微生物學(xué)-復(fù)習(xí)題-2015

1、第一章復(fù)習(xí)思考題1 .試圖示G+細(xì)菌和G-細(xì)菌細(xì)胞壁的主要構(gòu)造，并簡要說明其異同？答： 革蘭氏陽性細(xì)菌的細(xì)胞壁：G+細(xì)菌細(xì)胞壁具有較厚（20-80nm）而致密的肽聚糖層，多達(dá)20 層，占細(xì)胞壁成分的60%-90%。它同細(xì)胞膜的外層緊密相連。有的G+細(xì)菌細(xì)胞壁中含有磷壁酸也稱胞壁質(zhì)，它是甘油和核酸的酯而存在。由于磷壁酸通常帶負(fù)電荷，它可在細(xì)胞表面能調(diào)節(jié)陽離子濃度，磷壁酸與細(xì)胞生長有關(guān)，細(xì)胞生長中有自溶素酶與細(xì)胞生長起作用，磷壁酸對自溶素有調(diào)節(jié)功能，阻止胞壁過度降解和壁溶。如果細(xì)胞壁的肽聚糖層被消溶，G+細(xì)胞成為原生質(zhì)體，細(xì)胞壁不復(fù)存在，而只存留細(xì)胞膜。除鍵球菌外，大多是G+細(xì)菌細(xì)胞壁中含有極少蛋

2、白質(zhì)。革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁：G-細(xì)菌細(xì)胞壁比G+細(xì)菌細(xì)胞壁?。?15-20nm）而結(jié)構(gòu)較復(fù)雜，分外膜和肽聚糖層（2-3nm） 。在細(xì)胞壁和細(xì)胞質(zhì)膜之間有一個明顯的空間，稱為壁膜間隙。G-細(xì)菌細(xì)胞壁外膜的基本成分是脂多糖，它同細(xì)胞質(zhì)膜相同之處也是雙層類脂，但除磷脂外還含有多糖和蛋白質(zhì)。2 .試述革蘭氏染色的機(jī)制？答： 革蘭氏染色的機(jī)制是：微生物學(xué)中最重要的染色法。通過結(jié)晶紫色初染和碘液媒染后，在細(xì)菌的細(xì)胞壁以內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。G+細(xì)菌由于其細(xì)胞壁較厚，肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密，故乙醇的處理不會溶出間隙，因此能把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其保持紫色。反之，G 細(xì)菌因其

3、細(xì)胞壁薄，外膜層類脂含量高，肽聚糖層薄和交聯(lián)度差，遇脫色劑乙醇后，以類脂為主的外膜迅速溶解，這時薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋，結(jié)晶紫和碘復(fù)合物的溶出，因此細(xì)胞退成無色，這時，再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染。就使G 細(xì)菌呈現(xiàn)紅色，G+細(xì)菌則仍保留最初的紫色了。此法證明了，G+和 G 主要由于起細(xì)胞壁化學(xué)成分的差異而引起了物理特性的不同而使染色反應(yīng)不同，是一種積極重要的鑒別染色法，不僅可以用與鑒別真細(xì)菌也可鑒別古生菌。3 .什么是缺壁細(xì)菌？試列表比較4 種缺壁細(xì)菌的形成，特點和實踐意義？答： 缺壁細(xì)菌是一種特殊的缺損或損細(xì)胞壁的細(xì)菌。雖然細(xì)胞壁是一切原核生物的最基本構(gòu)造，但在自然界長期進(jìn)化中和在實驗室菌種的

4、自發(fā)突變中都會產(chǎn)生少數(shù)缺細(xì)胞壁的種類，此外， 在實驗室中，還可用人為方法通過抑制新細(xì)胞壁的合成或?qū)ΜF(xiàn)成細(xì)胞壁進(jìn)行酶解而獲得人工缺壁細(xì)菌。自發(fā)缺壁突變：L 型細(xì)菌實驗室中形狀徹底除盡：原生質(zhì)體人工方法去壁：缺壁細(xì)菌部分去除：球狀體自然界長期進(jìn)化中形成：支原體原生質(zhì)體：指人工條件下用溶菌酶除盡原有細(xì)胞壁或用青霉素抑制細(xì)胞壁的合成后，所留下的僅由細(xì)胞膜包裹著的圓球狀滲透敏感細(xì)胞，一般由G+細(xì)菌形狀。球狀體：指還殘留部分細(xì)胞的原生質(zhì)體，一般由G 細(xì)菌形成。原生質(zhì)體和球狀體的共同特點是無完整的細(xì)胞壁，細(xì)胞呈球狀，對滲透壓較敏感，即使有鞭毛也無法運動，對相應(yīng)噬菌體不敏感，細(xì)胞不能分裂等，在合適的再生培養(yǎng)基

5、中，原生體可以恢復(fù)，生長細(xì)胞壁。 L 型細(xì)菌： L 型細(xì)菌專一指在實驗室中通過自發(fā)突變形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺陷菌株，L 型細(xì)菌雖然喪失合成細(xì)胞壁的能力，但是由于質(zhì)膜完整在一定的滲透壓下不影響其生存和存殖，但是不能保持原有細(xì)胞形態(tài)，菌體形成高度多形態(tài)的變異菌。支原體：是在長期進(jìn)化過程中形成的適應(yīng)自然生活條件的無細(xì)胞壁的原生核微生物。 其細(xì)胞壁中含有一般原核生物所沒有的甾醇，因此雖缺乏細(xì)胞壁，其細(xì)胞仍有較高的機(jī)械強(qiáng)度。人們在實驗中，還可用人為方法通過抑制新生細(xì)胞壁的合成或?qū)ΜF(xiàn)成細(xì)胞壁進(jìn)行酶解而獲得人工缺壁細(xì)菌。4. 研究細(xì)菌芽孢有何理論和實際意義？答： 芽孢的有無，形態(tài)， 大小和著生位置等是細(xì)

6、菌分類和鑒定中的重要形態(tài)學(xué)指標(biāo)。這類菌種芽孢的存在，有利于提高菌種的篩選效率，有利于菌種的長期保藏。是否能殺滅一些代表菌的芽孢是衡量和制定，各種消毒滅菌標(biāo)準(zhǔn)的主要依據(jù)。許多產(chǎn)芽孢細(xì)菌是強(qiáng)致病菌，例如：炭疽芽孢桿菌肉毒校菌和破傷風(fēng)校菌等。有些產(chǎn)芽孢細(xì)菌可伴隨產(chǎn)生有用的產(chǎn)物，如：抗生素短桿菌肽等。5. 什么是菌落？試討論微生物的細(xì)胞形態(tài)與菌落形態(tài)間的相關(guān)性及其內(nèi)在原因？答： 菌落是指單個（或聚集在一起的一團(tuán)）微生物在適宜的固體培養(yǎng)表面或內(nèi)部生長， 繁殖到一定程度可以形成肉眼可見的，有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞生長群體。菌落形態(tài)包括菌落的大小，形態(tài)，邊緣，光澤質(zhì)地，顏色和透明程度等，每一種細(xì)菌在一定條件下

7、形成固定的菌落特征，不同種或同種的培養(yǎng)條件下，菌落特征是不同的，這些特征對菌落種識別，鑒定有一定意義。細(xì)胞形態(tài)是菌落的基礎(chǔ)，菌落形態(tài)是細(xì)胞形態(tài)在群體集聚時反映，細(xì)菌是原微生物故形成的菌落也小，細(xì)菌個體之間瞞著水分，所以整個菌落顯得濕潤，易被接種環(huán)挑起，球菌形成隆起的菌落，有鞭毛細(xì)菌常形成邊緣不規(guī)則的菌落，具有硬膜的菌落表面較透明，邊緣光滑整齊，有芽孢的菌落表面干燥皺褶，有些能產(chǎn)生紫色的細(xì)菌，菌落還顯出鮮艷的顏色。其原因， 菌落的特征是細(xì)菌自身的形態(tài)結(jié)構(gòu)及營養(yǎng)特性在菌落生長形態(tài)上的反應(yīng)。6. 試以鏈霉菌為例，描述這類典型放線菌的菌絲，孢子和菌落的一般特征？答： 放線菌是一類主要呈菌絲狀生長和以孢

8、子繁殖的陸生性較強(qiáng)的原核生物，多數(shù)生活在土壤中，它們中有許多是抗生素的生產(chǎn)物，鏈霉菌屬是典型的放線菌，它們基內(nèi)有基內(nèi)菌絲和氣生菌絲構(gòu)成，后者成熟后，會分化出各種類型的孢子絲，其上產(chǎn)生形態(tài)，顏色各異的分生孢子，便于傳播和大量繁殖。放線菌在固體培養(yǎng)基上形成，與細(xì)菌不同的菌落特征，放線菌菌絲互相交錯纏線形成質(zhì)地致密的小菌落，干燥，不透明，難以挑取，當(dāng)大量孢子覆蓋于菌落表面時， 就形成面為粉末狀或顆粒狀的典型放線菌菌落，由于基內(nèi)菌絲和孢子常有顏色，使得菌落的反正面呈現(xiàn)出不同的色澤。放線菌的菌落由菌絲體組成，一般圓形，光平或有許多褶皺，光學(xué)顯微鏡下觀察，菌落類不同可分為兩大類：一類是由產(chǎn)生大量的分枝和氣

9、生菌絲的菌種所形成的菌落，另一類菌落由不產(chǎn)生大量菌絲體的種類形成，如諾長氏放線菌的菌落。第二章 復(fù)習(xí)思考題1. 試列表比較真核生物和原核生物的10 個主要差別？比較項目真核生物原核生物細(xì)胞大小較大（通常直徑>2nm）較?。ㄍǔＶ睆?lt;2nm）若有壁，其主要成分纖維素，幾丁質(zhì)等多數(shù)的為肽聚糖線粒體有無葉綠體光合自養(yǎng)生物中有無核糖體80S（指細(xì)胞質(zhì)核糖體）70SDNA含量低（約5%）高（約10%）有絲分裂有無光合作用部位葉綠體細(xì)胞膜生物固氮能力無有些有繁殖方式有性，無性等多種一般無性2. 試總結(jié)酵母菌的5 個特點，并列出各個特點的例處？答： 酵母菌是一個通俗名稱，一般指發(fā)酵糖類的各種單細(xì)

10、胞真菌，由于不同的酵母菌在進(jìn)化和分類地位上的異源性，因此很難對酵母菌下一個確切的定義，通常認(rèn)為， 酵母菌具有以下5 個特點： 個體一般以單細(xì)胞非菌絲狀態(tài)存在。多數(shù)營出芽繁殖。能發(fā)酵糖類產(chǎn)能。細(xì)胞壁常含甘露聚糖。常生活在含糖量較高酸度較大的水生環(huán)境中。多分布在含糖的偏酸性環(huán)境，也稱為“糖菌”。如水果蔬菜，葉子，樹皮等處，及葡萄園和果園土壤中等，有的酵母菌可利用烴類物質(zhì)：如，假絲酵母，畢亦式酵母是正烷酵生產(chǎn)三羧酸的高產(chǎn)微生物，為石油化工開發(fā)許多嶄新的工藝和生產(chǎn)，人類和第一種“家養(yǎng)微生物”釀造工業(yè)，食品工業(yè)，醫(yī)藥工業(yè)，飼料工業(yè)，化學(xué)工業(yè)。3. 試列表比較四大類微生物的細(xì)胞形態(tài)和菌落特征？菌落特征微生

11、物類別單細(xì)胞微生物菌絲狀微生物細(xì)菌酵母菌放線菌霉菌主 要 特 征菌 落含水狀態(tài)很濕或較濕較濕干燥或較干燥干燥外觀形態(tài)小而凸起或 大而平坦大而凸起小而緊密大而致密細(xì)胞相互 關(guān)系單個分散或 有一定排列 方式單個分散假絲狀絲狀交織絲狀交織形態(tài)小而均勻大而分化細(xì)而均勻粗而分化特征個別有芽孢參 考 特 征菌落透明度透明或稍透 明稍透明不透明不透明菌落與培養(yǎng)不結(jié)合不結(jié)合牢固結(jié)合較牢固結(jié)合菌落顏色多樣單調(diào)十分多樣十分多樣菌落正反面相同相同一般不同一般不同菌落邊緣一般看不到細(xì)胞可見球狀，卵圓狀有時可見細(xì) 胞絲狀細(xì)胞可見粗絲狀細(xì)胞細(xì)胞生長速度一般很快較快慢一般較快氣味一般很臭多帶酒香味常有泥腥味往往有霉味4.

12、試列表比較細(xì)菌，放線菌，酵母菌和霉菌細(xì)胞壁成分的異同，并提出制備相 應(yīng)原生質(zhì)體的酶或試劑？答： 細(xì)胞壁成分的異同：細(xì)菌分為G+和 G，G+肽聚糖含量高，G含量低，G+磷壁酸含量較高，G而不含磷壁酸；G+類脂一般無，而G含量較大；G+不含蛋白質(zhì)，G含量較高。放線菌為G，其細(xì)胞壁具有G所具有的特點。酵母菌和霉菌為真菌， 酵母菌的細(xì)胞壁外層為甘露聚糖，內(nèi)層為葡萄聚糖；而霉菌的細(xì)胞壁成分為幾丁質(zhì)，也含有纖維素。原生質(zhì)體制備方法：G+細(xì)菌原生質(zhì)體獲得：青霉菌，溶菌霉。G細(xì)菌原生質(zhì)體獲得：EDTA螯合劑處理，溶菌霉。放線菌原生質(zhì)體獲得：青霉素，溶菌酶。酵母菌原生質(zhì)體獲得：蝸牛消化酶。霉菌原生質(zhì)體獲得：蝸牛

13、消化酶，纖維素酶。5. 各種屬酶菌的結(jié)構(gòu)和繁殖方式？答： 無隔菌絲：為長管狀單細(xì)胞，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含多個核其生長表現(xiàn)為菌絲的延長和細(xì)胞核的增多，這是低等真菌所具有的菌絲類型。有隔菌絲：菌絲中有隔膜，被隔膜隔開的一段菌絲就是一個細(xì)胞，菌絲由多個細(xì)胞組成，每個細(xì)胞內(nèi)有一至多個核，隔膜上有單孔或多孔，細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核可自由流通，每個細(xì)胞功能相同。營養(yǎng)菌絲：伸入到培養(yǎng)基內(nèi)部，以吸收養(yǎng)分為主的菌絲。氣生菌絲：向空中生長菌絲片段包囊孢子分生孢子繁殖方式無性孢子厚坦孢子節(jié)孢子孢子卵孢子有性孢子接合孢子子囊孢子 擔(dān)孢子第六章 復(fù)習(xí)思考題（微生物生長及其控制）1. 微生物的生長與繁殖間的關(guān)系如何？研究它們的生長繁殖有何

14、理論與實踐意義？答： 生長， 繁殖和死亡是微生物最本質(zhì)的屬性之一，其中的規(guī)律對科學(xué)研究和指導(dǎo)生產(chǎn)實踐具有重要的意義。生長是一個逐步發(fā)生的量變過程，繁殖是一個產(chǎn)生新的生命個體的質(zhì)變過程。高等生物里這兩個過程可以明顯分開，但在低等特別是在單細(xì)胞的生物里，這兩個過程是緊密聯(lián)系又很難劃分的過程。單個微生物細(xì)胞 合適的外界條件，吸收營養(yǎng)物質(zhì)，進(jìn)行代謝同化作用的速度超過了異化作用 個體的生長原生質(zhì)的總量（重量，體積，大?。┚筒粩嗟卦黾尤绻骷?xì)胞組分是按恰當(dāng)?shù)谋壤鲩L時，則達(dá)到一定程度后就會發(fā)生繁殖，引起個體數(shù)的增加 群體內(nèi)各個個體的進(jìn)一步生長群體的生長。微生物的生長繁殖是其在內(nèi)外各種環(huán)境因素相互作用下生理

15、，代謝等狀態(tài)的綜合反映， 因此， 有關(guān)生長繁殖的數(shù)據(jù)就可作為研究多種生理，生化和遺傳等問題的重要指標(biāo)；同時， 微生物的生產(chǎn)實踐上的各種應(yīng)用或是人類對致病，霉腐等有害的微生物的防治，也都與它們的生長繁殖或抑制密切相關(guān)。這是研究微生物生長繁殖規(guī)律的重要指標(biāo)。2. 平板菌落計數(shù)法有何優(yōu)點？試對澆注平板法和涂布平板法作一比較？答： 平板菌落計數(shù)法的優(yōu)點：平板計數(shù)簡單靈敏，廣泛應(yīng)用于食品，水體及土壤樣品中活菌的計數(shù)。缺點： 可能因為操作不熟練使得細(xì)胞未均勻分散或者由于培養(yǎng)基不合適不能滿足有微生物的需要而導(dǎo)致結(jié)果偏低，或使用傾平板技術(shù)時因培養(yǎng)基溫度過高損傷細(xì)胞等原因造成結(jié)果不穩(wěn)定等。澆注平板法：為最常用的

16、分離培養(yǎng)細(xì)菌的方法，通過平板劃線后，可使細(xì)胞分散生長， 形成單個菌落，有利于含有多種細(xì)菌的標(biāo)本中分離出目的菌。其目的都要使細(xì)菌呈現(xiàn)單個菌落生長，便于同雜菌鑒別。涂布平板法：由于將含菌料現(xiàn)加到還較燙培養(yǎng)基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡， 而且采用稀釋平臺法也會使一些嚴(yán)格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長，因此在微生物學(xué)研究中更常用的純種分離方法是涂布平板法。3. 在微生物的培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基的PH變化有何規(guī)律？如何合理調(diào)整以利微生物更好地生長和產(chǎn)生大量代謝產(chǎn)物？答： 微生物的生命活動過程中會有自動地改變外界環(huán)境的PH，其中發(fā)生PH改變有變酸和變堿兩種過程，在一般微生物的培養(yǎng)中往往以

17、變酸占優(yōu)勢，因此， 隨著培養(yǎng)時間延長，培養(yǎng)基的PH會逐漸下降。PH的變化還與培養(yǎng)基的組分尤其是碳氮比有很大關(guān)系，碳氮比高的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后PH明顯下降；相反，碳氮比低的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后，其PH常會明顯上升。在微生物培養(yǎng)過程中的變化往往對該微生物本身及發(fā)酵生產(chǎn)均不利的影響，因此，如何及時調(diào)整PH就成了微生物培養(yǎng)和發(fā)酵生產(chǎn)中的一項重要措施。通過總結(jié)實踐中的經(jīng)驗，這里把人工調(diào)節(jié)PH的措施分成“治標(biāo)”和“治本”兩大類，前者指根據(jù)表面現(xiàn)象而進(jìn)行直接，及時， 快捷但不持久的表面化調(diào)節(jié)，后者則是指根據(jù)內(nèi)在機(jī)制而采用的間接，緩效但可發(fā)揮持久作用的調(diào)節(jié)。這兩類措施表解如下：過酸時：加NaOH,N2aCO3等堿液中和

18、“治標(biāo)”過堿時：加H2SO4， HCl等酸液中和PH調(diào)節(jié)過酸時：加適當(dāng)?shù)矗杭幽蛩兀琋aNO3， NH4OH或蛋白質(zhì)“治本”等提高通氣量過堿時：加適當(dāng)碳源：加糖，乳酸醋酸，檸檬酸或油脂等降低通氣量。4. 抗生素對微生物的作用機(jī)制可分幾類？試各舉一例。名稱類型作用機(jī)制抑制細(xì)胞壁合成青霉素抑制肽尾與肽橋間的轉(zhuǎn)化作用引起細(xì)胞壁降解溶葡萄球菌素水解肽尾和分解胞壁酸- 葡萄球菌干擾細(xì)胞壁多粘菌素使細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)釋放抑制蛋白質(zhì)合成紅霉素與 50S核糖體結(jié)合抑制DNA合成灰黃霉素不清楚抑制DNA復(fù)制絲裂霉素使 DNA的互補鏈相結(jié)合抑制DNA轉(zhuǎn)錄放線菌素D與 DNA中的鳥嘌呤結(jié)合抑制RNA合成利福霉素與 R

19、NA聚合酶結(jié)合5. 抗藥性是如何產(chǎn)生的？其作用類型有幾種？試各舉一例。答： 抗藥性是通過遺傳途徑產(chǎn)生，例如基因突變，遺傳重組或質(zhì)粒轉(zhuǎn)移等。產(chǎn)生原因：產(chǎn)生一種能使藥物失去活性的酶；例如：抗青霉素的菌株可產(chǎn)生 -內(nèi)酰胺酶， 從而使這兩類抗生素的核心結(jié)構(gòu)中的內(nèi)酰胺酶鏈斷裂而喪失活性。把藥物作用的靶位加以修飾和改變；抗鏈霉素的菌株可因而通過突變使30S 核糖體亞單位的蛋白質(zhì)組分改變，從而使鏈霉素不再與這種變更的30S 亞單位結(jié)合。形成 “救護(hù)途徑”既通過被藥物阻斷的代謝途徑發(fā)生變異，而變?yōu)槿阅芎铣稍瓉懋a(chǎn)物的新途徑。使藥物不能透過細(xì)胞膜。通過主動外排系統(tǒng)吧進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的藥物泵出細(xì)胞外。第七章 復(fù)習(xí)思考題（

20、微生物的遺傳變異和育種）【 P237】1. 試述用Ames法檢測微量致癌，致突變，致畸變物質(zhì)的理論依據(jù)，方法要點和優(yōu)缺點。答：Ames實驗是一種利用細(xì)菌營養(yǎng)缺陷型的恢復(fù)突變來檢測環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑的簡便有效方法。理論依據(jù)：由于一切生物的遺傳物質(zhì)都是核酸，尤其是DNA，因此凡是能改變核酸結(jié)構(gòu)的生物學(xué)功能，某些化學(xué)物質(zhì)會引起核酸結(jié)構(gòu)損傷，并對生物具有致突變，致癌變，致畸變的作用。根據(jù)生物化學(xué)統(tǒng)一性原理， 人們可以選用最簡單的低等生物作為模型去了解發(fā)生在復(fù)雜的高等生物體內(nèi)的突變事件的原因。鼠傷寒沙門氏的組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株在基本培養(yǎng)基的平板上不能生長，如發(fā)生恢復(fù)突變成原養(yǎng)型后能生長。方法

21、大致是在含持測可凝 “三致”物的試樣中，加入鼠肝勻漿液，經(jīng)一段時間保溫后，吸入濾紙片中，然后將濾紙片放置于平板中央，經(jīng)過培養(yǎng)后出現(xiàn)三種情況：在平板上無大量菌落產(chǎn)生，說明試樣中不含誘變劑。在紙上周圍有一抑制，其外周圍出現(xiàn)大量菌落說明試樣中有某種高濃度誘變劑存在。在紙上周圍有大量菌落，說明試樣中有濃度適當(dāng)?shù)恼T變劑存在。優(yōu)點：快速，準(zhǔn)確，費用省等。2. 試用表解概括一下篩選營養(yǎng)缺陷型菌株的主要步驟和方法。步驟過程方法第一步誘變劑處理一般誘變劑處相同紫外線等物理方法 化學(xué)誘變劑法第二步淘汰野生型在誘變后的存活個體中，營養(yǎng)缺陷型的比例一般較低，通常只有百分之幾至千分之幾，從而達(dá)到“濃縮”極少數(shù)營養(yǎng)缺陷型

22、的目的抗生素法 菌絲過濾法第三步檢出缺陷型要用連個培養(yǎng)皿才能檢測出的，有逐個檢出法和影印接種法，可根據(jù)實驗要求和實驗室具體條件加以選用。夾層培養(yǎng)法 限量補充培養(yǎng)法 逐個檢出法 影印平板法第四步鑒定缺陷型生長譜法是指在混有供試菌的基本培養(yǎng)基平板表面點加微量營養(yǎng)物視某營養(yǎng)物的周圍有否長菌來確定，該供試菌的營養(yǎng)要求的一種快速，直觀的方法。生長譜法3. 試簡述轉(zhuǎn)化的基本過程？答： 轉(zhuǎn)化的基本過程：供體菌dsDNA片段與感受態(tài)體菌細(xì)胞表面的膜連DNA結(jié)合蛋白相結(jié)合，其中一條鏈被核酸酶切開和水解，；另一條進(jìn)入細(xì)胞。來自供體菌的ssDNA片段被細(xì)胞內(nèi)的感受態(tài)特異的ssDNA結(jié)合蛋白相結(jié)合，并使ssDNA結(jié)合

23、蛋白相結(jié)合，并且使ssDNA進(jìn)入細(xì)胞，隨即在RecA蛋白的介導(dǎo)下與受體菌核染色體上的同源區(qū)段配對，重組， 形成一小段雜合DNA區(qū)段。受體菌染色體組進(jìn)行復(fù)制，于是雜合區(qū)也跟著得到復(fù)制。細(xì)胞分裂后，形成一個轉(zhuǎn)化子和一個仍保持受體菌原來基因型的子代。4. 試比較 E.coil 的 F+F-F和Hfr4 菌株的特點。并圖示它們間的相互聯(lián)系。答：F+ 菌株：既“雄性”菌株，指細(xì)胞內(nèi)存在幾個F 質(zhì)粒，并在細(xì)胞表面著生一至幾條性菌毛的菌株。F-菌株：既“雄性”菌株，指與F+菌株相應(yīng)的，細(xì)胞中無F 質(zhì)粒， 細(xì)胞表面也無性菌毛的菌株，不含因子。Hfr4 菌株： 在 Hfr 菌株細(xì)胞中，因 F 質(zhì)粒已從游離態(tài)轉(zhuǎn)變

24、成在核染色體組特定位點上的整合態(tài)。Hfr 菌株的染色體向F-菌株的轉(zhuǎn)移過程與上述的F 質(zhì)粒的F+ 轉(zhuǎn)移至F-基本相同。 Hfr 與 F細(xì)胞配對通過性菌毛使兩個細(xì)胞直接接觸，并形成接合管，Hfr的染色體在起始子（i ）部開始復(fù)制，F(xiàn) 質(zhì)粒插入的部分才告結(jié)束，供體DNA的一條單鏈通過性菌毛進(jìn)入受體細(xì)胞。發(fā)生接合中斷，F(xiàn)-成了一個部分雙倍體，在那里供體細(xì)胞的單鏈DNA片段合成了另一條互補的DNA鏈。外源雙鏈DNA片段與受體菌（F-）的染色體DNA雙鏈間進(jìn)行雙交換，從而產(chǎn)生了穩(wěn)定的接合子。5. 試列表比較原核微生物的轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)導(dǎo)，接合和原生質(zhì)體融合的異同？轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)導(dǎo)原生質(zhì)體融合接合源基因供體菌的DNA片段

25、供體菌的DNA片段供體菌的全部基因F 質(zhì)?；蚬w菌的 DNA片段媒介無dsDNA直接與感受體接合醋鋰或CaCl2缺陷噬菌體無性菌毛增進(jìn)措施處理，增加感受態(tài)個數(shù)對雙重溶源菌 進(jìn)行誘導(dǎo)PEG或電源沖使 融合控制F 質(zhì)粒舉例十分普通，主要有肺炎鏈球菌，嗜血桿菌屬，芽孢桿菌屬，根瘤屬鼠傷寒沙門氏 菌，變形桿菌 屬， 弧菌屬，根瘤菌屬原生生物和真 核生物都有主要在革蘭氏陰性菌中，放線菌中常見共同點實現(xiàn)了外源基因的導(dǎo)入，并獲得了新的穩(wěn)定重組子，表現(xiàn)出若干新遺傳性狀6. 基因工程的基本操作過程是怎樣的？試用簡圖表示并簡要說明。答： 基因工程的基本操作過程是：目的基因的取得：取得具生產(chǎn)意義的目的基因主要有3 條途徑： 從適當(dāng)?shù)墓w生物包括微生物，動物或植物中提取；通過逆轉(zhuǎn)錄酶的作用，由mRNA合成cDNA。由化學(xué)合成方法有特定功能的目的基因。優(yōu)良載體的選擇：優(yōu)良載體必須具備幾個條件：是一個相對分子質(zhì)量較小，結(jié)構(gòu)清楚，具自我復(fù)制能力的復(fù)制子；能在受體細(xì)