腸道原蟲檢查方法與形態(tài)鑒別

1、腸道原蟲檢查方法與形態(tài)鑒別第一頁，共52頁常見的腸道原蟲主要種類阿米巴溶組織內(nèi)阿米巴原蟲迪斯帕內(nèi)阿米巴結(jié)腸內(nèi)阿米巴哈氏內(nèi)阿米巴布氏嗜碘阿米巴微小內(nèi)蜒阿米巴波列基內(nèi)（波氏）阿米巴鞭毛蟲藍氏賈第鞭毛蟲脆弱雙核阿米巴人毛滴蟲孢子蟲隱孢子蟲人芽囊原蟲纖毛蟲結(jié)腸小袋纖毛蟲常見的腸道原蟲主要種類第二頁，共52頁 一、檢查方法一、檢查方法 常用的有常用的有生理鹽水直接涂片、碘液染色生理鹽水直接涂片、碘液染色和鐵蘇和鐵蘇木素染色、三色酸染色法、固定染色、抗酸染色木素染色、三色酸染色法、固定染色、抗酸染色法及培養(yǎng)法等。法及培養(yǎng)法等。 （一）實驗器材（一）實驗器材 顯微鏡（顯微鏡（10104040）、）、 顯微鏡

2、測微尺、玻顯微鏡測微尺、玻片、蓋玻片、竹簽片、蓋玻片、竹簽 、 記號筆等。記號筆等。 第三頁，共52頁（二）實驗試劑（二）實驗試劑 1 1、0.85%0.85%鹽水鹽水 NaCl 0.85g NaCl 0.85g 蒸餾水加至蒸餾水加至100ml100ml 2 2、盧戈氏碘液、盧戈氏碘液 碘化鉀碘化鉀6.0g, 6.0g, 碘碘4.0g 4.0g 蒸餾水至蒸餾水至100ml100ml （先用（先用30ml30ml左右蒸餾水溶解碘化鉀，再加入碘混勻左右蒸餾水溶解碘化鉀，再加入碘混勻溶解后加蒸餾水至溶解后加蒸餾水至100ml100ml，充分混勻后儲存于棕色瓶，充分混勻后儲存于棕色瓶中）中） 第四頁，

3、共52頁（三）操作步（三）操作步 u直接涂片法直接涂片法（用于滋養(yǎng)體檢測（用于滋養(yǎng)體檢測）l標本采集自然排出、無尿液摻混的新鮮糞便（注意保溫);l取預(yù)溫潔凈載物玻片一張，加滴37預(yù)溫的生理鹽水1滴2滴;l在保溫條件下，用竹簽挑取糞便標本可疑部分（如有粘液、血液應(yīng)盡可能采取粘液、血液部分），在鹽水中涂抹成直徑為1cm糞便薄膜，厚度以透過糞便薄膜能看清字為宜;l蓋上蓋玻片，置顯微鏡下觀察有無活動的滋養(yǎng)體.第五頁，共52頁u碘液玻片法碘液玻片法（用于包囊檢測）（用于包囊檢測）l涂片時用碘液代替生理鹽水，制法及注意事項同直接涂片法;l蓋上蓋玻片，顯微鏡下觀察包囊。 注意事項l涂片的厚度以看清報紙上的字

4、跡為度，太薄易漏查，太厚難以觀察;l因為蟲體大小在鑒定上是重要的依據(jù)，因此顯微鏡必須裝備有目鏡測微器。第六頁，共52頁二、病原形態(tài)鑒別二、病原形態(tài)鑒別 原蟲是由單一細胞構(gòu)成，屬于單細胞真核動物，它所有的生命活動都是在細胞內(nèi)完成的。（一）基本結(jié)構(gòu)（一）基本結(jié)構(gòu)主要有表膜、細胞質(zhì)和細胞核 1、表膜：包在蟲體表面，可保持蟲體的完整性，并參與蟲體攝食、排泄、感覺、運動等生理活動，具有很強的抗原性。 第七頁，共52頁2、細胞質(zhì)細胞質(zhì)： 多數(shù)原蟲分內(nèi)質(zhì)與外質(zhì)兩部分（1 1）內(nèi)質(zhì)）內(nèi)質(zhì)：呈細顆粒狀，占細胞質(zhì)的大部分，內(nèi)含細胞核、食物泡、伸縮泡等。（2 2）外質(zhì)）外質(zhì)：分布在蟲體表層，透明或有微細顆粒，運動細

5、胞器是由外質(zhì)形成。偽足偽足：是肉足亞門原蟲所特有的臨時性運動器，為外質(zhì)的暫時性突出部分，常見為葉狀，偶可見樹根狀或網(wǎng)狀。鞭毛鞭毛：是鞭毛蟲綱原蟲的運動細胞器官，為外質(zhì)底下的毛基體發(fā)出的細胞質(zhì)絲狀延伸部分，鞭毛數(shù)目因蟲種而異。纖毛纖毛：是纖毛蟲綱原蟲的運動細胞器，結(jié)構(gòu)與鞭毛基本相似，也是從基體發(fā)出，但數(shù)量多，短而尖細。波動膜波動膜：是毛滴蟲的運動細胞器。 第八頁，共52頁3、細胞核細胞核細胞核在內(nèi)質(zhì)中，與原蟲的生長、繁殖有關(guān)，是原蟲分類鑒別的重要依據(jù)。分兩種類型：l泡狀核：圓、橢圓或相類似型狀。核染色質(zhì)顆粒量少，分布不均，在堿性染料下著色很淺，呈現(xiàn)為泡狀核。阿米巴、鞭毛蟲及纖毛蟲的小核均屬此型。

6、l實質(zhì)核：形狀多樣，常見有橢圓形、腎形或馬蹄形，核染色質(zhì)顆粒量多。纖毛蟲的大核屬此型。第九頁，共52頁 阿米巴滋養(yǎng)體示意圖阿米巴滋養(yǎng)體示意圖第十頁，共52頁 內(nèi)質(zhì)內(nèi)質(zhì)外質(zhì)外質(zhì)內(nèi)外質(zhì)不明顯，僅在偽足內(nèi)外質(zhì)不明顯，僅在偽足伸出時，才可可見外質(zhì)伸出時，才可可見外質(zhì)第十一頁，共52頁 阿米巴包囊示意圖阿米巴包囊示意圖第十二頁，共52頁 纖毛蟲滋養(yǎng)體示意圖纖毛蟲滋養(yǎng)體示意圖腎形，核染腎形，核染色質(zhì)顆粒多色質(zhì)顆粒多第十三頁，共52頁 鞭毛蟲滋養(yǎng)體示意圖鞭毛蟲滋養(yǎng)體示意圖第十四頁，共52頁（二）鑒別要點（二）鑒別要點 1 1、大小、大?。?最小直徑僅2m，大可達200m 第十五頁，共52頁 2 2、運動、運

7、動運動形式 偽足、鞭毛、纖毛運動速度 活潑或緩慢運動方向 定向或不定向 3 3、細胞核、細胞核核數(shù)量、形狀、位置核膜厚、薄核仁大小、形狀、位置 4 4、細胞質(zhì)、細胞質(zhì)滋養(yǎng)體界細胞質(zhì)線是否明顯，顆粒細密或粗大；漿內(nèi)有無吞噬的紅細胞。包囊 囊壁厚、薄，折光度，細胞質(zhì)有無纖絲狀排列、糖元塊和擬染色體。 第十六頁，共52頁 （三）常見腸道原蟲的形態(tài)特征（三）常見腸道原蟲的形態(tài)特征 1 1、溶組織內(nèi)阿米巴、溶組織內(nèi)阿米巴 阿米巴痢疾和阿米巴結(jié)腸炎的病原體，寄生在結(jié)腸內(nèi);可侵犯肝、肺、腦等器官，引起腸外感染;生活史發(fā)育階段為：包囊期和滋養(yǎng)體期。 第十七頁，共52頁 （1 1）滋養(yǎng)體滋養(yǎng)體 溶組織內(nèi)阿米巴滋

8、養(yǎng)體具有侵襲性，隨時可吞噬RBC；蟲體大小在1060m之間，胞漿分為內(nèi)外兩層，外漿透明而均勻、折光強，內(nèi)漿呈細顆粒狀，當外漿伸出形成偽足作定向運動時，內(nèi)漿顆粒即涌入偽足內(nèi)，使蟲體前進。蟲體形態(tài)多變，運動活躍，在新鮮膿血便和阿米巴肝膿腫穿刺液中，滋養(yǎng)體可以每秒5微米的速度活潑運動。第十八頁，共52頁第十九頁，共52頁第二十頁，共52頁第二十一頁，共52頁 （2 2）包囊：）包囊：直徑1020m，囊壁光滑，透明、折光性強、不著色，厚約0.5m，包囊內(nèi)含14個核，成熟包囊內(nèi)常見1個或多個兩端鈍圓的長棒狀擬染色體。第二十二頁，共52頁 1個核包囊個核包囊 3個核包囊個核包囊2個核包囊個核包囊第二十三頁

9、，共52頁 2 2、結(jié)腸內(nèi)阿米巴、結(jié)腸內(nèi)阿米巴 結(jié)腸內(nèi)阿米巴是非致病性阿米巴，也可引起腹瀉，主要寄生在人體盲腸和結(jié)腸，常與溶組織阿米巴共存，是腸道最常見的共棲原蟲。 滋養(yǎng)體：直徑15 50m，運動遲緩，無定向，內(nèi)外質(zhì)界限不明顯，僅在偽足形成時才能看見外質(zhì)，內(nèi)質(zhì)呈顆粒狀，內(nèi)含1個細胞核和許多食物泡，食物泡中含有細菌，不含紅細胞。核仁較大，常偏位。包囊：球形，較溶組織阿米巴大，直徑10 30m，1 8個細胞核，偶見成熟包囊超過8個核，細胞質(zhì)顆粒狀，未成熟包囊常有較大的深棕色的糖原泡，位于核周圍。擬染色體常不清晰，似碎片或草束狀，兩端尖細。第二十四頁，共52頁第二十五頁，共52頁 結(jié)腸阿米巴（未染色

10、）結(jié)腸阿米巴（未染色）碘染色碘染色第二十六頁，共52頁 結(jié)腸內(nèi)阿米巴包囊結(jié)腸內(nèi)阿米巴包囊 第二十七頁，共52頁 測微尺測量包囊大小測微尺測量包囊大小第二十八頁，共52頁 3 3、微小內(nèi)蜓阿米巴、微小內(nèi)蜓阿米巴 微小內(nèi)蜓阿米巴是最常見的小型阿米巴，滋養(yǎng)體寄生在大腸，在大腸中成囊，成熟包囊污染食物和水源，偶可引起腹瀉。（1）滋養(yǎng)體：直徑6 15m，一般小于10m，內(nèi)外漿不明顯，偽足透明，短而鈍，運動緩慢，不定向，核膜與核仁間有核絲連接，核仁大而不規(guī)則，位于中心或偏位，（2）包囊：卵圓形，5 14m，囊壁有折光，1 4個細胞核，集中在包囊一端，核仁大，常偏于一側(cè)。偶見小而彎曲的擬染色體。第二十九頁，

11、共52頁碘液染色碘液染色鐵蘇木素染色鐵蘇木素染色第三十頁，共52頁 4 4、布氏嗜碘阿米巴、布氏嗜碘阿米巴布氏嗜碘阿米巴是以包囊中獨居特征的糖原泡而命名，人豬均可感染，是豬最常見的阿米巴。滋養(yǎng)體寄生在大腸，主要通過糞便排出的包囊傳播。（1）滋養(yǎng)體形態(tài)不一，直徑8 20m，細胞核較大，核仁約占直徑的1/2，位于核中央，偽足寬大，不吞噬紅細胞。細胞質(zhì)內(nèi)有1 2個糖原泡，為鑒定的重要特征。（2）包囊直徑5 20m，囊壁折光性強，成熟包囊僅1個核，核仁位于核的一端，包囊中無擬染色體，但有1個大而明顯的糖原泡，碘染色后，糖原泡呈紅棕色團塊。 第三十一頁，共52頁布氏嗜碘阿米巴包囊第三十二頁，共52頁第三

12、十三頁，共52頁第三十四頁，共52頁 寄生人體腸道的阿米巴滋養(yǎng)體鑒別特征寄生人體腸道的阿米巴滋養(yǎng)體鑒別特征 蟲蟲 種種 大大 小小( (m) m) 偽足與運動偽足與運動 細胞核細胞核 內(nèi)含物內(nèi)含物 溶組織內(nèi)溶組織內(nèi) 大大: 20: 2060 60 內(nèi)外質(zhì)分明內(nèi)外質(zhì)分明, ,偽足指偽足指 一個一個, ,不明顯不明顯, ,染色染色 大滋養(yǎng)體大滋養(yǎng)體: : 紅細胞紅細胞 阿米巴阿米巴 小小: 12: 1230 30 形或舌形形或舌形, ,形成快形成快, , 后可見后可見, ,細胞核小細胞核小 小滋養(yǎng)體小滋養(yǎng)體: : 細菌細菌 * * 12 12 1515 運動活潑，定向。運動活潑，定向。 位于中央。

13、位于中央。 很少有空泡很少有空泡 。 哈門氏內(nèi)哈門氏內(nèi) 5 512 12 內(nèi)外質(zhì)分明內(nèi)外質(zhì)分明, ,偽足指偽足指 一個，較小一個，較小, ,多位多位 細菌細菌阿米巴阿米巴 * * 1 1 8 8 狀形成慢狀形成慢, ,運動緩慢運動緩慢 于中央。于中央。 定向。定向。結(jié)腸內(nèi)結(jié)腸內(nèi) 202050 50 內(nèi)外質(zhì)不明顯內(nèi)外質(zhì)不明顯, ,偽足偽足 一個一個, ,易見，染色易見，染色 細菌、酵母菌和糞細菌、酵母菌和糞阿米巴阿米巴 * * 20 20 2525 足短、鈍足短、鈍, ,不透明不透明, , 后可見細胞核大后可見細胞核大, , 渣等；空泡較多。渣等；空泡較多。 形成較慢形成較慢; ;運動緩慢運動緩

14、慢, , 偏一側(cè)偏一側(cè) 。 無方向性。無方向性。布氏嗜碘布氏嗜碘 8 820 20 內(nèi)外質(zhì)不明顯內(nèi)外質(zhì)不明顯; ;偽足偽足 一個一個, ,不明顯不明顯, ,染色染色 細菌、酵母菌和細菌、酵母菌和阿米巴阿米巴 * * 12 12 1515 寬大透明寬大透明, ,形成緩慢形成緩慢 后可見細胞核小后可見細胞核小, ,位位 糞渣等糞渣等; ;有空有空 泡泡 無方向性。無方向性。 于中央。于中央。 微小內(nèi)蜒微小內(nèi)蜒 6 612 12 內(nèi)外質(zhì)不明顯內(nèi)外質(zhì)不明顯; ;偽足偽足 一個一個, ,不明顯不明顯, ,染色染色 細菌，有空泡。細菌，有空泡。阿米巴阿米巴 * * 8 8 1010 鈍圓、透明鈍圓、透明,

15、 ,形成較形成較 后可見細胞核小后可見細胞核小, ,位位 慢，運動緩慢慢，運動緩慢, ,無方無方 于中央。于中央。 向性。向性。 第三十五頁，共52頁 寄生人體腸道的阿米巴包囊鑒別特征（碘染色）寄生人體腸道的阿米巴包囊鑒別特征（碘染色）蟲種蟲種 大大 小小(m) (m) 形形 態(tài)態(tài) 細胞核細胞核 糖原塊糖原塊 擬染色體擬染色體溶組織內(nèi)溶組織內(nèi) 101020 20 圓形，折光性強，圓形，折光性強， 1 14 4個，清楚個，清楚 不明顯，呈彌不明顯，呈彌 不著色，兩不著色，兩阿米巴阿米巴 * * 1215 囊壁薄、透明。囊壁薄、透明。 核仁居中。核仁居中。 散狀，紅棕色散狀，紅棕色 端鈍圓棒狀端鈍

16、圓棒狀 中央著色較深中央著色較深 哈門氏內(nèi)哈門氏內(nèi) 5 510 10 圓或橢圓形圓或橢圓形, 1, 14 4個，染色后個，染色后 彌散狀，棕色彌散狀，棕色 短棒狀、碎短棒狀、碎阿米巴阿米巴 * * 68 可見核仁，其占可見核仁，其占 粒狀，折光粒狀，折光 比例較溶組織阿比例較溶組織阿 性強性強 米巴大。米巴大。 結(jié)腸內(nèi)結(jié)腸內(nèi) 101030 30 圓形，折光強，圓形，折光強， 1 18 8個個, , 核仁大核仁大 未成熟包囊明未成熟包囊明 折光性強折光性強阿米巴阿米巴* * 1 1525 囊壁厚囊壁厚 多偏位。多偏位。 顯塊狀，紅棕顯塊狀，紅棕 呈白色。呈白色。 色。色。微小內(nèi)蜒微小內(nèi)蜒 5 5

17、10 10 橢圓或長圓形，橢圓或長圓形， 1 14 4個個, ,多數(shù)多數(shù)4 4個，早期偶有，個，早期偶有， 少見，偶少見，偶 阿米巴阿米巴 * * 6 6 8 8 折光強，囊壁薄。折光強，囊壁薄。 很小。很小。 淡棕色，彌散淡棕色，彌散 有呈小點有呈小點 狀。狀。 或小棒狀或小棒狀布氏嗜碘布氏嗜碘 5 520 20 圓、卵圓、三角圓、卵圓、三角 1 1個，偶有個，偶有2 2個，個， 大而明顯，棕色大而明顯，棕色 無無阿米巴阿米巴* * 101012 12 形等，囊壁厚形等，囊壁厚 核仁大核仁大, ,偏一側(cè)。偏一側(cè)。 或紅棕色?；蚣t棕色。 第三十六頁，共52頁5 5、藍氏賈第鞭毛蟲、藍氏賈第鞭毛

18、蟲寄生人體小腸、膽囊主要在十二指腸，可引起腹痛、腹瀉和吸收不良等癥狀，糞便呈水樣、量大、惡息、一般無膿血。分布于世界各地，在旅游者中發(fā)病率較高，故又稱旅游者腹瀉。生活史有滋養(yǎng)體和包囊兩個階段，在糞便中均可查見。第三十七頁，共52頁5 5、藍氏賈第鞭毛蟲、藍氏賈第鞭毛蟲 （1）滋養(yǎng)體滋養(yǎng)體：形似半個倒梨形，前段鈍圓，后端尖細，長：921m，寬515m，厚24m。腹面扁平，背面隆起，胞漿呈顆粒狀，腹面前半部至3/4處凹陷形成左右2個大吸盤，一對橢圓形的核位于吸盤中央，蟲體有兩條軸索和4對鞭毛。 第三十八頁，共52頁第三十九頁，共52頁 （2 2）包囊）包囊橢圓形，大小812710m；囊壁較厚，折光

19、性強，細胞質(zhì)收縮形成雙層壁，與細胞間有明顯間隙，可見2-4個細胞核，多偏于一端。囊內(nèi)可見鞭毛殘體、絲狀物及軸柱等，碘染色后呈棕黃色。第四十頁，共52頁 6 6、 結(jié)腸小袋纖毛蟲結(jié)腸小袋纖毛蟲結(jié)腸小袋纖毛蟲是人體最大的寄生原蟲，寄生宿主廣泛，通常認為豬是人體感染的主要傳染源。主要寄生于宿主結(jié)腸，引起痢疾。（1 1）滋養(yǎng)體）滋養(yǎng)體橢圓形，前端略尖，后端較鈍，蟲體甚大，大小5020030 100m，周身有纖毛，呈斜縱排列，能前后運動。胞漿內(nèi)有2個細胞核，大核呈腎形，小核呈球形（一般不易見），新鮮糞便可見蟲體前、后端各有一個伸縮泡。（2 2）包囊）包囊圓或卵圓形，直徑40 60m，囊壁厚而透明，呈雙層

20、內(nèi)有核和伸縮泡各1個。新鮮包囊可見囊內(nèi)有活動的滋養(yǎng)體。寄生人體的滋養(yǎng)體很少轉(zhuǎn)變?yōu)榘遥抑饕谪i腸內(nèi)形成。第四十一頁，共52頁 結(jié)腸小袋纖毛蟲滋養(yǎng)體、包囊結(jié)腸小袋纖毛蟲滋養(yǎng)體、包囊伸縮泡伸縮泡大核大核食物泡食物泡第四十二頁，共52頁 包囊包囊 滋養(yǎng)體滋養(yǎng)體第四十三頁，共52頁第四十四頁，共52頁7.7.人芽囊原蟲人芽囊原蟲人芽囊原蟲廣泛分布于世界各地。該蟲是寄生在高等靈長類和人類腸道內(nèi)可致病的原蟲。人芽囊原蟲可侵入腸粘膜上皮。臨床表現(xiàn)輕重不一，帶蟲者可高達44.12%。感染重者可有消化道癥狀，如腹瀉、腹脹、厭食、惡心、嘔吐，甚至出現(xiàn)發(fā)燒寒戰(zhàn)等。免疫功能正常的患者多數(shù)為自限性。艾滋病患者容易感染人芽囊原蟲，而且癥狀嚴重，治療十分困難。預(yù)防應(yīng)加強衛(wèi)生宣傳教育，注意個人衛(wèi)生和飲食衛(wèi)生；糞便無害化處理，保護