溶出度方法驗(yàn)證易忽視的幾個(gè)問題

1、化學(xué)藥品普通口服固體制劑溶出度方法驗(yàn)證易忽視的幾個(gè)問題字體：小中大|打印發(fā)表于：2007-11-0707:43作者：sjc_wy來源：藥物臨床試驗(yàn)網(wǎng)審評四部審評八室鄭國鋼溶出度系指藥物從片劑或膠囊劑等固體制劑在規(guī)定的溶出介質(zhì)中溶出的速度和程度，是一種模擬口服固體制劑在胃腸道中的崩解和溶出的體外試驗(yàn)方法。它是評價(jià)藥物制劑質(zhì)量的一個(gè)重要指標(biāo)。一個(gè)完整的溶出度方法驗(yàn)證主要包括以下內(nèi)容：（1）溶出介質(zhì)及介質(zhì)體積的選擇；（2）溶出方法（轉(zhuǎn)籃法與槳法）及其轉(zhuǎn)速的選擇；（3）溶出量測定方法的驗(yàn)證，（4）溶出度均一性試驗(yàn)（批內(nèi)）、重現(xiàn)性試驗(yàn)（批間）等。審評中發(fā)現(xiàn)提供溶出度方法驗(yàn)證資料往往不全，應(yīng)引起申報(bào)單位注

2、意。（一）溶出度測定方法的選擇溶出度測定方法的選擇包括溶出介質(zhì)及介質(zhì)體積的選擇、溶出方法（轉(zhuǎn)籃法與槳法）及其轉(zhuǎn)速的選擇。根據(jù)化學(xué)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立的規(guī)范化過程技術(shù)指導(dǎo)原則，溶出介質(zhì)通常采用水、0.1mol/L鹽酸溶液、緩沖液（pH值38為主）。對在上述溶出介質(zhì)中均不能完全溶解的難溶性藥物，可加入適量的表面活性劑，如十二烷基硫酸鈉等。檢查方法轉(zhuǎn)籃法以100轉(zhuǎn)/分鐘為主；槳法以50轉(zhuǎn)/分鐘為主。應(yīng)該注意的是（1）溶出介質(zhì)的體積需使藥物符合漏槽條件，大杯法（第一、二法）常用體積為5001000ml,小杯法（第三法）常用體積為100250ml。部分品種為滿足在溶出量測定時(shí)藥物濃度的需要，可采用低于上述限

3、度范圍的溶劑。（2）介質(zhì)、方法、轉(zhuǎn)速的選擇一般根據(jù)溶出曲線測定結(jié)果確定。部分資料簡單地通過比較主藥在各溶劑中的溶解度來選擇溶出介質(zhì)，我們認(rèn)為相同的溶劑可能會(huì)導(dǎo)致對不同制劑溶出行為的差異，且工藝的選擇、輔料的加入能改變主藥在不同溶劑中的溶解行為，故僅考慮溶解度是不適合的；部分資料根據(jù)單點(diǎn)測定結(jié)果進(jìn)行方法和轉(zhuǎn)速選擇，如鹽酸左旋多巴甲酯片申報(bào)資料中采用籃法100rpm和槳法75rpm比較，結(jié)果45min溶出均大于95%,故選擇槳法75rpm測定溶出度，單點(diǎn)測定不能很好區(qū)分不同處方和生產(chǎn)工藝的溶出情況，也影響溶出拐點(diǎn)的確定，故不合適；考慮今后大生產(chǎn)工藝，申報(bào)單位確定溶出度檢查方法中常采用高轉(zhuǎn)速或延長取

4、樣時(shí)間，取樣時(shí)間與溶出曲線的拐點(diǎn)位置相距較遠(yuǎn)，導(dǎo)致溶出度測定區(qū)分能力不明顯，溶出度取樣時(shí)間常選擇溶出曲線的拐點(diǎn)處后推1020分鐘，如果時(shí)間較長或太短，可通過適當(dāng)提高或減低轉(zhuǎn)速等手段重新測定溶出曲線。（3）如是仿制已有國家標(biāo)準(zhǔn)的藥品，則應(yīng)與被仿制的制劑進(jìn)行溶出曲線比對，并對相似性進(jìn)行評價(jià)，評價(jià)方法建議采用f2因子法。溶出曲線中溶出介質(zhì)除采用已確定溶出度檢查中的溶出介質(zhì)外，還應(yīng)選擇水、0.1mol/L鹽酸溶液、pH3.8醋酸鹽緩沖?夜、6.8磷酸鹽緩沖液及pH7.27.4磷酸鹽緩沖液進(jìn)行溶出曲線比對。（4）重現(xiàn)性試建議采用對驗(yàn)（批間均一性）是考察制劑工藝穩(wěn)定性及溶出度方法重復(fù)性的一項(xiàng)重要指標(biāo),三批

5、樣品進(jìn)行均一性考察。（二）溶出量測定方法的驗(yàn)證溶出量測定常同含量測定，采用HPLC、UV方法。如溶出量測定所用的溶劑（溶出介質(zhì)）與含量測定的溶劑不一致，溶出量測定濃度與含量測定濃度不一致，溶出度測定制劑為膠囊劑或需去除糖衣、薄膜衣后測定含量的片劑，則均需重新進(jìn)行溶出量測定方法驗(yàn)證。根據(jù)中國藥典附錄藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則（附錄XIXA）溶出度測定方法的驗(yàn)證與含量測定相同，包括準(zhǔn)確度（回收率）、精密度、專屬性（輔料、膠囊殼等的干擾試驗(yàn)）、線性和耐用性等。應(yīng)該注意的是（1）溶出量測定方法學(xué)驗(yàn)證中范圍與含量測定不同。含量測定范圍為測試濃度的80%120%（回收率高、中、低常設(shè)為80%、100

6、%、120%）,對于溶出度，范圍規(guī)定為限度的受0%（回收率高、中、低常設(shè)為50%、限度濃度、100%）。（2）測定干擾2%以下可忽略不計(jì)，25%可考慮在限度上適當(dāng)提高，超過5%以上測定方法不可取，如是空膠囊產(chǎn)生的應(yīng)進(jìn)行囊殼的消除試驗(yàn)?？漳z囊常僅對UV測定有干擾，藥典規(guī)定如空膠囊干擾大于標(biāo)示量的25%,實(shí)驗(yàn)無效，如干擾不大于標(biāo)示量的2%,可忽略不計(jì)?？紤]膠囊殼的批次、來源不同，紫外吸收強(qiáng)度也各不相同，故干擾也常常不同。嚴(yán)格按照樣品測定的步驟，取6?？瞻啄z囊殼進(jìn)行試驗(yàn)，工作量大，且由于干擾不一，會(huì)給測定結(jié)果帶來誤差。故空膠囊干擾較大時(shí)，建議采用HPLC法測定。如曾發(fā)現(xiàn)，氟康陛膠囊溶出度UV法測定，

7、部分企業(yè)空白膠囊干擾可達(dá)20%,嚴(yán)重影響數(shù)據(jù)的真實(shí)性，建議改為HPLC法測定。（三）濾膜吸附的驗(yàn)證取樣過濾時(shí)，可能存在損失，故需進(jìn)行濾膜吸附的驗(yàn)證，大部分資料未進(jìn)行該項(xiàng)試驗(yàn)。中國藥典溶出度測定法對微孔濾膜的規(guī)定為濾孔應(yīng)不大于0.8并使用惰性材料制成的濾器，以免吸附活性成分或干擾分析測定工作中常用濾膜有水系和有機(jī)系兩種，濾膜孔徑0.45m、0.80水系微孔濾膜通常為混合纖維素酯濾膜（WX）,不耐酸、堿、有機(jī)溶劑。使用前常需進(jìn)行漂洗（水浸）處理，防止濾膜使用時(shí)未壓緊有氣泡入內(nèi)，同時(shí)水浸也為了使膜充分溶脹，現(xiàn)有針式混合纖維素酯過濾器，可直接使用。有機(jī)系微孔過濾膜有尼龍（N6、N66）濾膜、聚偏氟乙烯

8、（PVDF）濾膜、聚四氟乙烯（PTFE）濾膜等，也有針式過濾器，上述濾膜具有顯親水性，使用前不需預(yù)先濕潤，幾乎能與全部溶出介質(zhì)相容，無纖維脫落等優(yōu)點(diǎn)，但由于價(jià)格昂貴使用單位較少。判定吸附與否的方法可采用：（1）取溶出液過濾，舍去不同體積的初濾液后測定，觀察響應(yīng)值的變化，了解被測藥物與濾膜的吸附情況。（2）取樣后，一部分不過濾，直接采用高速離心，取上清液測定。另一部分采用過濾法，取所得的續(xù)濾液測定，考察兩者間測定數(shù)據(jù)的差異。（3）取對照品溶液，經(jīng)濾膜過濾后，與原溶液進(jìn)行比較，觀察測定前后數(shù)據(jù)的變化。發(fā)生吸附的品種往往是主藥均難溶于水（如他克莫司），制成制劑時(shí)一般需進(jìn)行微粉化等處理，使原料藥粒徑變小，比表面能變大，靜電吸附能力增強(qiáng)，故與濾膜的吸附作用明顯；一些小規(guī)格制劑（如非那雄胺片）溶出液中主藥濃度低，達(dá)到飽和所需的初濾液體積大大增加，干擾也較大。一般認(rèn)為吸附量在2%以下時(shí)可忽略不計(jì)，超過2%建議或在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中明確注明濾膜規(guī)格或?yàn)V膜預(yù)處理方法（如煮沸1.5h）、增加初濾液量（常規(guī)為5ml）或規(guī)定樣品高速離心后取上清液測定。（四）其他溶出度方法驗(yàn)證除按規(guī)定的條件外，還應(yīng)注意介質(zhì)的脫氣、溫度控制，以及取樣位置等考察。介質(zhì)的脫氣中國藥典規(guī)定必須