅機(jī)理為靜態(tài)猝滅 根據(jù)不同溫度下相互作用所得的結(jié)合常數(shù)，利用公式 lnK2/K1=H(1/T1- 1/T2) /R G=-RTlnKa G=H-TS 從而計(jì)算出反應(yīng)的焓變(H)、熵變(S)和吉布斯自由能變(G) 等反應(yīng)的熱力學(xué)參數(shù)的值。溫度/KKaLmol-1 GkJmol-1 HkJmol-1 SJmol-1K-1 290 4.384103 -20.35 -26.54 -21.17 2980.703103 -16.24 -26.54 -34.56 根據(jù)ROSS理論： H0 00 疏水作用力 H0 靜電作用力 H0 S0 范德華力或氫鍵作用力 所以，蘆丁與牛血清白蛋白之間的相互作用力為范德華力或氫鍵作用力。 1）蘆丁對(duì)牛血清白蛋白的熒光存在猝滅作用。 2）試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)溫度對(duì)蘆丁與牛血清白蛋白的熒光滅反應(yīng)的影響較大，兩者在生理?xiàng)l件下猝滅機(jī)理為靜態(tài)猝滅。 3）計(jì)算了兩個(gè)實(shí)驗(yàn)溫度下蘆丁與