實(shí)驗(yàn)十食品中淀粉的測定

1、。實(shí)驗(yàn)十食品中淀粉的測定第一法酶水解法一、目的與要求：1、明確與掌握各類食品中淀粉含量的原理及測定方法。2、掌握用酶水解法和酸水解法測定淀粉的方法。二、原理樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后，其中淀粉用淀粉酶水解成雙糖，再用鹽酸將雙糖水解成單糖，最后按還原糖測定，并折算成淀粉。三，試劑：1 、0.5 淀粉酶溶液：稱取淀粉酶0.5 克，加 100 毫升水溶解，數(shù)滴甲苯或三氯甲烷，防止長霉，貯于冰箱中。2、碘溶液：稱取3.6 克碘化鉀溶于20 毫升水中，加入1.3 克碘，溶解后加水稀釋至 100 毫升。3、乙醚4、 85乙醇5、 6N鹽酸：量取 50 毫升鹽酸加水稀釋至100 毫升。6、甲基紅指示液：

2、0.1 乙醇溶液。7、 20氫氧化鈉溶液。8、堿性酒石酸銅甲液： 稱取 34.639 克硫酸銅 (CuS04·5H2O)。加適量水溶解，加 0.5 毫升硫酸，再加水稀釋至 500 毫升，用精制石棉過濾。9 、堿性酒石酸銅乙液：稱取173 克酒石酸鉀鈉與50 克氫氧化鈉，加適量水溶解，并稀釋至500 毫升，用精制石棉過濾，貯存于橡膠塞玻璃瓶內(nèi)。10 、 0.1000N 高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液。11 、硫酸鐵溶液：稱取50 克硫酸鐵，加入 200 毫升水溶解后，人100 毫升硫酸，冷后加水稀釋至1000 毫升。四、操作方法：1 、樣品處理：稱取 2-5 克樣品，置于放有折疊濾紙的漏斗內(nèi)，先用5

3、0 毫升乙醚分 5 次洗除。1。脂肪，再用約100 毫升 85乙醇洗去可溶性糖類，將殘留物移入250 毫升燒杯內(nèi)，并用 50 毫升水洗濾紙及漏斗，洗液并入燒杯內(nèi)，將燒杯置沸水浴上加熱15分鐘，使淀粉糊化，放冷至 60以下，加 20 毫升淀粉酶溶液，在 55-60 保溫 1 小時(shí)，并時(shí)時(shí)攪拌。然后取 1 滴此液加 1 滴溶液，應(yīng)不顯現(xiàn)藍(lán)色，若顯藍(lán)色，再加熱糊化并加 20 毫升淀粉酶溶液，繼續(xù)保溫，直至加碘不顯藍(lán)色為止。加熱至沸，冷后移入 250 毫升容量瓶中，并加水至刻度，混勻，過濾，棄去初濾液。取 50 毫升濾液，置于 250 毫升錐形瓶中， 并加水至刻度， 沸水浴中回流 1 小時(shí)，冷后加 2

4、 滴甲基紅指示液，用20氫氧化鈉溶液中和至中性，溶液轉(zhuǎn)入100 毫升容量瓶中，洗滌錐形瓶，洗液并人 100 毫升容量瓶中， 加水至刻度，混勻備用。B 、測定：吸取 50 毫升處理后的樣品溶液，于400 毫升燒杯內(nèi)，加入25 毫升堿性酒石酸銅甲液及 25 毫升乙液，于燒杯上蓋一表面皿，加熱，控制，在4 分鐘內(nèi)沸騰，再準(zhǔn)確煮沸 2 分鐘，趁熱用鋪好石棉的古氏坩堝或c4 垂融坩堝抽濾，并用60熱水洗滌燒杯及沉淀，至洗液不呈堿性為止。將古氏坩堝或垂融坩堝放回原400毫升燒杯中，加 25 毫升硫酸鐵溶液及25 毫升水，用玻棒攪拌使氧化亞銅完全溶解，以 0.1000N 高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至微紅色為終點(diǎn)。

5、同時(shí)量取 50 毫升水及與樣品處理時(shí)相同量的淀粉酶溶液，按同一方法做試劑空白實(shí)驗(yàn)。(A1 -A2) ×0.9計(jì)算： X1=- -×10050 V1m1×-×- ×1000250100X1 ：樣品中淀粉的含量，；A1 ：測定用樣品中還原糖的含量，mg；A2 ：試劑空白中還原糖的含量，mg；0.9 ：還原糖 ( 以葡萄糖計(jì) ) 換算成淀粉的換算系數(shù)；m1：稱取樣品質(zhì)量， g；V1 ：測定用樣品處理液的體積，毫升(m1) 。2。第二法酸水解法一、原理：樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后，其中淀粉用酸水解成具有還原性的單糖，然后按還原糖測定，并折算成淀粉。二

6、、試劑：1、乙醚；2、 85乙醇溶液；3、 6N鹽酸溶液；4、 40氫氧化鈉溶液；5、 10氫氧化鈉溶液；6、甲基紅指示液： 0.2 乙醇溶液7、精密 PH試紙8、 20乙酸鉛溶液9、 10硫酸鈉溶液10、乙醚11、堿性酒石酸銅甲液。( 配制見前 )12、堿性酒石酸銅乙液；( 配制見前 )13、硫酸鐵；( 配制見前 )14、0.1000N 高錳酸鉀標(biāo)液三、儀器：1、水浴鍋2、高速組織搗碎機(jī)： 1200r min3、皂化裝置并附250 毫升錐形瓶。四、操作方法：1、樣品處理A、糧食，豆類、糕點(diǎn)、餅干等較干燥的樣品，稱取2.0-5.0克磨碎過 40 目篩的樣品，置于放有慢速濾紙的漏斗中，用30 毫

7、升乙醚分三次洗去樣品中的脂。3。肪，棄去乙醚。再用 150 毫升 85乙醇溶液分?jǐn)?shù)次洗滌殘?jiān)?，除去可溶性糖類物質(zhì)。并濾干乙醇溶液， 以 100 毫升水洗滌漏斗中殘?jiān)⑥D(zhuǎn)移至 250 毫升錐形瓶中，加入 30 毫升 6N 鹽酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流 2 小時(shí)?；亓魍戤吅?，立即置流水中冷卻。待樣品水解液冷卻后，加入 2 滴甲基紅指示液，先以 40氫氧化鈉溶液調(diào)至黃色，再以 6N鹽酸校正至水解液剛變紅色為宜。若水解液顏色較深，可用精密 PH試紙測試，使樣品水解液的 PH約為 7。然后加 20 毫升 20乙酸鉛溶液，搖勻，放置 10 分鐘。再加 20 毫升 10硫酸鈉溶液，以除去過多的鉛。搖勻后

8、將全部溶液及殘?jiān)D(zhuǎn)入 500 毫升容量瓶中， 用水洗滌錐形瓶， 洗液合并于容量瓶中，加水稀釋至刻度。過濾，棄去初濾液 20 毫升，濾液供測定用。 B 、蔬菜、水果、各種糧豆含水熟食制品：按 1：1 加水在組織搗碎機(jī)中搗成勻漿 ( 蔬菜、水果需先洗凈、 晾干、取可食部分 ) 稱取 5-10 克勻漿 ( 液體樣品可直接量取 ) ，于 250 毫升錐形瓶中，加 30 毫升乙醚振搖提取 ( 除去樣品中脂肪 ) ，用濾紙過濾除去乙醚， 再用 30 毫升乙醚淋洗兩次，棄去乙醚。再用 150 毫升 85乙醇溶液分?jǐn)?shù)次洗滌殘?jiān)?除去可溶性糖類物質(zhì)。 并濾干乙醇溶液， 以 100 毫升水洗滌漏斗中殘?jiān)⑥D(zhuǎn)移至

9、 250 毫升錐形瓶中， 加入 30 毫升 6N鹽酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流 2 小時(shí)?；亓魍戤吅螅⒓粗昧魉欣鋮s。待樣品水解液冷卻后，加入 2 滴甲基紅指示液，先以 40氫氧化鈉溶液調(diào)至黃色，再以 6N鹽酸校正至水解液剛變紅色為宜。若水解液顏色較深，可用精密PH試紙測試，使樣品水解液的 PH約為 7。然后加 20 毫升 20乙酸鉛溶液，搖勻，放置 10 分鐘。再加 20 毫升 10硫酸鈉溶液，以除去過多的鉛。搖勻后將全部溶液及殘?jiān)D(zhuǎn)入500 毫升容量瓶中，用水洗滌錐形瓶，洗液合并于容量瓶中，加水稀釋至刻度。過濾，棄去初濾液 20 毫升，濾液供測定用。2 、測定：吸取 50 毫升處理后的

10、樣品溶液，于400 毫升燒杯內(nèi)，加25 毫升堿性酒石酸銅甲液及 25 毫升乙液。于燒杯上蓋一表面皿加熱，控制在4 分鐘沸騰再準(zhǔn)確煮沸 2 分鐘，趁熱用鋪好石棉的古氏坩堝或 G4垂融坩堝抽濾，并用 60熱水洗滌燒杯及沉淀，至洗液不呈堿性為止。 將古氏坩堝或垂融坩堝放回原 400 毫升燒杯中，加 25 毫升硫酸鐵溶液及 25 毫升水，用玻棒攪拌使氧化銅完全溶解，以0.1000N 高錳酸鉀標(biāo)液滴定至微紅色為終點(diǎn)。同時(shí)吸取 50 毫升水，加與測樣品時(shí)相同量的堿性酒石酸銅甲乙液、硫。4。酸鐵溶液及水，按同一方法做試劑空白試驗(yàn)。(A3-A 4) × 0.9計(jì)算： x2=-×100V 2M2×-×100500式中：X2 ：樣品中淀粉含量，；A3