尿生成的影響因素、藥物的利尿作用

1、尿生成的影響因素、藥物的利尿作用姓名： 學(xué)號： 班級：一、 實驗?zāi)康?. 學(xué)習(xí)膀胱插管技術(shù)測定尿量的方法。2. 觀察影響尿生成的各種因素對尿量的影響，并分析其作用機制，加深對尿生成過程的理解。二、 實驗材料1. 實驗動物：家兔（體重2.0kg以上）2. 器材：哺乳類動物手術(shù)器械，兔手術(shù)臺，膀胱插管，注射器，頭皮針。3. 藥品：生理鹽水， 20%葡萄糖溶液，呋塞米，1:10000去甲腎上腺素溶液，垂體后葉素，20%氨基甲酸乙酯溶液，班氏試劑。三、 實驗方法和步驟1. 麻醉：將家兔稱重后，20%氨基甲酸乙酯溶液按5ml/kg劑量自耳緣靜脈注射麻醉。2. 固定：家兔仰臥位固定。3. 備皮：剪取家兔頸

2、部，下腹部被毛。4. 手術(shù)1) 頸部手術(shù) 剪去頸前部兔毛，正中切開皮膚56厘米，用止血鉗縱向分離軟組織及頸部肌肉，暴露氣管及與氣管平行的右血管神經(jīng)鞘，細心分離出右側(cè)鞘膜內(nèi)的迷走神經(jīng)，在神經(jīng)下穿線備用。2) 腹部手術(shù) 從恥骨聯(lián)合向上沿中線作長約4厘米的切口，沿腹白線打開腹腔，將膀胱輕拉至腹壁外，先辨認清楚膀胱和輸尿管的解剖部位，用止血鉗提起膀胱前壁(靠近頂端部分)，選擇血管較少處，切一縱行小口，插入插管后膀胱即隨著尿液的流出而縮小。如膀胱壁較松馳而膀胱容積仍較大時，可用粗線將膀胱扎掉一部分，使膀胱內(nèi)的貯尿量減至最少。用線結(jié)扎膀胱頸部以阻斷膀胱同尿道的通路。5. 觀察項目1) 記錄正常尿量（滴/m

3、in）2) 生理鹽水對尿量的影響 自耳緣靜脈快速注射38生理鹽水20ml，觀察尿量的變化。3) 葡萄糖對尿量的影響先收集尿液2滴進行尿糖定性試驗作為對照，然后自耳緣靜脈快速注射20%葡萄糖溶液5ml，觀察尿量的變化。在尿量變化增多時，再去尿液2滴作尿糖定性試驗。尿糖定性試驗方法：試管內(nèi)加1ml班氏試劑，加入數(shù)滴尿標(biāo)本，在酒精燈上加熱煮沸。冷卻后觀察溶液和沉淀物的顏色改變，藍色為陰性（-），若顏色變?yōu)榫G色（+）、黃綠（+）、土黃色（+）、或磚紅色（+），則為陽性且其含糖量依次升高。4) 去甲腎上腺素對尿量的影響 自耳緣靜脈注射1:10000去甲腎上腺素溶液0.5ml，觀察尿量的變化。5) 迷走神

4、經(jīng)興奮對尿量的影響 用保護電極以中等強度和頻率的連續(xù)脈沖（定時刺激，持續(xù)時間20s，波寬5ms，強度2.0V，頻率25Hz）刺激右迷走神經(jīng)，觀察尿量的變化。6) 呋塞米對尿量的影響 自耳緣靜脈注射呋塞米1U（1ml），觀察尿量的變化。7) 抗利尿激素（ADH）對尿量的影響 自耳緣靜脈注射垂體后葉素（含ADH）1U（1ml），觀察尿量的變化。四、 實驗結(jié)果實驗項目對照組（實驗前）實驗組1min2min3min4min5min38生理鹽水20ml01136420%葡萄糖溶液5ml1322121:10000去甲腎上腺素溶液0.5ml212122呋塞米1U1514263629垂體后葉素1U222970

5、01表1. 尿生成的影響實驗結(jié)果五、 實驗討論1. 尿生成的生理調(diào)節(jié)1) 腎內(nèi)自身調(diào)節(jié)a. 小管液中溶質(zhì)的濃度 滲透性利尿：通過提高小管液中溶質(zhì)濃度而引起尿量增多的現(xiàn)象。圖1. 小管液濃度調(diào)節(jié)b. 球管平衡不論腎小管于濾過率或增或減，近端小管的重吸收率始終占腎小管濾過率的6570%左右。機制：近端小管的定比重吸收。如圖2，3所示。圖2.近段小管的定比重吸收圖3.近段小管的定比重吸收機制反之，腎小球濾過率減小，近端小管對Na+和水的重吸收也相應(yīng)地降低。生理意義：使尿中排出的溶質(zhì)和水不致因腎小管濾過率的增減而出現(xiàn)大幅度變動。2) 神經(jīng)體液調(diào)節(jié)a. 腎交感神經(jīng)的作用圖4. 腎交感神經(jīng)的作用機制b.

6、血管升壓素（VP；又稱抗利尿激素，ADH）下丘腦視上核、室旁核合成，神經(jīng)垂體儲存貯存和釋放。作用（對尿生成的主要影響）：遠曲小管、集合管對水的通透性水的重吸收尿量（圖5）圖5. VP的作用作用機制：VP與遠曲小管和集合管上皮細胞管周膜上的V2受體結(jié)合通過Gs激活膜內(nèi)的AC上皮細胞中cAMP的生成激活蛋白激酶A蛋白質(zhì)磷酸化位于管腔膜附近的含有水孔蛋白AQP-2的小泡鑲嵌在管腔膜上管腔膜上的水通道數(shù)量對誰的通透性水通過管腔膜進入細胞內(nèi)經(jīng)基側(cè)膜的水孔蛋白AQP-3和AQP-4進入細胞間隙而被重吸收（圖6）圖6. VP的作用機制分泌的調(diào)節(jié)：a) 血漿晶體滲透壓（最敏感）b) 循環(huán)血量c. 腎素-血管緊

7、張素-醛固酮系統(tǒng)（RAAS）圖7. 醛固酮分泌調(diào)節(jié)示意圖+：興奮 -：抑制a) Ang II對尿生成的影響i. 刺激醛固酮的合成和分泌保Na+排K+ii. 近段小管對NaCl重吸收使尿中排除的NaCliii. 血管升壓素釋放遠曲小管和集合管對水的重吸收尿量iv. 入球小動脈強烈收縮（高濃度的AngII）腎小球濾過率b) 醛固酮對尿生成的影響i. 合成部位：腎上腺皮質(zhì)球狀帶ii. 生理作用：保Na+排K+促進遠曲小管和集合管的主細胞對Na+的重吸收，并促進K+的分泌；同時，CI-、水的重吸收也增加，使細胞外液量增多。（圖8）圖8. 醛固酮的生理作用iii. 作用機制：醛固酮進入遠曲小管和集合管的

8、上皮細胞內(nèi)與胞漿受體結(jié)合形成激素-受體復(fù)合物作用于核中的DNA特異性位點調(diào)節(jié)特異性mRNA轉(zhuǎn)錄合成醛固酮誘導(dǎo)蛋白Na+重吸收造成小管腔內(nèi)的負電位Cl-和水的重吸收細胞外液量（圖9）圖9. 醛固酮的作用機制iv. 醛固酮的分泌調(diào)節(jié)：腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)，血漿內(nèi)K+、Na+d. 心房鈉尿肽（ANP）心房壁受牽拉可刺激心房肌細胞釋放ANP。a) 抑制集合管對NaCl的重吸收心房鈉尿肽與集合管上皮細胞基側(cè)膜上的受體結(jié)合激活了鳥苷酸環(huán)化酶細胞內(nèi)cGMP含量管腔膜上的Na+通道關(guān)閉Na+重吸收，排除（圖10）圖10. 心房鈉尿肽的作用機制b) 入球小動脈舒張>出球小動脈舒張腎血漿流量和GFR

9、尿量c) 抑制腎素、醛固酮、VP分泌 水、Na+排出【1】2. 快速注射38生理鹽水20ml靜脈快速注射大量生理鹽水后,血漿蛋白被稀釋，使血漿膠體滲透壓降低，腎小球有效濾過壓增加；另一方面腎血漿流量增加，血漿膠體滲透壓升高速度減慢，達到濾過平衡時間推遲，于是腎小球濾過率增加，尿量增加，且反應(yīng)時間相對較長。3. 注射20%葡萄糖溶液5ml靜脈注射葡萄糖，使家兔血糖濃度升高，提高了腎小管液滲透壓，妨礙水的重吸收，于是尿量增加。4. 注射1:10000去甲腎上腺素溶液0.5ml去甲腎上腺素能使腎血管收縮，腎血流量減少，從而使腎小球毛細血管血壓降低，有效濾過壓降低，腎小球濾過率減小，尿的生成量減少，尿

10、量減少。5. 注射呋塞米1U因髓袢升支粗段對Na和Cl的主動重吸收是外髓部滲透梯度形成的動力，所以，該段NaCl的重吸收直接影響尿的濃縮和稀釋。呋塞米等利尿劑能阻抑髓袢升支粗段上皮細胞管腔膜的載體轉(zhuǎn)運功能，使其對Na、Cl的重吸收受到抑制，影響腎髓質(zhì)滲透梯度的形成，從而干擾尿的濃縮機制，導(dǎo)致利尿?！?】6. 注射垂體后葉素1U垂體后葉素的主要作用因素為抗利尿激素，抗利尿激素的主要作用是提高遠曲小管和集合管上皮細胞對水的通透性，從而增加對水的重吸收，使尿量濃縮，從而使尿量減少?！?】六、 實驗反思本次實驗中，家兔膀胱由于實驗前準(zhǔn)備食入較多汗水物質(zhì)致使膀胱過度充盈，在腹腔手術(shù)時，膀胱緊貼腹直肌深筋膜后壁，手術(shù)小許失誤在切開過程中誤損膀胱，有漏尿發(fā)生，在找到漏尿部位后，扎閉減小以減小對手術(shù)影響。在膀胱插管后，注射少許呋塞米有助于膀胱恢復(fù)充盈，并充盈膀胱插管，待尿液流速恢復(fù)正常后即可開始實驗。