高三一輪復(fù)習(xí)選修一微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用習(xí)題

1、課時考點訓(xùn)練題組、微生物的應(yīng)用1(2013年高考江蘇卷)某研究小組從有機廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是()A培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌B轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進行劃線C接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次解析：本題考查了微生物實驗室培養(yǎng)的相關(guān)知識。培養(yǎng)基滅菌后再分裝到培養(yǎng)皿中；轉(zhuǎn)換劃線角度前要灼燒接種環(huán)，冷卻后再從上次劃線的末端開始進行劃線；接種后的培養(yǎng)皿需放在恒溫箱中進行培養(yǎng)，一般每隔12 h或24 h觀察一次。答案：B2(2012年高考北京卷)高中生物學(xué)實驗中，在接種時不進行嚴(yán)格無菌操作對實驗結(jié)果影響最大的一項是 ()A將少許干酵母加入到

2、新鮮的葡萄汁中B將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上C將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無菌培養(yǎng)基上D將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上解析：本題主要考查幾種常見生物學(xué)實驗對無菌操作的要求。生產(chǎn)果酒和腐乳時對無菌的要求不是很高，接種不需要進行嚴(yán)格的無菌操作；土壤浸出液中含有多種雜菌，所以利用選擇培養(yǎng)基篩選土壤浸出液中特定微生物時，不進行嚴(yán)格無菌操作也不會影響實驗結(jié)果；植物組織培養(yǎng)技術(shù)成功的關(guān)鍵是無菌條件，若接種時不進行嚴(yán)格無菌操作將可能導(dǎo)致實驗失敗，故C項符合題意。答案：C3(2013年高考新課標(biāo)全國卷)臨床使用抗生素前，有時需要做細(xì)菌耐藥實驗。實驗時，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實驗步驟

3、操作，以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性?；卮鹣铝袉栴}：(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用_法或_法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當(dāng)稀釋，用_法接種于固體培養(yǎng)基表面，在37 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，使其均勻生長，布滿平板。(3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A_；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素B_；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明_；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明

4、圈中出現(xiàn)了一個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的_。(4)根據(jù)上述實驗結(jié)果，為達到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素_。解析：本題主要考查微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識。(1)將細(xì)菌接種到固體培養(yǎng)基上的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)由(1)獲取的致病菌單菌落，經(jīng)過適當(dāng)稀釋，用涂布法接種至固體培養(yǎng)基表面進一步培養(yǎng)。(3)在檢測致病菌對抗生素的敏感性實驗中，若含A種抗生素的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明周圍的致病菌死亡，該致病菌對A種抗生素敏感；若含B種抗生素的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明致病菌對B種抗生素不敏感；若含C種抗生素的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明該致病菌對C的敏感性比對

5、A的弱；若含D種抗生素的濾紙片周圍透明圈也比含A的小，說明A、B、C、D四種抗生素的殺菌效果最顯著的為A。透明圈中出現(xiàn)的菌落為耐藥菌。(4)根據(jù)(3)中分析，為達到抗菌目的最好選用抗生素A。答案：(1)劃線稀釋涂布(或涂布)(2)涂布(3)敏感不敏感該致病菌對C的敏感性比對A的弱耐藥菌(4)A4(2013年高考四川卷)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人將地衣芽孢桿菌的淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中，經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種(過程如圖甲所示)。(1)圖甲中，過程需要的酶有_。為達到篩選目的，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以_作為唯一碳源。、過程需重復(fù)幾次，目的是_。(2)某同學(xué)嘗試過程的操作

6、，其中一個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學(xué)的接種方法是_；推測該同學(xué)接種時可能的操作失誤是_。(3)以淀粉為原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵，接種_菌的發(fā)酵罐需要先排氣，其原因是_。(4)用凝膠色譜法分離淀粉酶時，在色譜柱中移動速度較慢的蛋白質(zhì)，相對分子質(zhì)量較_。解析：本題考查生物技術(shù)實踐與基因工程在生產(chǎn)生活中的應(yīng)用。(1)構(gòu)建基因表達載體時需限制酶和DNA連接酶。為篩選可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以淀粉作為唯一碳源。、過程需重復(fù)幾次，目的是進一步篩選純化獲得分解淀粉能力強的酵母菌。(2)分析圖乙平板中經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布狀況可知，菌落分布

7、不均勻，此現(xiàn)象可能是該同學(xué)涂布不均勻所致。(3)工程酵母菌與普通酵母菌相比，直接利用淀粉的能力強，分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力強，從而使酒精發(fā)酵產(chǎn)生CO2的速率更快，因此培養(yǎng)工程酵母菌的發(fā)酵罐需要先排氣。(4)凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部的通道，移動速度較快。而相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)能進入凝膠內(nèi)部，移動路徑較長，移動速度也較慢。答案：(1)限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶淀粉進一步篩選純化獲得分解淀粉能力強的酵母菌(2)稀釋涂布平板法涂布不均勻(3)工程酵母工程酵母菌分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力強，導(dǎo)致酒精發(fā)酵產(chǎn)生CO2的速率更快(4

8、)小5有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株?；卮饐栴}：(1)在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上。從功能上講，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即_和_。(3)為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力_。(4)通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中，實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_和_。無菌技術(shù)要求實驗操作應(yīng)在酒精燈_附近進行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。解析：(1)可以將所需要的微生物從混雜的微生物群中分離出來的

9、培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。欲篩選出能降解原油的菌株，則培養(yǎng)基中應(yīng)只含有原油而無其他碳源，這樣不能降解原油的細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生存，能降解原油的細(xì)菌才能在只含原油這一碳源的培養(yǎng)基上生存。(2)分離純化菌種時，接種的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，其目的都是使聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單菌落，以便于純化菌種。(3)降解原油能力越強的菌株，在菌落周圍形成的分解圈越大。(4)實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌(如接種環(huán))、干熱滅菌(如培養(yǎng)皿)和高壓蒸汽滅菌(如培養(yǎng)基)等。無菌技術(shù)要求整個實驗操作都要在酒精燈火焰附近進行，以避免周圍微生物的污染。答案：(1)原油選擇(2)平板劃線

10、法稀釋涂布平板法(3)強(4)干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰課時高效訓(xùn)練一、選擇題1關(guān)于微生物的實驗室培養(yǎng)技術(shù)，下列表述正確的是()A溶化時將稱好的牛肉膏從稱量紙上直接倒入燒杯B常見的消毒方法包括灼燒、煮沸、紫外線和噴灑化學(xué)試劑等C配制固體培養(yǎng)基時加入瓊脂，其目的是為微生物生長提供碳源D用移液管稀釋菌液時，吹吸三次的目的是使菌液與水充分混勻解析：本題考查微生物的培養(yǎng)以及培養(yǎng)基的配置和消毒的方法等。稱好的牛肉膏要連同稱量紙一起放入燒杯，待牛肉膏與稱量紙分離后，用玻璃棒取出稱量紙；灼燒屬于滅菌方法，不屬于消毒方法；瓊脂是作為固體培養(yǎng)基的凝固劑，而不是為微生物提供碳源；吹吸三次可以使菌液充分混合均勻，使實

11、驗結(jié)果更加準(zhǔn)確。答案：D2欲從土壤中分離出能分解尿素的細(xì)菌，下列實驗操作中不正確的是()A將土壤用無菌水進行一系列的梯度稀釋B同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個平板C可將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對照D用加入剛果紅指示劑的培養(yǎng)基可篩選出分解尿素的細(xì)菌解析：本題考查土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離實驗操作過程。在以尿素為碳源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，指示劑變紅說明該菌種能分解尿素；而含剛果紅的培養(yǎng)基是用于鑒別分解纖維素的細(xì)菌。答案：D3分離纖維素分解菌的實驗過程中操作有誤的是()A經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上B富集培養(yǎng)這一步可省略，但培養(yǎng)纖維素分解菌少C經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，用剛

12、果紅染色D對照組可用同樣量的培養(yǎng)液涂布到不含纖維素的培養(yǎng)基上解析：經(jīng)選擇培養(yǎng)后，再經(jīng)稀釋，才能將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上；富集培養(yǎng)可省略；經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，用剛果紅染色；設(shè)置對照能證明經(jīng)富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的微生物。答案：A4某細(xì)菌菌株需從環(huán)境中攝取現(xiàn)成的亮氨酸(20種氨基酸中的一種)才能生長，此菌株對鏈霉素敏感(對鏈霉素?zé)o抗性)。科學(xué)家用誘變劑處理此菌株，想篩選出表中列出的菌株類型。依據(jù)篩選目的，培養(yǎng)基添加物質(zhì)合理的組別是(注：L亮氨酸；S鏈霉素；“”加入：“”不加入。如，L：不加入亮氨酸；S：加入鏈霉素)()解析：本題考查用選擇培養(yǎng)基選擇特定類型的菌株。需要亮氨酸的菌株對鏈霉素

13、敏感，因此篩選不需要亮氨酸的菌株需要在沒有亮氨酸且無鏈霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)；而篩選出抗鏈霉素的菌株需要在培養(yǎng)基中加入鏈霉素，而篩選不需要亮氨酸且抗鏈霉素的菌株需要加入鏈霉素，不加亮氨酸，根據(jù)這一要求只有B符合。答案：B二、非選擇題5(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮_、_和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、_、_等優(yōu)點，因此常作為遺傳學(xué)研究的實驗材料。(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進行_(消毒、滅菌)；操作者的雙手需進行清洗和_；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能_。(3)若用稀

14、釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所得估計值更接近實際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的_。(4)通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細(xì)菌進行初步的_。(5)培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_。(6)若用大腸桿菌進行實驗，使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過_處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。解析：(1)大腸桿菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點，培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。(2)滅菌是用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，所以對

15、培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌；消毒是用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物，操作者的雙手需要進行清洗和消毒，紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。(3)稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)，應(yīng)保證樣品稀釋的比例適合。(4)對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征進行初步的鑒定。(5)培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。(6)因為有的大腸桿菌會釋放一種強烈的毒素，并可

16、能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。答案：(1)溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短(2)滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)(3)比例合適(4)鑒定(或分類)(5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(6)滅菌6某研究性學(xué)習(xí)小組的同學(xué)，為了從土壤中篩選纖維素分解菌，利用下列材料和用具進行了實驗，請完善下列實驗步驟。提示：剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物，纖維素分解菌在含有剛果紅和纖維素的培養(yǎng)基上形成有透明圈的菌落。材料用具：采集的土樣、研缽、配制纖維素分解菌培養(yǎng)基的各種原料、瓊脂、纖維素粉、剛果紅溶液、培養(yǎng)箱、無菌水。實

17、驗步驟：(1)利用培養(yǎng)纖維素分解菌培養(yǎng)基的各種原料、瓊脂及_配制固體培養(yǎng)基，滅菌。(2)將采集的土壤樣品在研缽中研碎后_，制成土壤勻漿。(3)利用無菌操作方法把土壤勻漿_到培養(yǎng)基上，放在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)一段時間。(4)用顯微鏡觀察纖維素分解菌時，要從_挑取材料制成臨時裝片。解析：本題考查分解纖維素細(xì)菌的分離。分離纖維素分解菌的培養(yǎng)基中要加入纖維素粉做碳源，加入剛果紅溶液，剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物，故將纖維素分解菌接種在含有剛果紅和纖維素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。采集的土壤樣品在研缽中研碎后需加入無菌水，制成土壤勻漿。利用無菌操作方法把土壤勻漿點接或接種到培養(yǎng)基上，放在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。纖維素分解菌產(chǎn)生的纖

18、維素酶分解剛果紅纖維素復(fù)合物，會產(chǎn)生透明圈，故挑取周圍有透明圈的菌落制成臨時裝片，可觀察到纖維素分解菌。答案：(1)纖維素粉和剛果紅溶液(2)加入無菌水(3)點接或接種(4)周圍有透明圈的菌落7(2014年南通模擬)多環(huán)芳烴菲在染料、殺蟲劑等生產(chǎn)過程中被廣泛使用，是土壤、河水中常見的污染物之一。下圖表示科研人員從被石油污染的土壤中分離獲得能降解多環(huán)芳烴菲菌株Q的主要步驟。請回答：(1)步驟的培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中加入多環(huán)芳烴菲作為唯一碳源，目的是_。(2)步驟的培養(yǎng)過程中，需將錐形瓶放在搖床上振蕩，一方面使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率；另一方面能_。(3)步驟用平板劃線法純化菌株Q

19、過程中，在做第二次以及其后的劃線操作時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，原因是_。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時要倒置培養(yǎng)的目的是_。(4)接種環(huán)通過灼燒來滅菌，完成步驟中劃線操作，共需灼燒接種環(huán)_次。(5)為了獲得分解多環(huán)芳烴菲能力更強的菌株，研究人員又對菌種Q進行了誘變處理，得到突變株K。為了比較兩種菌株降解多環(huán)芳烴菲的能力，設(shè)計了下列實驗，請補全實驗步驟：取9只錐形瓶均分成三組，編號A、B、C。_。_。28 時，恒溫培養(yǎng)3天后，測定錐形瓶中多環(huán)芳烴菲的降解率。解析：(1)培養(yǎng)液中加入多環(huán)芳烴菲作為唯一碳源，目的是篩選出能分解多環(huán)芳烴菲的菌株Q。(2)培養(yǎng)過程中錐形瓶放在搖床上振蕩，既能增加溶氧量

20、也能有利于菌株和營養(yǎng)物質(zhì)接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。(3)劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處的要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時要倒置培養(yǎng)的目的是因為培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)形成水珠，如果正放，水珠滴落在培養(yǎng)基平面上會影響菌落的生長(污染培養(yǎng)基)，所以要保證培養(yǎng)基的干燥，必須倒置培養(yǎng)。(4)每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，在劃線接種結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)，故五個區(qū)域劃線前和操作完成后共6次灼燒接種環(huán)。(5)根據(jù)實驗?zāi)康模罕容^兩種菌株降解多環(huán)芳烴菲的能力，9只錐形瓶均分成A、B、C三組，每支錐形瓶中分別加

21、入等量以多環(huán)芳烴菲為唯一碳源的培養(yǎng)液，再向A、B、C三組培養(yǎng)液中分別加入等量的無菌水、菌株Q菌液和突變株K菌液，相同條件下培養(yǎng)測定錐形瓶中多環(huán)芳烴菲的降解率。答案：(1)篩選出菌株Q(2)增加培養(yǎng)液中的溶氧量(3)線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基(4)6(5)向9支錐形瓶中分別加入等量以多環(huán)芳烴菲為唯一碳源的培養(yǎng)液向A、B、C三組培養(yǎng)液中分別加入等量的無菌水、菌株Q菌液和突變株K菌液8.(2014年武漢模擬)某些微生物能合成纖維素酶，通過對這些微生物的研究，人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn)酒精，用纖維素酶處理服裝面料等。研究人員用化合物A、硝酸鹽、磷酸

22、鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選到能產(chǎn)生纖維素酶的微生物。請分析并回答問題：(1)培養(yǎng)基中加入的化合物A是_，為微生物的生長提供_，這種培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)在篩選纖維素分解菌的過程中，通常用_染色法，這種方法能夠通過顏色反應(yīng)直接對纖維素分解菌進行篩選。甲同學(xué)在實驗時得到了如上圖所示的結(jié)果，則纖維素分解菌位于_內(nèi)。ABC D(3)在培養(yǎng)纖維素分解菌的過程中，進行平板劃線時，每次劃線結(jié)束后仍然要灼燒接種環(huán)，原因是_。(4)某同學(xué)打算從牛胃中分離纖維素分解菌并計數(shù)，與分離醋酸菌相比，進行培養(yǎng)時除了營養(yǎng)不同外，最主要的實驗條件差別是_，該同學(xué)采用活菌計數(shù)法統(tǒng)計的菌落數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目

23、_。(5)丙同學(xué)在提取和分離纖維素酶的過程中，為了保證抵制外界酸和堿對酶活性的影響，采取的措施是向提取液和分離液中添加_；若探究纖維素酶活性的最適溫度，如何設(shè)置對照？_。解析：(1)根據(jù)該微生物能產(chǎn)生纖維素酶的特點，在其選擇培養(yǎng)基中添加纖維素，可為其生長提供碳源。(2)利用剛果紅染色法來篩選纖維素分解菌，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)培養(yǎng)基中的纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。(3)進行平板劃線接種時，每次劃線后要灼燒接種環(huán)是為了及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免污染。(4)牛胃內(nèi)是無氧環(huán)境，故應(yīng)在無氧環(huán)境下分離牛胃

24、中的纖維素分解菌。菌落是同種菌體的集合，相距很近的細(xì)菌可以形成一個菌落，故菌落數(shù)比活菌數(shù)少。(5)在提取液和分離液中添加緩沖溶液可保證液體的pH不受干擾。探究某種酶活性的最適溫度應(yīng)設(shè)置不同的溫度梯度進行相互對照。答案：(1)纖維素碳源選擇(2)剛果紅A(3)及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境(4)保證無氧環(huán)境小(低)(5)緩沖溶液設(shè)置不同的溫度梯度進行相互對照9(2012年高考浙江自選模塊)幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進行分離培養(yǎng)。實驗基本步驟如下：請回答：(1)在配制培養(yǎng)基時，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因為Hp含有

25、_，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周圍會出現(xiàn)_色環(huán)帶。(2)下列對尿素溶液進行滅菌的最適方法是_滅菌。A高壓蒸汽 B紫外燈照射C70%酒精浸泡 D過濾(3)步驟X表示_。在無菌條件下操作時，先將菌液稀釋，然后將菌液_到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得_菌落。(4)在培養(yǎng)時，需將培養(yǎng)皿倒置并放在_中。若不倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致_。(5)臨床上用14C呼氣試驗檢測人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將14C標(biāo)記的_分解為NH3和14CO2。解析：此題考查微生物的分離與培養(yǎng)知識。(1)幽門螺桿菌(Hp)含有脲酶，能以尿素為氮源，在加入尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)Hp，由于尿素經(jīng)脲酶的降解可產(chǎn)生堿性的NH3，NH3能使培養(yǎng)基中的酚紅由紅黃色變成紅色，故菌落周圍會出現(xiàn)紅色環(huán)帶。(2)由于尿素加熱會分解，對尿素溶液進行滅菌最好用G6玻璃砂漏斗過濾。(3)微生物的分離和培養(yǎng)步驟是：配制培養(yǎng)基滅菌、倒平板接種培養(yǎng)。為獲得單菌落，接種操作前應(yīng)先將菌液稀釋，然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上即可。(4)微生物培養(yǎng)時需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中，若不倒置培養(yǎng)，則無法形成單菌落。(5)幽門螺桿菌能將14C標(biāo)記的尿素分解為NH3和14CO2，故臨床上常用14C呼氣試驗檢測人體內(nèi)幽門螺桿菌的存在。答案：(1)脲酶紅(2)D(3)接種涂布單(4)恒溫培