（精心整理）用高倍顯微鏡觀察葉綠體實驗步驟

1、活動目標 1使用高倍顯微鏡觀察葉綠體和線粒體的形態(tài)和分布。 2識別光學顯微鏡下的葉綠體和線粒體。 背景資料 1相關知識 地球上絕大多數生命活動所需能量的最終源頭是太陽能。綠色植物是主要的能量轉換者，完成這一能量轉換的細胞器是葉綠體。葉綠體利用光能將二氧化碳和水合成糖類等有機物，同時產生氧。在高等植物細胞中葉綠體呈橢球形，長徑510 m，短徑24 m，厚23 m。高等植物的葉肉細胞中一般含50200個葉綠體，可占細胞質的40%。葉綠體的數目因同種植物不同細胞類型、生態(tài)環(huán)境、生理狀態(tài)而有所不同。在藻類細胞中，葉綠體形狀多樣，有網狀、帶狀、裂片狀和星形等，而且體積巨大，長徑可達100 m。 線粒體是

2、動植物細胞中重要的細胞器，與能量轉換有關。線粒體一般呈粒狀或棒狀，因不同的細胞種類和生理狀態(tài)而不同，可呈環(huán)形、啞鈴形、線狀、分支狀或其他形狀。線粒體數目因細胞種類和生理狀態(tài)不同有所差異，一般在一個細胞中有數百到數千個。植物細胞因有葉綠體的緣故，線粒體數目相對較少；肝細胞中約有1 300個線粒體，占細胞體積的20%；巨大變形蟲中線粒體數目可達50萬個；許多哺乳動物成熟的紅細胞中無線粒體；酵母細胞中有一個大型分支狀的線粒體。線粒體通常分布在細胞生命活動旺盛的區(qū)域。例如，在肝細胞中呈均勻分布；在腎細胞中靠近微血管，呈平行或柵欄狀排列；在精子中集中在尾的基部。線粒體在細胞質中可以向生命活動旺盛的區(qū)域遷

3、移。 2實驗原理 （1）葉綠體的觀察植物綠色部位的細胞中含有葉綠體。如果將葉片的橫切片制成臨時裝片，就可以在顯微鏡下觀察到葉綠體。某些植物幼嫩的葉也可直接用于觀察葉綠體。 （2）線粒體的觀察線粒體是細胞進行有氧呼吸的主要場所，內含細胞色素氧化酶系。健那綠是一種堿性染料,可以專一性地對線粒體進行染色。與線粒體內的細胞色素氧化酶系發(fā)生作用時，染料始終保持氧化狀態(tài),呈藍綠色;而線粒體周圍的細胞質中的染料被還原為無色的狀態(tài)。通過染色可以在高倍顯微鏡下觀察到呈現藍綠色的線粒體。 操作指南 1材料 蘚類、菠菜或黑藻的葉，人的口腔上皮細胞，洋蔥內表皮細胞。 2用具 顯微鏡，載玻片，蓋玻片，滴管，鑷子，消毒牙

4、簽。 3試劑及配制方法 （1）試劑 清水，健那綠染液。 （2）試劑的配制方法 等滲溶液稱取085 g NaCl、025 g KCl、003 g CaCl2溶于100 mL蒸餾水中。 健那綠染液先稱取10 mg健那綠溶于1 mL等滲溶液中，用濾紙過濾。再取濾液加入49 mL等滲溶液中，即為染色液。 4操作要點 （1）制作臨時裝片 在觀察黑藻前10 min，用40 °C的水浸泡黑藻的葉。這樣的葉用于制作臨時裝片，便于觀察到黑藻的葉綠體隨細胞質而流動。 在適宜的溫度下制作人的口腔上皮細胞臨時裝片?？梢詫⒔∧蔷G染液保持在37 °C，盡可能使人的口腔上皮細胞在染色期間保持在生活狀態(tài)。

5、 用健那綠染液染色時，要染色1015 min。在此期間要適當添加染液，以保證細胞不干燥。 （2）觀察 觀察時，注意通過調整光圈來調節(jié)反射光線的強弱，使進入物鏡的光線不要太強。 按照正確的觀察順序，先用低倍鏡找到觀察的物像，通過移動臨時裝片選擇單層的典型細胞，再轉換高倍鏡進行觀察。 分析討論 1選擇觀察葉綠體的實驗材料時，應注意什么問題？ 2具有較多線粒體的細胞在功能上有什么特點？ 3為什么用健那綠染液作為觀察線粒體的染色劑？ 4細胞中的葉綠體和線粒體的共同特點是什么？ 評價建議 操作步驟規(guī)范的操作方法分值 得分 安放顯微鏡及對光 將顯微鏡放在實驗臺的正確位置上。調節(jié)粗準焦螺旋，使物鏡上升至適當高度。轉動轉換器，使低倍鏡對準通光孔，調節(jié)光圈和反光鏡，使視野變明亮2分 制片 選取材料適量，無氣泡 2分 低倍鏡觀察 材料展放均勻