基因工程的工具

1、第一節(jié)基因工程的工具酶和載體【學習目標】1. 能夠描述基因工程的概念和目的。2. 能說出基因工程的三種基本工具及各工具的的特點和用途?！灸繕诉_成】活動一：基因工程的工具（一） “分子手術(shù)刀” 一一 （自主學習）1、 來源：主要從 中分離。2、 功能：能夠識別雙鏈 DNA分子的特種序列，并使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的斷開。3、 結(jié)果：切割后的末端有 和。4、 特點： ，即識別特點脫氧核苷酸序列，在特點位點上切割DNA分子。（識別序列特點：）【練一練】寫出下表中四種限制酶切割后的結(jié)果，并分析限制酶所識別的DNA序列有什么特點？限制酶Kfsg I 相BamH INjbig I 茯Sina I

2、爾切卩 f立點心-GGATCC*-CCTAGTG-* GATC-C1AGT CCCGGG一 GGGTCCC4（二） “分子搬運車” 一一1、 作用： 作為工具，將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細胞中。在受體細胞中復制，從而使目的基因也大量 。2、條件：（以質(zhì)粒為例） 含有，能在宿主細胞內(nèi)自我復制并穩(wěn)定地保存。 有一個或多個 ，可使目的基因插入到載體上。 具有，如四環(huán)素抗性基因、 氨芐青霉素抗性基因或某些生化表型等，用于鑒定和選擇重組 DNA分子。3、 種類： （最常用）、。（三）“分子針線” _ 1、 作用：將DNA雙鏈片段縫合起來，恢復被 切開的兩個核苷酸之間的，拼接成新的DNA分子。2、 E- COl

3、i DNA連接酶，只能連接 ，不能連接 。T4 DNA連接酶，既可以連接 ，又可以連接 。活動二：構(gòu)建重組質(zhì)粒（小組合作）請利用所示限制酶對目的基因、質(zhì)粒分別進行切割，并構(gòu)建重組質(zhì)粒，各小組展示成果?；顒尤簩蚬こ谈拍畹睦斫狻灸繕藱z測】1、 限制酶切割 DNA時（）A. 專一識別特定的核苷酸序列B.C.任意切割，沒有特定的核苷酸序列D.2、不屬于質(zhì)粒被選為基因運載體的理由是（A. 能復制B .有多個限制酶切點切斷的是堿基對之間的氫鍵識別多種核苷酸序列，但切口只有一個）C 具有標記基因D 它是環(huán)狀 DNA基因工程的別名操作環(huán)境操作對象操作水平原理結(jié)果基本過程3、 下面是3種限制性核酸內(nèi)切酶對

4、 DNA分子的識別序列和剪切位點圖，錯誤的是（）限制酶 1 : - J GATC-;限制酶 2： -CCGCJ GG-;限制酶 3： -G J GATCC-A. 不同的限制酶有不同的識別序列和切割位點，體現(xiàn)了酶的專一性B. 限制酶2和3識別的序列都包含 6個堿基對 C.限制性酶1和酶3剪出的粘性末端相同C. 能夠識別和切割 RNA分子內(nèi)一小段核苷酸序列的酶只有限制酶24、 限制酶 BamH和Bgl I識別序列及切割位點依次為GJ GATC（和AJ GATCT用BamH切割目的基因，Bgl I切割質(zhì)粒，并連接得到重組質(zhì)粒相關(guān)敘述正確的是（）A. 酶切過程中，需控制好酶濃度、溫度和反應時間等因素B. 目的基因經(jīng)BamHI切割后