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文檔簡(jiǎn)介
1、實(shí)驗(yàn)五磺胺喀陡非靜脈給藥后的藥時(shí)曲線及藥動(dòng)學(xué)參數(shù)實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí):6實(shí)驗(yàn)類型:(綜合)實(shí)驗(yàn)要求:(必修)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私饣前房宸茄軆?nèi)一次給藥后血藥濃度隨時(shí)間變化的規(guī)律。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容(1)制作磺胺喀咤鈉濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線;(2)兔靜脈注射磺胺喀咤鈉溶液,定時(shí)采血測(cè)血藥濃度,繪制血藥濃度一一時(shí)間曲線;三、實(shí)驗(yàn)原理、方法和手段已知磺胺喀咤等磺胺類藥物在酸性環(huán)境下其苯環(huán)上的氨基(一NH2)將被離子化而生成俊類化合物(一NH3+)。后者與亞硝酸鈉反應(yīng)可發(fā)生重氮化反應(yīng)進(jìn)而生成重氮鹽(一N=N+一)。該化合物在堿性條件下可與麝香草酚生成橙黃色化合物。在525nm波長(zhǎng)下比色,其光密度與磺胺喀咤的濃度成正比。具體反應(yīng)過(guò)程
2、為:根據(jù)上述原理,在給受試家兔一次給予一定劑量的磺胺喀咤后,于不同時(shí)間點(diǎn)采集其靜并以血藥濃度對(duì)相應(yīng)時(shí)脈血樣,采用比色法對(duì)各樣品中磺胺喀咤的血藥濃度進(jìn)行定量分析,間作圖,從而獲得磺胺喀咤的靜脈給藥后的藥時(shí)曲。四、實(shí)驗(yàn)組織運(yùn)行要求采用集中授課形式。五、實(shí)驗(yàn)條件動(dòng)物3kg左右家兔一只藥品20%磺胺喀咤(sulfadiazine,SD)、7.5%三氯醋酸、0.1%SD標(biāo)準(zhǔn)?夜、0.5%亞硝酸鈉、0.5%麝香草酚(用20%NaOH配制)、1000u/mL肝素生理鹽水、3%戊巴比妥鈉、蒸儲(chǔ)水。器材721分光光度計(jì)、離心機(jī)、磅秤、手術(shù)器械、動(dòng)脈夾、尼龍插管(或玻璃插管、硅膠管)、兔手術(shù)臺(tái)、注射器(5mL)及
3、針頭、移液器(0.011mL)、吸頭、試管、離心管、試管架、玻璃記號(hào)筆、藥棉、紗布、計(jì)算機(jī)。六、實(shí)驗(yàn)步驟(1)麻醉:全麻或局麻均可。取兔一只(實(shí)驗(yàn)前禁食12小時(shí)不禁水),記錄體重和性別,耳緣靜脈注射3%戊巴比妥鈉0.81.0mL/kg麻醉,仰位固定于兔手術(shù)臺(tái)上。(2)手術(shù):頸部手術(shù)區(qū)剪毛,切皮約6cm左右,鈍性分離皮下組織和肌肉,氣管插管,分離出頸總動(dòng)脈約23cm左右,在其下穿兩根細(xì)線,結(jié)扎遠(yuǎn)心端,保留近心端。(3)耳緣靜脈注射1000u/mL肝素1mL/kg。(4)插管:用動(dòng)脈夾夾住動(dòng)脈近心端,再于兩線中間的一段動(dòng)脈上剪一“V型切口,插入尼龍管,用線結(jié)扎牢固,以備取血用。(5)取血:打開(kāi)動(dòng)脈
4、夾放取空白血樣0.4mL,分別放入1號(hào)管(空白管)和2號(hào)管(標(biāo)準(zhǔn)管)各0.2mL搖勻靜置。而后腹腔注射20%SD1.5mL/kg,分別于注射后5、15、30、45、75、120、180、240、300分鐘時(shí)由動(dòng)脈取血0.2mL加到含有7.5%三氯醋酸2.7mL的試管中搖勻。標(biāo)準(zhǔn)管加入0.1%SD標(biāo)準(zhǔn)液0.1mL,其余各管加蒸儲(chǔ)水0.1mL搖勻。(6)顯色:將上述各管離心5分鐘(1500-2000轉(zhuǎn)/分),取上清液1.5mL,力口0.5%亞硝酸鈉0.5mL,搖勻后,再加入0.5%麝香草酚1mL后溶液為橙色。(7)測(cè)定:于分光光度計(jì)在525nm波長(zhǎng)下測(cè)定各樣品管的光密度值。表1磺胺類藥物血藥濃度測(cè)
5、定的步驟試管空白管時(shí)間(min)07.5%三氯醋酸(mL)2.7血液(mL)0.2蒸儲(chǔ)水(mL)0.10.5%亞硝酸鈉(mL)0.50.5%麝香草酚(mL)1光密度0濃度聞/mL標(biāo)準(zhǔn)管標(biāo)準(zhǔn)液02.70.20.1充分搖0.5116.7給藥后12.70.20.1勻后離0.51心5分,充分32.70.20.1取上清0.5搖勻152.70.20.1液1.50.51152.70.20.10.51mL302.70.20.10.51452.70.20.10.51602.70.20.10.51902.70.20.10.511202.70.20.10.51(8)計(jì)算血中藥物濃度:根據(jù)同一種溶液濃度與光密度成正比的原理,可用空白血標(biāo)準(zhǔn)管濃度及其光密度值求算出樣品管的磺胺藥物濃度。公式如下:樣品管光密度(OD)樣品管濃度(g/mL標(biāo)準(zhǔn)管光密度(OD)=標(biāo)準(zhǔn)管濃度(gg/mL)樣品管光密度(OD)X標(biāo)準(zhǔn)管濃度樣品管濃度(wg/ml)標(biāo)準(zhǔn)管光密度(OD)血藥濃度(g/mL)=樣品=度淅釋倍數(shù)(30)【結(jié)果與處理】將所得數(shù)據(jù)填入表1中,并用計(jì)算機(jī)軟件繪制藥物的藥時(shí)曲線。七、實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容應(yīng)包括:【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/p>
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