高效薄層掃描法測(cè)定雷公藤搽劑中雷公藤內(nèi)酯醇含量(精)

1、高效薄層掃描法測(cè)定雷公藤搽劑中雷公藤內(nèi)酯醇含量更新日期：2009-12-21點(diǎn)擊： 寧曉閩王寶奎劉錫鈞提要運(yùn)用高效薄層掃描法測(cè)定雷公藤搽劑中雷公藤內(nèi)酯醇的含量，具有簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)。關(guān)鍵詞雷公藤搽劑；雷公藤內(nèi)酯醇；薄層掃描法；含量測(cè)定 HPTLCDensitometric Determination of Triptolide (TL in Triptolide Liniment Ning Xiaomin,Wang Baokui, Liu Xijun Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Command of PLA,Fuz

2、hou350001AbstractHPTLC densitometric determination of Triptolide (TLin Triptolide Liniment is simple, rapid, sensitive and reproductive.Key wordsTriptolide liniment;Triptolide (TL;HPTLC-Densitometric;Determination.雷公藤搽劑是由雷公藤醋酸乙酯提取物配制成的透皮制劑，用于抗炎、鎮(zhèn)痛、免疫抑制等。雷公藤醋酸乙酯提取物中雷公藤內(nèi)酯醇是主要的有效成分，但也是主要的有毒成分 1。為了保證用藥安

3、全有效，探討本品的內(nèi)在質(zhì)量，制定質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，本文采用高效薄層掃描法對(duì)雷公藤搽劑中的雷公藤內(nèi)酯醇進(jìn)行含量測(cè)定。1實(shí)驗(yàn)部分 1.1 儀器與試劑： CS-9000型薄層掃描儀 (日本島津公司，高效硅膠 G 板(青島海洋化工廠(chǎng)，定量毛細(xì)管 (美國(guó)產(chǎn)；所用試劑均為分析純；雷公藤內(nèi)酯醇對(duì)照品 (福建省醫(yī)科所提供，雷公藤醋酸乙酯提取物，雷公藤搽劑 (均自制。 1.2 薄層層析及掃描條件：高效硅膠 G 板為吸附劑，氯仿乙醚 (21 為展開(kāi)劑 2，上行展開(kāi)約 9 cm，取出晾干測(cè)定，用島津 CS-9000 型薄層掃描儀定位，雷公藤內(nèi)酯醇 Rf 值為 0.74，掃描條件為 S225 nm，反射鋸齒掃描，擺幅 12

4、mm， Y 0.02，資料累積數(shù)為 1，尋峰參數(shù)為 2。 1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備：精密稱(chēng)取減壓干燥至恒重的雷公藤內(nèi)酯醇對(duì)照品 1.022 mg 置 10 ml 容量瓶中，加無(wú)水乙醇溶解稀釋至刻度，即得0.1022 g/ 的l對(duì)照品液。在高效硅膠 G 板上，用定量毛細(xì)管點(diǎn)樣， 1、2、7、10 l的對(duì)照品液 (0.1022 g/，l以氯仿乙醚 (21 室溫上行展開(kāi) 9 cm，取出晾干按選定的掃描條件測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表 1。以點(diǎn)樣量為橫坐標(biāo)，斑點(diǎn)積分值為縱坐標(biāo)，在0.11.0g范圍內(nèi)呈線(xiàn)性關(guān)系，求得回歸方程Y=0.0776+3.8928 10×-4 X. =0.9999。 表 1雷公藤內(nèi)酯醇

5、掃描積分值點(diǎn)樣量 ( 積l分面積1 2457 2 4754 512796 7 17738 10 25449 1.4穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：取對(duì)照品溶液5 l，按制備標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的方法點(diǎn)樣，層析，取出晾干后掃描，0.5、12、24、48h 掃描，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。實(shí)驗(yàn)表明穩(wěn)定性好。表 2穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果測(cè)定項(xiàng) 0.5h 12h 24h 48h積分面積12831.574 12789.324 12789.283 13024.471 =12844.250； CV=0.97%1.5雷公藤醋酸乙酯提取物中雷公藤內(nèi)酯醇含量測(cè)定：精密稱(chēng)取減壓干燥恒重的雷公藤醋酸乙酯提取物5.005 mg 置 10 ml 容量瓶中，無(wú)水乙醇溶解并

6、稀釋至刻度，作為供試液。吸取供試液5 l和對(duì)照品液 2、 5 l點(diǎn)樣，按選定的層析條件及掃描條件測(cè)定，外標(biāo)2 點(diǎn)法計(jì)算。結(jié)果見(jiàn)表3。 表 3雷公藤醋酸乙酯提取物中雷公藤內(nèi)酯醇含量測(cè)定點(diǎn)樣量 ( 掃l描面積 樣品中內(nèi)酯醇 測(cè)定量 ( g/ 醋l酸乙酯提取物中 內(nèi)酯醇含量(% 5 7310 0.05790.11575 7290 0.05800.11595 74270.05940.1187=0.1168%；CV=1.44% 1.6雷公藤醋酸乙酯提取物加樣回收率測(cè)定：在供試液點(diǎn)樣點(diǎn)上，加點(diǎn)雷公藤內(nèi)酯醇對(duì)照品液(0.1022g/ l 2或5ll，測(cè)定。結(jié)果見(jiàn)表4。 表4雷公藤醋酸乙酯提取物加樣回收率測(cè)定

7、樣品中內(nèi)酯醇含量 ( g加入內(nèi)酯 醇量 ( g測(cè)定量 ( g回收量 ( g回收率 (% 0.3127 0.2044 0.51010.1974 96.58 0.3084 0.5110 0.8139 0.5055 98.92 0.3244 0.5110 0.8114 0.4870 95.30=96.93%； CV=1.89% 1.7 雷公藤搽劑含量測(cè)定：用定量毛細(xì)管吸取搽劑10 l，對(duì)照品液 (0.1022g/ 、l52 l點(diǎn)樣，按選定的層析及掃描條件測(cè)定，外標(biāo)2 點(diǎn)法計(jì)算含量。結(jié)果見(jiàn)表5。 表 5 搽劑中雷公藤內(nèi)酯醇含量測(cè)定 點(diǎn)樣量 ( 掃l描面積 樣品中內(nèi)酯醇含量 ( g/ 搽l劑中內(nèi)酯醇含量

8、 ( ×10-3% 10 5934 0.0243 2.4310 60120.0246 2.46 10 6084 0.0249 2.49 =2.4610-3%；×CV=1.22% 1.8 雷公藤搽劑加樣回收率測(cè)定：在搽劑點(diǎn)上加點(diǎn)對(duì)照品液 (0.1022 g/ 、l25 l。結(jié)果見(jiàn)表6。表6搽劑中加樣回收率測(cè)定樣品中含內(nèi)酯醇( g加入酯醇量 ( g測(cè)定量 ( g回收量 ( g回收率 (% 0.3777 0.2044 0.5741 0.1964 96.09 0.3716 0.5110 0.8586 0.4870 95.300.3504 0.5110 0.8498 0.4994 97.74 =96.38%；CV=1.29% 2小結(jié)與討論2.1在高效硅膠G 板上，用氯仿乙醚(21 為展開(kāi)劑上行展開(kāi)約9 cm，雷公藤內(nèi)酯醇被分離得較好， Rf 值為 0.74。 2.2經(jīng)用島津 CS-9000 型薄層掃描儀進(jìn)行光譜測(cè)定，雷公藤內(nèi)酯醇在 225 nm 處有最大吸收，故選用樣品測(cè)定波長(zhǎng)為225 nm，因干擾小，采用單波長(zhǎng)掃描。 2.3 雷公藤內(nèi)酯醇斑點(diǎn)不經(jīng)顯色，用 CS-9000 型薄層掃描定位斑點(diǎn)在 48 h 內(nèi)定時(shí)測(cè)定，結(jié)果穩(wěn)定。 2.4 本法靈敏、簡(jiǎn)便、快速、穩(wěn)定性好，結(jié)果滿(mǎn)意。 作者單位：寧曉閩，女， 1950 年生，主管藥師 作者單