實(shí)驗(yàn)室安全操作要求

1、.實(shí)驗(yàn)室安全操作要求1制定實(shí)驗(yàn)室安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SsoP)，這些規(guī)程應(yīng)適用 于現(xiàn)有的條件，并與其它的規(guī)則和操作過(guò)程相一致。實(shí)驗(yàn)室 負(fù)責(zé)人應(yīng)保證工作人員和參觀(guān)人員理解這些安全要求。2實(shí)驗(yàn)室工作人員要熟悉生物安全操作知識(shí)和消毒技術(shù)。3實(shí)驗(yàn)室用品(包括工作服)不得用于其他用途；不可將私人和無(wú)關(guān)的物品帶入實(shí)驗(yàn)室。4在進(jìn)入微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室工作時(shí)，要穿隔離衣和工作衣，戴工作帽，戴一次性手套，如接觸物傳染性危險(xiǎn)大，可戴雙層(兩付)手套以增加保護(hù)。操作時(shí)手套破損，應(yīng)立即丟棄、洗手并戴上新手套。5不要用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等。6盡量避免使用尖銳物品和利器，包括注射器、針頭、刀片、玻

2、璃制品、載玻片等，它們?cè)诮佑|傳染性材料后非常危險(xiǎn)，最好不要在微生物實(shí)驗(yàn)室使用這些利器而使用不易破碎材料制品，如塑料移液管等。7工作結(jié)束，要對(duì)工作臺(tái)面消毒，如用消毒液清洗后要干燥20分 鐘以上；操作時(shí)有標(biāo)本、檢測(cè)試劑外濺時(shí)應(yīng)及時(shí)消毒；平時(shí)要保 持環(huán)境整潔。8工作完畢，脫去手套后洗手，再脫去工作衣，用肥皂和流動(dòng)水洗手。 25液)可以作為液體滅菌劑。注：甲醛是一種可疑的致癌劑。它具有刺鼻的氣味，其氣體能夠刺激眼睛和黏膜，因此必須在通風(fēng)櫥或通風(fēng)良好的地方儲(chǔ)存和使用。使用前必須參考有關(guān)化學(xué)品安全的使用規(guī)定。（三）戊二醛象甲醛一樣，戊二醛0HC(CH。)。CH0也對(duì)繁殖的細(xì)菌、孢子、真菌和脂或不含脂的病毒

3、具有活性。它不具有腐蝕性，比甲醛作用迅速，但也需要幾個(gè)小時(shí)才能殺死細(xì)菌孢子。通常所供應(yīng)的戊二醛是濃度約20L(2】的溶液，絕大部分產(chǎn)品使用前需要加入與產(chǎn)品一同提供的碳酸氫鹽混合物進(jìn)行“活化”(變成堿性)。活化的溶液根據(jù)其配方設(shè)計(jì)、應(yīng)用類(lèi)型和使用頻率等情況可以重復(fù)使用卜4與有些產(chǎn)品一同提供的指示條（dipstick)僅用于粗略指示溶液中的活性戊二醛水平。如果戊二醛溶液變混濁，就應(yīng)當(dāng)將其廢棄。 注：戊二醛具有毒性，并對(duì)皮膚和黏膜具有刺激性，應(yīng)當(dāng)避免與其接觸。必須在通風(fēng)櫥或通風(fēng)良好的地方使用。不建議采用其噴霧劑或溶液來(lái)清除環(huán)境表面的污染。使用前必須考慮化學(xué)品安全使用的有關(guān)規(guī)定。（四）醇類(lèi)乙醇(c2H

4、sOH)和異丙醇(cH。)：CHOH具有相似的滅菌特性。它們對(duì)于繁殖的細(xì)菌、真菌和含脂病毒具有活性，但不能滅活孢子，而對(duì)非含脂病毒的作用則不確定。其水溶液最有效的使用濃度約為70(vv)：更高或更低的濃度均不適宜殺菌。醇類(lèi)溶液的主要優(yōu)點(diǎn)是處理后物品不會(huì)留下任何殘留物 。將醇類(lèi)與其他試劑混合使用比單獨(dú)使用醇類(lèi)更有效，如70(vv)醇 18*和，100gL的甲醛混合使用，以及使用含有2gL有效氯的醇。70(vv)乙醇溶液可以用于消毒皮膚、實(shí)驗(yàn)臺(tái)和生物安全柜的工作臺(tái)面，以及浸泡小的外科手術(shù)器械。使用時(shí)皮膚的接觸時(shí)間不應(yīng)少于10秒，環(huán)境表面不應(yīng)少于3分鐘。由于乙醇可以使皮膚干燥，所以經(jīng)常與潤(rùn)滑劑混合使

5、用。在不便于或不可能進(jìn)行徹底洗手的情況下，推薦使用含醇類(lèi)的擦手液對(duì)輕度污染的手進(jìn)行消毒。但是必須記住，乙醇對(duì)孢子無(wú)效，而且不能殺死所有類(lèi)型的非含脂類(lèi)病毒。 注：醇類(lèi)是易揮發(fā)和易燃的，不能在明火附近使用。其工作液應(yīng)儲(chǔ)存在適當(dāng)?shù)娜萜鲀?nèi)以避免醇類(lèi)揮發(fā)。醇類(lèi)可以硬化橡膠并溶解某些膠質(zhì)。為了避免乙醇用于其他非滅菌目的，在實(shí)驗(yàn)室里對(duì)乙醇進(jìn)行專(zhuān)門(mén)地清點(diǎn)和儲(chǔ)存是非常重要的。由于宗教原因，乙醇的獲得和使用在有些地區(qū)可能受到限制。含有醇類(lèi)溶液的瓶子必須清楚標(biāo)記以避免被意外高壓滅菌。碘和碘伏 這類(lèi)滅菌劑的作用與氯類(lèi)似，只是有機(jī)質(zhì)對(duì)它們的抑制作用略弱。碘可以使纖維和環(huán)境表面著色，一般不適合作為消毒劑。但是，碘伏和碘酊

6、是很好的抗菌劑。多聚碘(P01yvidone iodine)是一種安全可靠的外科手術(shù)擦手劑和手術(shù)前皮膚抗菌劑。碘類(lèi)抗菌劑一般不適于醫(yī)療牙醫(yī)器械的消毒。碘不能在鋁或銅上使用。注：碘有毒性。含有有機(jī)碘的產(chǎn)品必須于4一10。c儲(chǔ)存以避免有潛在危害性的細(xì)菌在里面生長(zhǎng)。過(guò)氧化氫和過(guò)氧乙酸 像氯一樣，過(guò)氧化氫(H。0。)和過(guò)氧乙酸(CH。COOH)是強(qiáng)氧化劑，是一種廣譜殺菌劑。對(duì)人和環(huán)境它們較氯更為安全。通常供應(yīng)的過(guò)氧化氫是可以立即使用的3的溶液，或是用無(wú)菌水稀釋 19510倍體積后使用的30的水溶液。但是，那種單獨(dú)含有3一6過(guò)氧化氫的溶液殺菌作用緩慢而有限?，F(xiàn)有產(chǎn)品中含有其他成分來(lái)穩(wěn)定過(guò)氧化氫，加速其殺

7、菌作用并降低其腐蝕性。 過(guò)氧化氫能夠用于清除實(shí)驗(yàn)臺(tái)和生物安全柜工作臺(tái)面的污染，較高濃度的溶液適于清除對(duì)熱敏感的醫(yī)療(牙醫(yī)器械的污染。采用過(guò)氧化氫或過(guò)氧乙酸熏蒸來(lái)消毒對(duì)熱敏感的醫(yī)療牙醫(yī)器械時(shí)，需要特殊的設(shè)備。 注：過(guò)氧化氫和過(guò)氧乙酸能腐蝕鋁、銅、黃銅和鋅等金屬，也能使纖維、頭發(fā)、皮膚及黏膜褪色。經(jīng)它們處理的物品必須經(jīng)過(guò)徹底的漂沈后才能接觸眼睛和黏膜。它們應(yīng)當(dāng)儲(chǔ)存在避熱和避光的地方。四、清除局部環(huán)境的污染 需要聯(lián)合應(yīng)用液體和氣體消毒劑來(lái)清除實(shí)驗(yàn)室空間、用具和設(shè)備的污染。清除表面污染時(shí)可以使用次氯酸鈉(NaOC：1)溶液；含有1有效氯的溶液適于普通的環(huán)境衛(wèi)生設(shè)備，但是當(dāng)處理高危環(huán)境時(shí)，建議使用高濃度

8、(5gL)溶液。用于清除環(huán)境污染時(shí)，含有3過(guò)氧化氫的溶液也可以作為漂白劑的代用品。 可以通過(guò)加熱多聚甲醛或煮沸福爾馬林所產(chǎn)生的甲醛蒸氣熏蒸來(lái)清除房間和儀器的污染。產(chǎn)生甲醛蒸氣前，房間的所有開(kāi)口(如門(mén)窗等)都應(yīng)用密封帶或類(lèi)似物加以密封。熏蒸應(yīng)當(dāng)在室溫不低于21。C且相對(duì)濕度70的條件下進(jìn)行(見(jiàn)下面“清除生物安全柜的污染”部分)。 清除污染時(shí)氣體需要與物體表面至少接觸8小時(shí)。熏蒸后，該區(qū)域必須徹底通風(fēng)后才能允許人員進(jìn)入。在通風(fēng)之前需要進(jìn)入房間時(shí)，必須戴適當(dāng)?shù)姆蓝久婢??？梢圆捎脷鈶B(tài)的碳酸氫銨來(lái)中和甲醛。 已有報(bào)道，可采用過(guò)氧化氫溶液的氣霧熏蒸污染的空間，但對(duì)此還需 20要進(jìn)一步的研究。 注：甲醛是一

9、種危險(xiǎn)和有刺激性的氣體，并懷疑有致癌性。應(yīng)使用具有供氣系統(tǒng)的全面罩式防毒面具。操作時(shí)應(yīng)當(dāng)采用“雙人”制。五、清除生物安全柜的污染 清除I級(jí)和II級(jí)生物安全柜的污染時(shí)，應(yīng)當(dāng)將適量的多聚甲醛(空氣中的終濃度達(dá)到08)放在電熱板或電熱盤(pán)上(在生物安全柜外進(jìn)行控制)。然后在生物安全柜內(nèi)放置第二個(gè)放有比多聚甲醛多10的碳酸氫銨的加熱板或盤(pán)。第二個(gè)盤(pán)上覆蓋一個(gè)能夠從遠(yuǎn)處將其移走的蓋子(如連接一個(gè)能夠從生物安全柜外拉動(dòng)的繩子)，從而盡量減少對(duì)甲醛氣體的提前中和。 如果相對(duì)濕度低于70在使用強(qiáng)力膠帶如“管道密封膠帶”(ducttape)密封前部封閉板前，還要在安全柜內(nèi)部放置一個(gè)開(kāi)口的盛有熱水的容器。如果前部沒(méi)

10、有封閉板，則可以用重型塑料布(leavy gaugeplasticsheet ing)粘貼覆蓋在前部以保證氣體不會(huì)泄漏進(jìn)入房間。 打開(kāi)多聚甲醛盤(pán)的加熱開(kāi)關(guān)，1小時(shí)后或多聚甲醛完全蒸發(fā)后關(guān)閉。讓生物安全柜靜置過(guò)夜。移去第二個(gè)盤(pán)子的蓋后打開(kāi)加熱開(kāi)關(guān)，讓碳酸氫銨揮發(fā)。然后，關(guān)閉開(kāi)關(guān)并啟動(dòng)安全柜讓碳酸氫銨氣體循環(huán)l時(shí)。移去前封閉板(或塑料布)后就可以使用生物安全柜了。六、洗手清除手部污染 接觸生物危害性材料時(shí)，必須戴合適的手套。但是這并不能代替實(shí)驗(yàn)室人員需要經(jīng)常地、徹底地洗手。接觸過(guò)生物危害性材料和動(dòng)物后、使用過(guò)衛(wèi)生間后、離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前以及吃東西前都必須洗手。 大多數(shù)情況下，用普通的肥皂和水徹底沖洗對(duì)于

11、清除手部污染就足夠 21了。但在高度危險(xiǎn)的情況下，建議使用殺菌肥皂。手要完全抹上肥皂，搓沈至少10秒鐘，用干凈水沖洗后再用干凈的紙巾或毛巾擦干(如果有條件，也推薦使用暖風(fēng)干手器)。 推薦使用腳控或肘控的水龍頭。如果沒(méi)有安裝，應(yīng)使用紙巾或毛巾關(guān)上水龍頭以防止再度污染洗凈的手。 如上所述，如果沒(méi)有條件徹底洗手或洗手不方便，應(yīng)該用酒精擦手來(lái)清除雙手的輕度污染。七、加熱滅菌和消毒 加熱是最常用的清除病原體污染的物理手段。“干”熱沒(méi)有腐蝕性，可用來(lái)處理實(shí)驗(yàn)器材中許多可耐受160。C或更高溫度24小時(shí)的物品。燃燒或焚化(見(jiàn)下)也是一種干熱方式。高壓滅菌的濕熱法則最為有效。 煮沸并不一定能殺死所有的微生物或

12、病原體，但如果其他方法(化學(xué)殺菌、清除污染、高壓滅菌)不可行或沒(méi)有條件時(shí)，也可以作為一種最起碼的消毒措施。 滅菌后的物品必須小心操作并保存，以保證在使用之前不再被污染。(一)高壓滅菌壓力飽和蒸汽滅菌(高壓滅菌)是對(duì)實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行滅菌時(shí)最有效和最可靠的方法。對(duì)于大多數(shù)目的，下列組合可以確保正確裝載的高壓滅菌器的滅菌效果：134、3分鐘126、10分鐘12l。C、15分鐘 22了。但在高度危險(xiǎn)的情況下，建議使用殺菌肥皂。手要完全抹上肥皂，搓沈至少10秒鐘，用干凈水沖洗后再用干凈的紙巾或毛巾擦干(如果有條件，也推薦使用暖風(fēng)干手器)。 推薦使用腳控或肘控的水龍頭。如果沒(méi)有安裝，應(yīng)使用紙巾或毛巾關(guān)上水龍頭

13、以防止再度污染洗凈的手。 如上所述，如果沒(méi)有條件徹底洗手或洗手不方便，應(yīng)該用酒精擦手來(lái)清除雙手的輕度污染。七、加熱滅菌和消毒 加熱是最常用的清除病原體污染的物理手段?！案伞睙釠](méi)有腐蝕性，可用來(lái)處理實(shí)驗(yàn)器材中許多可耐受160。C或更高溫度24小時(shí)的物品。燃燒或焚化(見(jiàn)下)也是一種干熱方式。高壓滅菌的濕熱法則最為有效。 煮沸并不一定能殺死所有的微生物或病原體，但如果其他方法(化學(xué)殺菌、清除污染、高壓滅菌)不可行或沒(méi)有條件時(shí)，也可以作為一種最起碼的消毒措施。 滅菌后的物品必須小心操作并保存，以保證在使用之前不再被污染。(一)高壓滅菌壓力飽和蒸汽滅菌(高壓滅菌)是對(duì)實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行滅菌時(shí)最有效和最可靠的方

14、法。對(duì)于大多數(shù)目的，下列組合可以確保正確裝載的高壓滅菌器的滅菌效果：134、3分鐘126、10分鐘12l。C、15分鐘 228、應(yīng)當(dāng)注意保證高壓滅菌器的安全閥沒(méi)有被高壓滅菌物品中的紙等堵塞。八、焚燒 在處理那些經(jīng)過(guò)或事先未經(jīng)清除污染的動(dòng)物尸體以及解剖組織或其他實(shí)驗(yàn)室廢物時(shí)，焚燒是一種有效的方法。只有在實(shí)驗(yàn)室可以控制焚燒爐，并且能夠有效地控制溫度和配備了二級(jí)焚燒室時(shí)，才能用焚燒代替高壓滅菌來(lái)處理感染性物質(zhì)。許多焚燒爐，尤其是那些只有單個(gè)焚燒室的，不能滿(mǎn)足處理感染性物質(zhì)、動(dòng)物尸體和塑料制品的要求。這些材料可能不能完全銷(xiāo)毀，微生物、有毒化學(xué)試劑和煙塵還可能通過(guò)煙囪排放而污染大氣。但也有許多結(jié)構(gòu)令人滿(mǎn)

15、意的焚燒室。理想的是一級(jí)焚燒室的溫度至少應(yīng)達(dá)到800。C，二級(jí)焚燒室的溫度至少應(yīng)達(dá)到1000【)C。需要焚燒的材料(即使事先已清除污染)應(yīng)當(dāng)用袋子運(yùn)送到焚燒室，最好使用塑料袋。負(fù)責(zé)焚燒的工作人員應(yīng)當(dāng)接受關(guān)于如何裝載和控制溫度等的正確指導(dǎo)。還需要注明的是，焚燒爐的操作是否有效主要取決于對(duì)需要處理的廢物中物品的正確混合。 人們已經(jīng)關(guān)注到現(xiàn)有的或計(jì)劃制造中的焚燒爐可能對(duì)環(huán)境造成的負(fù)面影響，并正努力使焚燒爐對(duì)環(huán)境的影響更小，也更節(jié)約能源。九、廢物處理 實(shí)驗(yàn)室和醫(yī)學(xué)廢物的處理要遵守各個(gè)地區(qū)、國(guó)家和國(guó)際的規(guī)定，在設(shè)計(jì)和補(bǔ)充關(guān)于生物危害性廢物處理、運(yùn)輸和廢棄的規(guī)程時(shí)，必須參考最新版的相關(guān)文件。一般情況下，焚

16、燒爐內(nèi)的灰燼可以作為普通家庭廢物處理并由當(dāng)?shù)夭块T(mén)運(yùn)走。高壓滅菌過(guò)的廢物可以在其他地方焚燒后處理，或在指定垃圾場(chǎng)掩埋處理.24嚴(yán)格的個(gè)人防護(hù)及保健1嚴(yán)格的個(gè)人防護(hù)對(duì)于減少感染的危險(xiǎn)性很重要。皮膚受損、患病都會(huì)增加感染的危險(xiǎn)性。2很小的傷口和擦傷都應(yīng)以防水的敷料覆蓋。3·進(jìn)實(shí)驗(yàn)室前要修剪長(zhǎng)的、帶刺的手指甲，以免刺破手套。4在脫去隔離衣、帽，離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前必須洗手。5·在實(shí)驗(yàn)室工作的人員應(yīng)盡量避免用可能已受到污染的手套觸摸面部。6·在有危險(xiǎn)化學(xué)品濺出可能時(shí)，應(yīng)佩戴防護(hù)眼鏡和面罩，7·不得在微生物和相關(guān)實(shí)驗(yàn)室用嘴吸取液體。不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吃食 物、喝飲料、吸煙和化妝

17、打扮等，不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)會(huì)客。8·遇有高危意外事故，應(yīng)立即進(jìn)行處理和報(bào)告，同時(shí)應(yīng)立即采取預(yù)防措施，包括對(duì)其隨訪(fǎng)、按醫(yī)囑服用抗微生物藥物進(jìn)行預(yù)防。實(shí)驗(yàn)室安全事故處理方案工作人員發(fā)生意外事故時(shí)，如針刺損傷、感染性標(biāo)本濺及體表或口鼻眼內(nèi)，或污染實(shí)驗(yàn)臺(tái)面等均視為安全事故，應(yīng)立即進(jìn)行緊急處理。事故緊急處理：根據(jù)事故情況采用相應(yīng)的處理方法1小型事故：任何一種小的損傷，包括皮膚的破損或刺傷等都可能與傳染性物質(zhì)接觸，必須用肥皂和水沖洗，如果可能盡量擠出損傷處的血液，使用70乙醇或其他皮膚消毒劑，立即進(jìn)行醫(yī)療處理；2皮膚污染：污染部位用水和肥皂沖洗，并用適當(dāng)?shù)南緞┙荩纾?0乙醇或皮膚消毒劑(外科

18、用藥)；3針刺和切割傷：懷疑皮膚有損傷或針刺時(shí)，建議盡可能擠壓傷口，然后用大量的水沖洗；4眼睛濺入液體：必須迅速用生理鹽水沖洗，且避免揉擦眼睛。連續(xù)沖洗至少十分鐘。5衣物污染(1)盡快脫掉隔離衣以防止感染物觸及皮膚并防止進(jìn)一步擴(kuò)散。脫 掉防護(hù)手套，洗手并更換隔離衣及手套；27實(shí)驗(yàn)室安全事故處理方案工作人員發(fā)生意外事故時(shí)，如針刺損傷、感染性標(biāo)本濺及體表或口鼻眼內(nèi)，或污染實(shí)驗(yàn)臺(tái)面等均視為安全事故，應(yīng)立即進(jìn)行緊急處理。事故緊急處理：根據(jù)事故情況采用相應(yīng)的處理方法1小型事故：任何一種小的損傷，包括皮膚的破損或刺傷等都可能與傳染性物質(zhì)接觸，必須用肥皂和水沖洗，如果可能盡量擠出損傷處的血液，使用70乙醇或其他皮膚消毒劑，立即進(jìn)行醫(yī)療處理；2皮膚污染：污染部位用水和肥皂沖洗，并用適當(dāng)?shù)南緞┙?，例如?0乙醇或皮膚消毒劑(外科用藥)；3針刺和切割傷：懷疑皮膚有損傷或針刺時(shí)，建議盡可能擠壓傷口，然后用大量的水沖洗；4眼睛濺入液體：必須迅速用生理鹽水沖洗，且避免揉擦眼睛。連續(xù)沖洗至少十分鐘。5衣物污染(1)盡快脫掉隔離衣以防止感染物