ZARhD血型鑒定操作規(guī)程029

1、對象：全院職工醫(yī)療藥事制度文件名稱:Rh(D)血型鑒定編寫日期:2014.1修訂日期:2017.4執(zhí)行日期:2017.4注：本文件僅供本院人員使用，未經(jīng)同意，不得翻印本文件最終解釋權(quán)歸輸血科Rh(D)血型鑒定【原理】Rh血型系統(tǒng)是輸血醫(yī)學中僅次于ABO系統(tǒng)的第二大血型系統(tǒng)。Rh血型系統(tǒng)常見的抗原有D和C、c、E、e五種，分別由RHD基因和RHCE基因編碼，RhD和RhCE蛋白均是反復(fù)穿膜的蛋白質(zhì)。使用相應(yīng)的抗D、抗C、抗c、抗E、抗e五種血型試劑可以鑒定這些抗原。臨床上，D抗原是Rh抗原中免疫原性最強的抗原，也是最具有臨床意義的抗原，一般只做D抗原鑒定，凡帶有D抗原者稱為Rh陽性，不帶D抗原者

2、稱為Rh陰性。1 .試管法【樣本】抗凝或不抗凝的木¥本均可用于Rh鑒定試驗。紅細胞可懸浮在自身血清、血漿或鹽水中，也可以洗滌后懸浮于鹽水中?！驹噭?1) IgM抗D試劑(2) Rh對照試劑【制作】(1)加1滴抗D到一潔凈試管，并做好標記(2)加1滴Rh對照試劑到第二個潔凈試管中，并做好標記(3)分別加1滴2%5%紅細胞懸液到每支試管中(4)輕輕混勻，通常(900100)Xg離心15秒(5)輕輕重懸細胞扣，檢查凝集(6)評價反應(yīng)強度，記錄試驗管和對照管得試驗結(jié)果【結(jié)果判定】(1)抗D管凝集，對照管不凝集表明紅細胞是RhD陽性(2)對照管和抗D管均陰性，說明待測紅細胞是RhD陰性結(jié)果(

3、3)對照管凝集則試驗無效2 .玻片法【樣本】用玻片法進行RhD定型時，待檢紅細胞懸液的濃度是40%50%【試劑】適合用于玻片法的低蛋白抗D試劑【制作】(1)加1滴抗D到一潔凈的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好標記(2)加1滴適合的對照試劑到另一潔凈的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好標記(3)向以上玻片或白瓷板凹孔中的每一種試劑中分別加1滴混勻的40%50%待檢紅細胞懸液(4)十足混合抗體試劑和細胞，用攪拌棒將混合物均勻分散(5)不斷地從一邊到另一邊輕輕傾斜轉(zhuǎn)動玻片或白瓷板，持續(xù)大概2分鐘(6)讀取，解釋并記錄所有玻片或白瓷板凹孔中的結(jié)果【結(jié)果判定】(1)抗D試劑與紅細胞反應(yīng)表現(xiàn)凝集，而對照為陰性反應(yīng)，表明待檢紅細胞為RhD陽性(2)抗D試劑與對照均為陰性反應(yīng)，表明待檢紅細胞為RhD陰性(3)對照管凝集則試驗無效【注意事項】玻片法可能存在感染性標本暴露的風險，需要注意防范。玻片法不適用于檢測弱D表型3 .柱凝集法【樣本】同玻片法和試管法【試劑】已加入抗D試劑的柱凝集血型卡【制作】(1)配制好的檢測樣本的紅細胞懸液和試劑紅細胞懸液.通常配制為0.8%1.0%濃度。(2)在專用微柱凝集卡的RhD檢測管中加入樣本紅細胞懸液50ul(3)在專用血型血清學用離心機內(nèi)離心(4)判讀并記錄凝集反應(yīng)結(jié)果【結(jié)果判定】根據(jù)紅細胞在凝膠柱內(nèi)的反應(yīng)情況解釋